微小 RNA-374a靶向脾酪氨酸激酶对卵巢癌细胞放射敏感性及迁移、侵袭的影响

目的 探讨微小RNA-374a(miR-374a)靶向脾酪氨酸激酶(Syk)对卵巢癌细胞迁移、侵袭的影响及其与放射敏感性的关系.方法 选取2017年2月至2018年1月宜宾市第二人民医院接受手术切除治疗的卵巢癌病人63例,术中切除卵巢癌组织及癌旁组织,以癌旁组织为对照,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测卵巢癌组织及癌旁组织中miR-374a的表达水平;体外培养卵巢癌A2780细胞,采用随机数字表法分成anti-miR-NC组、anti-miR-374a组、anti-miR-374a+si-NC组、anti-miR-374a+si-Syk组.采用MTT法检测各组细胞增殖活性;克隆形成实验检测各组细胞存活分数及放射敏感性;Tran-swell实验检测各组细胞迁移及侵袭数;miR-374a与Syk的靶向调控作用通过双荧光素酶报告基因检测验证.结果 与癌旁组织比较,卵巢癌组织中miR-374a的表达水平升高[(0.28±0.03)比(0.92±0.09)](P<0.05);与anti-miR-NC组比较,anti-miR-374a组细胞存活分数降低[(0.37±0.08)比(0.07±0.02)](P<0.05),增敏比(1.816)增加,迁移[(139±14)个比(66±7)个]及侵袭细胞数[(127±13)个比(58±6)个]减少(P<0.05),细胞增殖能力降低[24 h(0.65±0.06)比(0.30±0.03);48 h(1.04±0.10)比(0.45±0.04);72 h(1.63±0.16)比(0.60±0.06)](P<0.05);miR-374a可靶向结合Syk,并可负向调控Syk的表达与活性;抑制Syk表达可减弱miR-374a抑制对细胞生物学行为及放射敏感性的影响.结论 miR-374a低表达可通过上调Syk表达抑制卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭,提高细胞对放射治疗的敏感性.     

环状 RNA肌球蛋白轻链激酶靶向微小 RNA-497-5p调控结肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨环状 RNA肌球蛋白轻链激酶( circMYLK)对结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和可能机制。方法本研究 2019年 3月至 2020年 1月进行。实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测检测正常结肠上皮细胞( NCM460)和结肠癌细胞(SW480、SW620、Caco-2)中 circMYLK和微小 RNA-497-5p(miR-497-5p)表达水平。将 circMYLK小干扰 RNA(si-circMYLK)、 miR-497-5p模拟物分别转染 SW480细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、 Transwell实验分别检测干扰 circMYLK或过表达 miR-497-5p对 SW480细胞增殖、迁移和侵袭的影响。双荧光素酶报告基因实验和 RT-qPCR确定 circMYLK对 miR-497-5p的调控作用。结果与 NCM460细胞比较,结肠癌细胞中 circMYLK表达( 1.00±0.06比 3.39±0.23、2.31±0.24、2.98±0.18)显著升高, miR-497-5p表达( 1.00±0.08比 0.36±0.04、0.63±0.05、0.54±0.05)显著降低( P<0.05)。干扰 circMYLK表达后 SW480、细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低( P<0.05)。过表达 miR-497-5p后 SW480细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低( P<0.05)。 circMYLK靶向负性调控 miR-497-5p表达。抑制 miR-497-5p表达能够逆转干扰 circMYLK对 SW480细胞增殖、迁移和侵袭的影响,恢复细胞活力、迁移和侵袭能力( P<0.05)。结论结肠癌细胞中 circMYLK呈高表达,干扰 circMYLK通过靶向 miR-497-5p能够抑制结肠癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

微小RNA-455-3p 下调TRIM27 对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响

目的研究微小RNA-455-3p(miR-455-3p)对鼻咽癌细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法运用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人鼻咽癌细胞5-8F、CNE-1和鼻咽上皮细胞NP69中miR-455-3p的表达;将miR-NC、miR-455-3p mimics、pcDNA3.1、pcDNA3.1- TRIM27、si-NC、si- TRIM27 组、miR-455-3p mimics 和pcDNA3.1、miR-455-3p mimics 和pcDNA3.1-TRIM27通过脂质体试剂转染到5-8F;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)、流式细胞术、蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞的增殖、凋亡和TRIM27蛋白表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-455-3p与TRIM27的靶向关系。结果与鼻咽上皮细胞NP69(1.37±0.06)相比,人鼻咽癌细胞5-8F(0.42±0.02)、CNE-1(0.96±0.05)中miR-455-3p的表达显著降低(F =314.35,P =0.001)。过表达miR-455-3p 可明显抑制5-8F、CNE-1 细胞的增殖,促进其凋亡;miR-455-3p 可抑制野生型TRIM27细胞的荧光活性,且与TRIM27的表达呈负相关;抑制TRIM27可抑制抑制5-8F细胞的增殖,促进凋亡,过表达TRIM27能够逆转miR-455-3p对鼻咽癌细胞5-8F增殖凋亡的作用。结论miR-455-3p能够调控鼻咽癌细胞增殖、凋亡的作用机制与其靶向TRIM27相关,将可为鼻咽癌的治疗提供新靶点。     

利多卡因调控微小RNA-195对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响

目的 探讨利多卡因(lidocaine)对骨肉瘤MG63细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响及其可能的作用机制.方法 研究于2018年5―12月,体外培养骨肉瘤MG63细胞,不同浓度的利多卡因干预MG63细胞,采用甲基噻唑基四唑(MTT)法检测MG63细胞存活率及顺铂半抑制浓度(IC50值);流式细胞术检测细胞凋亡率;实时...     

微小RNA-152对肝癌细胞HepB3与SNU449生物学功能的影响

目的:研究微小RNA-152(miR-152)对肝癌细胞生物学功能的影响。方法:将miR-152阻遏物及模拟物转染至HCC细胞系HepB3及SNU449中,检测HCC细胞生长、凋亡及Caspase3/7活性的变化。结果:miR-152阻遏物可抑制HCC细胞生长、诱发凋亡及促进Caspase3/7活性的增加。结论:miR-152在肝癌的发展中发挥重要作用,并有望成为HCC的新的治疗靶标。     

微小 RNA-744-5p靶向整合素连接激酶对膀胱癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响

目的 探讨微小RNA-744-5p(miR-744-5p)对膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制.方法 选取2016年2月至2018年11月枣庄矿业集团枣庄医院接收的经病理确诊的56例膀胱癌病人病理组织切片,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测56例膀胱癌组织和对应癌旁组织中miR-744-5p表达水平.分别转染miR-744-5p模拟物(mimics)、miR-744-5p抑制剂或共转染miR-744-5p mimics与整合素连接激酶(ILK)过表达载体至膀胱癌BIU-87、T739细胞,MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹法(Western Blotting)检测过细胞中细胞周期蛋白(Cyclin D1)、P21、基质金属蛋白酶(MMP-2)和钙黏附蛋白E(E-cadherin)蛋白表达.双荧光素酶报告基因实验验证miR-744-5p与ILK调控关系.结果 与癌旁组织相比,膀胱癌组织中miR-744-5p表达水平显著降低[(0.98±0.10)比(0.25±0.02),P<0.05].过表达miR-744-5p后,BIU-87和T739细胞OD值、迁移数和侵袭数及Cyclin D1和MMP-2蛋白表达降低(P<0.05),而P21和E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05).抑制miR-744-5p后,BIU-87和T739细胞OD值、迁移数和侵袭数升高(P<0.05).miR-744-5p靶向结合并负调控ILK,过表达ILK逆转过表达miR-744-5p对BIU-87和T739细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结论 膀胱癌组织中miR-744-5p呈低表达,过表达miR-744-5p可阻碍膀胱癌细胞增殖、迁移和侵袭,而抑制miR-744-5p则起相反的作用,其可能通过靶向负调控ILK表达发挥作用.     

长链非编码 RNA FOXD2相邻相反链 RNA 1靶向调控微小 RNA-760对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨 FOXD2相邻相反链 RNA 1(FOXD2-AS1)对前列腺癌细胞的增殖和凋亡的影响以及作用机制。方法验于 2019年 1—11月进行,根据 DU145细胞转染情况分为空载体质粒( pcDNA)组、 FOXD2-AS1过表达质粒( pcDNA-FOXD2实AS1)组、小干扰 RNA阴性对照( si-NC)组、 FOXD2-AS1小干扰 RNA(si-FOXD2-AS1)组、微小 RNA(miR)-760组、 miR-760阴性对照( miR-NC)组及 si-FOXD2-AS1+抗 miR-760阴性对照( anti-miR-NC)组、 si-FOXD2-AS1+抗 miR-760(anti-miR-760)组。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测 miR-760和 FOXD2-AS1表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测荧光活性;蛋白质印迹法检测蛋白表达; MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡。结果与正常前列腺上皮细胞 RWPE-1相比,前列腺癌细胞 DU145、LNCaP、22Rv1中 miR-760表达水平显著降低［( 0.34±0.03)、(0.56±0.05)、(0.42±0.04)比( 1.01±0.08)］(P<     

咪达唑仑上调miR-137影响胃癌细胞的增殖、凋亡的机制研究

摘要：目的:探讨咪达唑仑（MID）对胃癌细胞的增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法:以胃癌HGC-27细胞为研究对象,采用不同浓度的MID处理,采用细胞增殖/毒性检测试剂盒（CCK-8）检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞的凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测微小RNA（miR）-137的表达量; miR-137 mimics转染至HGC-27细胞,采用上述方法检测细胞增殖及凋亡;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞周期蛋白1（CyclinD1）、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（C-caspase-3）蛋白表达。结果:MID可降低细胞存活率、增高细胞凋亡率、促进miR-137与C-caspase-3的表达（P<0.05）; miR-137过表达可降低细胞存活率、增加细胞凋亡率、抑制CyclinD1表达、促进C-caspase-3表达（P<0.05）;抑制miR-137的表达可减弱MID对HGC-27细胞增殖及凋亡的作用。结论:MID可通过上调miR-137的表达从而抑制胃癌细胞增殖,促进细胞凋亡。     

微小RNA-107 调控内质网应激对喉癌Hep-2 细胞癌增殖及凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR-107)调控内质网应激对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响。方法将miR-107类似物和阴性对照片段转染至对应组细胞中,以未转染组作为空白组。采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组Hep-2细胞中miR-107相对表达量,用蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组Hep-2 细胞中的内质网应激有关蛋白即蛋白激酶R 样内质网激酶(PERK)及活化转录因子4(ATF4)蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定Hep-2细胞的增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果三组转染细胞miR-107相对表达量差异有统计学意义(χ2=11.50,P<0.05)。其中mimics组miR-107的相对表达量为(15.32±1.94),与mimics组相比较,NG组、空白组miR-107相对表达量均降低(P<0.05)。三组转染细胞的PERK和ATF4蛋白表达水平均差异有统计学意义(F=70.35、13.77,P<0.05)。其中mimics组PERK 和ATF4蛋白的相对表达量为(0.53±0.07)和(0.75±0.06),与mimics组相比较,NG组和空白组的PERK和ATF4蛋白相对表达量均降低(P<0.05)。MTT分析结果显示,三组细胞的增殖能力差异有统计学意义(F=21.44、28.38、59.14,P<0.05)。其中mimics组Hep-2细胞增殖能力在12、24、36 h时分别为(0.15±0.01)、(0.33±0.03)和(0.47±0.04),与mimics组比较,在12、24、36 h后NG组、空白组Hep-2细胞增殖能力均有显著升高(P<0.05)。三组转染细胞的细胞凋亡率比较差异有统计学意义(F=102.32,P<0.05)。其中mimics组Hep-2细胞凋亡率为(10.18±0.93),与mimics组相比较,NG组和空白组的细胞凋亡率均降低(P<0.05)。结论上调miR-107的表达能够抑制Hep-2细胞的增殖,促进Hep-2细胞凋亡,内质网应激可能在其中有重要作用。     

长链非编码 RNA LINC00346调控微小 RNA-138-5p对宫颈癌细胞增殖、凋亡的影响

目的研究长链非编码 RNA(lncRNA)LINC00346影响宫颈癌细胞增殖和凋亡的分子机制。方法选取 2018年 1—12月于南阳市中心医院手术治疗的 28例宫颈癌病人的宫颈癌组织(实验组)及癌旁正常组织(对照组)为研究对象。根据细胞转染情况分为 si-NC组、 si-LINC00346组、 miR-NC组、 miR-138-5p组、 si-LINC00346+anti-miR-NC及 si-LINC00346+anti-miR-138-5p组;利用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测宫颈癌组织和宫颈癌海拉细胞中 LINC00346和微小 RNA(miR)138-5p的表达水平,蛋白质印迹法检测海拉细胞中周期素依赖激酶抑制剂 p21(P21)和胱天蛋白酶 -3(caspase-3)的蛋白含量, MTT法和流式细胞术测定细胞存活率和凋亡率,双荧光素酶报告系统验证 LINC00346和 miR-138-5p的靶向关系。结果与正常癌旁组织相比,宫颈癌组织中 LINC00346含量显著升高［( 2.51±0.08)比( 0.99±0.05)］(P<0.001);转染 si-LINC00346(LINC00346干扰物)后,与 si-NC(阴性对照组)相比, si-LINC00346组宫颈癌海拉细胞中的 LINC00346含量显著下降［( 0.33± 0.03)比( 1.00±0.05)］P21和 caspase-3蛋白含量升高［(0.63±0.04)比( 0.22±0.02);(0.79±0.05)比( 0.30±0.03)］,海拉细胞存活率降低［(52.84±4.39)比(,100.00±6.13)］,凋亡率升高［( 23.39±1.64)比( 8.19±1.00)］,均差异有统计学意义( P<0.001),敲除 LINC00346可降低细胞存活率,提高细胞凋亡率及 P21和 caspase-3蛋白含量;转染野生型 WT-LINC00346的海拉细胞,与 miR-NC对照组相比, miR-138-5p组野生型 WT-LINC00346的萤火虫荧光素酶相对活性显著下降［( 0.24±0.03)比( 0.97±0.05)］。敲除 LINC00346可显著上调 miR-138-5p含量［(2.43±0.07)比( 1.01±0.05)］(P<0.001)。结论 LINC00346通过靶向 miR-138-5p调控宫颈癌海拉细胞增殖和凋亡。     

人类表皮生长因子受体 2对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响

目的 研究人类表皮生长因子受体2(HER2)对胃癌细胞增殖、迁移侵袭和凋亡的影响,并探讨其机制.方法 2018年11月至2019年6月,运用实时定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测永生化的正常胃上皮细胞GES-1、胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823中HER2的表达;将空载体(pcDNA 3.1)、HER2过表达载体(pcDNA 3.1-HER2)、小干扰RNA阴性对照(si-NC)、HER2小干扰RNA(si-HER2)用脂质体法转染至SGC-7901细胞.噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖;Tran-swell小室检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞中p16、p21、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、裂解的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(cleaved-PARP)、裂解的半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)蛋白表达.结果 与正常胃上皮细胞GES-1相比,胃癌细胞SGC-7901、MGC-803、BGC-823中HER2的表达[(3.02±0.28),(2.51±0.21),(2.36±0.19)比(1.00±0.08)]明显升高,其中SGC-7901细胞中的表达最高(P<0.05);过表达HER2后,SGC-7901细胞的增殖[(1.12±0.09)比(0.61±0.06)]、迁移[(170±15)比(100±9)]和侵袭[(130±12)比(75±6)]能力均明显上调,细胞的凋亡力[(8.03±0.69)％比(19.46±1.44)％]明显下调(P<0.05);敲减HER2则可下调SGC-7901细胞的增殖[(0.59±0.05)比(0.89±0.08)]、迁移[(55±5)比(100±8)]和侵袭[(36±4)比(75±6)]能力,上调细胞的凋亡[(16.82±1.15)％比(8.01±0.65)％]能力(P<0.05).重要的是,过表达HER2可明显抑制SGC-7901细胞中增殖抑制蛋白p16、p21,迁移侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9,凋亡促进相关蛋白cleaved-PARP、cleaved caspase-3的表达,敲减HER2具有相反的作用.结论 HER2可促进胃癌细胞的增殖、迁移侵袭,抑制凋亡,其可能与调控功能增殖、迁移侵袭及凋亡相关蛋白表达有关.     

微小RNA-766-5p通过调控组氨酸磷酸酶基因表达影响胃癌细胞增殖和放射敏感性

目的 研究微小RNA(miR)-766-5p对人胃腺癌细胞(AGS)细胞增殖和放射敏感性的影响及潜在作用机制.方法 以胃上皮细胞GES-1为对照,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测胃癌细胞系AGS、MGC803、MKN-28和SGC-7901中组氨酸磷酸酶(LHPP)mRNA和miR-766-5p的...     

胃癌细胞凋亡与E钙黏附蛋白表达的关系及意义

目的探讨E钙黏附蛋白和凋亡相关蛋白Survivin、Fas与胃癌分化程度的关系,及胃癌组织中E钙黏附蛋白、Survivin、Fas间的相关性。方法采用免疫组织化学法检测63例(高、中、低分化)胃癌及22例正常胃黏膜组织中三者的表达。结果 E钙黏附蛋白胃癌中表达率为73%,高于正常胃组织中的64%,Fas在胃癌组织中的表达率为6%,低于正常胃组织中的86%。Survivin在63例胃癌组织中阳性表达87%,明显高于正常组织中的18%,组间相比差异有统计学意义(P<0.05)。E钙黏附蛋白在高、中、低分化癌的阳性表达率依次为45%、33%、5%,Fas在不同分化癌的阳性表达率依次为36%、19%、10%,E钙黏附蛋白、Fas蛋白的表达率在高、中分化癌与低分化癌相比差异有统计学意义(P<0.05)。Survivin阳性表达率由高分化癌的68%到低分化癌的85%有逐渐增强的趋势,但不同分化程度相比差异无统计学意义。E钙黏附蛋白与Fas蛋白在不同分化癌中的表达趋势较一致,但之间无相关性。E钙黏附蛋白、Survivin蛋白在胃癌组织中表达呈正相关(r=0.383,P<0.05);Survivin、Fas蛋白在胃癌组织中表达呈负相关(r=-0.463,P<0.05),未发现三者间有明显相关性。结论 E钙黏附蛋白、Fas在胃癌中表达率低于正常胃组织,且两者与分化程度有关,而Survivin正好相反,从而进一步证实了E钙黏附蛋白、Survivin、Fas对胃癌发生、发展的影响。     

长链非编码 RNA膀胱癌相关转录物 1对微小 RNA-503-5p的靶向关系及对结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录物1(BLACAT1)对微小RNA(miR)-503-5p的靶向关系及结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测结肠癌细胞株SW620,LOVO,HT29和人正常结肠黏膜上皮细胞株NCM460中BLACAT1和miR-503-5p的表达.在HT29细胞中转染si-BLACAT1、pcDNA-BLACAT1或miR-503-5p,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞核相关抗原Ki-67(Ki-67)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、活化的多聚ADP-核糖聚合酶(Cleaved PARP)和活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved caspase-3)的表达,starbase预测和双荧光素酶报告分析BLACAT1与miR-503-5p之间的靶向关系.si-BLACAT1和anti-miR-503-5p共转染,观察干扰miR-503-5p对沉默BLACAT1诱导的结直肠癌细胞增殖和凋亡的影响.结果 与NCM460细胞比较,SW620、LOVO和HT29中BLACAT1表达量明显增加[(4.93±0.58)、(5.66±0.53)、(6.17±0.66)比(1.03±0.22)],miR-503-5p表达量减少[(0.72±0.11)、(0.67±0.09)、(0.51±0.08)比(1.04±0.14)](P<0.05).沉默BLACAT1或转染miR-503-5p明显减少HT29细胞的细胞存活率、Ki-67、CyclinD1蛋白表达量,提高细胞凋亡率、Cleaved PARP和Cleaved caspase-3蛋白水平(P<0.05),过表达BLACAT1则反之.BLACAT1靶向miR-503-5p调控其表达.干扰miR-503-5p部分逆转沉默BLACAT1抑制结直肠癌细胞增殖、Ki-67、CyclinD1蛋白表达和诱导结直肠癌细胞凋亡、Cleaved PARP、Cleaved caspase-3蛋白表达的作用.结论 lncRNA BLA-CAT1在表达上调,沉默BLACAT1可通过靶向调控miR-503-5p的表达,来抑制结直肠癌细胞增殖,并诱导细胞凋亡.     

Spleen tyrosine kinase participates in src-mediated migration and proliferation by PDGF-BB in rat aortic smooth muscle cells

Tyrosine kinases, Src and spleen tyrosine kinase (Syk), play crucial roles in cell responses to platelet-derived growth factor (PDGF) and may have their functional interactions. In this study, we focused on investigating the roles of Syk in the regulation of Src signaling in PDGF-mediated vascular cell responses. Migration, proliferation, and activity of kinases were determined in rat aortic smooth muscle cells (RASMCs). PDGF-BB (10 ng/mL) induced the migration and proliferation of RASMCs, which were significantly inhibited by PP2 (10 microM) and piceatannol (30 microM), inhibitors of Src and Syk, respectively. The phosphorylation of Syk induced by PDGF-BB was abolished by PP2. PDGF-BB increased the co-association of the PDGFbeta-receptor and the kinases, Src or Syk, and its maximal binding to Src was achieved in a shorter time than that to Syk. PDGF-BB stimulated the phosphorylation of p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) and extracellular signal-regulated kinase (ERK) 1/2, which was inhibited by PP2 and piceatannol. PDGF-BB-induced proliferation and migration were inhibited by SB203580 (30 microM) and PD98059 (30 microM), inhibitors of p38 MAPK and ERK1/2, respectively. These results imply that Syk is regulated by Src kinase, which participates in migration and proliferation in response to PDGF-BB in RASMCs.     

胃癌酪氨酸激酶与细胞凋亡的关系

目的 研究酪氨酸激酶(Syk)的表达与胃癌细胞凋亡的关系.方法 RT-PCR检测50例胃癌及癌旁正常胃组织标本中Syk mRNA的表达情况,并用流式细胞仪检测胃癌组织肿瘤细胞凋亡,分析Syk表达与胃癌组织肿瘤细胞凋亡的情况.结果 所有癌旁胃组织都有Syk基因的表达,而50例胃癌组织中只有11例有表达,癌旁正常胃组织与胃癌组织中Syk基因表达率差异有显著性(P＜0.05).有淋巴结转移的39例胃癌组织中, 2例有Syk基因表达,无淋巴结转移的11例胃癌组织中有9例检测到Syk mRNA的表达,有淋巴结转移的胃癌组织中Syk mRNA的表达率显著降低(P＜0.05). Syk阳性表达的11例胃癌组织的凋亡率为(28.27±4.39)%,显著高于39例Syk阴性的胃癌组织的凋亡率为(3.29±2.37)%(P＜0.05).结论 Syk对胃癌的生长和转移可能有抑制作用,诱导胃癌组织肿瘤细胞凋亡可能是其抑癌作用的主要原因之一.     

地西他滨对胃癌细胞 AGS增殖和侵袭的影响

目的 探究地西他滨对胃癌AGS细胞增殖和侵袭的影响及其作用机制.方法 本研究时间为2017年10月至2018年12月,采用地西他滨处理购自于中国科学院细胞库的胃癌AGS细胞,应用MTT法检测细胞增殖率,亚硫酸氢钠转化测序法检测APC基因启动子的甲基化程度,实时荧光定量PCR法检测APC基因mRNA的表达,Western blotting检测APC蛋白表达,细胞锚定非依赖性生长分析法和Transwell细胞侵袭法检测细胞的增殖和侵袭能力.结果 AGS细胞中,APC基因启动子高度甲基化((85.7±5.4)％);地西他滨处理AGS细胞后,细胞活力受到抑制,且呈浓度和时间依赖性.APC基因启动子去甲基化,mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05),5μM升高(2.3±0.1)倍,10μM升高(3.6±0.2)倍,25μM升高(4.1±0.1)倍,50μM升高(3.9±0.2)倍),增殖和侵袭能力均减弱(P<0.05),AGS组(290.3±5.7)个细胞,5μM为(213.2±6.7)个细胞,10μM为(160.4±7.3)个细胞,25μM为(145.8±6.2)个细胞,50μM为(119.2±8.6)个细胞).结论 地西他滨可以抑制AGS细胞的增殖和侵袭,表现出抗肿瘤活性,其相关机制可能为去除AGS细胞中APC基因的甲基化,恢复APC基因的表达.     

长链非编码 RNA LINC01419调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的机制

目的研究长链非编码 RNA(lncRNA)LINC01419调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移侵袭的机制。方法收集漯河市中心医院 2015年 10月至 2018年 5月因结直肠癌手术切除的组织标本 20例,以距离结直肠癌边缘 ≥3 cm的癌旁正常组织标本 20例为对照。实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRT-PCR)检测结直肠癌组织中 lncRNA LINC01419和微小 RNA-132-3p(miR-132-3p)表达。构建干扰 lncRNA LINC01419或 miR-132-3p过表达的结直肠癌 SW620细胞, MTT法和流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡, Transwell检测细胞迁移、侵袭,蛋白质印迹法( Western blotting)检测细胞周期蛋白 D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂 1A(P21)、 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)蛋白、 Bcl-2相关 X(Bax)蛋白、基质金属蛋白酶 -2(MMP-2)、基质金属蛋白酶 -9(MMP-9)蛋白表达。生物信息学预测结合双荧光素酶报告实验分析 lncRNA LINC01419和 miR-132-3p的靶向关系。 si-LINC01419和 anti-miR-123-3p共转染,观察抑制 miR-132-3p表达对干扰 lncRNA LINC01419诱导的 SW620细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。结果与癌旁组织［(1.00±0.09)、(1.01±0.08)］比较,结直肠癌组织中 lncRNA LINC01419表达量( 2.74± 0.26)明显增加( P<0.05)miR-132-3p表达量( 0.51±0.05)显著减少( P<0.05)。干扰 lncRNA LINC01419或 miR-132-3p过表达显著抑制 SW620细胞增殖、,迁移、侵袭、 cyclin D1、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达,并促进细胞凋亡、 P21、Bax蛋白表达。 lncRNA LINC01419靶向调控 miR-132-3p的表达。抑制 miR-132-3p表达逆转了干扰 lncRNA LINC01419对结直肠癌细胞 SW620增殖、迁移、侵袭的抑制作用,以及对细胞凋亡的促进作用。结论 lncRNA LINC01419通过靶向 miR-132-3p调控结直肠癌细胞增殖、凋亡、迁移侵袭。