一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠视上核及室旁核的分布

目的：探讨自发性高血压大鼠视上核及室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的改变。方法：用ＮＡＤＰＨ－ｄｉ－ａｐｈｏｒａｅ组织化学方法,观察和比较了一氧化氮合酶在自发性高血压大鼠和正常对照大鼠视上核和室旁核的分布间下观察下捕脑视上核及室旁核的一氧化氮合酶阳性细胞形态、分布并进行计数。用图像分析仪测其灰度显差异。视上核及室旁核内的一氧化氮合酶阳性细胞灰度值在高血压组均明显高于对照组。提示这两上核内一氧化氮合酶     

大鼠下丘脑室旁核内一氧化氮合酶神经元的生后发育

应用 NADPH-黄递酶组织化学和一氧化氮合酶 (NOS)免疫组织化学方法以及计算机图像分析 ,观察 NOS神经元在大鼠下丘脑室旁核 (PVN)生后发育各阶段的形态及分布特征。结果显示 ,1d时 PVN内已有 NOS神经元。随着生长发育 ,PVN的面积逐渐变化 ,NOS神经元主要集中在 PVN的外侧大细胞部及腹侧部 ,细胞逐渐增多 ,胞体的平均截面积逐渐变大 ,平均灰度值逐渐降低。14d以后至成年鼠 (90 d)以上变化不明显。结果提示 ,PVN中 NOS神经元的生后发育和成熟主要在 14d前 ,尤以 7d至 14d为关键时期     

大鼠下丘脑室旁核一氧化氮和外周血白细胞介素1β含量的昼夜节律变化及相关性的探讨

目的:探讨大鼠外周血白细胞介素1β(IL-β)和下丘脑室旁核中的一氧化氮是否具有昼夜节律以及两者的相关性。材料和方法:成年雄性SD大鼠24只随机分为4组,分别在16:00、22:00、4:00和10:00时腹腔注射细菌脂多糖。两小时后,分别麻醉采血及灌注取脑。采用放射免疫分析法测定外周血IL-1β的含量,运用β-NADPH-酶组化和计算机图像分析技术对室旁核中NADPH-d阳性神经元的切面面积和平均灰度值进行分析。结果:1.6:00时组外周血IL-1β含量最高,12:00时组最低,显示出明显的昼夜节律性。2.四组大鼠室旁核内NADPH-d阳性神经元的切面面积12:00时组最大,18:00时组最小,差异有显著性。3.外周血IL-1β含量昼夜节律变化的时相比室旁核一氧化氮产生量昼夜节律变化的时相早6小时。结论:大鼠外周血中IL-1β和室旁核一氧化氮的产生量均有昼夜节律性变化,外周血中IL-1β可能对室旁核一氧化氮的产生有促进作用。     

束缚应激大鼠下丘脑内一氧化氮合酶与c-fos蛋白的共存

为了探讨下丘脑内一氧化氮与应激之间的关系，本实验应用NADPH-d组化法和C-fos免疫组化技术相结合的方法，对束缚应激大鼠下丘脑内一氧化氮合酶（NOS）和c-fos蛋白的分布以及两者的共存关系进行了观察。结果表明，大鼠在束缚应激4h后，（1）室旁核大细胞部和视上核可见密集深染的NOS阳性大细胞；（2）室旁核小细胞部、背内侧核、穹窿周核、环状核、腹内侧核腹外侧部、结节内侧核、外侧区、室周区、乳头体前核和内侧核的外侧区等核团出现疏密不等和深浅不一的NOS阳性细胞；（3）C-fos蛋白以室旁核表达最为强烈，视前区、背内侧核、弓状核和外侧区亦有较强的表达；（4）在外侧区、室旁核小细胞部及其附近的室周区、背内侧核及乳头体前核腹侧部约有10％～15％的中、小型NOS阳性细胞同时表达C-fos蛋白，室旁核大细胞部则仅有较少的NOS阳性大细胞表达C－fos蛋白，在结节区、结节内侧核和视上核视交叉后部则偶见双标细胞。结果提示上述下丘脑核团内的部分一氧化氮能神经元与束缚应激反应有关。     

大鼠下丘脑内的一氧化氮合酶与雌激素受体双标神经元

目的:探讨一氧化氮合酶(NOS)和雌激素受体(ER)在下丘脑诸核团的分布及共存,为揭示雌激素与一氧化氮之间的内在联系提供形态学依据。方法:采用NADPH-d组织化学法并结合免疫组织化学技术,观察雌性大鼠下丘脑内NOS阳性神经元、ER阳性神经元以及NOS/ER双染神经元的形态及分布。结果:NOS阳性神经元主要分布在下丘脑室旁核、视上核、下丘脑外侧区和室周核;ER阳性神经元在下丘脑诸核团的表达不及NOS阳性神经元广泛;NOS与ER双染神经元主要分布在下丘脑的室旁核、视上核、下丘脑外侧区及室周核;其他区域可见散在分布的双染神经元。结论:NOS与ER双染神经元主要集中分布在视上核的背内侧和背外侧部及室旁核小细胞部腹内侧区,在下丘脑外侧区分布较广但比较分散,室周核呈散在分布。     

大鼠室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的构筑

利用黄递酶组织化学染色 ,观察鼠脑室旁核各亚核内 NOS阳性神经元的构筑。结果显示室旁核内 NOS阳性神经元主要分为两种类型 :大型 NOS阳性神经元 ,占大部分 ,相对密集、成群分布于室旁核四个大细胞亚核即 :前连合核、内侧室旁核、外侧室旁核、室旁核后亚核 ;小型 NOS阳性神经元 ,占小部分 ,散在分布于大细胞亚核内或小细胞部 ,如室旁核前小细胞部、背外侧帽。结果提示 ,室旁核各亚核内 NOS阳性神经元的形态与分布存在着差别 ,意味着具有多种相应的生理功能     

外源性雌激素对去势后大鼠下丘脑视上核一氧化氮合酶阳性神经元分布的影响

目的观察外源性雌激素对去势后雌性大鼠下丘脑视上核(SON)一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元分布的影响。方法选用2～3月龄、健康未交配的雌性大鼠40只;动物分组如下:对照组大鼠20只,分为正常对照组(n=10)和实验对照组(卵巢切除术后,n=10)。实验组(即卵巢切除术后肌肉注射雌激素组)20只,造模成功后,分别于术后40d(即给药一个月)和术后70d(即给药两个月)陆续灌注取材。采用SABC法在光学显微镜下对下丘脑视上核内NOS阳性神经元进行形态学观察和细胞计数,采用图像分析系统测定NOS阳性神经元内免疫反应产物的平均灰度值。结果卵巢切除术后对照组大鼠下丘脑视上核NOS阳性神经元的密度明显增高,细胞比正常对照组有所增大(P0.05)。去势后补充雌激素1个月组的大鼠与正常对照组和卵巢切除组相比较,视上核内NOS阳性神经元的密度及形态均无明显改变(P0.05)。去势后补充雌激素两个月组与实验对照组相比较,无论NOS阳性神经元的密度还是阳性神经元胞体的大小均显著下降(P0.05),细胞着色变浅。结论外源性雌激素可能影响去势雌性大鼠下丘脑视上核NOS阳性神经元的分布和表达。     

大鼠下丘脑室旁核中一氧化氮合酶阳性神经元的生后发育

本文用NADPH－d组织化学方法观察NOS阳性神经元在大鼠下丘脑室旁核生后发育各阶段（1、7、14、21、28和90d）的形态及分布特征。结果显示，1d时下丘脑室旁核内已有密集的NOS阳性神经元分布，但随生长发育，室旁核的截面积逐渐变大，其中的NOS神经元主要集中在该核的外侧大细胞部以及腹侧部，单位面积中的NOS神经元的密度逐渐降低。到21d，下丘脑室旁核NOS阳性神经元的分布密度较1d时下降50％。28d以后至成年鼠（90d），此密度维持在一定水平．提示下丘脑室旁核中NOS神经元的生后发育主要在生后1d至21d之间，并提示胚胎时期该核中已有NOS神经元存在。     

雌性大鼠室旁核一氧化氮合酶神经元周期性变化

目的：研究不同动情周期雌大鼠下丘脑室旁核（PVN）一氧化氮合酶（NOS）神经元的分布。方法：采用SABC法结合图像定量分析。结果：动情期大鼠PVN中NOS神经元数量最多，细胞深染、突起明显；动情前期和后期神经元数量中等；动情间期神经元数量最少，细胞元数量中等；动情间期神经元数量最少，细胞染色浅。经方差分析，不同动情周期各组PVN中NOS神经元细胞数、灰度值总体有显著差异动情期组与动情间期组两项指标也有显著性差异。结论：NO可能与雌性动物生殖周期的调控有关。     

大鼠下丘脑室旁核加压素神经元的生后发育

用免疫细胞化学PAP法研究了大鼠下丘脑室旁核加压素(VP)神经元的生后发育过程,对75只生后不同发育阶段大鼠下丘脑室旁核VP神经元进行了观察,结果表明,不同发育时期的室旁核内,均有VP免疫阳性细胞出现,细胞质和突起呈棕黄色,胞体大多数为椭圆形,少数为圆形和三角形,用测微尺测量了各级发育阶段阳性细胞的直径及计数了各切面被标记的细胞数量,大多数细胞只有二支突起,少数有三支突起。生后30天大鼠室旁槟VP阳性细胞的形态、数量、直径和复杂化程度已接近成年水平,另在第三脑室周圍灰质区域,室管膜和室管腆下层也发现有VP阳性细胞存在。     

加压素在自发性高血压大鼠与正常大鼠下丘脑视上核、室旁核神经元内表达

目的观察加压素(AVP)在自发性高血压大鼠(SHR)与正常大鼠下丘脑视上核(SON)、室旁核(PVN)内的分布。方法应用光镜和免疫细胞化学技术。结果SHR的AVP阳性细胞内分泌颗粒密集呈棕黄色,正常大鼠组则染色较浅。SHR大鼠SON内AVP阳性神经元百分数(69.30±18.10%)明显多于正常大鼠(59.53±16.97%,P<0.05),而两组大鼠PVN内AVP的表达无明显差异。结论AVP在下丘脑的血压调节活动中起着重要的介导作用,中枢AVP含量的异常增加可能与高血压的发病有关。     

高渗刺激诱导大鼠下丘脑室旁核和视上核神经激肽B受体阳性神经元表达Fos

目的研究神经激肽Ｂ受体（ＮＫ３受体）与机体渗透压调节之间的可能关系。方法用双重免疫组织化学染色技术,高渗刺激采用静脉内注射１．５ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ的方法,观察了下丘脑室旁核和视上核内ＮＫ３受体阳性神经元在高渗刺激下的Ｆｏｓ表达情况。结果高渗盐水可诱导下丘脑室旁核和视上核内大量神经元表达Ｆｏｓ。在室旁核,双标细胞约占ＮＫ３受体阳性神经元的８８％,约占Ｆｏｓ阳性细胞的７１％;在视上核的主部,双标细胞约占ＮＫ３受体阳性神经元的７４％,约占Ｆｏｓ阳性细胞的４３％。结论室旁核和视上核内ＮＫ３受体阳性神经元可能参与大鼠渗透压调节过程。     

高原低氧对大鼠下丘脑谷氨酸、天门冬氨酸和NOS的影响

目的:观察高原低氧大鼠下丘脑谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)和一氧化氮合酶(NOS)的变化。方法:应用氨基酸测定和NADPH-d组化法,检测高原低氧模型大鼠下丘脑Glu、Asp含量和NADPH-d阳性神经元的数量。结果:高原低氧大鼠下丘脑Glu、Asp含量明显增多,室旁核、视上核可见密集深染的NADPH-d阳性神经元;用NMDA受体拮抗剂氯氨酮(Ketamine)和AP-V对高原低氧大鼠进行预处理后置于低压氧舱,观察到大鼠下丘脑室旁核、视上核NADPH-d阳性神经元数明显少于相应时间的高原低氧组(P＜0.01)。结论:NMDA受体可能参与了高原低氧引起的下丘脑NOS的表达。     

IFN-γ对流产大鼠视上核、弓状核、室旁核TNF-α表达的影响

为了探讨γ-干扰素(IFN-γ)对流产大鼠视上核(SON)、弓状核(AN)、室旁核(PVN)内肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响,将20只孕SD大鼠随机分为A、B、C、D组。A组为对照组;B组为流产模型组;C、D组分别为流产模型+1IU/gIFN-γ组和流产模型+10IU/gIFN-γ组。妊娠13d灌注取材,并观察妊娠结局;采用免疫组化SP法对每组SON、AN、PVN中TNF-α的表达进行检测。结果显示:B、C、D组三个核团内TNF-α免疫阳性产物的灰度值均较A组降低,而阳性细胞数均较A组增高;C组SON、AN内TNF-α的阳性灰度值均高于B组,而SON、AN、PVN阳性细胞数均低于B组;D组TNF-α免疫阳性产物的灰度值均较B、C组低,阳性细胞数均较B、C组高;C组平均胚胎数较B、D组显著增高。以上结果表明IU/gIFN-γ对妊娠有利,这种作用可能与其参与SON、AN和PVN中TNF-α表达的调节有关。     

N-氨基-D-门冬氨酸诱导大鼠下丘脑视上核、室旁核和弓状核内c-fos基因表达

实验用foS蛋白免疫组织化学方法,研究了中枢神经系统兴奋性介质N-氨基-D-门冬氨酸诱导大鼠下丘脑内c-fos的表达.N-氨基-D-门冬氨酸注射大鼠皮下后,观察了fos阳性细胞在下丘脑内开始出现与消失的时程相关以及在下丘脑内的分布.结果表明:给N-氨基-D-门冬氨酸后30分开始出现fos阳性细胞,1～2小时达高峰,4～8小时消失.fos阳性细胞主要分布于视上核、室旁核和弓状核,视上核和室旁核中fos阳性细胞分别占细胞总数的57.8%和63.6%,在弓状核中占细胞总数的60.6%.     

自发性高血压大鼠第三脑室触液神经元内一氧化氮合酶与加压素的共表达

目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)与SD大鼠第三脑室触液神经元(CSFCN)内一氧化氮合酶(NOS)与加压素(VP)的分布和共存。方法:应用还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学方法,结合ABC免疫组织化学技术。结果:在SHR视前区至室间核后大细胞亚核平面的第三脑室室壁均有NOS阳性CSFCN的分布;在SHR第三脑室室壁的CSFCN内NOS与VP具有共存性,且SHR组第三脑室的CSFCN内NOS与VP共存率较SD组高。结论:一氧化氮(NO)与VP在下丘脑的血压神经内分泌活动调节中起着重要的介导作用,也可能对高血压的发生发展有影响。     

老年性记忆减退大鼠内侧隔核-斜角带胶质纤维酸性蛋自过度表达

<正> 为探讨胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达与一氧化氮合酶(nitric oideSynthase,NOS)神经元损伤引起的老年性记忆减退的关系,选用青年鼠20只,老年鼠40只,进行Morris水迷宫行为学测定,将老年大鼠分为老年性记忆正常组(简称正常组)和老年性记忆减退组(简称减退组).用免疫细胞化学、还原型烟酰胺腺嘌吟二核苷酸(nicotinamide adenine dinudcleotide phosphate diaphorase,NADPH-d)组织化学及其双重染色分析内侧隔核-斜角带(Septum me-dialis-Diagonal Band,SM-DB)中 GFAP和NOS的表达.GEAP免疫细胞化学染色见老年大鼠SM-DB中星形胶质细胞肥大,减退大鼠更为明显.减退组平均胞体面积明显大于正常组(P<0.01),胞体体密度明显高于老年正常组和青年组(p<0.01);细胞的体密度也较正常组和青年组明显增加(P<0.01).GFAP免疫细胞化学和NADPH-d组织化学双重染色见,减退大鼠SM-DB     

短期饥饿对老年、成年大鼠下丘脑加压素神经元及血浆皮质酮的影响

免疫组化光、电镜法观察禁食五天老年及成年大鼠下丘脑精氨酸加压素(AVP)神经元,并检测其血浆皮质酮(B),与同龄正常鼠相比.结果:(1)B均值明显升高(P<0.01),(2)各神经核团的阳性神经元有增有减,非同步变化,(3)正中隆起外带阳性纤维密集,面积增加,(4)视上核主部及室旁核的神经元粗面内质网层次增多,线粒体较密集,(5)成年饥饿鼠阳性细胞总数增加,但其视上核主部的减少,并和血浆B的增加负相关(r=-0.98,P<0.01),而老年饥饿鼠阳性细胞总数减少,且和血浆B的相关性不明显.实验结果表明:血浆B和下丘脑AVP神经元均有明显应激反应,不论成年或老年鼠对短期饥饿均呈现合成及分泌AVP较旺盛的结构变化,但老年的饥饿应激反应弱于成年鼠的.     

一氧化氮合酶在听源性惊厥易感大鼠室旁核的变化

用NADPH-d组织化学方法，观察和比较了室旁核内一氧化氮合酶在听源性惊厥易感大鼠和正常Wistar大鼠下丘脑室旁核的分布和变化.结果显示：在惊厥发作的大鼠，室旁核内一氧化氮合酶阳性神经元的光密度值明显高于非惊厥发作的听源性惊厥易感大鼠和正常Wistar大鼠。提示室旁核内的一氧化氮可能参与了惊厥应答过程。     

微囊化兔坐骨神经组织移植对大鼠脊髓损伤神经元的影响

目的：观察大鼠脊髓半横断损伤后植入微囊化兔坐骨神经组织对一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法：尼氏染色和NADPH-d组织化学染色。利用图像分析系统检测染色标记细胞数和阳性细胞平均面积、平均光密度。结果：脊髓损伤后神经元数量减少,尼氏体脱失、溶解。术后3d,微囊组NOS阳性细胞数、阳性细胞平均面积及平均光密度均明显高于单损组;术后7d微囊组NOS阳性细胞数和阳性细胞平均面积较细胞组高;术后14d,细胞组NOS阳性细胞数急剧增高超过微囊组,但微囊组仍平稳上升。结论：微囊化兔坐骨神经组织移植能诱导早期NOS表达增加及抑制后期NO过量产生,减轻脊髓继发性损伤,有利于损伤脊髓的修复和再生。