瑞香素对脑缺血再灌注大鼠模型胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨瑞香素对大鼠前脑缺血再灌注后海马和皮层胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）表达的影响.方法反复夹闭大鼠双侧颈总动脉模仿人类脑缺血制备前脑缺血再灌注模型,术后给予瑞香素灌胃治疗,免疫组化法检测脑缺血再灌注后2、4、6 w海马和皮层GFAP的表达.结果瑞香素治疗后,海马和皮层GFAP的表达在2 w时较假手术组和缺血再灌注组高,然后开始下降,4 w时低于缺血再灌注组但高于假手术组,6 w时已低于假手术组;瑞香素治疗组中,随着时间延长,GFAP的表达进行性下降,差异显著.结论大鼠前脑缺血再灌注后应用瑞香素治疗对海马和皮层GFAP表达的影响呈动态变化过程,表现为早期促进表达,后期抑制表达,这种调节作用可能与脑缺血性损伤后神经保护有关.     

脑缺血后胶质纤维酸性蛋白表达的变化

胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP )是脑内星形胶质细胞 (astrocyte ,Ast)中间纤维的结构蛋白组成成分 ,由Eng等 (1971)首先从脑内星形胶质细胞中分离出来 ,逐渐被人们看做成熟和反应性星形胶质细胞的特征性标记物 ,Zilles(1991)将其作为全脑所有Ast的特异性免疫组化标记物〔1〕。GFAP在脑缺血后不同时间、不同脑区的表达有明显差异 ,反映了Ast活化程度不同。本文就脑缺血后GFAP的表达作一综述。1　GFAP的生物学特点GFAP是一种线性结构蛋白质 ,与波形蛋白、巢状蛋白一起组成Ast的中间纤维。人GFAP是由 43 …     

阿魏酸钠对反复前脑缺血再灌注大鼠海马及额叶胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨内皮素(ET)受体拮抗剂阿魏酸钠对大鼠前脑缺血再灌注后海马和额叶胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响.方法 双侧颈总动脉夹闭法制备大鼠前脑缺血再灌注模型,HE染色观察阿魏酸钠治疗前后海马CA1区神经元形态学改变,免疫组化法检测缺血再灌注后2、4、6 w海马和额叶胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 阿魏酸钠治疗组海马神经元缺失、变性、坏死较对照组轻,缺血再灌注后海马和额叶GFAP的表达随时间延长逐渐增多,阿魏酸钠治疗组GFAP的表达较假手术组多,较缺血再灌注组减少,差异显著(P<0.05).结论 大鼠前脑缺血再灌注后GFAP表达增多,阿魏酸钠能够降低其表达,对脑缺血性损伤具有保护作用.     

三七三醇皂苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠微管相关蛋白2、胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的了解局灶性脑缺血再灌注后梗死区周围微管相关蛋白(MPA)2、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的动态变化以及三七三醇皂苷对其表达的影响。方法采用改良的线栓法制备大脑中动脉阻塞0.45 h后,不同再灌注时间(1、7、14、21、28 d),大鼠短暂局灶性脑缺血模型。应用免疫双标法观察再灌注损伤后1、7、14、21、28 d Brdu、Brdu/MPA2、Brdu/GFAP表达及三七三醇皂苷对其影响。结果脑缺血再灌注后14 d Brdu表达水平达到峰值,至再灌注28 d Brdu表达水平已明显回落,但仍较正常水平高。再灌注7、14、21 d,三七三醇皂苷组Brdu/GFAP阳性细胞比例高于模型组(P0.05)。三七三醇皂苷组Brdu/MPA2阳性细胞水平于整个实验过程中均较相同时间段对照组增多,但都无显著差异(P0.05)。结论脑缺血再灌注后神经干细胞增殖水平增高,而三七三醇皂苷治疗可能加速了神经干细胞的增殖,并可能使增殖的神经干细胞更多向胶质细胞分化。     

缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 观察脑缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响,探讨星形胶质细胞活化在脑缺血耐受中的意义.方法 36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为缺血预处理再缺血组、缺血组和对照组,每组12只,前2组分别在2 h大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)前3 d给予10 min的MCAO预处理或假手术,第2次MCAO后24 h处死,对照组仅给予2次间隔3 d的假手术.比较各组脑梗死体积、组织病理学变化和GFAP表达.结果 缺血预处理后再缺血组和缺血组梗死体积分别为(136.85±14.51)mm3和(281.37±29.93)mm3,前者较后者显著缩小53.15%(P=0.007);同时,缺血预处理再缺血组神经元变性坏死显著减轻,并伴有GFAP表达显著上调(2组免疫组化染色平均吸光度分别为102.66±8.39和86.28±6.19,P=0.009).结论 缺血预处理可诱导脑缺血耐受,促进GFAP表达,星形胶质细胞活化可能是脑缺血耐受产生的机制之一.     

缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

Objective To observe the effect of focal cerebral ischemic preconditioning on the expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP) and to investigate the significance of astrocyte activation in cerebral ischemic tolerance.Methods Thirty-six healthy male SpragueDawley rats were randomly divided into reischenmic,ischemic and control groups (n = 12 in each group) after ischemic preconditioning.The former two groups received 10 minutes middle cerebral artery occlusion (MCAO) preconditioning or sham operation 3 days before the 2-hour MCAO.The rats were killed 24 hours after the second MCAO.The control group only receivedthe two sham operations with an interval of three days.The infarct volume,histopathological changes,and GFAP expression in each group were compared.Results The infarct volume after ischemic preconditioning in the reischenmic and ischemic groups was 136.85 ± 14.51 mm3and 281.37 ± 29.93 mm3 respectively.The former was significantly reduced 53.15%compared to the latter (P =0.007).At the same time,neuronal degeneration and necrosis was reduced significantly,and GFAP expression was upregulated significantly (the mean absorbance for immunohistochemical staining in both groups was 102.66 ± 8.39 and 86.28 ± 6.19respectively,P = 0.009) after ischemic preconditioning in the reischemic group.Conclusions Focal ischemic preconditioning may induce brain ischemic tolerance and promote GFAP expression.The activation of astrocytes may be one of the mechanisms of cerebral ischemic tolerance.     

降纤酶对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的　探讨降纤酶对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响及其机制。方法　健康雄性Wistar大鼠 15 6只 ,随机分为降纤酶组和生理盐水组 ,采用大脑中动脉线栓模型 ,腹腔注射降纤酶 8U kg ,应用氯化三苯四氮唑染色、SP免疫组织化学检测胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) ,观察缺血不同时间大鼠脑梗死体积比、神经元改变和星形胶质细胞数量、周长和积分光度值改变。结果　降纤酶治疗组大鼠脑梗死体积明显小于生理盐水组 ;反应性星形胶质细胞数量、周长、染色强度均明显高于生理盐水组 ;出血梗死明显少于生理盐水组。结论　降纤酶对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用 ,反应性星形胶质细胞增生 ,血管内皮细胞损伤的减轻是其脑保护机制之一     

增龄对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的影响

目的 观察增龄对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤(CI/RI)的影响.方法 应用线栓的方法,对10、16周龄的雄性SD大鼠作局部脑缺血2 h、再灌24 h模型,观察增龄对大鼠神经症状缺失评分、脑损伤面积、病理形态、脑组织乳酸(LD)、乳酸脱氢酶(LDH)及血清中LDH和肌酸激酶(CK)的影响.结果 CI/RI 24 h, 两个年龄组神经症状缺失评分及脑损伤面积明显增大,病理形态改变严重、脑组织LD及LDH明显下降,血清中LDH和CK明显升高,以16周龄更为严重.结论 CI/RI随年龄增长损伤程度增加,可能与脑的老龄化相关.     

血管内皮细胞生长因子在糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注模型中的表达

糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后各时间点血管内皮细胞生长因子在缺血中心区、半暗带区神经元和微血管的表达均明显低于非糖尿病大鼠。     

大鼠局灶性脑缺血/再灌注后血管生成素-1和-2的动态表达变化

目的检测相关细胞因子血管生成素-1(Ang-1)、Ang-2在大鼠局灶性脑缺血／再灌注后表达的动态变化。方法采用免疫组化及原位杂交技术。结果在正常脑组织及缺血／再灌注后均发现Ang-1蛋白及Ang-1 mRNA的中等程度的广泛表达，在再灌注48h时达到高峰，此后虽有所下降，但仍为持续的阳性表达。Ang-2蛋白及Ang-2 mRNA在对照组及假手术组中均呈阴性表达，在MCAO后6h于梗死灶内的一些单个细胞中发现，在12～24h后达到高峰，这种表达一直持续到72h。结论Ang-1、Ang-2在脑损伤的过程中起着重要的作用。     

脑梗死患者急性期血清泛素羧基末端水解酶-1及神经胶质原纤维酸性蛋白水平的变化

目的探讨泛素羧基末端水解酶-1(UCH-L1)、神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)在脑梗死急性期水平的变化。方法回顾性纳入2011年3月至2012年6月于首都医科大学宣武医院神经内科门诊、急诊和卒中筛查工程基地及北京市仁和医院神经内科病房就诊的早期脑梗死患者95例作为脑梗死组,并选择同期在体检中心接受体检的61名非卒中对象作为对照组。测定脑梗死组及脑梗死发病不同时间组(发病12 h组和发病12~24 h组)及美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)不同评分组(NIHSS 0~4分组和NIHSS 5~19分组)和对照组人群的血清UCH-L1、GFAP水平并进行各组间比较。构建受试者工作特征(ROC)曲线,获取相关参数在脑梗死诊断中的阳性与阴性的临界值及诊断敏感度与特异度。结果脑梗死组血清UCH-L1、GFAP均高于对照组[0.13(0.09,0.21)μg/L比0.05(0.02,0.13)μg/L,0.030(0.008,0.130)μg/L比0.004(0.004,0.020)μg/L;Z值分别为3.62、4.95,均P0.01];NIHSS评分5~19分组血清UCH-L1、GFAP水平高于NIHSS评分0~4分组[0.12(0.08,0.21)比0.09(0.08,0.18),0.07(0.01,0.11)比0.04(0.01,0.10);均P0.05]。发病12~24 h组血清UCH-L1、GFAP水平与发病12 h组差异无统计学意义[0.12(0.08,0.21)μg/L比0.09(0.08,0.18)μg/L,0.030(0.010,0.110)μg/L比0.040(0.008,0.100)μg/L;均P0.05]。UCH-L1、GFAP诊断急性脑梗死的ROC曲线分析结果显示,当血清UCH-L1≥0.18μg/L时,UCH-L1的敏感度、特异度分别为68%、74%;当血清GFAP≥0.11μg/L时,GFAP的敏感度和特异度分别为70%、86%;UCH-L1、GFAP诊断脑梗死的ROC曲线下面积分别为0.64及0.71。结论血清UCH-L1、GFAP水平在脑梗死急性期时有明显变化。血清UCH-L1、GFAP水平与卒中的严重程度可能具有一定相关性。     

联合应用尼莫地平和胞磷胆碱对大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用

目的探讨联合应用尼莫地平、胞磷胆碱对局灶性脑缺血-再灌注大鼠的脑保护作用。方法Sprague-Dawley雄性大鼠48只,随机分为缺血对照组,尼莫地平组,胞磷胆碱组及联合用药组,每组12只。线栓法制作大脑中动脉栓塞90min,同侧颈总动脉结扎60min模型。尼莫地平经颈内动脉给药（40μg/kg）;胞磷胆碱经腹腔注射给药（250mg/kg,1次/d,连用3d）。再灌注后24h行神经功能缺损评分;再灌注后72h测量脑组织梗死体积,采用流式细胞仪检测大鼠前脑皮质细胞凋亡率。结果对照组、尼莫地平组、胞磷胆碱组及联合用药组神经功能缺损评分分别为2.6±0.8、1.5±1.2、1.2±0.8和0.7±0.6;脑梗死体积分别为（186±25）、（122±22）、（119±21）和（81±27）mm^3;细胞凋亡率分别为（30.6±1.9）、（8.8±2.0）、（4.6±2.4）、（2.2±1.7）%。所有观察指标,用药组与对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.05）;尼莫地平组与胞磷胆碱组相比,无统计学意义（P〉0.05）;联合用药组与尼莫地平组或胞磷胆碱组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。HE染色显示,所有用药组神经细胞缺血性损伤较对照组明显减轻。结论脑缺血-再灌注后,尼莫地平和胞磷胆碱早期使用均有效,两药联合使用疗效优于单独用药。     

罗格列酮对局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用

目的 研究不同剂量罗格列酮(rosiglitazone,RSG)对局灶性脑缺血再灌注大鼠的保护作用.方法 40只雄性Sprague-Dawley 大鼠随机分为假手术组、对照组、小剂量RSG组[1mg/(kg·d)]、中剂量RSG组[2 mg/(kg·d)]和大剂量RSG组[4 mg/(kg·d)],每组8只.线栓法制备...     

大鼠脑缺血再灌注后超早期-过性过度灌注现象的病理生理学机制研究

目的 探讨脑缺血再灌注后自发性一过性过度灌注现象的病理生理学机制.方法 52只SD大鼠随机分为假手术组(A组)、缺血2 h组(B组)和缺血6 h组(C组),B组按再灌注时间分为0 h、0.5 h、1 h、2 h、4 h、6 h、24 h组,C组按再灌注时间分为0 h、0.5 h、1 h、2 h、24 h组,每组4只.各组动物在缺血后再灌注不同时间点行多层螺旋CT灌注成像(CT perfusion imaging,CTPI),扫描完成后立即处死大鼠行光学和电子显微镜检查.结果 A组假手术区脑血流灌注参数相对值及光学和电子显微镜结果与对侧无显著差异.随着再灌注时间的延长,B组缺血核心区相对脑血流量(relativecerebral blood flow,rCBF)和相对脑血容量(relative cerebral blood volume,rCBV)逐渐上升,相对平均通过时间(relative mean transit time,rMTT)和相对达峰时间(relative time to peak,rTTP)逐渐下降,再灌注6 h后与A组相比无显著差异.光学和电子显微镜显示,B组缺血核心区神经元密度降低,部分细胞体积增大呈空泡变,部分神经元胞体和胞核浓缩.C组随着再灌注时间的延长,缺血核心区rCBF仍维持在较低水平.再灌注0.5 h,B组和C组在缺血核心区均出现一过性rCBF和rCBV增高现象,光学和电子显微镜显示此时缺血核心区出现大量凋亡和坏死细胞以及炎症细胞浸润.再灌注6 h,B组缺血核心区电镜下可见血管密度增高,微血管怒张.结论 CIPI在大鼠大脑中动脉闭塞和再灌注过程中的动态变化与病理学损伤机制具有一定相关性,大鼠脑缺血再灌注后超早期自发性一过性过度灌注现象与灌注损伤后的一过性炎性充血有关.     

3-硝基丙酸诱导沙土鼠脑缺血耐受时海马区胶质纤维酸性蛋白的表达

目的　观察 3 硝基丙酸 (3 nitropropionicacid ,3 NPA)预处理后缺血再灌注不同时间海马区胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)分布、表达的动态变化 ,探讨其与 3 NPA预处理诱导脑缺血耐受的关系。方法　阻断沙土鼠双侧颈总动脉造成前脑缺血模型 ,应用免疫组织化学方法观察星形胶质细胞的反应。结果　GFAP的分布随再灌注时间而变化 ,GFAP阳性星形胶质细胞在海马CA1区主要分布于多形细胞层、辐状层、腔隙层、分子层。 3 NPA预处理后脑缺血再灌注 3dGFAP表达增强 ,7、14d维持在较高水平 ,2 8d时有所下降 ,但与对照组比较仍保持在较高水平。结论　 3 NPA预处理诱导脑缺血耐受中 ,GFAP的表达增强保持在较高水平 ,表明星形胶质细胞增生、活化可能与 3 NPA预处理诱导脑缺血耐受有关。     

大鼠脑缺血-再灌注损伤期脑温度变化规律的研究

目的探讨大鼠局部脑缺血再灌注脑温度变化的规律。方法将30只SD大鼠随机分为缺血再灌注组和假手术对照组,每组各15只。对缺血再灌注组大鼠使用线栓法制作大脑中动脉闭塞模型(MCAO),缺血3h再灌注48h。持续监测缺血后1h和再灌注后1h大鼠纹状体和脑皮质的温度变化,同时监测肛温。保持室温在22～25℃,湿度在60%。结果脑缺血再灌注组在缺血早期,纹状体温度下降1.3℃,脑皮质温度下降1.5℃,肛温变化不明显;再灌注后,纹状体和脑皮质温度反跳性升高0.5～0.8℃,其中脑皮质温度快速升至(36.3±0.6)℃,纹状体温度升至(36.8±0.8)℃。肛温变化仍不明显。假手术组脑温度相对稳定。结论缺血期脑温度先下降后缓慢升高,再灌注时脑温度反跳式升高后稍有下降,随后缓慢升高。     

脂肪乳对大鼠局灶性脑缺血-再灌注所致脑损伤的保护作用

目的观察20％脂肪乳对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤后的脑保护作用。方法雄性Sprague-Dawley大鼠23只,随机分为假手术组6只、模型组6只、脂肪乳组11只。线栓法制备右侧大脑中动脉闭塞2h、再灌注24h模型。再灌注即刻,脂肪乳组经尾静脉注射20％脂肪乳0．2mg／kg,模型组注射等体积等渗盐水。再灌注后24h,观察各组神经功能缺失评分、脑梗死体积及腑水肿程度。结果神经功能缺损评分的中位数,模型组为2分,脂肪乳组为1分,两组比较差异有统计学意义（t=81,P〈0．05）。脂肪乳组脑梗死体积分数为（5．4±4．5）％,显著小于模型组的（20．1±2．4）％;脂肪乳组脑水肿程度为（8±5）％,明显低于模型组（28±9）％,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论脂肪乳对急性局灶性脑缺血-再灌注所致的脑损伤具有保护作用。