CD86协同刺激信号在孕早期母—胎界面Th1／Th2型细胞因子表达调控中的作用

目的探讨CD86协同刺激信号在孕早期母-胎界面Th1/Th2型细胞因子表达调控中的作用。方法建立正常妊 娠模型CBA×Balb/c和自然流产模型CBA× DBA/2。于孕第4、6、8、10天给CBA孕鼠腹腔注射大鼠IgG作为对照组;仅于孕第4 天或于孕第4、6、8、10天给CBA孕鼠腹腔注射大鼠抗小鼠CD86 mAb。孕第14天计算两种模型各实验组胚胎吸收率R。ELISA 法测定孕第9和第14天各实验组母-胎界面组织体外培养上清中Th1/Th2型及相关细胞因子(IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-4、IL-10、 TGF-β2)表达水平。结果孕早期干预CD86协同刺激信号,对正常妊娠模型母-胎界面孕第9和第14天IL-4、IL-10、TGF-β2以及 IFN-γ、TNF-α表达均无显著影响,其胚胎吸收率亦无显著变化。自然流产模型中,孕早期干预CD86协同刺激信号后,孕第9、 第14天母-胎界面IL-4、IL-10、TGF-β2表达均显著增加(P＜0.05);而IFN-γ、TNF-α表达显著下降(P＜0.05)。胚胎吸收率亦 显著下降(P＜0.05)。结论孕早期母-胎界面CD86协同刺激信号的调节紊乱可能是触发母体对胚胎产生免疫排斥的重要病 理因素,于孕早期干预CD86协同刺激信号能够恢复母-胎界面Th1型/Th2型免疫调节的生理平衡,从而诱导母-胎免疫耐受。     

复发性自然流产育龄期妇女母-胎界面中细胞因子表达分析

目的:分析复发性自然流产(RSA)育龄期妇女母-胎界面中相关细胞因子表达水平变化。方法:连续选择近期就诊的RSA育龄期妇女21例,收集流产蜕膜组织,采用酶联免疫吸附法进行蜕膜组织液中IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ浓度等指标检测,并与同期早孕并行人工流产终止妊娠妇女(对照组,20例)相同测试结果比较。结果:RSA组蜕膜组织液IL-2和IFN-γ浓度均明显高于对照组,而IL-4和IL-10浓度则显著低于后者(P均<0.01)。结论:RSA育龄期妇女母-胎界面上存在着明确的Th1优势状态表达。     

过继转输胚胎抗原耐受T细胞对宿主母-胎界面细胞因子表达的影响

目的探讨过继转输胚胎抗原耐受性T、B细胞对宿主孕鼠妊娠预后及母胎界面TH1TH2型细胞因子表达的影响。方法♀CBAJ×♂DBA2为自然流产模型,于孕4d(着床期)分别腹腔注射大鼠抗小鼠CD80和CD86McAb或大鼠同型IgG。于孕9d,分选脾脏T细胞和B细胞,并过继转输至孕4d的自然流产模型♀CBAJ×♂DBA2孕鼠,孕第14天测定宿主母胎界面组织体外培养上清液中TH1TH2型细胞因子(IL4、IL10、TNFα、IFNγ)水平,并比较各组宿主孕鼠胚胎吸收率。结果转输胚胎抗原耐受T细胞和转输正常妊娠模型孕鼠的T细胞均使宿主孕鼠母胎界面IL4和IL10表达显著增加,而IFNγ和TNFα表达则显著下降,且胚胎吸收率也显著下降(P<0.05)。结论于孕早期过继转输胚胎抗原耐受T细胞和正常妊娠模型孕鼠的T细胞可通过调节宿主孕鼠母胎界面TH1TH2型细胞因子的平衡,从而诱导母胎免疫耐受。     

干预CD86协同刺激信号诱导母-胎界面Th2型免疫偏离及其对妊娠预后的影响

目的探讨干预CD86协同刺激信号在母-胎界面Th1/Th2型细胞因子表达调控及诱导母-胎免疫耐受中的作用.方法将正常妊娠模型CBA×BALB/C和自然流产模型CBA×DBA/2的CBA孕鼠均分为3组对照组于孕第4、6、8、10天腹腔注射大鼠IgG;A组于孕第4、6、8、10天腹腔注射大鼠抗小鼠CD86mAb;B组仅于孕第4天(着床期)腹腔注射大鼠抗小鼠CD86mAb.孕第9天,竞争性半定量RT-PCR测定各组母-胎界面Th1/Th2型细胞因子转录水平;孕第9、14天ELISA测定母-胎界面组织培养上清IL-4/IFN-γ比值;孕第14天比较两种模型各组的胚胎吸收率R.结果正常妊娠模型中,干预CD86协同刺激信号对母胎界面原有Th2型免疫偏离及妊娠预后均无显著影响.自然流产模型中,干预CD86协同刺激信号能够诱导母胎界面局部形成Th2型免疫偏离并显著改善其妊娠预后.结论于孕早期干预CD86协同刺激信号能够恢复母-胎界面局部Th1型/Th2型细胞因子表达的生理平衡,形成维持正常妊娠所需的Th2型免疫偏离,诱导母-胎免疫耐受.     

脱氢表雄酮增强去势鼠Th1型偏移及成骨细胞增殖能力

目的：探讨脱氢表雄酮（DHEA）对去势鼠CD4＋T细胞Th1/Th2型细胞因子表达和成骨细胞（OB）增殖的影响。方法：建立小鼠绝经后骨质疏松（PMO）模型，分为OVX组、OVX＋DHEA组、OVX＋E2组。另设Sham组为假手术对照。取腰椎和股骨行骨组织形态计量分析；流式细胞术（FCM）检测各组鼠脾脏CD4＋T细胞内IL-2、IFN-γ（Th1型）和IL-4、IL-10（Th2型）的表达；并取椎骨植块法培养OB，FCM分析增殖细胞核抗原（PCNA）表达。结果：OVX组与Sham组相比，椎骨和股骨骨小梁面积显著下降（P〈0.01），说明PMO模型成功建立；与OVX组相比，OVX＋DHEA组腰椎、股骨及OVX＋E2组腰椎、股骨骨小梁面积都明显增加（P〈0.01）。OVX组IL-2及IFN-γ表达显著低于Sham组（P〈0.05）；而OVX＋DHEA组和OVX＋E2组显著高于OVX组（分别为P〈0.01和P〈0.05）。OVX＋DHEA组IL-4及IL-10表达显著低于OVX组（P〈0.01）。OVX组IFN-γ/IL-4比值明显低于Sham组（P〈0.05）；OVX＋DHEA组和OVX＋E2组IFN-γ/IL-4比值均显著高于OVX组（P〈0.01）。OVX组OB的PCNA表达与Sham组相比显著增高（P〈0.05）；与OVX组相比，OVX＋DHEA组OB核内PCNA的平均表达强度和阳性细胞百分率皆显著增高（分别为P〈0.05和P〈0.01）。OVX＋DHEA组OBPCNA表达与CD4＋T细胞IFN-γ水平呈明显正相关（r=0.931，P〈0.05）；与IL-4水平呈负相关（r=-0.815，P〈0.05）。结论：DHEA可通过细胞免疫调节作用形成Th1型免疫偏移，从而显著改善PMO的免疫状态；并有效促进OB增殖，显著改善骨形态。     

高迁移率族蛋白B1与原因不明复发性流产患者Th1/Th2平衡的相关性

目的 探讨HMGB1和Th1/Th2型细胞因子在原因不明复发性流产（URSA）患者外周血中的表达及相关性研究。方法 纳入2019年6月至2020年6月期间在深圳市妇幼保健院妇科就诊的100例URSA患者为URSA组,分别于免疫治疗前、后采集患者外周血。以同期100例体检健康妇女为对照组。比较两组外周血中Th1、Th2细胞比例、Th1/Th2比值、IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10和HMGB1的表达。比较治疗后不同妊娠结局URSA患者细胞因子和HMGB1表达水平。采用Pearson相关分析法分析细胞因子和HMGB1的相关性。结果 URSA治疗前与治疗后和对照组相比、妊娠成功组与失败组相比,IL-2、IFN-γ和HMGB1均升高,IL-4和IL-10均降低（P<0.05）;URSA治疗前与对照组比,Th1细胞比例、Th1/Th2值升高,Th2细胞比例降低（P<0.05）。HMGB1与IL-2和IFN-γ呈正相关,与IL-4和IL-10呈负相关（均P<0.01）。结论 URSA的发病与Th1/Th2细胞平衡向Th1方向偏移有关,HMGB1可能参与了Th1/Th2失衡...     

细胞因子Th1/Th2偏移与运动及衰老的关系

背景：很多研究都提示机体衰老和疾病过程中均伴有Thl和Th2细胞因子平衡发生偏离的现象。 目的：就运动、衰老和免疫领域的细胞因子与Thl/Th2分化、衰老与Th1/Th2型细胞因子、Th1/Th2型细胞因子平衡在运动延缓衰老中的可能作用方面的研究进行归纳分析。 方法：检索1990/2011PubMed数据及万方数据库有关运动、免疫和衰老等方面的文献,英文检索词为“exercise,immune senescence”,中文检索词为“运动,衰老,免疫”。排除与研究目的无关和内容重复者。保留42篇文献做进一步分析。 结果与结论：随着增龄,老年人易出现T淋巴细胞克隆向Th1亚群分化,进而出现Th1型细胞因子分泌增多,抑制Th2型细胞因子的分泌,破坏了Thl/Th2平衡在机体免疫防御反应的调节中所具有关键性作用,导致糖尿病、肿瘤和自身免疫性疾病等发病率增加。大量研究也证实,运动可以延缓衰老,减少老年性疾病的发生率。是否可以通过Thl/Th2偏移及其偏移的逆转来解释呢？还有待科学实验来予以验证。     

Th1、Th2型细胞因子与免疫排斥反应及免疫耐受

本文就Th1、Th2型细胞因子在排斥反应和免疫耐受中的表达、作用以及它们和排斥反应以及免疫耐受之间的关系加以综述。     

终末期肾病患者Th1/Th2型细胞因子的特征与外周血T细胞凋亡的关系

目的:研究终末期肾病(ESRD)患者Th1/Th2型细胞因子的特征及其与外周血T细胞凋亡的关系,并探讨不同透析膜对T细胞凋亡的影响。方法:应用流式细胞术检测10例ESRD未透析(ND)患者,维持性血液透析的患者45例,分别采用醋酸纤维素膜(CA)、低通聚砜膜(PS-LF)、高通聚砜膜(PS-HF)进行透析,以及8例健康对照组(HC)的外周血T细胞,经PHA刺激培养24h后锚定蛋白(AnnexinV)的表达。用ELISA法检测细胞培养上清IFN-γ及IL-4的水平。结果:ESRD患者未透析组及3种膜透析组T细胞AnnexinV的表达高于健康对照组(P<0.05)。各透析组患者T细胞AnnexinV的表达以CA组最高,PS-HF组最低,组间比较具有统计学意义(P<0.05);ESRD患者各组IFN-γ的水平均低于健康对照组(P<0.05),与AnnexinV的表达呈负相关;IL-4的水平高于健康对照组(P<0.05),与AnnexinV的表达呈正相关。结论:ESRD患者存在Th型细胞因子的失衡,呈Th2型细胞因子占优势,T细胞的凋亡增加。     

NKT细胞在母胎界面免疫调节中的作用

NKT细胞(natural killer T cell)是一类新型的免疫调节细胞,该类细胞同时表达T细胞表面受体(TCR)和NK细胞的抗原NK1.1。NKT细胞上的TCR通过限制性识别由CD1d分子提呈的脂类抗原,进一步被激活后可分泌多种细胞因子,从而调节机体的免疫反应。近年来逐渐认识到NKT细胞可能参与了母胎界面的免疫调节。     

Adoptive transfer of paternal antigen-hyporesponsive T cells facilitates a Th2 bias in peripheral lymphocytes and at materno-fetal interface in murine abortion-prone matings

PROBLEM: To investigate the Th1/Th2 cytokine changes in abortion-prone recipient mice adoptively transferred by the paternal antigen-hyporesponsive T cells. METHOD OF STUDY: The paternal antigen-hyporesponsive T cells were generated by the anti-B7 monoclonal antibody (mAb) treatment and adoptively transferred into pregnant CBA/J mice of abortion-prone matings on day 4 of gestation. The intracellular expressions of Th1 cell-derived cytokine, tumor necrosis factor-alpha, gamma-interferon and interleukin-2 (IL-2) and Th2 cell-derived cytokine, IL-4 and IL-10 in the maternal spleen were analyzed by flow cytometry, and secretions of the Th1 and Th2 cytokines in supernatant of the feto-placental unit culture were analyzed by an enzyme-linked immunosorbent assay. RESULTS: Our findings showed the increased secretion of Th1 cytokines and the decreased secretion of Th2 cytokines in abortion-prone matings. Treatment with anti-B7 mAbs on day 4 of gestation enhanced Th2 and reduced Th1 cytokine production in abortion-prone matings. Similarly, adoptive transfer of paternal antigen-hyporesponsive T cells induced maternal tolerance to the fetus and displayed a Th2 bias both in the peripheral lymphocytes and at the materno-fetal interface of the abortion-prone matings. CONCLUSIONS: These findings indicate that the Th2 cytokine bias and an increase in fetal viability induced by the anti-B7 mAb treatment can be transferred to other pregnant mice of the abortion-prone matings.     

不明原因习惯性流产患者Th1/Th2型细胞因子的检测

目的 :了解不明原因习惯性流产 (UHA)患者对滋养细胞抗原刺激产生Th1、Th2型细胞因子的水平 ,探讨其在UHA发病中的作用。方法 :选取 5 4例UHA患者 ,35例为未妊娠者 ,为UHA未孕组 ,19例为有UHA病史 ,现在确定妊娠并难免流产者 ,为UHA难免流产组。分别选取 15例正常未孕妇女及正常妊娠者作为对照组。应用酶联免疫吸附法检测未孕各组经滋养细胞抗原刺激的外周血单个核细胞 (PBMC)及妊娠各组PBMC与蜕膜单个核细胞 (DMC)培养上清液中IL 2、IFN γ、IL 4、IL 10的水平。结果 :①在最佳诱导时间下 ,UHA未孕组PBMC产生IL 2、IFN γ的水平明显高于正常未孕组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平明显低于正常未孕组 (P均 <0 0 5 )。②UHA难免流产组PBMC及DMC产生的IL 2、IFN γ水平均明显高于正常妊娠组 (P均 <0 0 5 ) ,而IL 4、IL 10水平则明显低于正常妊娠组 ,差异均有显著性 (P均 <0 0 5 )。两组PBMC产生的各细胞因子水平均低于同组DMC ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :UHA患者对滋养细胞抗原产生以Th1型反应为主的免疫应答 ,产生大量Th1型细胞因子 ,导致妊娠丢失。     

The costimulatory signal upregulation is associated with Th1 bias at the maternal-fetal interface in human miscarriage

PROBLEM To evaluate whether the association of the costimulatory signal regulation with T helper 1/T helper 2 (Th1/Th2) bias at maternal-fetal interface in human pregnancy loss. METHOD OF STUDY The expression of CD80 and CD86 in decidual tissues and CD28 and cytotoxic T-lymphocyte antigen-4 (CTLA-4) in the decidual T cells was compared between normal early pregnancy and miscarriage by qPCR and Western blot. The cytokine production in decidual T cells was performed by flow cytometry. The correlation of costimulatory molecule expression with Th1/Th2 cytokines was analyzed. RESULTS The CD80 mRNA and protein expression showed no significant difference between normal pregnancy and miscarriage. An increase in the expression of CD28 and CD86 was accompanied by a decrease in the expression of CTLA-4 in miscarriage in comparison with the early pregnancy. The higher expression of interleukin (IL)-2 and interferon-γ (IFN-γ), and lower expression of IL-4 and IL-10 in the decidual T cells were present in miscarriage. A correlation analysis showed a significant positive correlation of CD86 and CD28 expression with the Th1 cytokine production (IL-2 and IFN-γ), a significant negative correlation of CTLA-4 expression with the Th1 cytokine production. CONCLUSION The upregualtion of costimulatory signals on T cells might form an abnormal immune microenvironment, a shift to Th1 responses, at maternal-fetal interface, which leads to human miscarriage.     

The CXCL12/CXCR4 axis is involved in the maintenance of Th2 bias at the maternal/fetal interface in early human pregnancy

The regulatory mechanism of Th2 bias at the maternal/fetal interface remains unclear. In this study, we characterized cytokine production in decidual stromal cells (DSCs), decidual immune cells (DICs) and embryo-derived trophoblast cells, and investigated the regulation of CXCL12/CXCR4 interaction on Th2 bias at the maternal/fetal interface in early human pregnancy. We found differential production of Th1-type and Th2-type cytokines by trophoblasts, DSCs and DICs. The secretion of these cytokines varied in different cell cocultures, conduced to Th2 bias. Flow cytometry showed that coculture of trophoblasts with DSCs and DICs significantly increased IL-4 and IL-10 production in trophoblasts, and IL-10 production in DSCs. However, the coculture of trophoblasts with DSCs and DICs significantly increased interferon (IFN)-γ expression in DSCs, and tumor-necrosis factor (TNF)-α expression in DICs. No change was seen in Th1-type cytokine production in trophoblasts, and in Th2-type cytokine production in DICs in all cocultures. Furthermore, pre-treatment with anti-CXCR4 neutralizing antibody upregulated the production of the Th1-type cytokines IFN-γ and TNF-α, and downregulated the production of the Th2-type cytokines IL-4 and IL-10, in trophoblasts, DSCs, DICs or their cocultures. Interestingly, rhCXCL12 inhibited production of the Th1-type cytokine TNF-α and enhanced the expression of the Th2-type cytokines such as IL-4 and IL-10 in DICs; this effect was abrogated by anti-CXCR4 antibody. Our present study has elucidated the individual contributions of component cells to the shaping of Th2 bias, and uncovered a complicated cross-talk via the CXCL12/CXCR4 signal at the maternal/fetal interface in early human pregnancy.     

在单个细胞水平上分析抗原特异性Th1/Th2细胞因子产生的关联性

目的　在单个细胞水平上 ,观察抗原特异性Th1和Th2细胞因子产生的关联性 ,为进一步阐明CD4 T细胞的分化 ,细胞因子产生的相互关系及其特征提供理论依据。方法　从OVA TCR转基因小鼠的脾和淋巴结中分离CD4 T细胞 ,在体外在抗原提呈细胞存在下 ,用卵白蛋白 (OVA)抗原多肽刺激 3d后 ,再以同样的培养条件刺激 5～ 6h ,固定细胞 ,然后进行细胞表面和细胞内细胞因子染色 ,最后利用流式细胞仪在单个细胞水平上分析Th1和Th2细胞因子产生的关联性。结果　抗原特异性CD4 T细胞经抗原再一次刺激后 ,分泌Th1(IFN γ和IL 2 )和Th2 (IL 4、IL 5和IL 10 )细胞因子。IL 12促进IFN γ的表达 ,控制Th2细胞的分化。此外 ,大多数抗原特异性CD4 T细胞只产生 1种细胞因子 ,1个细胞同时产生 2种细胞因子极少见。结论　在单个细胞水平上的研究结果表明 ,经抗原短暂刺激后 (3d) ,不同的CD4 T细胞亚群只产生 1种Th1和 或Th2细胞因子 ,同时产生两种以上者占有很低的比率     

Th1／Th2类细胞因子在新型甲型H1N1流感重症患者不同预后转归中作用分析

目的 探讨细胞因子在新型甲型H1N1流感重症患者不同临床预后中作用。方法 2009年4月至2010年1月间北京佑安医院收治甲型H1N1流感重症患者28例（16例治疗痊愈,12例死亡）为研究对象,正常对照11例。Luminex技术检测血清中Th1/Th2细胞因子水平。结果 Th1类细胞因子中IL-2,IL-12 （P70）,IFN-γ水平在死亡组明显低于治愈组及正常组,差异有统计学意义,P值均＜ 0.05。Th2类细胞因子中IL-4水平在死亡组明显低于治愈组及正常组,P=0.0012,0.031。结论 新型H1N1感染重症治愈患者、死亡患者Th1类细胞因子水平均呈下降趋势,死亡组患者下降更为明显,Th1类细胞因子水平的严重减低可能与重症患者预后不良相关。     

Th1/Th2类细胞因子在新型甲型H1N1流感重症患者不同预后转归中作用分析

目的 探讨细胞因子在新型甲型H1N1流感重症患者不同临床预后中作用。方法 2009年4月至2010年1月间北京佑安医院收治甲型H1N1流感重症患者28例（16例治疗痊愈,12例死亡）为研究对象,正常对照11例。Luminex技术检测血清中Th1/Th2细胞因子水平。结果 Th1类细胞因子中IL-2,IL-12 (P70),IFN-γ水平在死亡组明显低于治愈组及正常组,差异有统计学意义,P值均＜ 0.05。Th2类细胞因子中IL-4水平在死亡组明显低于治愈组及正常组,P=0.0012,0.031。结论 新型H1N1感染重症治愈患者、死亡患者Th1类细胞因子水平均呈下降趋势,死亡组患者下降更为明显,Th1类细胞因子水平的严重减低可能与重症患者预后不良相关。