巨噬细胞增强兔晶体上皮细胞c—fos原癌基因的表达

目的验证关于人工晶体表面沉着的炎细胞可刺激残留的晶体上皮细胞增生的推测。方法将巨噬细胞及巨噬细胞调理液与培养的兔晶体上皮细胞共同孵育，用纯化的抗人Ｆｏｓ蛋白抗体做免疫细胞化学染色（ＡＢＣ法）。结果经巨噬细胞及其调理液作用的晶体上皮细胞较对照组生长迅速。在巨噬细胞后４小时，及巨噬细胞调理液作用后１小时，晶体上皮细胞核呈Ｆｏｓ蛋白染色阳性反应，而对照组为阴性。结论上述结果表明巨噬细胞能增强晶体上皮细胞     

巨噬细胞对培养兔晶体上皮细胞增殖率及DNA合成率的影响

采用细胞计数及Ｈ＾３ＴＤＲ液闪测定的方法，观察巨噬细胞对体外培养兔晶体上皮细胞增殖率的影响。结果表明，在巨噬细胞调理液作用２４小时后，晶体上皮细胞增殖率及ＤＮＡ合成率均较对照组明显增高（Ｐ〈０．０５），并保持至作用后第５天。由此证实，巨噬细胞及其活性因子可促进晶体上皮细胞增殖。该机制可能与白内障术后后囊混浊有关。     

碱性成纤维细胞生长因子在人晶体上皮细胞的蛋白检测研究

研究成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）对人晶体上皮细胞（ｈｕｍａｎｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓ,ＨＬＥＣｓ）的促增殖作用。方法：采用免疫组织化学检查（ＡＢＣ法）来检测人晶体上皮细胞上ｂＦＧＦ蛋白水平,并用图像分析进行相对定量。结果：定性及定量地证明了人晶体上皮细胞有ｂＦＧＦ蛋白存在。结论：阐明了人晶体上皮细胞本身存在的ｂＦＧＦ以蛋白的形式参与了术后后囊混浊的形成。     

碱性成纤维细胞生长因子对牛眼晶体上皮细胞的促增殖作用

目的观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对牛眼晶体上皮细胞的作用。方法首先进行牛眼晶体上皮细胞原代与传代培养；在第２代培养细胞中添加ｂＦＧＦ，浓度１０－２～１０２ｎｇ／ｍｌ，借助甲基噻唑基四唑（ｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＭＴＴ）测定方法观察ｂＦＧＦ对晶体上皮细胞增殖的影响。结果牛眼晶体上皮细胞体外具有易于贴附、细胞融合较快以及生长迅速等特点。添加ｂＦＧＦ后，可促进晶体上皮细胞的增殖，尤其是１０２ｎｇ／ｍｌ显示出明显的促增殖作用。结论ｂＦＧＦ在促进白内障术后晶体上皮细胞的增殖及后囊混浊上起了重要作用。     

中药复明眼液对过氧化氢诱导体外培养的兔晶状体上皮细胞凋亡的c-fos蛋白表达的影响

目的：观察中药复明眼液对H2O2诱导体外培养的兔晶体上皮细胞凋亡的 c-fos蛋白表达的影响，进一步探讨中药抗氧化作用的机制。方法：采用终浓度250μmol/LH2O2诱导体外培养的兔晶体上皮细胞凋亡，免疫组化方法检测凋亡的兔晶体上皮细胞的c-fos蛋白的表达。结果：正常对照组兔晶体上皮细胞未见胞核阳性染色；模型对照组在H2O2处理后2h胞核阴性染色，处理后4h和8h均见部分细胞胞核呈棕褐色阳性染色。处理后12h和24h可见大量细胞胞核呈棕褐色阳性染色；中药治疗组在H2O2处理后2h，4，h8h胞均呈性染色，处理后12h和24h仅见少量细胞胞核呈棕褐色阳性染色；阴性对照组兔晶体上皮细胞胞未见阳性染色。结论：终浓度250μmol/LH2O2可以诱导体外培养的兔晶体上皮细胞凋亡的c-fos蛋白表达，中药复明眼液可能是通过保护兔晶体上皮细胞的抗氧化作用而减少或延缓凋亡的兔晶体上皮细胞的c-fos蛋白表达。     

碱性成纤维细胞生长因子受体基因在牛眼晶体上皮细胞内的表达

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对晶体上皮细胞促增殖作用的机理。方法从培养的第二代牛眼晶体上皮细胞提取ＲＮＡ，经逆转录反应合成ｃＤＮＡ。借助从人体胎盘纤维细胞ｂＦＧＦ受体序列合成的寡核苷酸引物，聚合酶链反应体外扩增ｃＤＮＡ。扩增的ｃＤＮＡ片段克隆后，Ｓａｎｇｅｒ双脱氧链终止法测定其序列。结果探测出牛眼晶体上皮细胞ｂＦＧＦ受体的ｍＲＮＡ，测序后发现其氨基酸序列片段中仅３个氨基酸与人体不同。结论晶体上皮细胞存在ｂＦＧＦ受体，当ｂＦＧＦ与其受体结合后，对促进晶体上皮细胞的增殖以及白内障术后后囊混浊具有重要作用。     

碱性成纤维细胞生长因子受体mRNA基因在人晶体上皮细胞内的检测研究

为研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）对晶体上皮细胞促增殖作用的机理,采用原位杂交,用合成的寡核苷酸探针来检测人晶体上皮细胞内的ｂＦＧＦ高亲和力受体—成纤维细胞生长因子受体１（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅ－ｃｅｐｔｏｒ１,ＦＧＦＲ１）的ｍＲＮＡ基因,并用图像分析进行相对定量。结果：表明了人晶体上皮细胞表达ＦＧＦＲ１的ｍＲＮＡ基因。结论：人晶体上皮细胞存在ＦＧＦＲ１,当ｂＦＧＦ与其高亲和力受体结合后,对促进晶体上皮细胞的增殖以及白内障术后后囊混浊的形成具有重要作用。     

巨噬细胞对体外培养兔晶状体上皮细胞增殖的影响

目的探讨白内障术后后囊混浊的发病机制。方法观察巨噬细胞对兔晶状体上皮细胞（rabbitlensepithelialcells，RLEC）增生的影响。结果实验组加有巨噬细胞，BLEC增殖活跃。巨噬细胞上清液48及72小时能明显促进BLEC的生长。结论巨噬细胞促进晶体上皮细胞的增生，可能是引起白内障术后后囊混浊的原因之一。     

肝素影响人工晶体表面细胞反应的实验研究

应用倒置显微镜及扫描电镜，对植入大鼠腹腔的经过肝素预处理２４小时及对照组的各１２枚后房型聚甲基丙烯酸甲酯（ＰＭＭＡ）人工晶体光学部的表面细胞反应进行了观察。结果发现有巨噬细胞、类上皮细胞、成纤维细胞样细胞、异物巨细胞及淋巴细胞粘附在人工晶体表面。经肝素预处理组细胞多呈单个、分散存在，细胞形态活化弱于对照组。提示吸附在人工晶体表面的肝素分子有稳定巨噬细胞的功能，降低其活化水平，从而减弱人工晶体表面细胞反应。     

碱性成纤维细胞生长因子受体mRNA基因在人晶体上皮细胞内 …

为研究碱性成纤维细胞生长因子对晶体上皮细胞促增殖作用的机理。采用原位杂交，用合成的寡核苷酸拆穿为检测人晶体上皮细胞内的ｂＦＧＦ高亲和力受体－成纤维细胞生长因子受体１的ｍＲＮＡ基因，并用图像分析进行相对定量。结果表明了人晶体上皮细胞表达ＦＧＦＲ１的ｍＲＮＡ基因。结果：人体晶上皮细胞存在ＦＧＦＲ１，当ｂＦＧＦ与其高亲和力受体结合后，对促进晶体上皮细胞的增殖以及白内障术后后囊混浊的形成具有重要作用     

碱性成纤维细胞生长因子对牛晶状体上皮细胞增殖的影响及其在牛晶状体上皮细胞中的蛋白表达

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ） 在体外对牛晶状体上皮细胞（ＢＬＥＣ） 增殖的影响及确定ＢＬＥＣ 是否表达ｂＦＧＦ 蛋白。 方法　ＢＬＥＣ 原代培养。用不同浓度的ｂＦＧＦ 及３Ｈ胸腺嘧啶（３ＨＴＤＲ） 处理ＢＬＥＣ３６ ｈ 后，液闪测定ｂＦＧＦ 对ＢＬＥＣ３ＨＴＤＲ 掺入率的影响。Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹（ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ） 法确定ＢＬＥＣ 是否表达ｂＦＧＦ 蛋白。 结果　ｂＦＧＦ 在体外有促进ＢＬＥＣ 增殖作用，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ 法表明ＢＬＥＣ 可表达低分子量（１８ ０００）ｂＦＧＦ 蛋白。 结论　ｂＦＧＦ 可能通过晶状体上皮细胞的自分泌，促进白内障术后残留晶状体上皮细胞的增殖，导致后发性白内障     

成纤维细胞生长因子受体与晶体后囊混浊

本文介绍了成纤维细胞生长因子受体（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｐｔｅｒ，ＦＧＦＲ）的分布和来源，阐述其基本特性及主要的生物学功能，并探讨了它对晶体上皮细胞的作用及其对后囊混浊的发病机制的影响。     

碱性成纤维细胞生长因子和胰岛素样生长因子-I及其协同作用对牛晶体上皮细胞增殖的影响

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）、胰岛素样生长因子Ｉ（ｉｎｓｕｌｉｎｌｉｋｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒＩ，ＩＧＦⅠ） 及二者的共同作用对体外牛晶体上皮细胞（ｂｏｖｉｎｅ ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌ，ＢＬＥＣ）增殖的影响。方法　ＢＬＥＣ原代培养，取第４ 代细胞种入２４ 孔板，加入不同浓度的ｂＦＧＦ、ＩＧＦⅠ、ｂＦＧＦ＋ ２０ μｇ／ＬＩＧＦⅠ，２０ ｈ 后加入３ＨＴＤＲ，１６ ｈ 后作液闪计数。结果　一定浓度的ｂＦＧＦ（１～１００ μｇ／Ｌ） 、ＩＧＦⅠ（２０～１００ μｇ／Ｌ） 在体外有促进ＢＬＥＣ 增殖的作用（ Ｐ＜ ０－０１ ） ，２０ μｇ／Ｌ的ＩＧＦⅠ可增加ｂＦＧＦ的促ＢＬＥＣ增殖作用。结论　生长因子及它们之间的协同作用在促进晶体上皮细胞异常增殖的过程中起重要作用。     

bFGF诱导的兔晶体上皮细胞TPK及PKC磷酸化的研究

目的 :探讨bFGF对培养的兔晶体上皮细胞酪氨酸蛋白激酶 (TPK )活性的影响 ,及对兔晶体上皮细胞蛋白激酶C (PKC)活性的影响。研究TPK及PKC信号系统在LEC增殖调控中的作用。方法 :家兔晶体上皮细胞原代及传代培养 ,应用同位素掺入法检测不同浓度 (0 1、 1、 10ng/ml)bFGF作用 2 4小时后 ,1 兔晶体上皮细胞膜TPK活性的变化。 2 细胞膜PKC及细胞质PKC活性的变化。结果 :bFGF作用 2 4小时后 ,晶体上皮细胞膜TPK、PKC及胞质PKC活性均较对照组明显升高 (P <0 0 5 )。结论 :bFGF可促进兔晶体上皮细胞膜TPK活性及胞膜、胞质PKC活性升高 ,该机制可能与促进晶体上皮细胞增殖有关。     

晶体上皮细胞在体外的分化规律及血清和眼组织对其增殖的影响

目的从细胞培养水平探讨后囊混浊形成机理和术后血－房水屏障破坏、晶体皮质残留等对其的影响。方法用考马斯亮蓝（ＣｏｏｍａｓｓｉｅＢＢ）染色、倒置显微镜和电镜观察培养的牛晶体上皮细胞（ｂｏｖｉｎｅｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｓ，ＢＬＥＣ）的增殖和分化规律，用Ｇｉｅｍｓａ染色比色法观察胎牛血清、房水、晶体皮质等对ＢＬＥＣ增殖的影响。结果在体外培养条件下ＢＬＥＣ可在第１～７代内分化为晶体纤维细胞，表现为细胞体积增大，形状渐趋长条形和梭形，细胞骨架逐渐增多；胎牛血清呈浓度依赖性促进ＢＬＥＣ增殖（Ｐ＜０．０５）；高浓度房水（占培养液１／３）抑制ＢＬＥＣ增殖（Ｐ＜０．０１），晶体皮质、晶体核、玻璃体均促进ＢＬＥＣ增殖（Ｐ＜０．０１）。结论晶体上皮细胞的分化在后囊混浊形成中起重要作用；术后血－房水屏障破坏、晶体皮质残留和玻璃体脱出可通过刺激晶体上皮细胞增殖促进后囊混浊形成。     

转化生长因子β诱导晶状体上皮细胞凋亡

目的 探讨转化生长因子β（ＰＧＦ－β）对体外培养的牛眼晶状体上皮细胞凋亡的作用。方法 ＭＴＴ法测定细胞经不同浓度ＴＧＦ－β作用后的增殖情况；以ＴＵＮＥＬ技术研究ＴＧＦ－β作用不同时间后细胞凋亡的变化。结果 ＴＧＦ－β可显著抑制晶状体上皮细胞的增殖，抑制率高达３５％。原位凋亡测定显示ＴＧＦ－β作用３０ｍｉｎ至８小时可明显诱导晶体上皮细胞凋亡，阳性细胞核由边缘着色逐渐变为整个核均匀 以。结论 转化生长     

肿瘤坏死因子对晶状体上皮细胞原癌基因表达的作用

目的研究肿瘤坏死因子α （ＴＮ－α）对体外培养的牛眼晶状体上皮细胞中原癌基因 ｆｏｓ，ｊｕｎ， ｍｙｂ， ｍｙｃ， ｒａｓ等蛋白产物表达的作用。方法细胞经 １０ Ｕ／ｍｌ ＴＮＦ－α作用不同时间后，采用卵白素－生物素－过氧化物酶复合物（ＡＢＣ）免疫酶标技术测定蛋白表达。结果经ＴＮＦ－α作用后，几种原癌基因表达的阳性细胞百分率均明显增高（Ｐ＜０．０１）。 ｆｏｓ，ｊｕｎ，ｍｙｂ，ｒａｓ在刺激１ｈ后即达到顶峰，ｍｙｃ在刺激２ｈ后达到顶峰，随后很快下降，恢复至正常水平。同时，细胞的阳性反应强度增加，细胞核内变化更为明显。结论ＴＮＦ－α通过激活细胞内原癌基因的表达而促进晶状体上皮细胞的增殖。     

人原代晶体上皮细胞bFGF多肽和mRNA的表达

目的 为研究后发性白内障的发生机理,检测生长中人晶体上皮细胞（ＨＬＥＣｓ）自身是否表达碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）。方法 体外培养人晶体上皮细胞,用免疫细胞化学和原位核酸分子杂交的方法,检测ＨＬＥＣｓ中ｂＦＧＦ多肽和其ｍＲＮＡ的表达。结果 用免疫细胞化学和原位核酸分子杂交方法,可检测到生长中的人晶体上皮细胞自身表达碱性成纤维细胞生长因子。结论 结合碱性成纤维细胞生长因子促进人晶体上皮细胞生长     

柔红霉素预防后囊膜混浊的研究

目的研究体外细胞培养中柔红霉素对各类晶体上皮细胞增殖的抑制作用及有效浓度,为后囊膜混浊的药物预防提供新线索。方法传代培养的牛、兔、人晶体上皮细胞经０．５、２．５、５．０、７．５、１０．０μｇ／ｍｌ柔红霉素３７℃孵育１０分钟后,观察细胞生长情况;用药后４８小时,采用Ｇｉｅｍｓａ染色－比色法检测细胞吸光值,并分别求得柔红霉素对三种晶体上皮细胞的半数抑制浓度（ＬＤ５０）。结果柔红霉素对体外培养牛、兔、人晶体上皮细胞的增殖均有显著抑制作用,呈浓度依赖性改变。对于人晶体上皮细胞,０．５μｇ／ｍｌ柔红霉素已有显著抑制效应,７．５μｇ／ｍｌ基本发挥最大作用。牛、兔、人晶体上皮细胞的ＬＤ５０值分别为０．４９、４．３０和４．０６μｇ／ｍｌ。结论柔红霉素低浓度短时间作用能有效抑制体外培养晶体上皮细胞的增殖,通过进一步在体研究,可能成为预防后囊膜混浊的理想药物。     

人工晶体植入术后房水肿瘤坏死因子和白细胞介素1含量的研究

目的从兔眼人工晶体植入术后房水肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）和白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ１，ＩＬ－１）的活性及动态变化，探讨它们对术后眼内炎症反应的影响。方法青紫蓝兔２７只，分为晶体囊外摘除及后房型人工晶体囊袋内植入术组；晶体囊外摘除术组；正常对照组。于术后１、３、７和１４天抽取房水，采用ＥＬＩＳＡ双层夹心法检测ＴＮＦ，采用ＭＴＴ比色法检测ＩＬ－１。结果房水ＴＮＦ含量和ＩＬ－１活性在人工晶体植入术组术后第１、３、７及１４天高于正常对照组，ＴＮＦ含量在术后３、７、１４天，ＩＬ－１活性在术后１、３天高于晶体囊外摘除术组（Ｐ＜０．０５）。人工晶体植入术后第７～１４天房水ＴＮＦ含量最高，术后第３～１４天ＩＬ－１活性最高。结论人工晶体植入术后房水ＴＮＦ和ＩＬ－１在术后早期眼内炎症反应中作为炎症介质，起着重要作用。