产前应激对抑郁症子代大鼠前额叶皮质蛋白质组学的影响

目的:应用整合组学分析子代大鼠前额叶皮质(PFC)代谢组及磷酸蛋白质组的变化,研究产前应激(PS)导致子代大鼠抑郁样行为的分子机制。方法:SD雌性妊娠大鼠在孕期第14～20 d接受慢性束缚应激。采用糖水偏好实验(SPT)检测出生后30 d(P30)子代大鼠抑郁样行为。分别采用串联质谱标签(TMT)定量蛋白质组学结合磷酸肽富集法和UHPLC-Q-TOFMS非靶向代谢组学对子代大鼠PFC的磷酸化蛋白质组及代谢组进行检测。结果:与对照组相比,抑郁样子代大鼠前额叶皮质有8404个差异修饰肽段和34个差异代谢物的丰度发生显著变化。经KEGG通路注释及富集比较发现,差异修饰肽段和差异代谢物主要参与胰岛素分泌、糖酵解/糖异生、磷酸戊糖代谢、醛固酮合成与分泌、c GMP-PKG信号途径、甲状腺激素合成等生物过程。结论:PS可能主要通过调节子代大鼠PFC中多种生物过程中的相关蛋白磷酸化及代谢物,从而诱导产生抑郁样行为。     

大鼠脑干到前额叶皮质的传入投射——WGA-HRP法研究

用WGA-HRP法研究了25只大鼠前额叶皮质的脑干传入投射。在前扣带回背部、前边缘区及岛叶无颗粒皮质背部注射WGA-HRP后,脑干中的逆行标记细胞大致可分为三类。第一类为单胺类神经元集中的核团,其中蓝斑、腹侧被盖区、黑质致密部、中缝背核、中央上核及尾侧线形核等广泛投射到前额叶皮质各部,而外侧网状核、连合核、中缝大核、A_4、A_5、臂旁核、黑质网状部及颅侧线形核投射到前额叶皮质各部的数量不同。外侧网状核、连合核、中缝大核、A_4、A_5到前额叶皮质的投射文献上尚未见报道。第二类为与眼肌运动有关的核团,如E-W核、导水管周灰质、中脑网状结构及脑桥吻侧网状核。第三类为与感觉有关的核团,如臂旁核、三叉神经感觉主核及连合核。     

人胎儿前额叶皮质生长抑素免疫反应阳性神经元的发育

本文用免疫细胞化学方法研究了人胎儿前额叶皮质生长抑素免疫反应阳性神经元的分布和发展。结果表明，生长抑素阳性神经元于１６周开始出现于皮质下板；１６－３０周，皮质下板生长抑素阳性神经元的密度逐渐增高，但到３０－３８周其密度无明显差异。１８周之前，皮质下板生长抑素神经元以双极细胞为主，染色谈，突起短；以后其形态逐渐转为以多极细胞为主，染２色加深，突起突长。     

Gas7在大鼠前额叶皮质发育过程中的表达

目的探讨生长休止特定蛋白7(Gas7)在大鼠大脑前额叶皮质发育过程中的表达及机制。方法采用免疫组织化学方法和免疫印迹(Western blot)方法检测Gas7在SD大鼠胚胎第18天(E18)、出生后P1(第1)、P7、P14、P21和P60各时期大脑前额叶皮质中的表达。同胞鼠1/2用于免疫组化实验,1/2用于Western blot检测。结果免疫组织化学方法显示,前额叶皮质在E18时即出现Gas7免疫阳性产物,Gas7免疫阳性神经元出现于P1-P60,P7时Gas7免疫阳性神经元轮廓已比较清晰,至P14时Gas7阳性反应最强,细胞突起也较长;之后,P21至P60时Gas7阳性反应逐渐减弱,均弱于P14(P0.05)。Western blot检测显示,在E18时Gas7表达较弱,P1至P14Gas7表达逐渐增强,至P14时达到高峰,之后又逐渐减弱,差异有统计学意义(P0.05)。结论 Gas7在大脑前额叶皮质的表达具有时间和空间上的差异性,提示Gas7可能在前额叶皮质结构形成和功能成熟方面起着重要的调控作用。     

脑震荡对大鼠认知行为及前额叶皮质多巴胺能神经纤维的影响

目的:探讨脑震荡(BC)大鼠认知障碍的特征及其与前额叶皮质(PFC)多巴胺能神经纤维变化的关系。方法:用金属单摆打击装置复制大鼠单纯性BC模型,伤后分1~24 d多个损伤组;用Morris水迷宫评价大鼠的学习记忆功能;用免疫组织化学技术研究BC后PFC多巴胺能神经纤维的变化。结果:BC伤后1~3 d大鼠隐匿平台逃避潜伏期显著延长,BC后除1 d外,其余各组PFC多巴胺能神经纤维的密度和免疫反应显著高于对照组。结论:BC后大鼠出现近期空间学习记忆功能障碍,多巴胺能神经纤维TH表达增高并持续一段时间。TH早期增高可能是神经递质紊乱,随后持续增高可能是一种代偿反应。     

前庭刺激激活大鼠内侧前额叶皮质神经元Fos表达

目的:分析对比加伐尼刺激(Galvanic stimulation)与双轴旋转运动分别作用于大鼠前庭器官对内侧前额叶皮质(mPFC)神经元活动的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为4组：电刺激组、对照组、双轴旋转运动组和对照组。电刺激组动物以100～200μA电流强度刺激前庭感受器1 h后休养1 h;双轴旋转组动物以双轴旋转运动刺激2 h。应用包含mPFC的25μm脑冠状切片,以免疫组织化学抗生物素蛋白-生物素复合物(ABC)技术进行Fos蛋白免疫反应并以3,3′-二氨基联苯胺(DAB)显色。最后,对mPFC内标记神经元进行计数和统计分析。结果:动物经两种类型分别刺激后,mPFC均见到大量Fos样免疫阳性反应神经元细胞核;曼-惠特尼U检验统计表明每种刺激条件下,刺激组较对照组动物mPFC内Fos阳性神经元数目都有显著增加(P<0.05)。半定量统计显示两种类型刺激后,接受刺激组和对照组动物mPFC内Fos阳性神经元数目激活的神经元数目分别是1053±240.50 vs 44.25±3.64和509.80±54.40 vs 128.30±7.66。结论:诱发晕动病的双轴旋转刺激和伽伐...     

大鼠大脑皮质到前额叶皮质的传入联系——WGA-HRP法研究

本实验用WGA-HRP法研究了25只大鼠大脑皮质到前额叶皮质的传入投射。观察到大鼠前额叶皮质广泛接受额叶、顶叶、颞叶、枕叶、岛区、梨状区、扣带区及海马后区皮质的传入,而且前额叶度质不同部位的皮质传入部位有区别。并观察到大鼠前额叶皮质除接受躯体感觉及内脏感觉传入外,还接受视觉、听觉皮质区的传入,是多种感觉的会聚部位。     

不同时段睡眠剥夺对大鼠脑内c-fos表达的影响

目的 :探索睡眠剥夺的脑机制。方法 :该研究采用小平台水环境法建立大鼠睡眠剥夺模型 ,用fos蛋白免疫组化的方法测量脑中fos蛋白的表达 ,分组为白天睡眠剥夺 12h组、夜晚睡眠剥夺 12小时组、大平台对照组和正常单独饲养组 ,每组 4只。结果 :睡眠剥夺使fos蛋白在皮层的广泛区域表达 ,脑干中同异相睡眠有关的区域有较高表达 ,同夜晚睡眠剥夺 12小时相比 ,白天睡眠剥夺 12小时在视交叉上核同生物节律有关的区域表达。结论 :睡眠节律改变可影响脑内fos蛋白表达     

创伤后应激障碍大鼠前额叶皮质PKMζ表达的变化

目的探讨创伤后应激障碍(PTSD)大鼠前额叶皮质PKMζ的表达变化情况。方法采用单程长时应激(SPS)制备PTSD大鼠模型,旷场试验、高架十字迷宫试验检测造模效果。将大鼠分为:SPS1d、SPS3d、SPS7d和SPS14d组,正常饲养大鼠作为对照组。利用Western blot和real-time RT-PCR检测PKMζ蛋白及m RNA在大鼠前额叶皮质表达。结果 SPS模型大鼠表现出明显的焦虑症状,SPS7d、SPS14d组大鼠前额叶皮质PKMζ蛋白和m RNA表达水平显著高于对照组。结论在应激后7d和第14d,PTSD大鼠前额叶皮质PKMζ表达显著增高。     

人胎儿前额叶皮质生长抑素免疫反应限性神经元的发育

本文用免疫细胞化学方法研究了人胎儿前额叶皮质生长抑素免疫反应阳性神经元的分布和发育。结果表明，生长抑素阳性神经元于16周开始出现于皮质下板；16～30周，皮质下板生长抑素阳性神经元的密度逐渐增高，但到30～38周其密度无明显差异。18周之前，皮质下板生长抑素神经元以双极细胞为主，染色淡，突起短；以后其形态逐渐转为以多极细胞为主，染色加深，突起变长。随着胳龄增大，生长抑素阳性神经元由深至浅依次出现于皮质各层内。本实验结果证实，人类前额叶皮质生长抑素阳性神经元的出现较以往的报道早6周。     

应激对NOD小鼠脑c-fos表达和胰岛细胞凋亡的影响

目的探讨情绪应激对NOD小鼠脑内c-fos表达和对胰岛内细胞凋亡的影响,了解应激影响糖尿病发生的中枢神经机制。方法自发糖尿病模型NOD小鼠在接受饮水冲突应激加限制应激后,分别于接受应激1天、2天、3天时,原位杂交测定脑区c-fos表达水平,TUNEL法测定胰岛细胞凋亡水平。结果1天(3.93±1.05)、2天(5.73±2.60)、3天(5.77±2.75)时段应激组小鼠胰岛细胞凋亡发生率显著高于对照组(0.82±0.93,t=4.46、3.58、3.41,P<0.05)。应激引起c-fos mRNA在脑内的广泛区域表达,其中海马三区、杏仁中央核、下丘脑室旁核的c-fos mRNA表达增高与胰岛细胞凋亡增高间存在正相关(0.79、0.69、0.64,P<0.01或P<0.05)。结论情绪应激时c-fos在海马三区、杏仁中央核、下丘脑室旁核中表达的提高与胰岛细胞凋亡升高相关,提示它们可能参与了应激影响1型糖尿病发生的过程。     

高粘血症大鼠心肌缺血缺氧时热休克蛋白,原癌基因表达的变化及意义

目的：研究高粘血症大鼠心肌发生缺血缺氧性损伤时原癌基因c－fos热休克蛋白（Hsp70）表达的变化及意义。方法：用免疫组化法（ABC法）检测高粘血症大鼠心肌组织和体外培养的心肌细胞缺氧后Hsp70和c－fos蛋白变化；用原位杂交法检测c－fosmRNA变化。用光镜、电镜观察心肌组织和心肌细胞的损伤。结果：发现c－fos蛋白在高粘血症大鼠心肌中明显增强，在体外培养的大鼠心肌细胞缺氧1h和4h后较对照组明显增强。c－fosmRNA表达也明显增强。上述变化与细胞损伤间呈正相关。结论：高粘血症引起的缺血缺氧可诱导c－fos表达增强和Hsp70增加，后者可能是心肌对缺血缺氧产生的应激反应产物。它们是一种早期防御代偿反应，并参与调节其他基因的变化。     

C-fos在多发性梗死性痴呆大鼠大脑皮层和海马的表达

目的研究即早基因c-fos与多发性梗死性痴呆(MID)的关系。方法采用微栓子注入颈内动脉的方法制备大鼠大脑多发性梗死性痴呆模型,通过免疫组织化学方法检测不同时间段大鼠脑内c-fos基因的表达。结果正常大鼠大脑皮层和海马内即有c-fos基因的表达,假手术组的表达略高于正常组(P>0.05);大鼠多发性梗死性痴呆后大脑c-fos基因过表达,在皮层和海马的表达明显高于正常对照组及假手术组(P<0.05)。随着缺血时间延长,缺血24h达高峰,持续至1个月。结论多发性梗塞性痴呆后c-fos基因呈现规律性的过表达。     

过氧化物酶体增生物激活受体激活物对ox-LDL诱导内皮细胞c-fos表达的影响

目的 观察过氧化物酶体增生物激活受体α激活物K877对氧化型低密度脂蛋白所诱导的人脐静脉内皮细胞c-fos基因表达的影响及机制。方法 体外培养人脐静脉内皮细胞,采取氧化型低密度脂蛋白刺激,应用K877干预,逆转录聚合酶链反应检测c-fos基因的表达。结果 与对照组比较,氧化型低密度脂蛋白组c-fos基因表达增加（P＜0.05）;与氧化型低密度脂蛋白组比较,K877组c-fos基因表达减少（P＜0.05）;与K877组比较,K877联合多聚肌甘酸c-fos基因表达进一步下降（P＜0.05）。结论 氧化低密度脂蛋白促进了人脐静脉内皮细胞c-fos基因的表达,过氧化物酶体增生物激活受体α激活物K877可抑制c-fos基因的表达,血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1参与了该过程。     

流动力对细胞原癌基因c-fos和c-myc表达的影响

目的研究流体力对脑微血管内皮细胞原癌基因c-fos和c-nyc表达的影响,为探索微血管疾病机理提供一定实验依据.方法获取Wistar大鼠脑微血管进行细胞培养,在平行板流动小室中对所培养的细胞施加力学作用,并应用免役组织化学技术观察微血管内皮细胞原癌基因c-fos和c-myc的表达.结果不同的流动力对体外培养的大鼠脑微血管内皮细胞c-fos和c-myc蛋白表达产生了不同的影响.c-fos蛋白表达在静态时非常低,但在4dynes/cm2和10dynes/cm2的流体力的作用下可诱导c-fos蛋白水平迅速增加,尤其是10dynes/cm2的流体力,并随着时间的延长而增加,到1h时达到高峰,随后c-fos蛋白表达量出现下降,2.5h时接近基础水平.c-myc蛋白在静态时表达也非常低,经流体力作用后缓慢增多.结论流体力的大小会影响c-fos和c-myc的表达,血液的力学信号传入细胞内并引起细胞的一些应答,也印证了c-fos和c-myc是被血液流体力作用短暂上调的基因,流体力与内皮细胞生长、增殖、损伤也有直接关系.     

Dizocilpine Blocks the Effects of Delta Sleep-Inducing Peptide-Induced Suppression of c-fos Gene Expression in the Paraventricular Nucleus of the Hypothalamus in Rats

The characteristics of the actions of the non-competitive blocker of NMDA receptors dizocilpine on the expression of the early c-fos gene in the paraventricular nuclei of the hypothalamus were studied in rats with different predicted susceptibilities to emotional stress in conditions of treatment with delta sleep-inducing peptide. The results showed that prior treatment with dizocilpine blocked reductions in c-fos expression induced by delta sleep peptide.     

Long-Term Sequelae of Prefrontal Cortex Damage Acquired in Early Childhood

Frontal lobe dysfunction is often invoked as a contributing factor in developmental disorders characterized by chronic maladaptive behavior, but interpretation of relevant neuropsychological findings has been hampered by the limited information available regarding the consequences of focal prefrontal damage early in life. We describe here the long-term behavioral and cognitive sequelae of damage to prefrontal cortex in two young adult patients who had sustained their brain damage prior to 16 months of age. In the context of normal neurological examinations, both cases had remarkable histories of impaired decision making, behavioral dyscontrol, social defects, and abnormal emotion. Performances were primarily normal on a broad range of neuropsychological measures (intellect, memory, language, academic achievement, visual perception, and visuoconstruction), but selective impairments of executive function were evident. Early dysfunction in the prefrontal region may result in severe and chronic social maladjustment despite largely normal cognitive abilities. These findings can help inform neuropsychological evaluation of patients with possible prefrontal dysfunction in the setting of developmental disabilities or early brain trauma.     

应激对中枢神经系统即刻早期基因c-fos表达及HPA轴的调节作用研究

目的：研究应激对即刻早期基因ｃ－ｆｏｓ表达的调节作用及其与ＣＲＦｍＲＮＡ、ＨＰＡ通路和行为之间的关系。方法：制造社会应激动物模型,高架十字迷宫和空场实验评估大鼠应激行为,免疫组织化学技术检测ＦＯＳ蛋白表达,计算机图像分析系统定量,原位杂交检测ＣＲＦｍＲＮＡ表达,放射免疫分析方法和酶联免疫吸附方法（ＥＬＩＳＡ）检测血清ＡＣＴＨ和Ｃｏｒｔｉｓｏｌ。结果：提示室旁核（ＰＶＮ）部位所ｃ－ｆｏｓ,可能作为第     

碱性成纤维细胞生长因子对成骨细胞生长与c-fos表达的影响

以重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (rb- b FGF)刺激体外培养的大鼠成骨细胞 ,发现 :经过 1～ 2 d的刺激 ,成骨细胞产生很长的突起 ,细胞数量和活力较对照均有显著升高 ;经 rb- b FGF 1h的刺激后 ,c- fos基因的表达即明显高于对照 ,刺激 1～ 2 d后 c- fos基因的表达也明显高于对照。这表明 b FGF可促进大鼠成骨细胞增殖 ,提高c- fos基因的表达量。 c- fos表达量的提高 ,可能是各种刺激在促进细胞增殖的信号转化过程中的重要一步