~(188)Re标记放射性药物研究进展

188W/188Re发生器的发展极大提高了188Re在各种疾病治疗中的应用1。88Re是一种非常理想的治疗用放射性核素。已经开发了许多新的188Re标记的放射性药物并普遍地应用于临床试验中。188 Re-MAG31、88Re-DTPA用于防止冠状动脉再狭窄,188Re-HEDP1、88Re-ABP1、88Re-EDTMP等用于骨痛缓解的治疗,188Re-HDD碘化油溶液用于治疗肝癌,188Re标记的胶体和微球用于治疗关节炎及其他的实质性肿瘤。然而,仍需要发展新的靶向性更强的188Re标记的放射性药物如肿瘤特异的单克隆抗体和肽及葡萄糖类似物1。88Re从发生器可方便地获得以及合理的价格使188Re标记药物的临床应用前景广阔。     

肿瘤靶向治疗用白蛋白磁性纳米粒子的~(188)铼(~(188)Re)标记

目的188铼(188Re)标记用于肿瘤靶向治疗的白蛋白磁纳米体的实验室条件.方法 188Re标记白蛋白磁性纳米体的最佳实验室条件是SnCl2·H2O8 mg/ml,柠檬酸20 mg/ml,维生素C 8 mg/ml,反应容积为500μl,反应时间为3 h.结果188Re总的标记率大于90%,标记稳定性7 h为98%、24 h为95%.结论188R-0白蛋白磁性纳米体的标记率及标记稳定性适于用于肿瘤靶向治疗的体内研究.     

188Re标记Morpholino寡核苷酸体外稳定性及生物分布

目的 采用治疗性核素铼188(rhenium- 188,188Re)标记Morpholino寡核苷酸,探讨其作为治疗性药物的可能性.方法 以硫乙甘肽(Mercaptoacetyltriglycine,MAG3)作为双功能螯合剂,采用间接标记法,试验不同标记条件对标记率的影响.标记完成后检测生物活性、体外稳定性及正常小白鼠的体内分布.结果 在最佳标记条件下,Morpholino的标记率为65％±12％,纯化后放化纯度＞93％,比活度为(2.37±0.32)MBq/μg.稳定性检测发现,标记物在体外出现再氧化,导致188Re-Morpholino出现解离.加入抗氧化剂抗坏血酸(VitC)后可以显著提高体外稳定性.正常鼠生物分布显示,Morpholinos 主要通过肾脏排泄,甲状腺及胃的摄取明显高于其他器官.结论 以MAG3作螯合剂,188Re可以成功标记Morpholino寡核苷酸;188Re-Morpholino标记物体外稳定性较差,虽然加入抗氧化剂可以提高体外稳定性,但标记物在体内仍出现解离,因此,目前的标记方法可能不适合作为治疗药物.     

~(188)Re标记反基因肽核酸的方法学研究

目的研究^188Re标记反基因肽核酸（AGPNA）的方法及标记物与胰腺癌Patu8988细胞结合内化的特性。方法用^188Re直接标记经修饰的AGPNA,改变标记条件摸索标记方法,在不同时间点（15min-6h）测定标记率;测定标记物加入人血清和生理盐水后不同时间点（15min-24h）的放化纯度;进行胰腺癌Patu8988细胞摄取^188Re-AGPNA的内化实验。结果当标记条件为100μlSnCl2·2H2O（20mg/ml）和20μlAGPNA（2mg/ml）时,^188Re-AGPNA的标记率最高可达（89.99±0.15）%,放射性胶体含量为（9.40±0.55）%。标记物加入血清24h后放化纯度为（89.14±0.63）%。^188Re-AGPNA转染胰腺癌Patu8988细胞的最高细胞结合率为（38.16±2.17）%,最高核内化率为（22.41±0.86）%。结论^188Re直接标记经修饰的反基因肽核酸方法简便、标记率较高,能与胰腺癌细胞结合并转染入细胞核。     

^188Re—HAb18（F（ab′）2在荷瘤鼠体内的药代动力学

目的　研究     

186铼标记单克隆抗体在荷人肺腺癌裸鼠体内的放射免疫显像研究

目的：建立^186铼（^186Re)标记单克隆抗体(McAb）方法，研究标记物的生物学特性，方法：用氯化亚硒（SnCl2)还原的^186Re与经抗坏血酸还原的McAb(Sc3A)直接标记制备成^186Re－Sc3A示踪剂，并在荷人肺腺癌裸鼠体内进行放射免疫显像和生物学分布研究。结果：此方法标记率＞96％，与250倍摩尔浓度的二乙烯三胺五乙酸和人血清白蛋白在37℃下共有24h，未见^186Re－Sc3A明显解离。用过量肿瘤细胞抗原结合法测定，标记物的抗体活性＞90％，经荷瘤鼠尾静脉注射示踪剂后24－48h均可获得肿瘤部位的清晰显像，以48h为佳，生物学分布在48h时示踪剂在肿瘤内呈性浓聚。结论：^186Re－Sc3A示踪剂使临床肿瘤的放射免疫诊断和放射免疫治疗成为可能。     

~(99)Tc~m标记VEGFR-3高亲和融合多肽在荷人卵巢癌裸鼠体内的分布和显像研究

目的 研究~(99)Tc~m标记VEGFR-3高亲和融合肽(phage-SHSWHWLPNLRHYAS)在荷人卵巢癌裸鼠体内分布和放射免疫定位显像.方法 用NHS-MAG3为双功能鳌合剂,固相法合成多肽.~(99)Tc~m预亚锡直接标记法进行标记,纸层析法测定标记率.经尾静脉注射于荷瘤鼠体内,取不同时相进行SPECT显像,测定标记物在体内的分布情况并进行分析.结果 融合多肽的~(99)Tc~m标记率为95.27%,放射化学纯度为96%,放射性浓度24.6 MBq/ml.经鼠尾静脉注射后1 h,植瘤部位开始出现放射性浓集,肾脏、肝脏及膀胱组织也可见显像;注射后3 h肿瘤显像最清晰,每克组织注射百分剂量率(%ID/g)为(30.20±6.89).其余大部分脏器的T/NT值均达最高,最高为肌肉(13.13);注射后4 h肿瘤部位显像逐渐消退.对照组裸鼠的肿瘤部位始终未见显像.结论 筛选获得的VEGFR-3高亲和融合肽能够靶向荷瘤鼠体内肿瘤组织,实现肿瘤的靶向受体显像.     

131I标记多肽K237用于前列腺癌荷瘤裸鼠显像的实验研究

目的研究将放射性核素131I标记多肽K237用于前列腺癌荷瘤裸鼠显像的可行性。方法按Iodogen法用131I标记多肽K237,用薄层层析法(TLC)测定标记率及放射化学纯度,经Sephadex G25柱凝胶过滤法分离纯化,获得标记率大于95%的131I-K237注射液。体外培养前列腺癌LNCap细胞株,构建LNCap荷瘤裸鼠动物模型,经尾静脉注射131I-K237,于特定时间处死、取肿瘤及主要脏器,测定各组织的放射性百分注射剂量率,研究荷瘤裸鼠体内131I-K237的生物分布。对荷瘤裸鼠尾静脉注射5.55Mbq131I-K237 1、2、4和8h后,分别用SPECT/CT仪显像,考察最佳显像时间。结果131I标记多肽K237的标记率为(73.7±3.2)%,经Sephadex G25柱分离纯化后,放射化学纯度为(96.7±0.6)%;LNCap前列腺癌荷瘤裸鼠体内131I-K237分布显示:30min和1、2、4、8、12、24h的T/NT比值分别是2.08和2.28、2.45、2.68、3.04、3.97、4.41。荷瘤裸鼠显像结果表明,1h时即可见肿瘤隐约显影,4h肿瘤显影最清晰。结论131I-K237的制备与显像操作简易,用于前列腺癌荷瘤裸鼠显像效果理想,有望成为一种新的针对前列腺癌的肿瘤显像剂。     

消化道肿瘤裸鼠碘-131 标记短肽 Tyr-GX1 的显影特征

目的 分析碘-131（131I）标记短肽酪氨酸修饰的血管靶向肽（Tyr-GX1）在荷结肠癌与胃 癌裸鼠体内的显影特征。方法 采用Iodogen 碘标法标记Tyr-GX1,检测其标记率和稳定性。建立荷结肠 癌、胃癌裸鼠模型（分别设置为结肠癌组和胃癌组）,均注射131I 标记短肽Tyr-GX1,观察24 h 后显影特 征。结果 纸层析法结果表明,131I 标记短肽Tyr-GX1 的标记率较高,为（95.67±0.79）% ;放射化学纯度为 （96.68±1.68）%。24 h 稳定性测试显示,131I 标记短肽分别与人血清、乙二胺四乙酸、生理盐水、半胱氨酸混 合后标记率仍然维持在90% 以上。结肠癌组、胃癌组裸鼠尾静脉注射131I 标记的短肽Tyr-GX1 后8 h 开始裸 鼠右后肢背侧荷瘤部位放射性浓聚较心血池本底升高,并随着时间延长而升高;结肠癌组16 h 时达峰值随后 稍有降低,荷瘤部位和心血池本底放射性摄取比值（T/NT）均>1。结肠癌组与胃癌组T/NT 比值在不同时 间、不同组间及变化趋势上有差异（P <0.05）。随着时间延长,结肠癌组和荷胃癌组裸鼠心、肺、肝、肾、胃、 肌肉、肿瘤、血液和甲状腺组织中Tyr-GX1 摄取率逐渐降低（P <0.05）,其中肝、肾组织均具有较高的放射 性。结肠癌组和胃癌组1、6、12 和24 h 肿瘤组织的摄取率均高于心脏、甲状腺、胃和肌肉组织（P <0.05）。 结论 131I 标记短肽Tyr-GX1 对结肠癌和胃癌裸鼠肿瘤血管靶向性较好,与恶性肿瘤组织有较高的结合率, 而结肠癌与胃癌的放射性浓聚和达峰时间有所不同;131I 标记短肽Tyr-GX1 可能在消化道恶性肿瘤血管靶向 诊断和治疗方面具有潜在价值。     

131I-VEGF siRNA/SPIO在人肝细胞癌移植瘤裸鼠体内的血液清除动力学及生物分布

目的研究在外加磁场作用下¹³¹I-VEGF siRNA/SPIO在人肝细胞癌移植瘤裸鼠体内的血液清除动力学及生物分布特性。方法以Bolton-Hunter法使VEGF siRNA标记上¹³¹I,以氧化铁超顺磁性纳米颗粒（superparamagnetic iron oxide nanoparticles,SPIO）包裹¹³¹I-VEGF siRNA。以人肝细胞癌细胞株Hep G2细胞悬液臀部皮下注射建立人肝细胞癌移植瘤裸鼠模型。45只人肝细胞癌移植瘤裸鼠随机分成外加磁场组（尾静脉注射¹³¹I-VEGF siRNA/SPIO+肿瘤部位外加磁场）、非外加磁场组（尾静脉注射¹³¹I-VEGF siRNA/SPIO+肿瘤部位无外加磁场）及对照组（尾静脉注射¹³¹I-VEGF siRNA+肿瘤部位无外加磁场）。然后进行：（1）血液清除动力学研究：三组人肝细胞癌移植瘤裸鼠（每组5只）尾静脉给药后,分别于0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h、3.0 h、4.0 h、6.0 h、8.0 h、10.0 h、12.0 h时间点尾静脉采血20 μL,测量血样每分钟放射性计数(counts per minute,cpm)值并绘制放射性-时间曲线,计算血液半衰期;（2）体内生物分布研究：三组人肝细胞癌移植瘤裸鼠尾静脉给药1 h后进行SPECT显像（每组5只）及MRI显像（每组5只）,SPECT及MRI显像完毕,依次摘取移植瘤裸鼠肿瘤、皮肤、肌肉、骨、甲状腺、胃、小肠、大肠、肺、脾、性腺、肝、心、肾、膀胱等脏器称重并测量cpm值,然后计算各离体组织的%ID/g[即组织的放射性比活度 (cpm/g) / 注入标记物的放射性比活度 (cpm/g)]。结果本研究分别以薄层层析硅胶板为载体、1∶1丙酮-生理盐水为展开剂和以新华一号滤纸为载体、1∶1甲醇-5%醋酸铵为展开剂测定¹³¹I标记VEGF siRNA的放化纯分别为81.15%和84.05%。外加磁场组、非外加磁场组及对照组移植瘤裸鼠的血液半衰期分别约为（2.27±0.14） h、（2.93±0.20） h和（3.06±0.23） h,外加磁场组半衰期小于其它两组（差异有统计学意义,P<0.01）。SPECT显像显示外加磁场组肿瘤局部明显放射性增浓,非外加磁场组及对照组肿瘤局部未见明显放射性增浓;尾静脉给药前后MRI T1WI显示外加磁场组肿瘤局部信号明显强化,非外加磁场组及对照组肿瘤局部信号未见明显强化;外加磁场组肿瘤组织的%ID/g分布较非外加磁场组及对照组的均明显增高（P<0.01）。结论在外加磁场的作用下,以SPIO作为siRNA载体能够较成功地将¹³¹I-VEGF siRNA转导至人肝细胞癌移植瘤裸鼠臀部皮下的肿瘤部位,对进一步研究肝细胞癌的VEGF靶向治疗、基因治疗以及示踪体内基因转导均有重要的意义。     

放射性碘标记反义寡核苷酸在荷人淋巴瘤裸鼠中的分布及显像研究

目的:探讨用放射性碘标记的框架区(framework region mRNA,FR)mRNA反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASON)作为B细胞淋巴瘤反义显像剂及反义治疗药物的可能性.方法:通过氯胺-T法用碘[125Ⅰ]与碘[131Ⅰ]标记含酪胺的18聚体寡核苷酸获得125Ⅰ-或131Ⅰ-FR-ASON,建立荷人淋巴瘤裸鼠动物模型.将148 kBq125Ⅰ-FR-ASON(2～3μg)经尾静脉注入正常小鼠,于不同时间处死小鼠,测定不同组织及标准源的放射性计数.荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的3.33 MBq131Ⅰ-FR-ASON(7～9μg),分别于注射后不同时间进行单光子发射计算机断层(single photon emission computer tomography,SPECT)显像,以脂质体包裹的正义寡核苷酸作为对照,24 h显像后处死裸鼠,取出血液、重要器官和肿瘤组织,测定各组织的放射性计数,并计算每克组织摄取率及肿瘤与非肿瘤组织放射性摄取比值(T/NT).结果:125Ⅰ-FR-ASON注入正常小鼠体内后1 h,各脏器的放射性摄取达高峰,24 h基本清除.肝、胃和肠放射性分布最高,骨、肌肉、脑中放射性分布较少.荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的131Ⅰ标记ASON后立即用SPECT成像仅见肿瘤部位,1和2 h成像可见示踪剂从肿瘤到腹腔,24 h仍可见肿瘤显像.比较24 h反义组与正义组肿瘤的每克组织摄取率、T/NT均有显著性差异.结论:放射性碘标记ASON对淋巴瘤组织有很强的特异性,有望用于淋巴瘤反义显像和反义治疗的研究.     

125I-Genistein 在荷人乳腺癌裸鼠体内分布的实验研究

目的研究^125I-Genistein在荷人乳腺癌裸鼠体内的生物学分布情况．探讨Genistein用于治疗人乳腺癌的可行性。方法Iodogen法标记Genistein；建立荷人乳腺癌裸鼠移植瘤模型；测定^125I-Genistein在荷瘤裸鼠体内的放射性分布．计算肿瘤（T）与非肿瘤组织（NT）的放射性比值。结果^125I-Genistein比活度为336KBq/μg．放射性化学纯度为98．72％。尾静脉给药30min后肿瘤组织的放射性达到高峰．但在各观察时相点肿瘤（T）放射性均显著低于血液、肝脏与肾脏（NT）（P〈0．01）；肾脏放射性明显高于肠道,30min后高于除血液外的其他受检组织；肠和脾脏的放射性始终处于极低水平。结论Genistein用于人乳腺癌的治疗需要进一步研究。以提高其在肿瘤组织中的分布。     

131I标记抗VEGF单抗在荷瘤膀胱癌裸鼠体内的生物学分布

目的研究131I-sc-7269在荷人膀胱癌裸鼠体内的生物学分布特性.方法 (1)Iodogen法标记抗-VEGF McAb(sc-7269),SephadexG-50柱层析分离纯化制备131I-sc-7269,体外细胞结合分析检测标记抗体的免疫活性;(2)荷瘤裸鼠131I-sc-7269体内分布实验.结果 (1)131I-sc-7269比活度为1.00MBq/μg(放射性浓度为18.30MBq/ml),放射性化学纯度为96.20%.体外131I-sc-7269与T24细胞结合率为59.12%;(2)体内分布实验显示131I-sc-7269在肿瘤组织中浓聚的峰时为注入标记抗体后96h,此时各组织T/NT比值为最高.结论 131I-sc-7269动物模型肿瘤/膀胱放射性峰时出现在96h,比值高达6.44,为应用131I-sc-7269放射免疫显像诊断人膀胱癌的实验和临床研究奠定了一定的实验基础.     

Radiolabeling LyP-1 peptide and preliminary biodistribution evaluation in mice bearing MDA-MB-435 xenografts

Background Recent studies have shown the LyP-1 peptide can home to either tumor lymphatics or the tumor cells and be internalized by targeted cells.This study aimed to investigate the possibility of us...     

131I-D2C5在荷瘤裸鼠体内分布实验

目的 探讨131I-D2C5在荷瘤裸鼠体内的生物分布.方法 12只荷瘤裸鼠随机分为二组(每组各6只),鼠尾静脉注射131I-D2C5 或131I-mIgG 4 h、24 h、48 h后,采用γ计数器检测体内放射性分布.结果 静脉注射131I-D2C5后4 h,131I-D2C5主要分布在血、心、肝、肾、脾中,肿瘤在4h开始略有浓集.24 h后肿瘤组织内131I-D2C5聚集达到高峰,此时每克组织的放射性占注射剂量的百分比(%ID/g)达到4.12.131I-D2C5注射后4 h、24 h、48 h肿瘤/肌肉的放射性比值依次为3.96、7.63、8.21,而131I -mIgG依次为3.30、2.80、2.60,两者变化趋势差异显著.结论 131I-D2C5 能在裸鼠肿瘤组织内特异性聚集,有望用于肿瘤组织的受体显像和导向治疗.     

131I-抗VEGF McAb在荷人膀胱癌裸鼠移植瘤体内分布的实验研究

目的 研究^131I-sc-7269在荷人膀胱癌裸鼠体内生物学分布情况，探讨^131I-sc-7269放射免疫治疗实验性人膀胱癌的可行性。方法 ①Iodogen法标记抗－VEGF McAb（sc－7269）;②荷人浸润性膀胱癌裸鼠移植膜型的建立；③荷瘤裸鼠^131I-sc－7269体内分布实验。结果 ①^131I-sc-7269比活度为1.00MBq/μg（放射性浓度为18.30MBq/ml），放射性化学纯度为96.20%。②^131I-sc-7269在肿瘤组织中浓聚的峰时为注入标记抗体后96h，此时各组织T／NT比值为最高。结论 ①采用Iodogen法标记的^131I-sc-7269免疫活性无改变；②^131I-sc-7269动物模型肿瘤／膀胱放射性峰时出现的96h，比值高达6.44,为应用^131I-sc-7269放射治疗人膀胱癌的研究提供了实验依据；③本实验研究为进一步开展应用放射性核素标记McAb(sc-7269）放射免疫治疗（RIT）与放射免疫导引手术（RIGS）治疗膀胱癌的实验研究奠定了基础。     

As2O3对裸鼠移植肿瘤生长及血管生成的抑制作用

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对人胃癌裸鼠皮下移植瘤微血管新生以及血管内皮生长因子受体-1（Fit-1）表达的抑制作用。方法：对30只裸鼠采用人胃腺癌SGC7901细胞建立皮下移植瘤模型,分为两个治疗组（2.5mg／kg组和5mg／kg组）和对照组,每组10只,2.5mg／kg组和5mg／kg组给予As2O3腹腔注射治疗,连续10d。对照组注射生理盐水测定肿瘤重量、抑瘤率,以判定As2O3抑制肿瘤生长的效果;荧光免疫测定CD31并计算微血管密度（MVD）;荧光免疫激光共聚焦测定Fit-1的表达。结果：2.5mg／kg组,5mg／kg组的抑瘤率按质量计算分别为29.08％和52.17％,As2O3治疗后瘤组织中MVD明显减少,与对照组比较差异有显著性意义（P〈0.01）;5mg／kg组瘤块中MVD明显少于2.5mg／kg组者（P〈0.01）。治疗组Flt-1表达显著低于对照组;5mg／kg组瘤块中Fit-1明显少于2.5mg／kg组者（P〈0.01）。结论：用As2O3单剂治疗能明显抑制人胃癌裸鼠皮下移植瘤的生长,As2O3治疗可显著减少肿瘤组织MVD,抑制肿瘤血管新生;抑制Flt-1的表达可能是As2O3抗肿瘤咀管新生的机制之一。