衰老细胞的基因表达

<正>生物衰老是自然界一种复杂的生命现象。生物学家对生物衰老的机制作了许多推测,提出了衰老的自由基学说、突变学说、DNA损伤修复学说及遗传学说等等。尽管这些学说各自都获得一些实验证据的支持,但至今仍不能用一种学说全面地解释衰老的现象。随着分子生物学的迅猛发展,衰老的机制研究已深入到分子水平。 个体的衰老是各脏器衰老的总和。细胞衰老时增生能力的下降可能是器官衰老的基本过程之一。在正常细胞培养条件下,成纤维细胞（fibroblast,Fb）具有有限的生长增殖能力。这一事实已被众多的学者所接受并把这一模型系统广泛地应用于细胞水平的衰老研究中。     

衰老细胞的PDGF基因表达

细胞丧失生长能力是细胞衰老的特征 ,故了解控制细胞生长的基因有助于了解衰老的机理。生长因子是一类能与靶细胞受体特异性结合 ,通过自分泌或内分泌方式调节细胞增殖和分化 ,具有广泛生物学作用的多肽或小分子蛋白质 ,参与胚胎发育、组织的损伤修复、肿瘤的发生发展和免疫系统的调节 ,有关衰老细胞中生长因子基因表达变化的研究尚不多。本文就细胞衰老过程中衰老细胞的血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)基因表达的变化作一综述。ＰＤＧＦ是一强有力的致分裂剂和趋化因子。因最初发现于血小板的α一颗粒而得名[1] 。由于后来发现ＰＤＧＦ能由许…     

基因表达与衰老

几十年来,衰老研究在各方面都积累了大量的实验报告,但其随龄出现生理功能衰退的根本原因尚未揭晓。信息生物分子如DNA、RNA和蛋白质的改变可能是这些生理变化的基础。然而,仍然缺乏有关变化特征以及在细胞的分子运转中诱导途径的知识。对于驱使这些变化的动力及程序更是当今的不解之谜。由     

益气养阴组方对衰老细胞P16基因表达影响的实验研究

目的:通过测定益气养阴中药组方对衰老细胞P16基因表达的影响,探讨益气养阴法及其组方延缓衰老的部分作用机制.方法:将健康雄性SD大鼠随机分为实验组、对照组、空白组三组,采用益气养阴中药、维生素E胶丸、生理盐水分别灌胃三组大鼠,提取含药血清,将提取的血清培养二倍体人胚肺成纤维细胞(MRC -5).从第28代开始在培养液中...     

D-半乳糖衰老大鼠睾丸生精细胞p53基因表达的变化

目的:观察D-半乳糖衰老大鼠血清睾酮含量及睾丸生精细胞p53基因表达的变化.方法:20只SD大鼠随机分为正常组、衰老模型组,每组均为10只.采用D-半乳糖连续腹腔注射制作亚急性衰老的大鼠模型.ELISA方法检测血清睾酮含量,SP免疫组化法检测睾丸生精细胞p53基因的表达.结果:衰老大鼠血清睾酮含量明显下降(与正常大鼠相比:P＜0.01);衰老大鼠睾丸p53阳性细胞率明显高于正常大鼠(P＜0.01).结论:衰老大鼠睾丸生精细胞p53基因表达上调,睾丸功能减退.     

细胞的衰老与凋亡

细胞的衰老与凋亡是机体发生在细胞水平的两个完全不同的分子事件 ,它们在机体的生长发育、创伤修复以及致病过程中起着不同的作用。一、细胞的衰老细胞衰老有两层含义 ,一是指其增殖分化的停止 ,二是指其同时能够维持细胞的基本功能。 2 0世纪初 ,杰出的诺贝尔奖获得者、著名的外科医师和细胞培养者AlexisCarrel发现 ,来源于雏鸡心脏的纤维母细胞在组织培养中始终存在 ,而且此结果被其他实验室所重复和证实 ,所以“培养细胞永生论”直到 2 0世纪 60年代仍被科学家所认可。 1 961年 ,Hayflick和Moorhead在经过大量的组织培养研究后 ,阐述…     

T细胞衰老的变化

T细胞在免疫系统中处于核心地位,参与各种免疫应答,执行各种免疫功能,抵抗疾病,直接或间接地参与细胞免疫和体液免疫.所以研究T细胞衰老是研究人体衰老的重要内容.     

T细胞的免疫衰老

在过去短短几个世纪 ,人类平均寿命不断增加 ,一些发达国家大约 2 0 %人口在 60岁以上 ,85岁以上人口增长速度比整体人口的增长速度快 6倍。人口老龄化已成为一个主要的社会问题。一提到老龄化 ,就很容易联想到一些疾病[1] 。虽然衰老与疾病并不是同义词 ,但衰老的确可以增加个体对感染、自身免疫病和肿瘤等疾病的易感性。原因一部分可能是由于这些疾病自身的因素 :许多慢性疾病例如动脉硬化是缓慢发展 ,在很长一段时间内不表现症状 ;另一部分可能的原因是与衰老相关的免疫系统的退化[2 ] ,这种退化现象在许多种属的动物中都得到了确认。在…     

芦笋多糖对衰老小鼠c-fos基因表达的影响

目的：研究芦笋多糖对衰老小鼠c-fos基因表达的影响,探讨芦笋多糖的抗衰老机制。方法：用D-半乳糖建立衰老小鼠模型,以芦笋多糖水煎剂治疗,RT-PCR法和免疫组化法观察小鼠脑海马c-fos的表达。结果：芦笋多糖治疗后,c-fos基因mRNA表达和蛋白表达均升高（P〈0.01）。结论：芦笋多糖能增加D-半乳糖衰老小鼠c-fos基因mRNA及蛋白表达,从而起到抗衰老的作用。     

Bmi-1基因表达与血管内皮细胞衰老的相关性

目的:探讨Bmi-1基因与人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的相关性,为研究血管内皮细胞衰老的分子机制打下基础。方法:采用细胞传代及肿瘤坏死因子α(TNF-α)刺激方法模拟内皮细胞衰老,用SA-β-半乳糖酐酶(SA-β-gal)染色检测衰老,Real-time PCR检测P16INK4A及Bmi-1基因的表达变化。结果:随着细胞传代次数的增加,HUVECs体积变大,细胞浆内颗粒和空泡增多,β-gal阳性染色率显著增多,P16INK4A mRNA表达逐渐升高(第6、8代与第1代相比P<0.05),同时Bmi-1 mRNA表达下降(第2、4、6、8代与第1代相比均P<0.05)。TNF-α(10 ng/mL)孵育HUVECs 48 h,与对照组相比,P16INK4A mRNA表达明显增加(P<0.05),Bmi-1 mRNA表达下降(P<0.05)。结论:Bmi-1在衰老内皮细胞中表达显著降低,提示其在血管内皮细胞衰老发生发展中起重要作用。     

衰老对大鼠脑与垂体细胞因子基因表达的影响

衰老对大鼠脑与垂体细胞因子基因表达的影响黄诚陈汉平程介士马兰老年期免疫细胞白细胞介素１（ＩＬ－１）与白细胞介素６（ＩＬ－６）基础分泌能力与青年期无差异，但经丝裂原刺激后其分泌能力随增龄而增加［１］。老年大鼠血管内皮细胞经细菌脂多糖（ＬＰＳ）刺激后也较...     

芦笋多糖对衰老小鼠p16基因表达的影响

目的：研究芦笋多糖对衰老小鼠p16基因表达的影响,探讨芦笋多糖的抗衰老机制。方法：用D-半乳糖建立衰老小鼠模型,以芦笋多糖水煎剂治疗,RT-PCR法观察小鼠脑海马p16基因的mRNA表达。结果：治疗组p16基因mRNA表达降低。结论：芦笋多糖能降低p16基因的表达,从而起到抗衰老的作用。     

人体细胞分子水平的衰老机理

人体细胞分子水平的衰老机理李坊莹（江西中医学院基础部南昌３３０００６）关键词人体细胞衰老机理分子水平一切事物发展规律都要经过发生、发展和消亡的过程。生命也如此，要经过生长、发育、生殖、衰老死亡时期。衰老（又称老化）是一种非常复杂的生物学过程，是机体在...     

细胞复制衰老过程中IGF2R基因表达及H3组蛋白修饰的变化

目的 研究细胞复制性衰老过程中胰岛素样生长因子2受体基因（IGF2R）的表达与H3组蛋白修饰谱的变化。 方法 培养人胚肺成纤维细胞（HPF）,以细胞群倍增数(PDL)为23(PDL23)为年轻组细胞,PDL=50(PDL50)为复制衰老细胞,观察细胞复制衰老过程中生物学性状改变;采用实时定量PCR法观察细胞PDL30、PDL40、PDL50 IGF2R基因的表达, 并采用染色质免疫共沉淀-实时定量PCR法（chromatinimmunoprecipitation-real time quantitative PCR methods,CHIP-PCR）检测IGF2R基因转录起始区组蛋白修饰(H3-Ac、H3K9-tri-Me、H3K9-Ac和H3K4-tri-Me) 的状况。 结果 与年轻细胞相比,衰老细胞体积变大,增殖能力减弱,细胞周期停滞,衰老特异性β-半乳糖苷酶着色阳性,IGF2R mRNA表达增加（P<0.05）,IGF2R mRNA表达与细胞PDL呈正相关(r=0.871)。相对年轻细胞而言,老年细胞的IGF2R基因在转录起始点上游0.6 kb处和转录起始点下游1.2 kb处以H3-Ac、H3K9-Ac和H3K4-tri-Me组蛋白修饰为主,而在转录起始点下游1.6~4.0 kb处H3K9-Ac修饰降低,H3K9-tri-Me组蛋白修饰升高,但H3K4-tri-Me组蛋白修饰占主要地位。 结论 IGF2R与细胞衰老程度相关,其基因表达受H3组蛋白修饰调控,表观遗传学参与细胞衰老进程。     

补肾健脾方药对老年大鼠肝脏衰老有关基因表达的影响

目的：比较补肾、健脾方药对老年大鼠肝脏衰老有关基因表达的调控作用。方法：以自然衰老大鼠为衰老模型,随机分为老年对照组、老年补肾组、老年健脾组,并设青年大鼠对照组。予药物干预4个月后,采用RT-PCR和Western blot方法检测大鼠肝脏抑癌基因p16、抑癌基因p21、细胞周期素D1（Cyclin D1）、增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期素E（CyclinE） mRNA转录和蛋白的表达。结果：老年大鼠肝脏p16、p21和Cyclin D1 mRNA/蛋白的表达明显增高,而PCNA和Cyclin E mRNA/蛋白的表达明显降低。补肾方药可明显下调肝脏p16和Cyclin D1,上调PCNA和Cyclin E基因mRNA与蛋白的表达;健脾方药能明显下调肝脏Cyclin D1,上调PCNA和Cyclin E基因mRNA与蛋白表达,但对p16作用不明显。结论：补肾、健脾方药均能不同程度调控肝脏衰老有关基因表达,促进老年大鼠肝细胞增殖,但补肾方药作用似更明显。     

p16INK4A诱导的衰老相关基因表达差异

目的检测衰老主导基因p16与衰老相关基因p21、CSIG、TOM1间的相互关系。方法正、反义p16转染人胚肺2倍体成纤维细胞(2Bs)后,用RT-PCR检测p21、CSIG、TOM1的表达,用Western Blot检测p21蛋白的表达。结果p16对p21存在转录后调控作用,正义p16转染细胞TOM1高表达,反义p16转染细胞CSIG高表达。结论衰老主导基因p16与衰老相关基因p21、CSIG、TOM1间存在相互作用,进一步说明了p16在衰老中的主导地位。     

益气活血方药对老年大鼠肝脏衰老相关基因表达的影响

目的:观察益气、活血方药对老年大鼠肝脏衰老相关基因表达的影响.方法:以自然衰老大鼠为衰老模型,采用RT-PCR、Western blotting法研究益气、活血方药对老年大鼠肝脏p16、p21、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、cyclin D1和cyclin E mRNA转录和蛋白表达的影响.结果:老年大鼠肝脏p16、p21、cyclin D1 mRNA转录和蛋白的表达增加;PCNA、cyclin E mRNA转录和蛋白的表达降低.与老年大鼠比较,益气、活血方药可下调老年大鼠肝脏cyclin D1 mRNA转录和蛋白表达,上调促进增殖基因cyclin E mRNA转录和蛋白表达,但对p16、p21和PCNA的调节作用不明显.结论:益气、活血方药主要通过调控cyclin D1和cyclin E mRNA转录和蛋白表达而促进细胞增殖.     

补肾益脑片对加速衰老小鼠P10/Ta小鼠神经细胞衰老相关基因表达的调节

目的 研究补肾益脑片抗衰老的分子机制.方法 应用DDRT-PCR研究补肾益脑片提取物对SAM(senescence-accelerated mouse)P10/Ta小鼠原代培养的神经细胞基因表达的影响.结果 发现了10个差异表达片段,分别与下列基因或转录产物同源:小鼠mRNA克隆IMAGE 4235872,小鼠RIKEN cDNA A730024A03基因mRNA,小鼠血清淀粉样蛋白A3(SAA3),异种核蛋白AO(HNRNP AO),小鼠OVCAl(Dph211)mRNA,蛋白酶体26S亚单位,ATP依赖线粒体RNA螺旋酶,小鼠线粒体核蛋白s31(Mrps31),小鼠CX43 gene,小鼠tRNA-lie.结论 补肾益脑片可能通过影响与衰老相关的基因表达发挥抗衰老作用.     

星形胶质细胞的基因表达谱差异

目的 研究1型和2型星形胶质细胞的基因表达谱差异，为深入研究TIA和T2A生物学特性及功能方面的异同打下基础。方法 以振荡法和差速贴壁纯化培养1型星形胶质细胞（TIA）和2型星形胶质细胞（T2A），提取总RNA，分别以Cy3-dCTP和Cy5-dCTP标记TIA和T2A的mRNA，进行基因表达谱芯片检测分析。结果 基因芯片上检测点4096个，4次结果交集显示共有差异表达基因138条（60条在TIA中高表达，78条在T2A中高表达），其中生物学功能较为明确的差异表达基因为99条（42条在T1A中高表达，57条在T2A中高表达）。结论 通过该研究获得了大鼠大脑TIA和T2A的基因表达谱，TIA和T2A之间存在99条生物学功能较为明确的差异表达基因。