脂多糖预处理减轻对乙酰氨基酚所致急性肝损伤

目的：建立对乙酰氨基酚( APAP)引起小鼠急性肝损伤动物模型,探讨低剂量脂多糖( LPS)预处理对APAP引起急性肝损伤的作用。方法①选取ICR雄性小鼠20只,随机分成APAP组和LPS+APAP组。禁食后,APAP组经腹腔注射APAP(300 mg/kg);LPS+APAP组经腹腔注射先给予LPS(50μg/kg),3 h后再给予APAP(300 mg/kg),密切观察小鼠存活状况,72 h后取材,测生化指标,行肝组织 HE 染色。②ICR雄性小鼠随机分成APAP 0、0．5、6、12、24、72 h组和LPS+APAP 0、0．5、6、12、24、72 h组。禁食后,APAP组腹腔注射APAP(300 mg/kg);LPS+APAP组腹腔注射LPS(50μg/kg),3 h后再经腹腔注射APAP(300 mg/kg),分别在每组对应时点取材。分离血清测丙氨酸氨基转移酶( ALT),用Beutler改良法测肝脏谷胱甘肽( GSH )含量。结果①APAP组给药4 h左右小鼠开始出现死亡情况,72 h存活率为50%;LPS+APAP组72 h内无死亡。②低剂量LPS预处理能降低血清ALT(P<0．05),减少小鼠肝脏坏死情况(P<0．01)。③ APAP组与LPS+APAP组肝脏GSH含量差异无统计学意义。结论低剂量LPS预处理能显著减轻APAP引起的急性肝损伤,这种作用不是通过减弱N-乙酰苯醌亚胺( NAPQI)耗竭GSH而产生的,可能与其激活了机体的免疫应答,抑制了GSH耗竭的下游机制有关。     

成纤维细胞生长因子1通过改善线粒体氧化应激缓解对乙酰氨基苯酚所致小鼠急性肝损伤

目的：探讨成纤维细胞生长因子1(FGF1)缓解对乙酰氨基苯酚（APAP）所致小鼠急性肝损伤的机制。方法：(1)将C57BL/6J小鼠随机分为Control组、APAP 3 h组、APAP 6 h组、APAP 12 h组和APAP 24 h组,500mg/kg剂量APAP腹腔注射造模后于对应时间点处死小鼠,肝脏DHE染色和F4/80染色观察活性氧（ROS）含量以及炎症细胞数目确定APAP小鼠急性肝损伤最显著时间点;(2)将C57BL/6J小鼠随机分为Control组、APAP组、APAP+FGF1 1 mg/kg组、APAP+FGF1 2 mg/kg组和APAP+FGF1 5 mg/kg组,500 mg/kg剂量APAP造模1 h后,腹腔注射对应剂量FGF1,于造模后6 h处死小鼠,通过肝脏HE染色观察损伤面积,酶标仪法检测谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量,qPCR检测过氧化氢酶（CAT）、SOD2、核因子E2相关因子2(NRF2)、趋化因子配体5(CCL5)、肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素-6(IL-6)基因表达,确定F...     

桑叶提取物对APAP诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：探究桑叶提取物对对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠急性肝损伤的保护作用。方法：选取30只健康雄性昆明小鼠(KM),分为对照组、APAP模型组、桑叶提取物组，每组10只。桑叶提取物组预防性连续给药7 d,末次给药2 h后桑叶提取物组和APAP模型组腹腔注射300 mg/kg APAP,建立急性肝损伤模型。24 h后取材，观察肝脏损伤情况，生化法检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平，HE染色观察肝脏组织病理损伤程度。结果：与对照组相比，APAP模型组的肝组织肉眼可见部分点状瘀血坏死，血清中AST、ALT明显升高，HE染色镜检见肝脏组织有凝固样坏死；而桑叶提取物组的肝脏损伤较APAP模型组明显减轻。结论：桑叶提取物对APAP诱导的小鼠急性肝损伤具有保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸对GalN/LPS引起小鼠急性肝损伤的保护作用

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对D-氨基半乳糖(D-GalN)与细菌脂多糖(LPS)引起小鼠急性肝损伤的保护作用。方法建立GalN/LPS引起的小鼠急性肝损伤模型。在GalN与LPS共处理前30min经腹腔注射给予NAC,于GalN/LPS处理1·5h后剖杀部分动物取血,测定血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;GalN/LPS处理8h后剖杀剩余动物,取血和肝脏,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活力和一氧化氮(NO)水平,检测肝脏组织Caspase-3活性与还原性谷胱甘肽(GSH)含量,采用DNA断裂分析方法检测肝脏凋亡,并对部分肝脏进行病理组织学检查。结果与GalN/LPS处理组比较,NAC预处理组小鼠血清ALT活力、肝脏Caspase-3活性和GSH损耗均显著下降,肝脏组织病理学改变明显改善,DNA断裂分析未见明显凋亡梯度,而NAC对小鼠血清TNF-α含量和NO生成无显著影响。结论NAC预处理对GalN/LPS引起的小鼠急性肝损伤有保护作用,主要通过其抗凋亡和抗氧化作用。     

人源抗TLR4抗体IgG2对对乙酰氨基酚诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：研究人源抗TLR4 抗体IgG2（human?TLR4 IgG2,hTLR4 IgG2）对对乙酰氨基酚（acetaminophen,APAP）诱导肝损伤的保护效应,探讨其在药物性肝损伤中的保护作用。方法：以人源抗TLR4 抗体Fab基因为模板,扩增其可变区基因,构建人源抗TLR4抗体IgG2真核表达载体,转染CHO?S细胞,筛选稳定表达细胞株,收集细胞上清,Protein G柱纯化抗TLR4抗体IgG2。将18只C57BL/6J 小鼠随机分成3组：生理盐水组、APAP（600 mg/kg）组和APAP +hTLR4 IgG2（5 mg/kg）组,统计小鼠腹腔注射APAP后 24 h的存活率;重复上述实验分组,检测小鼠腹腔注射APAP 8 h后,血清中丙氨酸氨基转移酶（alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate transaminase,AST）、白细胞介素?1（interleukin?1,IL?1）、白细胞介素?6（interleukin?6,IL?6）和肿瘤坏死因子?α（tumor necrosis factor?α,TNF?α）的表达水平,取肝脏做病理分析并使用Western blot检测凋亡蛋白的表达。结果：成功构建并表达纯化人源抗TLR4抗体IgG2;ELISA结果显示,抗体效价为1∶204 800。与APAP组相比,APAP+hTLR4 IgG2组小鼠的24 h存活率显著增加（P < 0.05）;血清AST、ALT以及炎性细胞因子的表达水平显著降低,具有统计学意义（P < 0.05）;病理分析结果显示,与模型组相比,人源抗TLR4抗体IgG2治疗组的小鼠肝组织炎性细胞浸润、充血和坏死等症状明显改善;Western blot结果显示凋亡相关蛋白的表达减少。结论：人源抗TLR4抗体IgG2能够抑制炎症因子的表达及细胞凋亡,对APAP诱导的小鼠肝损伤有显著的保护作用。     

N-乙酰半胱氨酸对异烟肼和利福平联合应用所致小鼠肝损伤保护作用

目的:探讨N-乙酰半胱氨酸对异烟肼和利福平联用所致小鼠肝损伤的保护作用及其可能机制。方法:32只昆明鼠随机分为4组(每组8只)后给予如下治疗:腹腔注射异烟肼和利福平(肝损伤组)、腹腔注射N-乙酰半胱氨酸(NAC)30min后再腹腔注射异烟肼和利福平(NAC保护组)、腹腔注射NAC(NAC对照组)和腹腔注射生理盐水(对照组)。治疗14d后处死小鼠,取眼球血,测量血清谷氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;取小鼠肝组织并测量肝指数(肝指数=肝重/体重),部分肝组织常规石蜡包埋切片,光镜观察肝组织形态结构特征;部分肝组织均浆,检测其中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:肝损伤组小鼠肝细胞呈不同程度的水变性和脂肪变性及局灶性坏死溶解,NAC保护组小鼠肝细胞呈轻度水变性和脂肪变性,未见肝细胞坏死。肝损伤组及NAC保护组小鼠肝指数(64.38±0.63及60.54±0.57)、血清ALT(82.81±4.75及68.70±5.81)U/L及AST活性(173.56±6.30及119.92±4.58)U/L显著高于对照组[57.48±0.53,(33.58±5.68)U/L、(85.84±5.20)U/L](P<0.01);NAC保护组小鼠肝指数、血清ALT及AST活性明显低于肝损伤组(P<0.01);与对照组(0.83±0.12、125.56±5.36)比较,肝损伤组小鼠MDA含量[(3.22±0.17)nmol/mgprot]显著升高,SOD活性[(88.44±5.52)U/mgprot]显著降低(P<0.01);与肝损伤组比较,NAC保护组MDA含量[(1.78±0.27)nmol/mgprot]明显降低,SOD活性[(106.85±3.66)U/mgprot]明显升高(P<0.01)。结论:异烟肼与利福平联合应用能引起小鼠较严重的肝损伤,N-乙酰半胱氨酸能够减轻这种损伤作用,其保护机制可能与增加机体谷胱甘肽(GSH)含量,从而减轻脂质过氧化反应有关。     

红景天超微粉对小鼠急性肝损伤的保护作用

[目的]探讨红景天超微粉及乙醇提取物对小鼠急性肝损伤的保护作用,比较两者对肝损伤保护作用的差异.[方法]用D-氨基半乳糖制作小鼠急性肝损伤动物模型,分别灌胃给予不同组小鼠相应剂型及剂量的红景天超微粉和乙醇提取物,连续4 d,末次给药1 h后测定小鼠血清丙氨酸转移酶(ALT)及天冬氨酸转氨酶(AST)含量,肝脏匀浆中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时行肝组织切片,染色,观察病理变化.[结果]红景天超微粉和乙醇提取物均可明显降低急性肝损伤小鼠血清ALT,AST及肝组织匀浆中MDA含量,提高SOD活性.[结论]红景天超微粉和乙醇提取物对小鼠急性肝损伤均具有保护作用,而红景天超微粉的作用优于红景天乙醇提取物.     

PCNA在CCl4诱导的小鼠急性肝损伤组织中的表达

目的研究增殖细胞核抗原(PCNA)在CCl4诱导小鼠急性肝损伤过程中的动态变化,以了解小鼠急性肝损伤过程肝脏再生的规律。方法试验共分10组:CCl4腹腔注射(浓度0.1%溶于食用油中,0.1 mL/10 g)诱导小鼠急性肝损伤3、6、12、243、03、6、42、485、4 h及对照组小鼠,每组10只小鼠。使用赖氏法检测各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平的变化趋势,用Western blotting方法检测CCl4诱导的小鼠肝损伤过程中PCNA蛋白的表达。结果与对照组小鼠相比,CCl4诱导小鼠急性肝损伤之后,小鼠血清ALT、AST明显呈变化趋势(P<0.05),先逐渐升高,36 h达到高峰,后逐渐减低;与对照组小鼠相比,CCl4诱导小鼠急性肝损伤之后肝脏PCNA蛋白的表达明显呈变化趋势(P<0.05),PCNA在CCl4处理后36、1、22、4 h明显降低,30 h时升高,42 h至最高点,后又逐渐减低,54 h时恢复到正常水平。结论 PCNA在CCl4诱导小鼠急性肝损伤过程中有显著的变化,在CCl4诱导小鼠急性肝损伤的过程中肝脏再生具有明显的规律。     

褪黑素减轻对乙酰氨基酚的急性肝脏毒性

目的探讨褪黑素(MT)对对乙酰氨基酚(APAP)引起的急性肝脏毒性的保护作用。方法雄性ICR成年健康小鼠随机分为对照(CON)组、MT组、APAP组和APAP+MT组。APAP组经腹腔注射APAP(300 mg/kg);APAP+MT组经腹腔注射给予不同剂量MT(1.25、5、20 mg/kg),30 min后再经腹腔注射APAP。APAP处理4 h后取血清测血液生化指标丙氨酸转氨酶(ALT),用免疫组化法检测肝脏3-硝基酪氨酸(3-NT)水平,用蛋白印迹法测肝脏JNK磷酸化水平。结果与CON组比较,APAP组肝脏系数和ALT水平显著升高(P<0.01,P<0.05),肝脏JNK磷酸化水平上升(P<0.01),3-NT水平升高,而肝脏还原性谷胱甘肽(GSH)含量下降(P<0.01);MT对抗APAP引起的ALT升高(P<0.05),抑制肝脏JNK磷酸化(P<0.01),而对APAP引起的蛋白硝化和GSH耗竭无明显改善。结论 MT通过抑制APAP引起的JNK磷酸化减弱其急性肝脏毒性作用。     

抑制IP3R-Ca2+途径对对乙酰氨基酚所致肝损伤及其线粒体内质网结构偶联的影响

目的 探讨抑制肌醇-1,4,5-三磷酸受体(IP3R)-Ca²⁺途径对对乙酰氨基酚(APAP)所致肝损伤及其线粒体内质网结构偶联(MAMs)的影响。方法 40只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、模型组、IP3R抑制剂(2-APB)组、钙离子螯合剂(BAPTA-AM)组，每组10只。模型组、2-APB组、BAPTA-AM组单次腹腔注射APAP(300 mg/kg)。注射APAP前30 min, 2-APB组腹腔注射2-APB(20 mg/kg),BAPTA-AM组腹腔注射BAPTA-AM(2.5 mg/kg)。腹腔注射APAP 24 h后处死各组小鼠。测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平；HE染色观察肝脏病理变化；透射电镜观察肝细胞中线粒体、内质网结构及MAMs变化；测定肝组织匀浆中的Ca²⁺水平；Western blot测定肝组织中线粒体融合蛋白1(MFN1)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、1,4,5-三磷酸肌醇受体1(IP3R1)、葡萄糖调节蛋白75(GRP75)蛋白表达水平。结果 与正常对...