miR-138-5p 靶向 TCF4调节眼葡萄膜黑色素瘤细胞的恶性生物学行为

目的 探讨miR-138-5p与转录因子4(TCF4)对眼葡萄膜黑色素瘤MuM-2B细胞恶性生物学行为的影响.方法 miR-138-5p mimic 和 pcDNA-TCF4分别或共转染 MuM-2B细胞,构建小鼠体内移植瘤模型.RT-qPCR检测细胞转染效率;生物信息学软件预测miR-138-3p和TCF4靶向位点;双荧光素酶报告基因实验验证靶向关系;克隆形成实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞侵袭能力;Western blot检测TCF4及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达;免疫组化检测Ki67、VEGF、Vimentin在肿瘤组织中的表达.结果 与对照组相比,转染组miR-138-5p和TCF4均升高(P＜0.05),且miR-138-5p和TCF4是靶向关系.miR-138-5p过表达通过靶向TCF4抑制MuM-2B细胞增殖和侵袭力并下调E-cad-herin和Vimentin蛋白表达量,上调N-cadherin蛋白表达量(P＜0.05).在体内移植瘤中,miR-138-5p过表达减轻肿瘤重量(P＜0.05),miR-138-5 p 过表达下调 Ki67、VEGF、Vim-entin在肿瘤组织中阳性细胞率(P＜0.05).结论 miR-138-5p过表达可下调TCF4水平,进而抑制葡萄膜黑色素瘤MuM-2B细胞增殖、侵袭及EMT.     

模拟失重下miR-138-5p靶向SIRT1负调控成骨细胞分化的研究

背景 机械刺激对于维持骨骼重塑和平衡至关重要,机械卸载引起的骨骼系统损伤是长期航天飞行的主要局限性之一.研究表明微小RNA(miRNA)可通过调控与骨形成相关的基因和信号通路调节成骨细胞功能.目的 探究模拟失重下miR-138-5p/SIRT1信号通路对成骨细胞分化的影响,为失重性骨质丢失的在体靶向干预寻求治疗靶点.方法 利用2D回转器对前成骨细胞MC3T3-E1进行模拟失重处理,验证沉默信息调节因子2相关酶I(SIRT1)及miR-138-5p在模拟失重下的表达发生变化;向MC3T3-E1细胞中转染miR-138-5p mimic、inhibitor、pcDNA3.1(+)-SIRT1及相应的阴性对照进行功能验证;向MC3T3-E1细胞中转染inhibitor-NC、miR-138-5p inhibitor后模拟失重处理48 h进行挽救实验;采用qRT-PCR方法检测miRNA及SIRT1、Runx2、Osx的mRNA表达变化;采用Western blot方法检测SIRT1、Runx2、Osx的蛋白表达变化;采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测和ALP染色方法检测成骨细胞分化能力的变化.结果 模拟失重下,MC3T3-E1细胞中Runx2、SIRT1的mRNA及蛋白均表达下降(P<0.01或P<0.05);转染miR-138-5p mimic和inhibitor后,qRT-PCR、Western blot、ALP活性及ALP染色检测均表明过表达miR-138-5p能够显著抑制成骨细胞分化,而抑制miR-138-5p能够促进MC3T3-E1细胞分化(P<0.05或P<0.01).miR-138-5p mimic与pEX-SIRT1共转染实验表明miR-138-5p通过抑制SIRT1负调控成骨细胞分化(P<0.01).此外,抑制miR-138-5p可以降低模拟失重对成骨细胞的分化抑制,表现为促进SIRT1、Runx2、Osx mRNA和蛋白表达(P<0.01).结论 SIRT1表达在模拟失重下下调,而miR-138-5p表达上调;miR-138-5p通过直接靶向SIRT1调控Runx2、Osx的mRNA及蛋白表达,抑制成骨细胞分化;此外,抑制miR-138-5p/SIRT1通路可以部分降低模拟失重对成骨细胞的分化抑制,miR-138-5p可以作为潜在的干预靶点.     

circGFRA1靶向miR-138-5p调控宫颈癌SiHa细胞生物学行为

摘要:目的 探讨circGFRA1调控宫颈癌细胞生物学行为的分子机制。方法 收集2020年3月至2020年7月浙 江大学医学院附属妇产科医院收治的45例宫颈癌患者的癌组织及其癌旁组织标本,采用qRT-PCR 法检测circGFRA1 与 miR-138-5p的表达量。体外培养人宫颈癌SiHa细胞,随机分为si-NC组、si-circGFRA1组、si-circGFRA1+anti-miRNC组、si-circGFRA1+anti-miR-138-5p组。采用双荧光素酶报告实验检测circGFRA1与 miR-138-5p的靶向关系。检 测和比较各组的细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力、细胞凋亡、Bax及 Bcl-2蛋白表达量。结果 宫颈癌组织中circGFRA1表达上调,miR-138-5p表达下调(均 P<0.05)。circGFRA1可负向调控 miR-138-5p的表达。转染si-circGFRA1可抑制增殖、克隆形成、迁移、侵袭,并促进细胞凋亡。共转染si-circGFRA1和anti-miR-138-5p可减弱si-circGFRA1对SiHa细胞生物学行为的作用。结论 干扰circGFRA1表达可通过促进 miR-138-5p表达而抑制宫颈癌细胞增 殖、克隆形成、迁移、侵袭及促进细胞凋亡。     

miR-138-5p靶向调控程序性死亡配体-1对肺腺癌细胞的增殖、迁移和上皮间质转化的影响

目的：探讨微小RNA-138-5p(miR-138-5p)靶向调控程序性死亡配体-1(PD-L1)对肺腺癌细胞（H1299）增殖、迁移及上皮间质转化（EMT）的影响。方法：选择2019年3月至2021年5月在本院手术治疗的肺腺癌患者42例,术中取肺腺癌组织与癌旁组织,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测肺腺癌组织、癌旁组织与肺腺癌细胞H1299、HCC827、A549、H1975及支气管上皮细胞BEAS-2B中miR-138-5p表达水平;将H1299细胞分为Control组、miR-138-5p过表达（miR-138-5p mimics）组及阴性对照（miR-NC）组、抑制PD-L1表达（si-PD-L1）组及阴性对照（si-NC）组、miR-138-5p mimics+空载质粒（pcDNA）组和miR-138-5p mimics+PD-L1过表达（PD-L1）组。双荧光素酶报告基因检测miR-138-5p与PD-L1的靶向关系,CCK-8法与细胞划痕实验检测H1299细胞增殖与迁移,Western blotting法检测H1299细胞PD-L1、增殖细胞核抗原（PCNA）、基...     

老年急性脑梗死患者血清circTTC3和miR-138-5p水平变化及意义

目的 探究老年急性脑梗死(ACI)患者血清环状RNA TTC3(circTTC3)和微小RNA-138-5p(miR-138-5p)水平变化及意义。方法 选取2021年9月—2023年9月四川大学华西医院老年医学中心/干部医疗科诊治老年ACI患者128例(ACI组),根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)分为轻度亚组42例、中度亚组49例和重度亚组37例,同期医院门诊体检的健康人员120例作为健康对照组;采用实时荧光定量PCR法测定血清circTTC3和miR-138-5p表达水平,Pearson法分析老年ACI患者血清circTTC3和miR-138-5p的相关性,Spearman法分析老年ACI患者血清circTTC3和miR-138-5p表达水平与NIHSS评分相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circTTC3和miR-138-5p表达水平对老年ACI患者神经缺损程度的诊断价值。结果 与健康对照组比较,ACI组血清circTTC3表达水平升高,miR-138-5p降低(t/P=17.207/<0.001、16.239/<0.001)。血清circTTC...     

miR-138-5p在癌症发展中的研究进展

随着癌症发病率的逐年增加,癌症已经成为全世界国家的主要死亡原因。早期诊断、早期治疗对癌症发病起到最关键的作用。癌症的发生不仅是由于体内的基因突变,其表观遗传学的紊乱调控也是其发生的重要原因。近年来,micro RNAs在多种疾病中的生物进程受到关注,miR-138-5p在癌症的发生发展过程中可以起到抑癌基因的作用进而抑制癌细胞的侵入、转移和凋亡。在靶向治疗的应用方面,miR-138-5p在癌症的发生发展和诊治过程中发挥着重要的作用。本文就miR-138-5p在癌症发展中的研究进展作一简要综述。     

miR-138-5p调控CDC5L表达对胶质瘤细胞增殖、侵袭的影响

目的 探讨微RNA (microRNA,miR)-138-5p对胶质瘤细胞增殖、侵袭的调控机制。方法 体外培养人胶质瘤U251细胞,采用随机数字表法将其分为对照组(n=6)、miR-NC组(n=6)、miR-138-5p组(n=6)、miR-138-5p+pc-NC组(n=6)、miR-138-5p+pc-细胞分裂周期5样(cell division cycle 5-like,CDC5L)组(n=6)。采用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)检测细胞中miR-138-5p、CDC5L mRNA水平,检测细胞增殖活力、细胞周期和细胞凋亡以及细胞侵袭能力,检测细胞中CDC5L和侵袭相关蛋白表达。结果 miR-138-5p的过表达可下调CDC5L mRNA和蛋白水平,降低胶质瘤细胞增殖活力和侵袭能力,并诱导G2/M期细胞周期停滞,促进细胞凋亡,降低N-钙粘蛋白、波形蛋白水平,升高E-钙粘蛋白水平,差异均有统计学意义(P<0.05);上调CDC5L表达可明显逆转过表达miR-138-5p对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响(P<0....     

miRNA-138-5p靶向抑制HIF-1α表达对乳腺癌MCF-7细胞顺铂耐药的逆转作用及其机制

目的:探讨miRNA-138-5p过表达对人乳腺癌MCF-7细胞顺铂(DDP)耐药的影响,并阐明其可能机制.方法:采用浓度梯度递增法诱导MCF-7细胞,建立DDP耐药细胞株MCF-7/DDP,再将miR-138-5p mimics或HIF-1α过表达质粒分别或同时转染至MCF-7/DDP细胞中.将细胞分为阴性对照组(N...     

MIR-138-5p 通过靶向组蛋白去乙酰化酶调节心脏 肥大

目的:探究MIR-138-5p 对心脏肥大的影响及其机制。方法:首先构建体外心脏肥大的模型,HE 染色、α-肌动蛋白染色 和RT-PCR 方法,分别检测模型大鼠心脏的横断面积和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）处理的心肌细胞（H9c2）的表面积和心肌细胞中 MIR-138-5p mRNA 表达情况;MIR-138-5p-mimic 转染AngⅡ处理过的H9c2 细胞,α-肌动蛋白染色和Western 印迹分别检测 心肌细胞的表面积和心肌肥大标志物的蛋白表达水平;采用TargetScan 在线软件筛选miR-138-5p 的潜在靶基因,并进一步验 证。MIR-138-5p-mimic、pcDNA- HDAC4共转染AngⅡ处理过的H9c2 细胞,α-肌动蛋白染色和Western 印迹法分别检测心肌 细胞的表面积和心肌肥大标志物的蛋白表达水平。结果:相对于Sham 组,模型大鼠的心脏体积及心脏横截面均明显增大,心肌 细胞中的MIR-138-5p mRNA 表达水平明显降低（F=21.578,P<0.001）;相对于Con 组,AngⅡ组心肌细胞的表面积明显增大,且 MIR-138-5p mRNA 表达水平明显降低（F=23.790,P<0.001）。相对于AngⅡ+miR-NC 组,AngⅡ+miR-mimic 组心肌细胞的表面 积（F=8.325,P<0.01）、心肌肥大标志蛋白表达水平（F=9.532,P<0.01）和心肌细胞中HDAC4 mRNA表达水平明显降低（F=25.530, P<0.001）; 相对于MIR-138-5p-mimic+pcDNA-Con 组,MIR-138-5p- mimic+pcDNA-HDAC4 组心肌细胞的表面积明显减小 （F=10.134,P<0.01）,心肌肥大标志蛋白表达水平明显升高。结论:MIR-138-5p 通过靶向组蛋白脱乙酰基酶-8（HDAC4） 调节心脏肥大反应。     

miR-96-5p靶向PTEN激活PI3K-Akt信号通路抑制非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭实验研究

目的:探讨miR-96-5p对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移、侵袭和增殖的作用及分子机制。方法:在人NSCLC细胞系A549中转染miR-96-5p类似物(miR-96-5p mimics)、阴性对照(NC mimics)或miR-96-5p抑制剂(miR-96-5p inhibitor)、阴性对照(NC inhibitor),通过CCK-8法检测细胞的增殖能力,通过划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞的迁移侵袭能力;采用荧光素酶报告基因实验检测miR-96-5p与磷酸酯酶与张力蛋白同源物(PTEN)启动子区DNA的结合;采用蛋白质免疫印迹实验检测miR-96-5p对PTEN/PI3K/Akt信号通路的调控作用。结果:抑制miR-96-5p, NSCLC细胞的迁移、侵袭和增殖能力降低,过表达miR-96-5p促进NSCLC细胞的迁移、侵袭和增殖(均P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-96-5p能与PTEN启动子区DNA结合;蛋白质免疫印迹实验结果表明,抑制miR-96-5p, PTEN表达升高、p-Akt的表达降低,过表达miR-96-5p后,PTE...     

碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌的联合药敏研究

目的 评价头孢哌酮/舒巴坦(CFS)与利福平(RFP)、米诺环素(MIN)及左氧氟沙星(LEV)对临床分离碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌(CRAB)的体外联合抑菌作用.方法 采用棋盘法设计,微量肉汤稀释法测定抗菌药物对60株临床分离的CRAB的最低抑菌浓度(MIC),并计算抑菌指数(FIC指数)判断联合抑菌效应.结果 CFS与RFP联用后,80％为协同作用,16.7％为相加作用,3.3％为无关作用,无拮抗作用;CFS与MIN联用后,11.7％为协同作用,45％为相加作用,35％为无关作用,8.3％为拮抗作用;CFS与LEV联用时,6.7％为协同作用,40％为相加作用,53.3％为无关作用,无拮抗作用.上述药物联用后,各药MIC50均明显降低,浓度-累积抑菌率曲线均表现为左移.结论 CFS与RFP、MIN联用对CRAB体外联合抗菌效应主要表现为协同和相加作用.CFS与LEV联用主要表现为无关作用,但仍有近半数菌株表现为协同和相加作用.     

士的宁对氯胺酮催眠作用的影响

目的 观察士的宁对氯胺酮催眠作用的影响,探讨士的宁敏感的甘氨酸受体与氯胺酮催眠作用的关系.方法 小鼠腹腔注射氯胺酮（150 mg·kg-1）建立催眠模型,在催醒实验中观察侧脑室注射不同剂量（1、2、4 μg）士的宁对小鼠睡眠时间的影响.结果 侧脑室注射不同剂量士的宁对氯胺酮麻醉小鼠的睡眠时间均无显著影响（P〉0.05）.结论 士的宁对氯胺酮催眠作用影响不大,士的宁敏感的甘氨酸受体可能不是氯胺酮催眠作用的主要靶位.     

面神经麻痹的外科治疗

目的 :研究面神经麻痹的治疗方法及时机。方法 :回顾分析 89例面神经麻痹的临床资料。结果 :6 1例行面神经减压术 ,4 8例有效。 8例行面神经吻合术 ,7例有效。 7例行面神经移植术 ,6例有效。总有效率为 6 7.1%。未行手术治疗 13例 ,仅 2例有效 ,有效率为 15 %。结论 :精确适时的手术是治疗面神经麻痹的有效方法。     

平咳喘颗粒主要药效学研究

目的:观察平咳喘颗粒主要药理作用.方法:采用枸椽酸钠引咳试验观察对豚鼠的止咳作用;采用酚红排泌试验观察对小鼠的化痰作用;采用组织胺喷雾试验观察对豚鼠的平喘作用.结果:平咳喘颗粒具有止咳、排痰、平喘作用.结论:平咳喘颗粒可用于久咳不愈的变异性哮喘症的治疗.     

超声治疗外阴白色病变的疗效观察与护理

目的：探讨超声治疗外阴白色病变的疗效观察与护理。方法：对收治的30例患者,按＂外阴白色病变临床疗效评分表＂进行疗效观察。结果：近期疗效明显,远期疗效有待进一步观察,其临床应用和研究正在深入进行。结论：超声治疗外阴白色病变是一种新的、有效的治疗技术与方法,为了更好的达到预期疗效,临床治疗中作好护理工作十分重要。     

SUNDOM-300 I型半导体激光治疗机治疗肩关节周围炎90例疗效观察

目的　总结SUNDOM - 30 0I型半导体激光治疗机对肩关节周围炎的疗效。方法　取风池、风府、风门穴 ,功率 90 0mW ,肩井、肩三贞、肩外俞、曲池穴功率 4 0 0～ 4 5 0mW ,时间 6～ 1 0min ,1次 /d ,1 0次为 1个疗程 ,并设对照组。结果　治疗组 90例中 ,痊愈 73例 ,显效 1 0例 ,好转 5例 ,无效 2例 ;对照组 78例中 ,治愈38例 ,显效 1 8例 ,好转 1 3例 ,无效 9例。 2组治愈率分别 81 1 %和 4 8 7%。结论　半导体激光治疗机操作简单 ,对肩关节周围炎症疗效显著     

轮叶党参醇提水溶部分抗自由基作用研究

目的探讨轮叶党参醇提水溶部分体外抗自由基的效果。方法采用分光光度法,进行体外轮叶党参醇提水溶部分抗自由基的实验。结果在单纯加入轮叶党参醇提水溶部分的情况下,轮叶党参醇提水溶部分各浓度组的吸光值没有明显变化,与H2O2组比较,没有统计学差异;加入S9的情况下,发现轮叶党参醇提水溶部分各浓度组的吸光值与H2O2组有统计学差异,并且呈现剂量效应反应,并且在加大H2O2的情况下,轮叶党参醇提水溶部分仍旧能发挥抗自由基作用。结论轮叶党参醇提水溶部分具有较强的抗自由基的作用,该作用是经生物活化后发生的。     

山茱萸强心作用的实验观察

目的 :明确山茱萸的强心作用 ,为开发疗效肯定且安全无毒、价格低廉的中医急症新药奠定基础。方法 :采用大鼠离体乳头肌实验法及家兔无创性心功能测定法 ,观察了山茱萸水煎药液对动物离体及在体心脏的强心作用。结果 :山茱萸能明显增强大鼠离体乳头肌收缩强度 ,改善家兔左室功能 ,为前人的用药经验提供了现代药理学基础。     

多维康复对脑瘫患儿生存质量的影响

目的探讨多维康复方法对脑瘫患儿生存质量影响。方法以2008～2010年在本院就诊的60例2～6岁的脑瘫患儿为研究对象,随机分为传统康复组和多维康复组,每组各30例,分别采用传统康复与多维康复进行康复治疗,以1年时间为期限,观察其运动疗效、心理疗效、生存质量疗效。心理疗效以PSQ为测评工具,生存质量疗效采用PedsQL4.0评分方法。结果经过1年治疗观察,多维康复组的运动疗效、心理疗效、生存质量疗效优于传统康复组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论多维康复治疗能够全面提高患儿的生活质量。     

糖皮质激素治疗突发性聋进展

为评价糖皮质激素治疗突发性聋的疗效及安全性。通过循证医学评价数据库、PubMed等数据库机检和检索中文耳鼻咽喉杂志,对突聋的文献进行分析。对于轻度、低频听力损失的突聋,激素并不优于其他治疗;抗病毒加激素治疗不能提高激素的有限疗效,无循证医学依据证明某一种激素的疗效更佳;激素与抗凝、神经营养类药治疗缺乏随机对照研究,临床报道的疗效相互矛盾;局部应用激素的疗效需多中心的随机对照研究,才能评价其真正作用。