大肠癌中自噬相关蛋白与JAK2/STAT3 信号通路的相关性

目的 探讨大肠癌发生、发展过程中自噬相关蛋白LC3、p62 与JAK2/STAT3 信号通路的关系。 方法 采用免疫组织化学法检测93 例大肠癌组织和癌旁组织中LC3、p62、p-JAK2 和p-STAT3 的蛋白表 达,并对其阳性表达率进行比较分析。结果 大肠癌中LC3、p-JAK2 和p-STAT3 阳性表达率高于癌旁组织 （P <0.05）,高中分化大肠癌LC3、p-JAK2 和p-STAT3 蛋白阳性表达率低于低分化大肠癌（P <0.05）,有淋 巴结转移患者LC3、p-JAK2 和p-STAT3 蛋白阳性表达率高于无淋巴结转移（P <0.05）。大肠癌p62 蛋白阳 性表达率低于癌旁组织（P <0.05）,高中分化大肠癌p62 蛋白阳性表达率高于低分化大肠癌（P <0.05）,有淋 巴结转移患者p62 蛋白阳性表达率低于无淋巴结转移（P <0.05）。LC3 蛋白表达与p-JAK2、p-STAT3 蛋白 表达均呈正相关（r s=0.315 和0.295,P <0.05）,而p62 蛋白与p-JAK2、p-STAT3 蛋白表达均呈负相关（r s=-0.320 和-0.326,P <0.05）。结论 LC3、p62 在大肠癌中表达增加可能与JAK2/STAT3 信号通路有关,为大肠癌的 发病机制研究提供可能的理论基础。     

PTEN和PI3K/Akt在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义

目的：通过检测卵巢浆液性肿瘤（OST）PTEN、PI3K以及Akt磷酸化,探讨OST的发生机制。方法：应用免疫组织化学法,检测5例卵巢正常上皮（NOT）、10例浆液性囊腺瘤（OSA）、18例浆液性交界性肿瘤（OSBT）、38例浆液性癌（OSC）石蜡包埋组织中PTEN、PI3Kp110α和p-AktSer473蛋白的表达,并结合OSC周围组织浸润、淋巴结转移情况进行统计分析。结果：（1）PTEN蛋白在OSC中的阴性率高于OSBT、OSA和NOT,差异有统计学意义（P〈0.05）;（2）PTEN蛋白与OSC浸润及淋巴结转移的关系均无统计学意义（P〉0.05）;（3）PI3Kp110α蛋白表达的阳性率在OSC和OSBT中高于OSA和NOT,差异有统计学意义（P〈0.01）,p-AktSer473蛋白表达的阳性率在OSC和OSBT中高于OSA和NOT,差异具有统计学意义（P〈0.05）;（4）PI3Kp110α和p-AktSer473蛋白与OSC浸润及淋巴结转移的关系均无统计学意义（P〉0.05）;（5）在OSC中,PTEN和PI3Kp110α、PTEN和p-AktSer473蛋白表达间均为负相关（P〈0.05）,而PI3Kp110α与p-AktSer473蛋白表达间为正相关（P〈0.05）。结论：PTEN蛋白表达的缺失伴随PI3K/Akt信号通路过度激活,可能共同参与OST的发生、发展。     

丝素蛋白与丝素蛋白/羟基磷灰石复合材料体外细胞相容性的比较

目的探讨丝素蛋白（SF）与丝素蛋白/羟基磷灰石复合材料（SF/HA）的体外细胞相容性,为组织工程提供理想的生物支架材料。方法将小鼠的骨髓间充质干细胞（C3H10T1/2）接种于上述两种生物材料上,运用四唑盐比色试验（MTT法）检测细胞的增殖能力,利用倒置显微镜和扫描电镜观察细胞在材料上的生长形态。结果 C3H10T1/2在SF与SF/HA上都能很好地黏附、生长和增殖。SF、SF/HA和C3H10T1/2都有良好的细胞相容性。结论 3%SF、6%SF、600%SF/HA3组多孔材料的体外细胞相容性最好。     

脑胶质瘤中IMP3的表达与PI3K/AKT信号通路相关性及靶向干预

目的 探讨胰岛素样生长因子II mRNA结合蛋白3（insulin-like growth factor-II mRNA-binding protein 3,IMP3）、磷酸肌醇三磷酸激酶-丝氨酸（phosphatidylinsitol 3-OH kinase-RAC-alpha serine,PI3K）、苏氨酸蛋白激酶（threonine-protein kinase,AKT）蛋白在人脑胶质瘤组织及细胞中的表达及相关性。 方法 采用免疫组织化学方法检测53例人脑胶质瘤组织及20例非瘤脑组织中IMP3,PI3K及AKT蛋白的表达情况;采用Westen-Blot及RT-PCR方法检测瞬时干扰IMP3基因后的胶质瘤U138细胞株IMP3、PI3K的蛋白及基因表达情况;检测抑制剂LY294002抑制U138细胞株的PI3K/AKT信号通路后相关蛋白IMP3、PI3K的表达情况。 结果 人脑胶质瘤组织中IMP3（P均=0.000）, PI3K（P均=0.000）和AKT（P均=0.000）蛋白的表达均高于非瘤脑组织中的表达,且表达程度（中重度阳性表达率,P均=0.000）随肿瘤病理级别升高而增高。胶质瘤U138细胞株干扰IMP3基因后,IMP3蛋白（P=0.038）及基因（P=0.031）的表达均降低,PIK3蛋白（P=0.019）及基因（P=0.023）的表达均降低,LY294002抑制U138细胞株的PI3K/AKT信号通路后,PI3K蛋白（P=0.039）及基因（P=0.035）的表达均降低,而IMP3的蛋白（P=0.907）及基因（P=0.102）表达没有明显变化。 结论 IMP3、PI3K、AKT蛋白的表达与胶质瘤的组织病理分级、肿瘤细胞增殖密切相关,IMP3与PI3K/AKT具有相关性,且有望成为治疗胶质瘤的一个新靶点。     

二苯乙烯苷通过调节GSK-3β/PP2A活性干预Aβ25-35致拟痴呆大鼠模型Tau蛋白磷酸化进程

目的 探讨二苯乙烯苷（2,3,5,4’-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glycoside,TSG）通过调节Aβ25-35致拟痴呆大鼠模型脑组织中糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、蛋白磷酸酯酶-2A(PP2A)、环磷酸腺苷依赖的蛋白激酶（PKA）的表达干预Tau蛋白磷酸化的机制。方法 采用Morris水迷宫定位航行实验对50只24月龄老年雄性SD大鼠进行筛选,剔除天生痴呆大鼠后,筛选出36只,随机分为正常组、假手术组、模型组、TSG低剂量组（0.033g/kg）、TSG中剂量组（0.1g/kg）、TSG高剂量组（0.3g/kg）,每组6只。大鼠手术造模14d后,TSG各剂量组大鼠按相应剂量灌胃药物（连续28d）;其余3组大鼠每天灌胃等量生理盐水。灌胃结束后,采用避暗箱实验对大鼠学习记忆能力进行检测;免疫荧光法（IF）检测各组大鼠脑组织GSK-3β蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法（qRT-PCR）检测GSK-3β、PP2A、PKA mRNA表达情况;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测Tau、PP2A、PKA蛋白表达情况。结果 正常组、假手术...     

小窝蛋白-3/RISK 介导HBO-PC 对 心肌的保护作用研究

目的 探究高压氧预处理（HBO-PC）减轻心肌缺血再灌注（I/R）损伤的具体分子机制。 方法 对心肌细胞予以HBO-PC 处理,并复制缺氧复氧（H/R）模型,用试剂盒测定丙二醛（MDA）、超 氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）及一氧化氮NO 的含量,Western blot 检测促/ 抗凋亡蛋白、 蛋白激酶Cε（PKCε）、小窝蛋白-3（Cav-3）、再灌注损伤挽救激酶（RISK）通路中蛋白及其磷酸化水 平的变化,免疫共沉淀和免疫荧光染色检测PKCε 与Cav-3 的结合;同时使用PKC 抑制剂Chelerythrine （CHE）和RISK 通路抑制剂进一步验证HBO-PC 对心肌细胞I/R 损伤的作用机制。结果 H/R 模型模 拟I/R 损伤过程。HBO-PC 降低MDA 和LDH 含量、Caspase-3 活性和Bax 的表达,增加SOD 和NO 含 量、Bcl-2 表达,抑制心肌细胞凋亡,减轻I/R 损伤。同时,HPO-PC 促进PKCε 活化及其与Cav-3 的结 合,增加Cav-3 蛋白表达,以及RISK 通路中胞外信号调节激酶（ERK）1/2、蛋白激酶B（Akt）、磷脂酰 肌醇3- 羟激酶（PI3K）和下游效应激酶糖原合酶激酶（GSK）3β 的磷酸化水平;CHE 能够抑制HPOPC 的作用。RISK 通路抑制剂增加Caspase-3 活性和Bax 表达,减少Bcl-2 表达,阻断HBO-PC 对心肌细 胞凋亡的拮抗作用。结论 HBO-PC 可能通过调控PKCε/Cav-3/RISK 通路,抑制心肌细胞凋亡,抵抗 心肌I/R 损伤,发挥心肌保护作用。     

沉默重组蛋白2对NCI-H1688细胞的抑制作用及其Wnt/β连环蛋白信号通路机制

目的：探讨T细胞淋巴瘤常见重排蛋白2（Frat2）通过Wnt/β连环蛋白（β-catenin）信号通路对小细胞肺癌NCI-H1688细胞增殖的影响,阐明其可能机制。方法：选取生长状态良好的人小细胞肺癌NCI-H1688细胞和正常支气管上皮样细胞HBE细胞,采用Western blotting法和逆转录实时荧光定量-聚合酶链反应（Real-Time RT-qPCR）法分别检测NCI-H1688细胞和HBE细胞中Frat2蛋白及mRNA表达水平。NCI-H1688细胞随机分为空白对照组、阴性对照组、Frat2-siRNA组和Frat2-siRNA+XAV组。空白对照组细胞不转染,阴性对照组细胞转染阴性对照慢病毒,Frat2-siRNA组转染Frat2-siRNA慢病毒,Frat2-siRNA+XAV组转染Frat2-siRNA慢病毒并同时加入4 μmol·L^-1Wnt信号通路抑制剂XAV939。采用Western blotting法和Real-Time RT-qPCR法分别检测转染后各组细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平,采用MTT法检测各组细胞增殖活性,采用流式细胞术检测不同细胞周期细胞百分率,采用Western blotting法检测细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）、c-myc、细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、β-catenin和磷酸化糖原合成酶激酶3（pGSK-3β）蛋白表达水平。结果：与HBE细胞比较,NCI-H1688细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。与空白对照组和阴性对照组比较,Frat2-siRNA组NCI-H1688细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平明显升高（P<0.05）;空白对照组与阴性对照组NCI-H1688细胞中Frat2蛋白和mRNA表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。与空白对照组和阴性对照组比较,Frat2-siRNA组细胞增殖活性降低（P<0.05）,G₀/G₁期细胞百分率升高（P<0.05）,S期和G₂/M期细胞百分率降低（P<0.05）,PCNA、c-myc、Cyclin D1、β-catenin和pGSK-3β蛋白表达水平降低（P<0.05）;与Frat2-siRNA组比较,Frat2-siRNA+XAV组细胞增殖活性降低（P<0.05）,G₀/G₁期细胞百分率升高（P<0.05）,S期和G₂/M期细胞百分率降低（P<0.05）,PCNA、c-myc、Cyclin D1、β-catenin和pGSK-3β蛋白表达水平降低（P<0.05）;空白对照组与阴性对照组上述各指标比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论：沉默Frat2可抑制小细胞肺癌细胞增殖,其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。     

滋养细胞分泌14-3-3 τ蛋白对子宫内膜基质细胞表达整合素αvβ3蛋白的影响

 目的 探讨滋养细胞分泌14-3-3 τ蛋白对子宫内膜基质细胞容受性分子整合素 α_vβ₃表达的影响。方法 RNA干扰技术下调人绒癌滋养细胞株BeWo细胞14-3-3 τ蛋白的表达。Western blot法检测BeWo细胞及培养液中14-3-3 τ蛋白的表达。建立14-3-3 τ蛋白表达下调的BeWo细胞与人子宫内膜基质细胞（endometrial stromal cells,ESC）的共培养体系,Western blot法检测共培养体系培养液中14-3-3 τ蛋白的表达,以及ESC容受性分子整合素α_vβ₃的表达变化。结果 与siRNA阴性对照组相比,特异性siRNA显著下调BeWo细胞和培养液中14-3-3 τ蛋白的表达（P<0.05）。共培养体系中,与siRNA阴性对照组相比,与14-3-3 τ蛋白表达下调的BeWo细胞共培养的ESC整合素α_vβ₃的表达显著上调（P<0.05）,提示ESC容受性增加。与单独培养的ESC相比,培养液中添加14-3-3 τ重组蛋白的ESC培养24 h后整合素α_vβ₃的表达显著下调（P<0.05）,提示ESC容受性降低。 结论 14-3-3 τ蛋白可以被滋养细胞分泌至细胞外,并可能发挥调控ESC容受性的作用,但其作用机制仍需进一步研究。     

增殖细胞核抗原和细胞周期依赖性激酶抑制剂p21WAF1/CIP1蛋白在大鼠肾上腺细胞体外原代培养中的表达及其意义

目的：探讨增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞周期依赖性激酶抑制剂p21 WAF1/CIP1蛋白在大鼠肾上腺细胞体外原代培养中的表达及其意义。方法：用SP免疫组化法检测大鼠肾上腺细胞培养第3、5、7、9、11 d的PCNA和p21蛋白表达强度。结果：在肾上腺细胞体外培养中,第3 d（（18±3）%）、5 d（（38±5）%）、7 d（（70±65）%）PCNA蛋白表达逐渐增强,第9（（50±3）%）、11 d（（39±2）%）与第7 d比减弱（P〈0.05）。第3 d（（43±5）%）、5 d（（35±2）%）、7 d（（21±3）%）p21 WAF1/CIP1蛋白表达逐渐减弱,第9 d（（39±3）%）、11 d（（52±4）%）与第7 d比重新增强（P〈0.05）。结论：肾上腺细胞体外原代培养在第7 d PCNA蛋白表达最强,p21 WAF1/CIP1蛋白表达最弱,肾上腺细胞增殖也最旺盛。     

敲除Sirt3后激活自噬对阿尔茨海默病有保护作用

目的: 探究Sirt3在阿尔茨海默病（AD）发生发展中的作用及可能机制。方法: 体内实验以C57BL/6野生型小鼠和Sirt3基因敲除小鼠为对象,采用腹腔注射D-半乳糖联合脑定位注射β-淀粉样蛋白（Aβ）_1-40建立AD小鼠模型。莫里斯（Morris）水迷宫实验、自发活动开场实验和悬尾实验观察造模前后小鼠学习记忆和焦虑抑郁状态的改变,免疫荧光染色观察脑内海马区域Aβ沉积情况,蛋白质印迹法检测小鼠脑组织中自噬和凋亡相关蛋白表达。体外实验选小鼠皮层原代细胞作为对象,给予Aβ_1-40建立AD体外模型,MTT法检测细胞活性。结果: 体内实验结果显示,野生型小鼠诱发AD后平台潜伏期延长（P < 0.05）,穿越平台次数减少、目标象限停留时间缩短（均P < 0.05）,提示造模后小鼠的学习记忆能力下降;而Sirt3敲除能够缓解AD所致的学习记忆障碍（均P < 0.05）。相较于野生型小鼠,Sirt3基因敲除小鼠脑内海马区域的Aβ沉积减少（P < 0.05）,凋亡蛋白cleaved caspase 3表达减少（P < 0.05）。另外,野生型小鼠诱发AD后LC3-Ⅱ和P62蛋白表达增加（均P < 0.05）,提示自噬流受阻;而Sirt3基因敲除小鼠诱发AD后LC3-Ⅱ蛋白表达增加,P62蛋白表达减少（均P < 0.05）,提示自噬被激活。小鼠皮层原代细胞AD模型中,Sirt3基因敲除的细胞较野生型细胞死亡减少（P < 0.05）;加用自噬抑制剂氯喹后,Sirt3基因敲除的保护作用消失（P < 0.05）。结论: Sirt3敲除对于D-半乳糖联合Aβ_1-40诱发的AD有保护作用,这种保护作用可能与自噬流活化有关。     

低氧激活ERK／JNK通路促进Smad2／3蛋白磷酸化诱导小鼠心脏成纤维细胞表型转换的实验研究

目的研究体外低氧诱导小鼠心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）向心脏肌成纤维细胞（cardiac myofibroblasts,CMFs）表型转换过程中,促分裂素原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases,MAPK）信号通路与Smad2／3蛋白磷酸化的关系。方法新生小鼠第1代CFs低氧（37℃、3％O2）无血清培养48h,免疫荧光检测α-SMA蛋白;新生小鼠CFs给予3种MAPK（ERK、JNK和p38）特异性抑制剂常氧培养1h,进行低氧培养30min,免疫印迹检测ERK、JNK、p38和Smad2／3蛋白磷酸化水平。结果①低氧显著上调新生小鼠CFs中α-SMA蛋白的表达;②低氧能显著地促进ERK、JNK和P38蛋白磷酸化,PD98059（ERK特异性抑制剂）、SP600125（JNK特异性抑制剂）和SB203580（P38特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的ERK、JNK和P38蛋白的磷酸化;③PD98059（ERK特异性抑制剂）和SP600125（JNK特异性抑制剂）能抑制低氧诱导的Smad2／3蛋白的磷酸化,SB203580（P38特异性抑制剂）无此作用。结论①低氧可诱导小鼠CFs细胞发生表型转化为CMFs;②ERK和JNK信号通路能调控Smad2／3蛋白的磷酸化表达;③MAPK和Smad信号通路可能参与低氧诱导的小鼠CFs细胞的表型转化。     

ALK-3、Pax-8基因抑制后大鼠心肌细胞中Smad1/5/8的表达

目的：抑制大鼠胚胎心肌细胞株中ALK-3、Pax-8基因的表达后,探索Smad1/5/8在其中所起的作用。方法：将H9C2（2-1）大鼠胚胎心肌细胞分为4组：针对Pax-8基因的小干扰RNA（Pax-8siRNA）组、ALK-3基因的小干扰RNA（ALK-3siRNA）组、阴性对照（NCsiRNA）组和空白对照组。前3组分别给予相应siRNA（5.0μL）和Lipofectamine2000（5.0μL）配制成的siRNA-脂质体复合物溶液,空白对照组给予等量的细胞培养基。采用qRT-PCR测定Pax-8和ALK-3的mRNA表达,Westernblot法检测磷酸化Smad1/5/8（p-Smad1/5/8）和半胱天冬酶（Caspase）-3表达。结果：与NCsiRNA组和空白对照组比较,Pax-8siRNA组的Pax-8mRNA表达分别下调50%（P＜0.05）和54%（P＜0.05）,ALK-3siRNA组的ALK-3mRNA表达分别下调49%（P＜0.05）和53%（P＜0.05）,而NCsiRNA组与空白对照组间差异无统计意义（P＞0.05）。与NCsiRNA组和空白对照组比较,ALK-3siRNA组p-Smad1/5/8的蛋白表达量分别下调58%（P＜0.05）和55%（P＜0.05）,Pax-8siRNA组p-Smad1/5/8的蛋白表达量差异无统计意义（P＞0.05）。NCsiRNA组与空白对照组间差异无统计意义（P＞0.05）。与NCsiRNA组和空白对照组比较,Pax-8siRNA组Caspase-3蛋白表达量分别上调76%（P＜0.05）和81%（P＜0.05）,ALK-3siRNA组Caspase-3的蛋白表达量分别上调135%（P＜0.05）和140%（P＜0.05）,而NCsiRNA组与空白对照组间差异无统计意义（P＞0.05）。结论：在大鼠胚胎心肌细胞株中对基因ALK-3、Pax-8干扰后能引起细胞凋亡蛋白Caspase-3明显增多,并且在ALK-3siRNA组发现Smad1/5/8蛋白磷酸化减少,而Pax-8siRNA组中未发现Smad1/5/8磷酸化减少,提示Smad1/5/8在基因ALK-3被干扰后引起细胞凋亡蛋白Caspase-3增多中起重要作用。     

磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路对生长激素介导的心肌成纤维细胞增殖的影响

目的探讨生长激素（GH）对心肌成纤维细胞（CFs）增殖的影响及其作用机制。方法以不同浓度的重组人生长激素（rhGH）（100、200、500、1 000 ng/ml）和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）抑制剂LY294002（10μmol/L）单独或同时作用CFs 48 h后,采用MTT法检测细胞增殖,Wertern Blot检测PI3K/Akt信号途径中Akt和磷酸化Akt（p-Akt）的蛋白水平的变化。结果 rhGH呈浓度依赖性的促进CFs的增殖;rhGH增加p-Akt的蛋白水平;LY294002可阻断rhGH诱导的CFs的增殖。结论生长激素可通过激活PI3K/Akt信号通路促进心肌成纤维细胞的增殖。     

PI3K/AKT/mTOR途径在慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌萎缩中的作用

目的研究PI3K/AKT/mTOR信号通路在慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用单纯熏香烟法复制慢阻肺大鼠动物模型。采用Western blot技术检测慢阻肺大鼠趾长伸肌中PI3K/AKT/mTOR信号通路中PI3K、总的及磷酸化的mTOR（t-mTOR,p-mTOR）、总的及磷酸化的GSK-3β（t-GSK-3β,p-GSK-3β）、总的及磷酸化的4E-BP1（t-4E-BP1,p-4E-BP1）、总的及磷酸化的p70S6K1（t-p70S6K1,p-p70S6K1）蛋白表达变化。结果 Western blot分析结果显示,大鼠趾长伸肌组织中PI3K的蛋白表达在两组间差异不显著（P〉0.05）;t-mTOR、p-mTOR、t-GSK-3β和p-GSK-3β的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组（P〈0.05,其中p-GSK-3β两组对照P〈0.01）;t-4E-BP1和t-p70S6K1的蛋白表达在两组间差异不显著（P〉0.05）,p-4E-BP1和p-p70S6K1的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组（P〈0.05）。结论慢阻肺大鼠趾长伸肌组织内PI3K/AKT/mTOR信号通路被激活,可能是骨骼肌萎缩的代偿机制之一。     

地塞米松对PI3K／Akt途径及哮喘大鼠气道炎症的调控

目的研究大鼠支气管哮喘（简称哮喘）模型PI3K／Akt信号转导途径与Th1／Th2的关系,探讨地塞米松对PI3K／Akt信号转导途径及大鼠气道炎症的调控。方法取SPF级雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、哮喘组、地塞米松组、渥曼宁青霉素组,每组8只。以卵白蛋白（OVA）致敏和激发建立大鼠哮喘模型。酶联免疫吸附试验（ELISA）测定BALF中IL-4、IL-12含量;免疫组化MaxvisionTM法测定肺组织中P—Akt蛋白的表达量并观察其表达位置;Western blot测定肺组织匀浆中P—Akt蛋白的含量;并对各检测指标进行组间比较分析。结果（1）与对照组比较,其他3组大鼠IL-4含量显著增高、IL-12含量显著降低（均P〈0.01）;而且地塞米松组及渥曼宁青霉素组IL-4含量显著低于哮喘组、IL-12含量明显高于哮喘组（P〈0.05或0．01）。（2）与对照组比较,其他3组大鼠P—Akt蛋白相对表达量及光密度值均显著增高（均P〈0.01）;而且地塞米松组及渥曼宁青霉素组P—Akt蛋白相对表达量及光密度值均显著低于哮喘组（均P〈0.01）.（3）肺组织中P—Akt蛋白含量与IL-4含量呈显著正相关（r=0．918,P〈001）,与IL-12含量呈显著负相关（r=-0．868,P〈0.01）.结论哮喘大鼠模型中出现了PI3K—Akt通路的激活,其Th1/Th2失衡可能与P13K／Akt通路的激活有关。糖皮质激素可能通过抑制PI3K／Akt通路,改善Th1/Th2失衡,从而减轻哮喘气道炎症。     

S14G-humanin对氧糖剥夺/复氧神经细胞损伤的保护作用

目的：评估S14G-humanin(HNG)在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞体外氧糖剥夺/复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)模型中潜在的神经保护作用的相关分子机制。方法：将SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD/R模型组、HNG干预组、HNG联合FLLL32抑制剂组。三气培养箱建立SH-SY5Y细胞OGD/R损伤模型;抑制剂组给予不同剂量HNG、FLLL32(JAK2/STAT3通路抑制剂)。CCK8细胞检测试剂盒检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western Blot分析JAK2、p-STAT3(Y705)、p-STAT3(S727)的表达。结果：OGD/R导致SH-SY5Y细胞存活率显著降低(P<0.01),凋亡率显著增加(P<0.01)。给予0.1、1、5、10μg·L^-1 HNG干预的SH-SY5Y细胞与未行HNG干预的OGD/R细胞相比,存活率更高(P<0.01),凋亡明显减少(P<0.01),1μg·L^-1HNG干预组效果最好。与对照组...     

基于cAMP/PKA/CREB信号通路独参汤对衰老模型大鼠认知功能障碍的影响

目的:探讨独参汤(DST)对D-半乳糖(D-gal)诱导的衰老模型大鼠神经元损伤、脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)的活性、丙二醛(MDA)和环磷酸腺苷(cAMP)水平的影响以及对cAMP/蛋白激酶A(PKA)/cAMP反应元件结合蛋白(CREB)信号通路的激活,阐明DST对D-gal诱导衰老模型大鼠...     

线粒体促凋亡因子Omi/HtrA2在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的:探讨线粒体促凋亡因子Omi/HtrA2在膀胱癌组织、癌旁组织、膀胱正常粘膜组织中的表达及其临床意义。方法:应用流式细胞术方法检测44例膀胱癌组织,44例癌旁组织及12例膀胱正常粘膜组织Omi/HtrA2的表达。结果:1Omi/HtrA2的阳性表达率为膀胱癌组织81.9%(36/44),癌旁组织31.9%(14/44),正常膀胱粘膜25.0%(3/12);2Omi/HtrA2在膀胱移行细胞癌的阳性表达率情况为G1级83.3%(10/12),G2级65.2%(15/23),G3级22.2%(2/9);3Omi/HtrA2的表达与性别、年龄和临床分期无明显的关系。结论:1Omi/HtrA2在膀胱移行细胞癌组织中的阳性表达率明显高于正常粘膜组织和癌旁组织。2Omi/HtrA2蛋白在膀胱移行细胞癌组织中的表达水平与患者的年龄、性别以及肿瘤的分期无关,与膀胱癌病理分级有关。     

Si-GATA-3对AR小鼠PBMCs中Th1/Th2细胞亚群功能的体外调节

目的 研究RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体si-GATA-3在体外对变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）小鼠PBMCs中Th2、Th1细胞亚群功能的调节作用。方法 构建RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体siGATA-3,并进行包装、纯化和滴定。BALB/C小鼠随机分为AR组和正常对照组。用卵蛋白构建BALB/C小鼠变应性鼻炎模型,抽取其外周血并分离外周血中单个核细胞（PBMCs）,随机分为3组,即si-GATA-3组、siNC组和AR组。进行细胞培养,然后分别用si-GATA-3、si-NC和生理盐水对3组变应性鼻炎小鼠的PBMCs进行干预72 h,用生理盐水代替si-GATA-3干预正常对照组小鼠的PBMCs。干预结束分离PBMCs和细胞培养上清液。分别用荧光定量qPCR和Western bloting方法检测PBMCs中GATA-3 mRNA、T-bet mRNA和GATA-3、T-bet蛋白的相对表达量;用ELISA技术检测细胞培养上清液中IL-4和IFN-γ的含量。结果 构建出RNAi介导的GATA-3基因慢病毒载体si-GATA-3,其滴度为5...