丙戊酸钠对精神分裂大鼠CREB/BDNF/TrkB通路及神经元损伤的影响

目的 探讨丙戊酸钠对精神分裂大鼠环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)/脑源性神经营养因子(BD-NF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)通路及神经元损伤的影响.方法 将50只雄性Wistar大鼠按随机数表法分为对照组、模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂量组和氯氮平组,每组10只.模型组、丙戊酸钠低剂量组、丙戊酸钠高剂...     

基于BDNF/TrkB/CREB途径探讨缺氧缺血性新生幼鼠海马神经元凋亡及脑发育损伤的机制研究

目的：基于BDNF/TrkB/CREB途径探讨缺氧缺血性新生幼鼠海马神经元凋亡及脑发育损伤发生的相关作用机制。方法：Wistar幼鼠结扎一侧颈总动脉,置8%氧气、92%氮气缺氧箱内2 h,制备缺氧缺血性脑损伤（hypoxic ischemic brain injury,HIBI）模型,健康大鼠作为对照组,取对照组、模型组幼鼠各10只,Y迷宫测试学习记忆能力;2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色检测脑组织损伤情况;蛋白质免疫印迹测定海马组织中脑源性神经营养因子（brain derived neurotrophic factor,BDNF）、酪氨酸蛋白激酶B(TrKB)、环磷腺苷效应元件结合蛋白（cAMP-response element binding protein,CREB）的表达。另取对照组15只,模型组幼鼠60只分为阴性对照（negative control,NC）组、BDNF过表达（LV-BDNF）组、TrkB过表达（LV-TrkB）组、CREB过表达（LV-CREB）组,尾静脉注射空白载体、BDNF、TrkB、CREB腺病毒过表达载体。Y迷宫测试学习记忆能力;TTC染色...     

安神定志方对阿尔茨海默病大鼠Tau蛋白磷酸化及BDNF/TrkB信号通路的影响

目的:观察安神定志方对阿尔茨海默病大鼠模型海马区tau蛋白磷酸化水平的影响及其相关机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、安神定志方(低、中、高剂量组)和多哌齐特组,除正常组外其余组通过链脲佐菌素侧脑室注射复制阿尔茨海默病大鼠模型后给予相应药物灌胃治疗2周。通过Morris水迷宫试验检测大鼠学习记忆能力,HE染色检测海马区组织学形态,Western-blot检测脑组织海马组织tau蛋白磷酸化水平及BDNF和TrkB蛋白的表达丰度。结果:与空白组相比,模型组大鼠逃避潜伏期显著增加,跨越平台次数及有效停留时间明显减少,tau蛋白的磷酸化水平均明显升高,BDNF蛋白及TrkB蛋白磷酸化的表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,安神定志方各剂量组均能明显降低AD大鼠逃避潜伏期,增加跨越平台次数及有效停留时间,抑制tau蛋白的磷酸化水平均,上调BDNF蛋白及TrkB蛋白磷酸化的表达水平,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:安神定志方能够通过激活BDNF/TrkB信号通路抑制tau蛋白的磷酸化,促进AD大鼠学习、记忆能力。     

运动联合抗抑郁药物对大鼠海马细胞和BDNF/pERK 信号通路的影响

目的 研究运动联合帕罗西汀的抗抑郁效果及其作用机制。方法 采用慢性不可预知性温和应激复制大鼠抑郁模型,分为对照组、模型组、运动组、给药组、联合组,每组12 只。通过规律性运动和帕罗西汀进行干预,用糖水和Morris 水迷宫实验检测大鼠行为学,作为缺乏快感的客观指标,判定模型是否复制成功。采用DCFH-DA 法检测海马细胞的凋亡率和活性氧（ROS）水平,Western blot 检测海马细胞中脑源性神经营养因子（BDNF）、磷酸化细胞外信号调节激酶（pERK）、神经肽（VGF）蛋白表达水平。结果 与对照组相比,联合组糖水消耗量降低,逃避潜伏期延长（P <0.05）;与运动组相比,联合组大鼠21 d 后糖水消耗量增加,逃避潜伏期降低（P <0.05）。与运动组相比,联合组细胞ROS、凋亡率降低（P <0.05）。模型组大鼠海马细胞中BDNF、pERK、VGF 蛋白表达低于对照组（P <0.05）;与运动组相比,联合组海马细胞中BDNF、pERK、VGF 蛋白表达升高。结论 运动联合帕罗西汀的抗抑郁效果优于单一运动疗法或药物治疗,可更好地缓解快感缺乏,降低海马细胞凋亡率和氧化应激损伤,其可能是通过BDNF/pERK 信号通路调控下游靶基因VGF 的表达而发挥作用。     

BDNF/TrkB信号通路与神经病理性疼痛的关系研究

神经病理性疼痛是一种发病机制复杂且严重影响患者生活质量的慢性疼痛。有研究表明BDNF/TrkB信号通路参与神经病理性疼痛的发生发展。目前临床上治疗神经病理性疼痛的有效办法不多。近年来,电针因其不良反应少,在临床治疗慢性疼痛方面有着广泛的研究,但有关电针镇痛的作用机制还有待进一步阐明。为此,本文就BDNF/TrkB信号通路在电针干预神经病理性疼痛的作用予以综述。     

神经病理性疼痛致抑郁小鼠脑内BDNF/TrkB/CREB信号的动态变化

目的 神经病理性疼痛(NP)可诱发抑郁情绪,但其机制尚不明确,文章旨在探讨NP致抑郁过程中小鼠海马和前额叶皮层内BDNF/TrkB/CREB信号的动态变化。方法 采用保留性神经损伤法(SNI)建立小鼠NP模型,将之分为假手术组、术后7、14、21和28 d组。vonfrey法、强迫游泳(FST)和悬尾(TST)实验测定各组小鼠的机械痛阈和抑郁样行为;TUNEL法检测小鼠海马和前额叶皮层神经元凋亡;Western blot法检测凋亡相关蛋白及BDNF/TrkB/CREB信号蛋白的表达。结果SNI术前各组小鼠的痛阈无明显差别(P>0.05),术后7 d小鼠的痛阈显著下降(P<0.01),并一直持续至术后28 d。SNI小鼠于术后21 d开始出现抑郁样行为,主要表现为FST实验中不动时间明显延长(P<0.01);术后28 d小鼠的抑郁行为更为显著,在FST和TST中的不动时间均显著延长(P<0.05)。SNI术后21 d和28 d小鼠海马和前额叶皮层出现了神经元凋亡,且Bcl-2/Bax比值明显低于假手术组(P<0.05),同时BDNF、TrkB、pAKT及pC...     

BDNF对非心源性缺血性脑卒中大鼠海马神经元细胞凋亡的影响

目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF)对非心源性缺血性脑卒中大鼠海马神经元细胞凋亡的影响及作用机制。方法 45只大鼠留取10只为假手术组,35只建立非心源性缺血性脑卒中模型,建模成功31只,随机分为模型组10只、空载组10只、BDNF组11只。空载组、BDNF组分别向蛛网膜下腔注入含有pGenesiI-1-NC、pGenesiI-1-BDNF脂质体质粒复合物,模型组和假手术组注入0.9%氯化钠溶液。5 天后观察大鼠学习和记忆能力、海马组织病理形态变化及海马神经元细胞凋亡情况;检测海马组织中BDNF、酪氨酸受体激酶B(TrkB)、磷脂酰肌醇3激酶(PI₃K)、丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(AKT)mRNA及蛋白表达、p-AKT/AKT表达变化。结果 HE染色显示模型组、空载组神经元排列紊乱,出现变性神经元;BDNF组神经元损伤轻微。与假手术组比较,模型组、空载组、BDNF组水迷宫实验逃避潜伏期、目标象限停留时间均缩短,穿越平台次数均减少,海马神经元凋亡率均升高,海马组织中BDNF、TrkB、PI₃K mRNA及蛋白相对表达量,p-AKT/AKT均降低(P＜0.05);与模型组、空载组比较,BDNF组水迷宫实验逃避潜伏期、目标象限停留时间延长,穿越平台次数增加,海马神经元凋亡率降低,海马组织中BDNF、TrkB、PI₃K mRNA及蛋白相对表达量、p-AKT/AKT升高(P＜0.05)。结论 上调BDNF表达可减少非心源性缺血性脑卒中大鼠海马神经元细胞凋亡,其机制可能是通过激活PI₃K/AKT信号通路发挥保护作用。     

基于BDNF/TrkB介导的海马突触可塑性研究补肝散对衰老大鼠学习记忆功能的影响

目的 基于肝气虚理论和海马突触可塑性探讨衰老机制,观察补肝散对D-半乳糖致衰老大鼠学习记忆能力的影响.方法 40只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、吡拉西坦组和补肝散组,各10只.模型组、吡拉西坦组、补肝散组腹腔注射400 mg/kg D-半乳糖制备衰老大鼠模型,空白对照组腹腔注射等量生理盐水,每日1次,...     

同型半胱氨酸对内皮细胞凋亡的影响

目的 研究同型半胱氨酸对内皮细胞凋亡的影响。方法 采用ＤＮＡ末端标记（ＴＵＮＥＬ）染色、苏木精染色分别测定同型半胱型酸（Ａ组）、低密度脂蛋白（Ｂ组）、同型半胶氨酸＋低密度脂蛋白（Ｃ组）、同型半胱氨酸＋低密度脂蛋白＋叶酸和Ｌ－精氨酸（Ｄ组）、同型半胱氨酸＋低密度脂蛋白＋谷氨酸和甘氨酸（Ｅ组）对体外培养兔主动脉内皮细胞凋亡的影响。结果 Ｃ组细胞凋亡明显高于其它组（Ｐ〈０．０１），Ｄ组和Ｅ组各项检测指标     

三七三醇皂苷对MCAO大鼠BDNF和TrkB表达的影响

目的观察三七三醇皂苷(PTS)对脑缺血大鼠模型脑源性神经营养因子(BDNF)及其酪氨酸激酶受体B(TrkB)表达的影响,揭示PTS对脑缺血受损神经元的重塑作用机制。方法选取成年雄性SD大鼠,采用改良的EZ Longa方法建立大脑中动脉缺血(MCAO)大鼠模型,根据清醒后所得Longa评分随机分为模型组(生理盐水)、三七三醇皂苷组(三七舒通胶囊)和阳性对照组(尼莫地平),分别于给药后3、7、28 d随机取大鼠6只,通过免疫组织化学法观察BDNF和TrkB的表达,并观察大鼠脑缺血后的神经功能变化。结果与正常组比较,术后各时间点脑组织BDNF和TrkB表达变化均有增高,并随时间的迁延呈下降的趋势。与模型组比较,三七三醇皂苷组能明显改善脑缺血的神经功能缺失症状,并能上调皮质中BDNF和TrkB蛋白的表达水平。结论三七三醇皂苷能上调脑缺血后BDNF和TrkB蛋白的表达,可能通过上调BDNF和TrkB表达对脑缺血神经元损伤起保护作用,促进神经元的重塑,发挥其对脑缺血的治疗作用。     

BDNF/TrkB通路活化星形胶质细胞对大鼠神经病理性痛的影响

目的 观察外源性脑源性神经营养因子(BDNF)对大鼠机械痛阈和星形胶质细胞的影响,探讨BDNF参与疼痛调控的可能机制.方法 将30只鞘内置管成功的大鼠随机分为空白对照组、安慰剂组、BDNF组、BDNF+星形胶质细胞抑制剂组(BDNF+氟代柠檬酸组)及BDNF+酪氨酸激酶受体B(TrkB)抑制剂组(BDNF+ K252a组),每组6只.予鞘内注入药物,1次/d×7 d.每次注药前1h测定50％机械缩爪阈值(50％ PWT);末次给药后1h取脊髓腰膨大,Western blotting法测定胶质细胞纤丝酸性蛋白(GFAP)及磷酸化TrkB的蛋白表达.结果 BDNF组大鼠后肢50％ PWT较空白对照组显著下降(P＜0.05);给药后第7天,BDNF组大鼠脊髓腰膨大GFAP和磷酸化TrkB的蛋白表达较空白对照组显著升高(P＜0.01).BDNF+氟代柠檬酸组和BDNF+K252a组50％ PWT和GFAP蛋白表达水平与空白对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).BDNF+ K252a组磷酸化TrkB的蛋白表达与空白对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 BDNF可能通过磷酸化TrkB受体使脊髓星形胶质细胞活化,进而参与神经病理性痛的发生和发展过程.     

甲基乙二醛对大鼠海马神经元的毒性作用及脑源性神经营养因子、TrKB表达的影响

目的 探讨葡萄糖降解产物甲基乙二醛(MG)对海马神经元的毒性作用及可能机制.方法取新生24h Sprague-Dawley大鼠海马神经元原代培养至第7天,给予MG干预24h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测海马神经元存活率,异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V联合碘化丙啶(PI)法检测海马神经元的凋亡率,采用实时RT-PCR法及Western印迹法测定脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体酪氨酸蛋白激酶(TrkB)mRNA和蛋白表达水平.结果 1.随着MG浓度的增加及干预时间延长,海马神经元存活率逐渐降低,呈浓度依赖性(r=0.946,P<0.01)和时间依赖性(r=0.993,P<0.01).与0h组海马神经元凋亡率(1.633±0.153)%相比,100μM MG干预2h、6h、12h和24h后,其凋亡率逐渐增加[分别为(2.833±0.153)%、(3.367±0.153)%、(4.433±0.404)%和(8.833±0.306)%;均P<0.01];2.与同时间对照组相比,MG干预12h组及24h组海马神经元BDNF mRNA及蛋白表达增加(P<0.05或P<0.01);而MG干预6h组、12 h及24h组TrkB mRNA及蛋白表达减少(P<0.05或P<0.01).结论 MG对海马神经元具有直接毒性作用,可能首先抑制海马神经元TrKB表达,导致BDNF表达代偿性增高,损伤BDNF-TrKB通路,诱导神经元凋亡增加.     

眼针对MCAO/R大鼠大脑缺血区半暗带脑组织中BDNF和TrkB表达的影响及其脑保护作用机制

目的：观察眼针对局灶性大脑中动脉缺血再灌注（MCAO/R）模型大鼠大脑缺血区半暗带脑组织中脑原性神经生长因子（BDNF）和酪氨酸激酶受体B（TrkB）表达水平的影响,探讨眼针对缺血性脑病的脑保护作用机制。方法：62只SD大鼠随机分为空白对照组（11只）、假手术组（11只）和模型复制组（40只）。模型复制组大鼠采用线栓法建立脑缺血再灌注模型,将模型复制成功的大鼠（32只）随机分为模型组（16只）及眼针组（16只）;眼针组大鼠参照人体取穴方法,取肝区、上焦区、下焦区和肾区进行针刺干预。再灌注后2 h即开始针刺,每8 h 1次,连续针刺10次,末次干预后30 min,断髓处死大鼠,剥离缺血区域周围半暗带部位的脑组织,采用RT-PCR和Western blotting法检测大鼠脑组织中BDNF和TrkB mRNA及蛋白表达水平。结果：与空白对照组比较,假手术组大鼠半暗带脑组织中BDNF和TrkB mRNA和蛋白表达水平均无明显变化（P>0.05）;与假手术组比较,模型组大鼠半暗带脑组织中BDNF和TrkB mRNA和蛋白表达水平均升高（P<0.01）;与模型组比较,眼针组MCAO/R模型大鼠半暗带脑组织中BDNF和TrkB mRNA和蛋白表达水平上升（P<0.05或P<0.01）。结论：脑缺血再灌注损伤发生后可促进BDNF及其受体TrkB表达以对抗损伤。眼针可通过上调BDNF及其受体TrkB表达水平实现其脑保护作用。     

白松片对抑郁模型大鼠海马脑源性神经营养因子和酪氨酸激酶B表达的影响

目的采用慢性应激复制抑郁大鼠模型,观测白松片对抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB表达的影响,探讨白松片的抗抑郁作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、白松片组、氟西汀组,采用连续21d慢性轻度不可预见性应激配合孤养复制抑郁模型。运用免疫组化方法研究白松片对抑郁模型大鼠海马CA1、CA3区锥体细胞和齿状回颗粒细胞BDNF、TrkB蛋白表达的影响。结果与正常组相比,模型组大鼠海马CA1、CA3区和齿状回BDNF、TrkB免疫反应阳性神经元平均灰度值上升,分别为107. 73±3. 43、119. 40±6. 36、109. 20±4. 65;与模型组相比,白松片组大鼠海马CA1、CA3区和齿状回BDNF、TrkB免疫反应阳性神经元平均灰度值下降,分别为105. 80±3. 32、109. 87±4. 82、105. 00±2. 56。结论白松片增加抑郁模型大鼠海马BDNF、TrkB的表达,可能是其抗抑郁作用的分子机制之一。     

Effect of icariin on apoptosis in hippocampal neurons cultured in high glucose

OBJECTIVE

To investigate effect of icariin on apoptosis in hippocampal neurons cultured in high glucose, and the possible mechanism behind the action.

脑源性神经营养因子及其特异性受体酪氨酸激酶B在中枢疾病的研究

众多研究发现脑源性神经营养因子(BDNF)及其特异性受体酪氨酸激酶B(TrkB)在许多中枢神经系统疾病中都有表达,升高或降低,且对中枢神经系统疾病的作用及机制不一。对BDNF、TrkB在中枢疾病中的深入研究对深刻理解中枢神经系统疾病的发病机制及探索新的治疗方法有重要的临床意义和应用前景。     

新型气体信号分子硫化氢对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨新型气体信号分子硫化氢(H2S)对低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞凋亡的调节作用.方法:24只Wistar大鼠,随机分为对照组(8只)、低氧组(8只)和低氧 NaHS组(8只).以化学分光光度法测定血浆H2S含量;采用原位缺口末端标记方法(TUNEL)检测大鼠肺动脉平滑肌细胞的凋亡,并行图像分析计算单位面积细胞凋亡率;采用免疫组织化学方法检测肺动脉平滑肌细胞凋亡蛋白Bcl-2、Fas和caspase-3表达,并进行定位和半定量分析.结果:低氧组与对照组比较,低氧组大鼠血浆中H2S含量下降36%,应用TUNEL检测肺动脉平滑肌细胞单位面积凋亡率减少52.9%,肺动脉平滑肌细胞Bcl-2蛋白表达增高123.9%,Fas蛋白表达减弱45%,caspase-3表达与对照组差异无显著性;低氧组与低氧 NaHS组比较,低氧 NaHS组大鼠血浆中H2S含量升高65%,应用TUNEL检测到肺动脉平滑肌细胞单位面积凋亡率较低氧组增高62.5%,肺动脉平滑肌细胞Bcl-2蛋白表达减弱36.4%,Fas和caspase-3蛋白表达分别增高84.8%、34.5%;结论:低氧时肺动脉平滑肌细胞凋亡减少,H2S可能通过抑制肺动脉平滑肌细胞Bcl-2蛋白表达、增加Fas和caspase-3蛋白表达,促进低氧时肺动脉平滑肌细胞凋亡.     

硫化氢对糖尿病大鼠视神经病变的防治作用

目的 观察硫化氢（H2S）对糖尿病大鼠视神经病变的影响,并探讨其可能的机制.方法 将SD大鼠随机分为对照组、糖尿病模型组和外源性H2S供体硫氢化钠（NaHS）治疗组,每组最终选入大鼠10只.糖尿病模型组和NaHS治疗组大鼠通过尾静脉注射链脲佐菌素（50 mg/kg）建立糖尿病大鼠模型,NaHS治疗组大鼠腹腔注射NaHS（100 μmol/kg）,对照组和糖尿病模型组大鼠给予相同量的生理盐水腹腔注射,每天1次,共8周.于实验末采用劳克坚牢蓝染色法观察大鼠视神经髓鞘结构的变化,分别检测血浆活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平,采用化学法测定血浆H2S浓度,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血浆睫状神经营养因子（CNTF）的水平.结果 与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血浆中H2S水平显著降低[（73.85±8.27）μmol/L比（38.45±4.82）μmol/L,t=3.24,P＜0.05];与糖尿病模型组大鼠比较,NaHS处理组大鼠血浆中H2S水平[（82.36±7.41）μmol/L]显著升高（t=2.97,P＜ 0.05）.对照组视神经髓鞘的染色均匀,视神经视束的直径和髓鞘的厚度一致.糖尿病模型组大鼠视神经的髓鞘出现较明显的溃变,有的髓鞘溃变成半环状或空白,可见空泡变性和崩解碎片.与糖尿病模型组比较,NaHS组大鼠视神经髓鞘的上述变化明显减轻.与对照组比较,糖尿病模型组大鼠视神经髓鞘面积所占的百分率显著降低[（22.56±14.81）％比（11.37±2.94）％,t=4.02,P＜0.05].NaHS处理组大鼠视神经髓鞘面积所占的百分率与糖尿病模型组比较显著增加[（11.37±2.94）％比（19.78±3.05）％,t=3.42,P＜0.05].与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血浆中ROS[（458.61±65.75）au比（1128.46±91.32）au,t=2.84,P＜0.05）]和MDA[（5.21±0.47） μmol/L比（9.76±0.86）μmol/L,t=4.18,P＜0.05]的水平显著增加,而SOD水平显著降低（127.58±10.52）比（48.31±5.39） kU/L,t=2.91,P＜0.05）.Na     

脑灵汤对阿尔茨海默病模型鼠凋亡调控基因的影响

目的 观察脑灵汤对阿尔茨海默病（Alzheimer’s Disease，AD）大鼠模型学习记忆能力及脑内海马细胞凋亡基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法 通过半乳糖腹腔注射及氯化铝（Alcl3）皮下注射建立AD大鼠模型，采用γ-电迷宫检测学习记忆能力，提取脑内海马纽织总RNA，应用RT—PCR和琼脂糖凝胶电泳方法测定Bcl-2、Bax基因的表达。结果 脑灵汤能改善模型大鼠的学习记忆能力，增强受损海马神经元Bcl-2基因的表达，降低Bax基因的表达。结论 脑灵汤可能通过升高Bcl-2／Bax的比值而抑制海马神经元的凋亡，改善模型大鼠学习记忆能力。