二至丸对D-半乳糖诱导大鼠肾细胞衰老的保护作用

目的 探讨二至丸对D-半乳糖(D-galactose, D-gal)诱导的大鼠肾(NRK)细胞衰老的保护作用。方法 使用不同浓度D-gal（1、5、10、20、40 g/L）作用不同时间（24、48、72 h）诱导NRK细胞衰老,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase)染色法鉴定细胞衰老;荧光素二-β-D-吡喃半乳糖苷(Fluorescein di-β-D-galactopyranoside, FDG）法检测衰老相关的β-半乳糖苷酶活性;噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力;以GSH-PX、SOD活力与MDA含量检测细胞氧化应激水平;构建体外NRK细胞衰老模型。根据FDG的结果来评估不同浓度二至丸(0.01、0.1、1 g/L)处理对衰老NRK细胞的影响,检测GSH-PX、SOD活力与MDA含量的变化来探讨二至丸对衰老NRK细胞的保护作用。结果 与对照组相比,模型组(20 g/L D-gal处理48 h)β-半乳糖苷酶染色阳性率明显增加,β-半乳糖苷酶活性明显增加;GSH-PX、SOD活力下降,MDA含量增加（P<0.05~0.01）,细胞活性无明显变化。与模型组相比,给药组β-半乳糖苷酶含量明显降低,阳性染色率显著下降,GSH-PX、SOD活力升高,MDA含量明显降低（P<0.05~0.01）。结论 建立D-gal诱导的NRK细胞衰老模型;二至丸能够减轻D-gal诱导的NRK细胞衰老的程度,其保护效应的产生可能与二至丸抗氧化应激效应相关。     

Neuregulin-1对过氧化氢诱导的小鼠骨髓间充质干细胞衰老的影响

目的:探讨Neuregulin-1(NRG-1)对过氧化氢(H2O2)诱导的小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)衰老的影响.方法:用H2O2诱导小鼠BMSCs衰老模型,将BMSCs分为对照组、H2O2组、H2O2+NRG-1组.采用CCK8检测细胞存活率,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老,流式细胞术检测细胞周期,实时荧光...     

何首乌饮对Leydig细胞衰老模型β-半乳糖苷酶表达的影响

目的:探讨何首乌饮对eydig细胞衰老模型β-半乳糖苷酶表达的影响.方法:采用3 β-HSD特异性染色鉴定体外培养的大鼠睾丸Leydig细胞,分为正常组、Leydig细胞衰老损伤组、何首乌饮预防组和何首乌饮治疗组,用50 μ mol/L的H2O2和100μmol/L的FeSO4处理Leydig细胞建立Leydig细胞衰老模型.观察各组Leydig细胞β-半乳糖苷酶表达的变化.结果:正常组Leydig细胞无β-半乳糖苷酶表达.与正常组比较,衰老组Leydig细胞β-半乳糖苷酶的表达明显升高(P＜0.05);何首乌饮预防组、治疗组Leydig细胞β-半乳糖苷酶的表达明显低于衰老组(P＜0.05),何首乌饮治疗组、预防组Leydig细胞β-半乳糖苷酶的表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:何首乌饮可通过降低β-半乳糖苷酶的表达保护睾丸Leydig细胞衰老损伤.     

胰岛素对血管内皮细胞衰老及Akt表达的研究

目的:探讨胰岛素对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)衰老及Akt表达的影响。方法:不同浓度的胰岛素(对照组、1 nmol/L、10 nmol/L、胰岛素100 nmol/L)加入体外培养的人脐静脉内皮细胞,24 h后β半乳糖酶染色检测细胞衰老率和免疫组化检测Akt活性。结果:与对照组比较,1 nmol/L组和10 nmol/L组细胞衰老程度降低,Akt表达上调。但随着浓度增加,100 nmol/L组细胞衰老反而加重。而Akt表达无统计学差异。结论:低浓度胰岛素可延缓内皮细胞衰老,可能与Akt基因表达上调有关。而高浓度胰岛素加重细胞衰老,其机制可能与Akt蛋白无关。     

欧亚旋覆花总黄酮对L929细胞衰老和自噬的影响

目的通过检测L929细胞中的衰老及自噬水平,探讨欧亚旋覆花总黄酮(IBFTF)对L929细胞衰老和自噬的影响,以更好地开发IBFTF的药用价值。方法分别使用0、5、10、20、40 g/L D-半乳糖作用于L929细胞,探究D-半乳糖诱导L929细胞衰老的最适浓度,分别使用浓度为25、50、100 mg/L IBFTF作用于衰老L929细胞探究IBFTF对L929细胞衰老和自噬的影响,通过MTT检测不同浓度D-半乳糖对L929细胞活力的影响,β-半乳糖苷酶染色检测不同浓度的D-半乳糖对L929细胞衰老进程的影响,荧光显微镜检测IBFTF对衰老L929细胞内活性氧生成的影响,通过吖啶橙染色和免疫荧光探究IBFTF对衰老L929细胞中溶酶体数量和LC3蛋白的表达,用Western-Blot检测细胞自噬相关蛋白水平。结果 IBFTF呈剂量依赖性延缓衰老L929细胞的衰老进程,在延缓衰老过程中L929细胞自噬水平也呈现剂量依赖性增高。结论 IBFTF延缓衰老L929细胞衰老的过程可能与自噬水平的上调有关。     

衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立

目的：探讨衰老SH-SY5Y细胞氧糖剥夺/再灌注模型的建立。方法：将SH-SY5Y细胞随机分为对照(D-半乳糖0 mmol/L)、D-半乳糖(25 mmol/L、50 mmol/L、100 mmol/L、200 mmol/L、400 mmol/L)组，分别给予对应浓度的D-半乳糖处理48 h，显微镜观察细胞形态的改变、β-半乳糖苷酶试剂盒检测β-半乳糖苷酶活性、EdU试剂盒检测细胞增殖率以及CCK-8法检测细胞存活率，确定D-半乳糖致衰浓度，建立衰老模型。将衰老SH-SY5Y细胞随机分为对照(氧糖剥夺不处理)、氧糖剥夺处理(0.5 h、1 h、1.5 h、2 h)组，随后复糖复氧24 h,CCK-8检测衰老SH-SY5Y细胞存活率。结果：25 mmol/L、50 mmol/L组的细胞形态、β-gal活性与对照组比较没有明显变化(P>0.05),100 mmol/L组细胞可见胞体肥大，200 mmol/L组细胞染色质固缩，400 mmol/L组细胞出现大量空泡化；(100 mmol/L～400 mmol/L)组细胞β-半乳糖苷酶染色阳性率与对照组比明显升高(P<0.05),1...     

非瑟酮通过 Nrf2/HO-1和 MAPK 信号通路抑制 阿霉素诱导的肺动脉内皮细胞衰老

摘要:目的 探讨非瑟酮(Fisetin)对阿霉素(Doxorubicin,DOX)诱导的人肺动脉内皮细胞(HPAEC)衰老的影响及 其相关机制。方法 使用不同浓度的 DOX(0.1、0.25、0.5、1μmol/L)诱导 HPAEC衰老,通过CCK8法检测细胞增殖活 性,Westernblot法检测衰老相关蛋白 P53、P21表达。随后用不同浓度的 Fisetin作用于 HPAEC,分别于0、24、48和72 h检测 Fisetin对 HPAEC 细胞增殖的影响,流式细胞术检测 Fisetin对细胞周期的影响,利用衰老相关β-半乳糖苷酶 (SA-β-gal)对衰老细胞进行染色并计数,活性氧(ROS)试剂盒检测 Fisetin对 HPAEC 活性氧(ROS)产生的影响,Westernblot法检测衰老相关蛋白、Nrf2和 MAPK 信号蛋白的表达情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测分泌的细胞因子浓 度,CCK8法检测 Fisetin预处理的 HPAEC培养上清对人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC)增殖的影响。结果 当 Fisetin 浓度在20μmol/L以下时,HPAEC增殖活性在24、48、72h没有明显降低,差异无统计学意义(P>0.05);流式细胞术检 测发现 DOX刺激后,90%以上的 HPAEC被阻滞在 DNA 合成前期(G0/G1期),而 Fisetin(5、10、20μmol/L)处理组细胞 周期在 DNA 合成期(S期)分别占40%、50%及55%,呈浓度依赖性上升,差异具有统计学意义(P<0.01)。Western blot证实 DOX刺激后,HPAEC中衰老相关蛋白 P21表达增加,而随着 Fisetin作用浓度的增加,P21表达逐渐下降(P< 0.05)。SA-β-gal衰老染色和 ROS染色证实 DOX 干预后,衰老细胞的数量明显增加,ROS的产生量也增加;而 Fisetin 处理后,衰老细胞的数量逐渐减少,ROS的产生量也减少。Fisetin可增加 HO-1、p-P38的表达,促进 Nrf2核转移,沉默 HO-1和抑制p-P38表达均可减弱 Fisetin对 P21的抑制作用。DOX刺激后细胞衰老相关分泌表型(SASP)的细胞因子 表达不断升高,而不同浓度的 Fisetin(5、10、20μmol/L)干预后,SASP细胞因子的表达量下降。CCK8实验证实,Fisetin 预处理的 HPAEC培养上清对 HPASMC增殖有抑制作用。结论 Fisetin可通过 Nrf2/HO-1和 MAPK 信号通路抑制 DOX诱导的 HPAEC衰老,并能够抑制 HPASMC增殖,从而抑制肺动脉重塑。     

血管紧张素Ⅱ对人脐静脉内皮细胞衰老的诱导作用及对端粒酶活性的影响*

目的观察血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endo-thelial cell,HUVECs)衰老的诱导作用及对端粒酶活性的影响。方法体外培养HUVECs,采用CCK-8法检测细胞存活率,用AngⅡ(终浓度10-6mol/L)干预,分为对照组和AngⅡ诱导组。β-半乳糖苷酶活性采用免疫化学染色方法,流式细胞术检测细胞周期来反映细胞的增殖能力;用聚合酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)检测端粒酶活性。结果与对照组比较,10-6mol/L AngⅡ诱导组存活的细胞数为对照组的(77.15±6.83)%;(71.10±6.81)%的细胞呈现β-半乳糖苷酶阳性染色,流式细胞仪检测细胞周期多停滞于G0/G1期[(84.11±7.92)%],证实细胞衰老;与对照组相比,10-6mol/L AngⅡ诱导组端粒酶活性明显下降(P<0.01)。结论 AngⅡ可以诱导HUVECs衰老,其机制可能与抑制衰老细胞端粒酶活性有关。     

Effects of angiotensin Ⅱ on human umbilical vein endothelial cells senescence and the telomerase activity

目的 观察血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVECs)衰老的诱导作用及对端粒酶活性的影响.方法 体外培养HUVECs,采用CCK-8法检测细胞存活率,用AngⅡ(终浓度10-6 mol/L)干预,分为对照组和AngⅡ诱导组.β-半乳糖苷酶活性采用免疫化学染色方法,流式细胞术检测细胞周期来反映细胞的增殖能力;用聚合酶链反应-酶联免疫吸附法(PCR-ELISA)检测端粒酶活性.结果 与对照组比较,10-6 mol/L AngⅡ诱导组存活的细胞数为对照组的(77.15±6.83)%;(71.10±6.81)%的细胞呈现β-半乳糖苷酶阳性染色,流式细胞仪检测细胞周期多停滞于G0/G1期[(84.11±7.92)%],证实细胞衰老;与对照组相比,10-6 mol/L AngⅡ诱导组端粒酶活性明显下降(P<0.01).结论 AngⅡ可以诱导HUVECs衰老,其机制可能与抑制衰老细胞端粒酶活性有关.     

不同剂量睾酮干预心肌细胞衰老中p16~(INK4a)的表达

目的探讨不同剂量睾酮干预小鼠心肌细胞衰老中p16^INK4a的表达。方法用1μmol／L,100nmol／L,10nmol／L3种剂量睾酮干预自然衰老的小鼠心肌细胞,检测各组衰老相关β-半乳糖甘酶染色阳性细胞率,细胞周期分布,p16^INK4a mRNA及蛋白表达。结果与衰老心肌细胞相比,1μmol．／L,100nmol／L,10nmol／L睾酮可剂量依赖性的降低衰老相关β-半乳糖甘酶染色阳性细胞率及细胞G0／G1期比例（P〈0．05）。睾酮干预亦可剂量依赖性地下调p16^INK4a mRNA及蛋白表达。结论1μmol／L,100nmol／L,10nmoL／L睾酮可通过剂量依赖性地减少p16^INK4a的表达,抑制小鼠心肌细胞衰老。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

人工全髋关节置换术的手术配合

目的：介绍人工全髋关节置换术的手术配合做法;方法：主要在手术配合的六个方面,解决防感染、防栓塞等问题。结果：30例人工全髋关节置换术均获成功,结论：手术配合是护士责任心和基本功的全面体现,对提高手术效果有至关重要的影响。     

80例局限性银屑病误诊原因分析

本文报告80例局限于小腿或手或足的银屑病。均经皮肤组织病理检查确诊。因部位比较特殊。受多种理化因素影响,使皮疹形态发生轻重程度不同的变化,常看不到典型损害,因而误诊为神经性皮炎,湿疹,慢性皮炎及癣等。作者对误诊原因进行了分析后,提出了鉴别诊断方法。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

妊娠晚期重度妊高征的监测

重度妊高征表现为高血压、蛋白尿、浮肿等症状 ,严重可以导致母婴死亡。对妊娠足月的重度妊高征 ,可以根据其临产与否及宫颈条件 ,立即决定其为阴道分娩或是剖宫产术。对于妊娠晚期的重度妊高征 ,因其胎龄不足月 ,胎儿生长发育及胎肺成熟度情况需通过一定时间的治疗 ,根据其病情变化来决定其治疗方案或终止妊娠的时机[1,2 ] 。这就需要我们对这一阶段的治疗进行监测 ,防止母儿并发症的发生。现将 2 0 0 0年至今我院收治妊娠晚期重度妊高征 30例的监测结果回顾分析如下。1　资料和方法1.1　研究对象　选择孕 31～ 36周重度妊高征 30例 ,其中 …     

尿微量白蛋白检测在继发性肾脏疾病中的临床意义

目的探讨尿微量白蛋白（m-Alb）检测在继发性肾脏疾病中的临床意义。方法采用Beckman Immage全自动特种蛋白分析仪对糖尿病组、高血压组、心脏病组患者进行了m-Alb测定,同时与健康组结果作对比。结果m-Alb检测糖尿病组为3.7±5.26mg/dl,高血压组为7.5±8.18mg/dl,心脏病组为7.8±3.76mg/dl,健康组为0.66±0.48mg/dl,各试验组m-Alb增高百分率为糖尿病组48.9%,高血压组37.5%,心脏病组26.9%。结论尿蛋白阴性的糖尿病、高血压、心脏病患者进行m-Alb检测,可以监测病程的进展。