聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用PCR法检测166例乙型肝炎病毒感染者血清HBV-DNA。结果显示:HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性,HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性和HBeAg阳性组,HBV-DNA阳性率分别为96.2％、28.6％、93.5％、HBsAg单项阳性者中,检出HBV-DNA阳性78例(孕妇占19.2％),阳性率81.3％。另外,在20例血清标志物全部阴性对照组中发现HBV-DNA阳性1例,阳性率5.36％。6例抗-HBc阳性和12例抗-HBe阳性者,HBV-DNA阳性率均为33.3％。从而提示乙肝病毒血清标志全部阴性,出现抗-HBs、抗-HBe、抗HBc,都不能说明血清中不存在乙肝病毒颗粒。因此应用PCR检测既可提高乙肝病毒感染的早期诊断率,又可直接反映病毒在体内复制状况。为指导临床治疗和预防提供可靠依据。     

乙肝血清标志物与HBV-DNA检测结果的相关性分析

目的:探讨乙肝血清标志物与HBV-DNA检测结果的相关性,以及二者联合检测在临床诊断中的应用。方法:收集1445例乙肝患者血清,同时采用电化学发光免疫分析法检测乙肝血清标志物和实时荧光定量PCR技术检HBV-DNA拷贝数。结果:HBsAg阳性HBeAg阳性组的HBV-DNA阳性率高于HBsAg阳性HBeAg阴性组和HBsAg阴性HBeAg阴性组(P<0.01),且HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)类型中病毒载量集中在高拷贝区段,但在HBeAg阳性者中仍有部分HBV-DNA为阴性(10.9%),而在HBsAg阳性HBeAg阴性组中HBV-DNA阳性率仍有25.5%。结论:HBeAg阳性是反映病毒复制的良好指标,但无正相关;仅依靠乙肝血清标志物检测不能很准确地判断HBV复制的程度及其传染性的强弱;乙肝血清标志物与HBV-DNA检测的结合能更好地为临床提供准确可靠的诊断数据。     

两种不同方法检测乙肝病毒血清学标志物比较及其临床意义

目的比较两种不同检测方法FQ-PCtL和ELISA定性检测HBVM及其临床意义。方法对106例乙肝病毒血清同时进行FQ—PCK检测HBV-DNA及ELISA方法测定HBVM。结果不同的血清学模式，HBV—DNA阳性率有差异，其中HBsAg（＋）、HBeAg（＋）、g-HBc（＋）和HBsAg（＋）、抗-HBe（＋）、抗-HBc（＋）模式的HBV—DNA阳性率高。结论FQ—PCIL检测患者血清HBV—DNA含量可以准确地反映HBV的感染状态和复制情况，具有较高的临床应用价值。     

HBV-DNA与乙型肝炎血清学标志物的相关性研究

目的探讨乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）与乙肝病毒血清标志物（HBV-M）之间的相关性。方法将临床筛查的600例HBsAg阳性血清标本用ELISA法检测HBV-M,同时用荧光定量PCR法检测HBV-DNA,按不同的HBV-M模式分组进行分析。结果 HBsAg和HBeAg同时阳性的标本,检测HBV-DNA阳性率为100%,明显高于HBeAg阴性模式的阳性率,亦高于HBsAg阳性的其它模式。差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 HBV-DNA检测在各种模式的HBV-M阳性血清中检出率差异有统计学意义,HBeAg阳性者HBV-DNA检出阳性率最高（100%）,检测乙肝患者HBV-M的同时检测HBV-DNA,对于早期诊断、判断患者传染性程度、疗效观察和预后判断具有重要的临床意义。     

1517例乙肝标志物和HBV-DNA定量相关性分析

目的探讨血清HBV-DNA水平与HBV血清标志物的相关性。方法采用实时荧光定量PCR对1517例HBV感染者血清标本中HBV-DNA含量进行检测,同时用ELISA法检测其HBV免疫标志物。结果HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组患者血清HBV-DNA检出率98.24%;HBsAg、HBeAg阳性组为100.00%;HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组为60.98%;HBsAg、HBcAb阳性组为37.71%;HBcAb阳性组为12.90%。结论患者血清HBV-DNA的阳性率与HBV血清标志物的存在状态相关,采用FQ PCR法检测HBV-DNA能更准确、直接地反映体内病毒复制情况。     

手术干预前后HBsAg阳性患者HBV-DNA的变化及其临床意义

[目的]探讨HBsAg阳性患者经外科手术干预前后HBV-DNA的变化及临床意义。[方法]采用时间分辨免疫荧光分析法58例HBsAg阳性手术患者术前血清HBV-M,采用实时荧光定量PCR检测了HBsAg阳性手术患者术前和术后d3、d7血清HBV-DNA的变化情况。[结果]（1）58例HBsAg阳性手术患者中27例血清中可检测到HBV-DNA,阳性率为46.1%,HBV-M的各种感染标志组合均有HBV-DNA检出。（2）27例检测到HBV-DNA的患者经外科手术干预后d3和d7,血清HBV-DNA拷贝数比术前显著增高（P﹤均0.01）,另有4例术前感染标志组合表现为HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性,但血清未检出HBV-DNA的患者,术后血清出现了10^4～10^6拷贝的HBV-DNA。[结论]（1）各种感染标志组合的HBsAg阳性手术患者体内存在乙肝病毒的活动,外科手术的干预可引起病毒复制增强,临床应重视HBV-DNA的监测,进行必要的抗病毒治疗。     

血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式的相关性

目的 探讨HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式之间的相关性.方法 将265例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBV DNA的荧光定量PCR检测,按照不同的乙肝病毒标志模式情况分组后,进行HBV DNA与乙肝病毒标志物的分析研究.结果 乙肝病毒标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBV-DNA阳性率98.3%,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组阳性率77.8%,HBsAg、HBcAb阳性组阳性率83.3%;HBsAg阳性组阳性率60%;:HbeAb、HBcAb阳性组阳性率42.1%;HBsAb阳性组阳性率38.1%;全阴性组阳性率3.1%.结论 HBV DNA荧光定量PCR法检测在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出,但检出率相差甚大(3.1%～98.3%);乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBV-DNA阳性率较高;HBsAg及其抗体阳性者也可检出HBV DNA,甚至乙肝模式全阴性者仍可检出HBV DNA.说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断患者是否具有传染性是不够的.因此同时检测乙肝标志物和HBV DNA有助于乙肝的早期诊断、疗效观察和预后判断.     

乙型肝炎患者HBV血清标志物检测结果分析

目的 比较分析乙型肝炎患者HBV血清标志物的检测结果。方法 ELISA法和荧光PCR法进行HBVM与HBV-DNA定量检测。结果 HBV-DNA的阳性率和含量在HBeAg（＋）与HBeAg（-）组差异有统计学意义（P〈0.01）;HBsAg的相对滴度与HBV-DNA的含量关系不密切。结论 HBeAg与HBV的复制和HBV-DNA的高含量关系密切;垂直传播或家族传播是导致乙型肝炎慢性化、肝硬化、肝坏死和肝癌的主要病因之一;而HBsAg的相对滴度则不能反映HBV的复制程度及传染性强弱。     

儿童乙型肝炎血清标志物与HBV-DNA定量检测的关系探讨

[目的]探讨儿童乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物与HBV-DNA含量的关系. [方法]202例血清标本用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒标志物,同时用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测标本中HBV-DNA的含量. [结果]HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组中,HBV-DNA阳性率为98.9%(88/89);HBsAg、HBeAg阳性组的HBV-DNA阳性率为100%(6/6);HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组中,HBV-DNA阳性率为25%(9/36);HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性组的HBV-DNA阳性率为12.5%(2/16);HBsAg、HBcAb阳性组和HBeAb、HBcAb阳性组分别5例中各有1例检出HBV-DNA;33例HBsAb阳性中仅1例HBV-DNA阳性;12例HBV血清标志物全阴的标本未检出HBV-DNA.[结论]儿童乙肝患者的多种血清标志物模式中都存在HBV-DNA复制.以HBeAg阳性者HBV-DNA复制水平最高.血清标志物与HBV-DNA联合检测对乙型肝炎的早期诊断、治疗方案的制定,尤其对抗病毒药物治疗的疗效观察具有重要的临床意义.     

乙型肝炎血清标志物与HBV-DNA水平关系探讨

目的探讨乙型肝炎患者血清标志物与HBV-DNA水平之间的关系。方法选择2009年1月—2012年11月收治的乙型肝炎患者722例,根据入院乙型肝炎五项检测结果,HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性患者213例为A组,HBsAg、HBeAg阳性患者25例为B组,HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性患者311例为C组,HBsAg、抗-HBc阳性患者129例为D组,HBsAg阳性患者44例为E组。用ELISA法检测血清标志物,用PCR法检测HBV-DNA水平,并对检测结果进行比较。计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 HBeAg阳性239例,其中HBV-DNA阳性226例,阳性率94.56%;HBeAg阴性483例,其中HBV-DNA阳性226例,阳性率46.79%。HBeAg阳性与HBeAg阴性患者HBV-DNA阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。HBV-DNA检测阳性A组204例,占95.77%;B组22例,占88.00%;C组160例,占51.45%;D组50例,占38.76%;E组16例,占36.36%。HBV-DNA检测阴性A组9例,占4.23%;B组3例,占12.00%;C组151例,占48.55%;D组79例,占61.24%;E组28例,占63.64%。结论对乙型肝炎患者血清标志物进行检测,可了解HBV在体内的感染情况,但不能直接反映HBV在患者体内的复制情况,HBV-DNA水平检测可以更好地反映病毒的复制情况。     

HBV-M与定量PCR法检测HBV-DNA相关性探析

目的：探讨乙肝病毒DNA（HBV-DNA）与其血清学标志物HBV-M之间的相关性。方法：选取本院收治的乙肝患者183例作为研究对象,采集并分离患者的血清标本,分别采用荧光定量PCR法和酶联免疫吸附法对患者的HBV-DNA、HBV-M进行检测,在不同的HBV-M模式下分析其与HBV-DNA间的关系。结果：在HBsAg（＋）＋HBeAg（＋）＋HBcAb（＋）的模式下,HBV-DNA的检测阳性率为97.9%;HBsAg（＋）＋HBeAg（＋）模式下,HBV-DNA的检测阳性率是100%;两者比较差异无统计学意义,但这两种模式下的检测阳性率都显著高于其他模式（P〈0.05）。结论：乙肝病毒的血清学标志物的模式不同,HBV-DNA的检测阳性率不同,乙肝患者机体内的病毒含量也有差异,HBV-M和HBV-DNA的检测分别是乙肝感染的间接证据和直接证据,同时对患者进行这两项指标的检测对于乙肝的临床诊断、病情判定、传染性的评估具有重要的意义。     

乙肝HBV DNA荧光定量检测与乙肝五项及perS1的相关性分析

目的分析乙肝五项及PreS1-Ag联合检测与HBV-DNA结果的一致性,探讨三者的相关性。方法分别采用ELISA、PCR的方法对328例乙肝患者进行HBV五项、前S1抗原及HBV-DNA的检测。结果在HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)的模式下,HBV-DNA、PreS1-Ag的阳性率分别为81.0%、79.4%,在HBsAg(+)HBeAg(+)的模式下,HBV-DNA、PreS1-Ag的阳性率分别为85.7%、80.0%,两者的检出率差异无统计学意义(P0.05);在HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)模式下,HBV-DNA、PreS1-Ag的阳性率分别为40.8%、35.7%,在HBsAg(+)HBcAb(+)模式下,HBV-DNA、PreS1-Ag的阳性率分别为54.5%、48.5%,在HBsAg(+)HBeAb(+)模式下,HBV-DNA、PreS1-Ag的阳性率分别为50.0%、50.0%,在HBsAg(+)模式下,HBV-DNA、PreS1-Ag的阳性率分别为100%、100%。PreS1-Ag和HBeAg的阳性检出率在HBV-DNA阳性与阴性标本中差异均有统计学意义(P0.005)。结论 PreS1-Ag、乙肝五项及HBV-DNA的结果密切关联,联合检测PreS1-Ag、乙肝五项能够很好的反映乙肝病毒的复制及传染性,对于乙肝的诊治具有指导意义。     

HBV—DNA实时荧光定量检测与HBV免疫标志物结果相关性分析

目的通过对血清中乙型肝炎病毒核酸（HBV～DNA）的实时荧光定量PCR（real—timePCR）（荧光探针法）检测结果与乙肝免疫标志物相关性分析,从而探讨二者在临床诊断中的应用。方法采用real—timePCR法检测HBV—DNA．ELISA法检测血清HBV免疫标志物。结果121例乙型肝炎标本中,FIBsAg＋、HBeAg＋、FIBcAb＋阳性组患者有39例．血清HBV—DNA阳性率67％,平均浓度1．42x10’Iu／rnl;HBsAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋阳性组患者有64例,血清HBV—DNA阳性率45％,平均浓度4．29×10^5IU／ml;HBsAg＋,HBcAb阳性组患者有6例,血清HBV—DNA定量值均为〈500;HBsAg＋,HBeAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋有2例,血清HBV-DNA阳性50％,平均浓度2．96×10^4IU／ml。结论血清中HBV—DNA定量检测结果与乙肝免疫标志物结合能更好地为临床提供准确可靠的诊断数据。     

血清中前S1抗原与HBV-DNA、HBeAg检测结果及临床意义的分析

目的对比分析前S1抗原、HBV—DNA和HBeAg在乙型肝炎感染期主要临床意义。方法用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测前S1抗原和乙肝血清标志物“五项”，用荧光定量聚合酶反应（PCR）检测HBV—DNA，对619例乙肝病毒标志物进行检测，检测结果进行统计分析。结果619例中HBV-DNA阳性率78．4％[485／619]，前S1抗原的阳性率为69．34％[429／619]，其中HBeAg阳性／HBeAg阴性[HBeAb阳性]又分为两组，结果：前S1抗原阳性率在EBeAg阳性模式组中明显高于HBeAg阴性／抗HBeAb阳性模式组，前S1抗原与HBV—DNA和HBeAg检测有明显相关性和互补性。结论前S1抗原的检测可以较好的反映HBV存在和复制的情况，前S1抗原作为辅助或补充指标联合HBV血清标志物与HBV—DNA同步动态监测，为乙型肝炎的诊断、治疗和预后判断提供依据，具有重要临床价值。     

乙型肝炎病毒外膜大蛋白含量与核酸载量的相关性研究

目的探讨乙型肝炎患者外膜大蛋白(HBV-LP)含量与HBV-DNA的相关性及临床意义。方法对270例HBV感染者采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清的HBV-LP、HBeAg,实时荧光定量PCR法定量检测HBV DNA,并进行相关性分析。结果 270例HBV感染者血清中HBV-LP含量与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关;在152份HBeAg阳性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为95.142%和93.189%,两者差异无显著性;在118份HBeAg阴性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为46.102%和56.125%,两者差异无显著性。结论血清HBV–LP含量能反映HBV感染者体内HBV复制程度,其灵敏度高于HBeAg,可作为判断HBV复制新的血清学指标。     

HBsAg阴性献血者乙肝五项标志物及HBV-DNA检测性分析

目的通过HBsAg阴性献血者乙型肝炎五项标志物和HBV-DNA的相关性分析,论证HBsAg阴性血液的安全性。方法应用酶联免疫法检测乙型肝炎五项标志物;应用实时荧光定量PCR检测技术检测HBV-DNA。结果3398例HBsAg阴性献血样本,HBV-DNA检测总阳性率为2.73%,其中HBsAb（＋）、HBcAb（＋）模式组占6.59%,HBV-DNA阳性率为5.80%;HBsAb（＋）、HBeAb（＋）、HBcAb（＋）模式组占4.74%,HBV-DNA阳性率为6.83%;HBcAb（＋）组占6.24%,HBV-DNA阳性率为5.19%;HBeAb（＋）、HBcAb（＋）模式组占5.86%,HBV-DNA阳性率为4.52%;HBsAb（＋）模式组占31.99%,HBV-DNA阳性率为1.56%;全阴模式组占44.59%,HBV-DNA阳性率为2.11%。结论HBsAg阴性的献血者仍然存在HBV感染的危险,特别当单独HB-cAb检测阳性或合并HBsAb、HBeAb等阳性标志物时,输血潜在感染的风险增加,应同时检测乙肝其他标志物,推行灵敏度高的核酸扩增技术筛查血液,可以进一步减少输血感染率。     

乙型肝炎病毒表面抗原在慢性乙型肝炎病毒感染后不同临床阶段的定量检测及临床意义

目的 测定慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染后不同临床阶段患者血清乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）定量,同时探究其与患者血清HBV DNA水平和年龄的相关性.方法 将未经抗病毒治疗的774例慢性HBV感染患者按照临床特征分为六组：慢性HBV携带组（102例）、非活动性HBsAg携带组（211例）、乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性慢性乙型肝炎组（236例）、HBeAg阴性慢性乙型肝炎组（114例）、HBeAg阳性乙型肝炎肝硬化组（52例）、HBeAg阴性乙型肝炎肝硬化组（59例）,采用化学发光微粒子免疫分析法测定患者血清HBsAg定量,实时荧光定量聚合酶链反应法测定患者血清中HBV DNA定量,血清HBsAg和HBV DNA需要经常用对数转换后进行组间比较.结果 HBsAg定量由高到低分别为慢性HBV携带组、HBeAg阳性慢性乙型肝炎组、HBeAg阴性慢性乙型肝炎组、非活动性HBsAg携带组、HBeAg阴性乙型肝炎肝硬化组和HBeAg阳性乙型肝炎肝硬化组[7.80（6.69 ～ 8.32）、7.11（5.42～8.27）、6.57（5.66 ～ 7.53）、6.38（4.39～ 7.40）、6.22（4.84～ 6.91）、6.13 （5.48～7.01）].HBeAg阳性慢性乙型肝炎组和HBeAg阴性慢性乙型肝炎组HBsAg定量与HBV DNA呈正相关（r=0.714和0.390,P＜0.01）.慢性HBV感染患者血清HBsAg的定量与年龄呈负相关（r=-0.416,P＜0.01）;监测年龄≥40岁非活动性HBsAg携带者的血清HBsAg定量有重要的临床价值.结论 慢性HBV感染后不同临床阶段患者血清HBsAg定量不同,血清HBsAg定量与患者HBV DNA水平和年龄相关,临床上应重点监测年龄≥40岁非活动性HBsAg携带患者血清HBsAg定量.     

合肥地区HBV感染及其活动性的免疫学调查与分析

目的：调查本区域HBV感染血清模式的分布及病情活动状况特征。方法：调查我室2001年以来血清＂两对半＂检测标本,选取含盖了全部HBV感染模式血清426份,以荧光定量PCR法检测HBV-DNA;以速率法检测血清ALT及AST活性。以50份HBV阴性血清为对照。结果：HBV感染血清模式12种,其中常见阳性模式有6种：均伴有显著较高的HBV-DNA含量及复制水平（P〈0.05）,且血清ALT和AST活性异常增高（P〈0.05）,显著高于对照组（P〈0.05）。结论：本区域内HBV感染血清模式丰富,以6种模式较常见;既往感染而非＂乙肝＂标志的血清模式也可能伴随出现血清中HBV的复制和肝功能异常的＂乙肝＂实质现象,此应引起相关临床的重视。     

血清HBV-DNA与HBV标志物定量关系的探讨

目的探讨乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）含量与乙型肝炎血清免疫标志物（HBV-M）定量检测的相关性。方法对200例乙肝患者血清用实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测HBV-DNA,同时采用电化学发光免疫测定法（ECLIA）检测HBV-M含量,并对各项检测结果进行统计学分析。结果 HBV-DNA含量与HBeAg、HBeAb成正相关（r=0.537,r=0.531）,与HBsAg成负相关（r=-0.456）,与HBcAb无相关关系。乙肝患者在HBV-DNA不同含量分组（〈103、103、104、105、≥106）中,随着HBV-DNA含量增加,HBsAg＋/HBeAg＋/HBcAb＋（大三阳）患者HBsAg含量减少,HBeAg含量升高,当HBV-DNA〉104时,HBeAg随着HBV-DNA增加而高水平维持,但没有显著性差异（P〉0.05）。HBsAg＋/HBeAb＋/HBcAb＋（小三阳）患者HB-sAg含量在同组间均比大三阳患者高,HBeAb含量变化与大三阳患者HBeAg变化相同。结论 HBV-DNA与HBeAg、HBeAb、HBsAg具有一定相关性,HBV-M定量检查可指示病人传染性强弱,但尚不是最可靠的指标,同时联合检测HBV-M和HBV-DNA可以对病情跟踪监测,为临床诊断和疗效观察提供依据。     

乙肝病毒前S1抗原检测在入境人员检测诊断中的应用价值

目的评价乙肝病毒PreS1抗原在入境人员检测中的应用价值。方法将2008—2010年经我中心体检的362份入境乙肝病毒表面抗原(HBsAg)阳性的血清标本进行PreS1抗原检测,同时用PCR法进行乙型肝炎病毒基因(HBV-DNA)测定。结果PreS1总阳性率为41.16%,HBV-DNA阳性率为43.92%,乙肝病毒e抗原(HBeAg)阳性率为29.83%。PreS1总阳性率明显高于HBeAg阳性率。PreS1与HBV-DNA的总符合率为84.80%。结论PreSl抗原作为乙肝感染和复制的血清学指标敏感性高于HBeAg,对提示乙肝患者的病情发展和转归有重要临床意义。PreS1抗原可以作为一项新的乙肝病毒复制的指标在入境人员中进行筛查。