非那西丁及其代谢产物对乙酰氨基酚的高效液相色谱测定

目的建立非那西丁及其代谢产物对乙酰氨基酚的高效液相色谱测定方法.方法色谱柱:Nova-PakR C18(3.9 mm×150 mm,5μm);流动相为甲醇水溶液,其梯度洗脱程序为:17%(体积分数,下同)甲醇(保持5 min)→80%甲醇(10 min)→17%甲醇(12 min);检测波长254 nm.结果非那西丁、对乙酰氨基酚线性范围分别为0.687～87.920 μg/mL(r=0.9999,n=5),0.423～54.200μg/mL(r=0.9997,n=5).低、中、高三种浓度的平均方法回收率非那西丁为96.9%(n=5),对乙酰氨基酚为95.1%(n=5); 日内,日间精密度(RSD)均小于6%(n=5).结论本研究为非那西丁的药物代谢研究提供了一种测定方法.     

HPLC法测定非那西丁和对乙酰氨基酚的血浓度

利用探针药物检测CYP450 同工酶活性是临床药理学和生理、生化实验等研究的重要手段之一.非那西丁(phenacetin)是研究P4501A2(CYP1A2)酶活性的特异性底物[1],非那西丁试验通过口服或注射非那西丁后,同时测定血中非那西丁及其代谢产物对乙酰氨基酚的药物浓度,以反应CYP1A2 在体内的活性.本实验建立的方法简便、快捷,灵敏度、准确度高,为非那西丁试验研究肝脏CYP1A2在体内的药物代谢活性提供了一种准确、快捷的方式.     

非那西丁及其代谢产物对乙酰氨基酚的高效液相色谱测定

目的　建立非那西丁及其代谢产物对乙酰氨基酚的高效液相色谱测定方法。方法　色谱柱:Nova Pak^RC₁₈(3.9mm×15 0mm ,5 μm) ;流动相为甲醇水溶液,其梯度洗脱程序为:17% (体积分数,下同)甲醇(保持5min)→80 %甲醇(10min)→17%甲醇(12min) ;检测波长2 5 4nm。结果　非那西丁、对乙酰氨基酚线性范围分别为0.687～87.920μg/mL(r=0.9999,n=5) ,0.423～54.200μg/mL(r==0 .9997,n=5)。低、中、高三种浓度的平均方法回收率非那西丁为96.9% (n=5) ,对乙酰氨基酚为95 .1% (n=5 ) ;日内,日间精密度(RSD)均小于6 % (n=5 )。结论　本研究为非那西丁的药物代谢研究提供了一种测定方法。     

HPLC/MS/MS法测定大鼠肝微粒体系统中非那西丁及其代谢物的浓度

目的:以高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠肝微粒体孵育液中非那西丁及其代谢物对乙酰氨基酚的浓度。方法:色谱柱为XTerraMSC18,流动相为甲醇-0.1%甲酸不同比例梯度洗脱,流速为0.2mL·min-1;质谱仪为电喷雾-三重四极杆质谱,以多反应监测方式采集数据。结果:非那西丁和对乙酰氨基酚的检测浓度线性范围分别为45～9000(r=0.9998)、15.2～1520ng·mL-1(r=0.9996);平均回收率分别为(96.2±2.3)%～(98.3±2.4)%、(99.6±2.1)%～(100.2±2.6)%;日内及日间精密度均小于5%,最低检测浓度分别为9、10ng·mL-1。结论:本法简单、快速、灵敏,适宜于检测大鼠肝微粒体孵育液中非那西丁及其代谢物浓度。     

液相色谱-串联质谱法同时测定大鼠血浆中咪达唑仑和非那西丁及其药动学研究

目的建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)同时测定非那西丁(PN)、咪达唑仑(MDZ)在大鼠血液中的含量。方法大鼠随机被分为PN组、MDZ组和PN-MDZ合用组(均n=6),分别尾静脉注射PN、MDZ及PN和MDZ混合探针药物,剂量均为1 mg·kg-1。于指定时间眼眶采集血样,以苯海拉明为内标,采用LC-MS/MS测定大鼠血浆中探针药物及其代谢产物的浓度。色谱柱为Kinetex XB-C18柱(100 mm×3.0 mm,2.6μm),流动相为甲醇∶0.025%甲酸水,进行梯度洗脱。电喷雾离子源,以多反应离子监测方法进行正离子扫描,PN和其代谢产物醋氨酚(Ace),MDZ和其代谢产物1-羟基咪达唑仑(1-OH-MDZ)及苯海拉明离子对分别为m/z 180.2→110.0,m/z 152.2→110.1,m/z 326.2→291.2,m/z 342.2→324.2和m/z 256.3→167.2。结果PN、Ace、MDZ和1-OH-MDZ线性范围分别为:4.288~21 440 ng·m L-1、1.038~5 190 ng·m L-1、4.664~11 660 ng·m L-1、0.01~50 ng·m L-1;回收率、稳定性和日内、日间精密度均符合生物样品分析要求;PN和MDZ单用与合用前后药动学参数无显著差异(P>0.05)。PN单用和与MDZ合用后t1/2分别为(0.44±0.15)、(0.42±0.08)h,ρmax分别为(9.35±1.58)、(10.17±0.76)μg·m L-1,AUC0-6 h分别为(4.21±0.63)、(4.90±0.42)μg·h·m L-1;MDZ单用和与PN合用后t1/2分别为(0.64±0.09)、(0.68±0.05)h,ρmax分别为(3.48±0.51)、(3.01±0.64)μg·m L-1,AUC0-6 h分别为(2.58±0.41)、(2.08±0.29)μg·h·m L-1。结论建立的测定方法可用于PN、MDZ以及其代谢产物的药动学研究,并证明PN、MDZ在大鼠体内基本没有代谢的相互作用。     

高效液相色谱法同时测定对乙酰氨基酚和非那西丁的血药浓度

目的:建立以高效液相色谱法同时测定对乙酰氨基酚和非那西丁血药浓度的方法。方法:以DiamonsilC18 为色谱柱,甲醇-水(45∶55)为流动相,茶碱为内标,检测波长为254nm ,柱温为室温。结果:对乙酰氨基酚和非那西丁的最低检测浓度为5μg/ml,线性范围为5～25μg/ml;方法回收率均>95 % ,日内、日间RSD均<4 .0 %。结论:本法简便、准确,能满足临床对于对乙酰氨基酚和非那西丁血药浓度测定的要求。     

咖啡因及代谢产物的尿药浓度测定方法建立及临床应用

目的 建立同时测定尿液中咖啡因及3种代谢产物茶碱、副黄嘌呤和可可碱浓度的方法并应用于临床。方法 以咖啡因-¹³C₃-d3为内标,尿液样本经乙腈沉淀蛋白后,采用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)技术测定咖啡因及3种代谢产物的浓度。以Waters ACQUITY UPLC^? BEH HILIC为色谱柱,60 mmol/L乙酸铵溶液(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.5mL/min,柱温为38℃,进样量为2μL。采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 195.1→110.0(咖啡因)、m/z 181.1→124.0(茶碱)、m/z 181.1→124.0(副黄嘌呤)、m/z 181.1→138.0(可可碱)、m/z 198.1→140.1(内标)。采用上述方法测定19例早产儿呼吸暂停(AOP)患儿尿液中咖啡因及3种代谢产物的浓度。结果 咖啡因、茶碱、副黄嘌呤、可可碱检测质量浓度的线性范围分别为0.200～200、0.050～50.0、0.050～50.0、0...     

复方氯唑沙宗片人体生物等效性研究

目的:研究2种复方氯唑沙宗片在健康志愿者体内的生物等效性.方法:20例男性健康志愿者随机交叉口服2种制剂(氯唑沙宗500 mg,对乙酰氨基酚600 mg),剂间间隔为1周.以非那西丁为内标,用高效液相色谱法同时测定氯唑沙宗和对乙酰氨基酚的血药浓度.结果:健康志愿者口服复方氯唑沙宗片后对乙酰氨基酚Cmax分别为(14.65±4.10)和(16.95±5.14)μg·mL-1;Tmax,分别为(0.8±0.3)和(0.7±0.3)h;AUC0-12分别为(47.63±13.21)和(48.89±14.43)h·μg·mL-1;t1/2分别为(2.90±0.99)和(2.82±0.62)h.氯唑沙宗Cmax分别为(18.07±5.07)和(18.30±3.31)μg·mL-1;Tmax分别为(1.2±0.5)和(1.1±0.4)h;AUC0-8分别为(43.14±7.33)和(43.90±6.39)h·μg·mL-1;t1/2分别为(1.09±0.17)和(1.12±0.25)h.各参数经统计学双单侧t检验,均有显著性差异(P<0.05).对乙酰氨基酚和氯唑沙宗同种成分的相对生物利用度分别为(109.1±30.9)%和(114.0±50.5)%.结论:2种氯唑沙宗片在健康志愿者体内的药动学参数相似,具有生物等效性.     

HPLC梯度洗脱法测定对乙酰氨基酚原料药及有关物质对氨基酚

目的:采用高效液相色谱(HPLC)法测定对乙酰氨基酚原料药及有关物质的含量。方法:用ZORBAXSB-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以5%乙腈的甲醇溶液和0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为272nm,流速1.0mL·min-1。结果:对乙酰氨基酚与对氨基酚能完全分离,对乙酰氨基酚和对氨基酚分别在10.64～106.4μg·mL-1和0.5104～5.104μg·mL-1浓度范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9999和0.9998,重复性试验的RSD为0.12%和8.6%。结论:该方法专属性好,操作简便,快速准确,可用于对乙酰氨基酚原料药及有关物质对氨基酚的含量测定。     

液相色谱-串联质谱法测定健康人口服复方氨酚右敏溶液后的尿药浓度

目的 建立高效液相色谱-串联质谱联用法同时测定人尿中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏(解热镇痛药)浓度及其排泄.方法 12名健康志愿者按3×3拉丁方顺序进行,单剂口服给药后,按设计时间点收集尿样;尿样加入曲马多为内标,甲醇沉淀蛋白后进样,用多重反应监测,定量检测对乙酰氨基酚和右氯苯那敏的浓度.结果 对乙酰氨基酚和右氯苯那敏线性范围分别为0.05～20.00μg·mL-1和0.05～20.00 ng·L-1;96 h内对乙酰氨基酚和右氯苯那敏低、中、高剂量组的原形药物的平均累积排泄率分别为(3.87±0.75)%、(3.86±1.33)%、(3.56±1.45)%和(8.06±3.79)%、(7.62±3.39)%、(8.10±3.42)%.结论 本方法 适于同时测定人尿中对乙酰氨基酚和右氯苯那敏浓度,且2者在人体内主要以非原形药排泄.     

成骨细胞的功能与损伤和骨质疏松的防治

骨质疏松是一种全身性骨骼疾病,导致骨折风险增加。成人的骨量通过破骨细胞的骨吸收和成骨细胞的骨形成作用来维持动态平衡,治疗骨质疏松症的理想策略是抑制破骨细胞的骨吸收和/或增强成骨细胞的骨形成功能。目前针对保护成骨细胞及增强其功能的骨质疏松疗法相对较少。因此,本文针对成骨细胞相关功能蛋白、各种细胞损伤机制（内质网应激、氧化应激、机械过载、微小RNA和长链非编码RNA的影响等）及骨质疏松的治疗与预防作一综述,以期为针对增强成骨细胞功能的骨质疏松治疗策略提供新思路。     

PTEN和DNA含量与非小细胞肺癌侵袭转移的关系探讨

目的 研究非小细胞肺癌(NSCLC)组织中抑癌基因PTEN的表达和DNA含量与NSCLC侵袭、转移的关系.方法 采用免疫组织化学SP方法检测PTEN在78例肺癌标本中的表达,并用流式细胞术检测30例肺癌标本中DNA含量.结果:肺癌标本中PTEN蛋白总缺失率为42.3%,有淋巴结转移组和无淋巴结转移组肺癌表达缺失率分别为52.1%和26.7%(P＜0.05),其表达缺失率随TNM分期增加而上升,分期越晚表达缺失率越高.PTEN缺失率高者生存时间短.DNA指数(DI)的分布范围在1.04～1.93.异倍体肿瘤24例,DI值随TNM分期增加而增加(P＜0.05),与淋巴结转移呈正相关.结论 肺癌组织中PTEN的表达与肺癌淋巴结转移有显著相关性,肺癌细胞DNA含量与肺癌TNM分期及淋巴结转移密切相关.检测PTEN蛋白表达和DNA含量将有助于判断肺癌的转移及预后.     

Comparison of formation of thiolactones and active metabolites of prasugrel and clopidogrel in rats and dogs

1. Prasugrel and clopidogrel are antiplatelet prodrugs that are converted to their respective active metabolites through thiolactone intermediates. Prasugrel is rapidly hydrolysed by esterases to its thiolactone intermediate, while clopidogrel is oxidized by cytochrome P450 (CYP) isoforms to its thiolactone. The conversion of both thiolactones to the active metabolites is CYP mediated. This study compared the efficiency, in vivo, of the formation of prasugrel and clopidogrel thiolactones and their active metabolites.

2. The areas under the plasma concentration versus time curve (AUC) of the thiolactone intermediates in the portal vein plasma after an oral dose of prasugrel (1 mg kg^?1) and clopidogrel (0.77 mg kg^?1) were 15.8 ± 15.9 ng h ml^?1 and 0.113 ± 0.226 ng h ml^?1, respectively, in rats, and 454 ± 104 ng h ml^?1 and 23.3 ± 4.3 ng h ml^?1, respectively, in dogs, indicating efficient hydrolysis of prasugrel and little metabolism of clopidogrel to their thiolactones in the intestine.

3. The relative bioavailability of the active metabolites of prasugrel and clopidogrel calculated by the ratio of active metabolite AUC (prodrug oral administration/active metabolite intravenous administration) were 25% and 7%, respectively, in rats, and 25% and 10%, respectively, in dogs.

4. Single intraduodenal administration of prasugrel showed complete conversion of prasugrel, resulting in high concentrations of the thiolactone and active metabolite of prasugrel in rat portal vein plasma, which demonstrates that these products are generated in the intestine during the absorption process.

5. In conclusion, the extent of in vivo formation of the thiolactone and the active metabolite of prasugrel was greater than for clopidogrel’s thiolactone and active metabolite.

     

阿立哌唑与利培酮治疗自闭症谱系障碍与注意缺陷多动障碍共病患儿的疗效与安全性评价

目的：评价阿立哌唑与利培酮治疗自闭症谱系障碍（ASD）与注意缺陷多动障碍（ADHD）共病患儿的疗效与安全性。方法：选取在某院精神科治疗的ASD和ADHD共病患儿68例,根据随机数字表法将患儿分为阿立哌唑组（n=34）和利培酮组（n=34）。阿立哌唑组患儿接受起始剂量为5 mg·d^-1的阿立哌唑片口服治疗,最终剂量增加至15 mg·d^-1。利培酮组患儿接受起始剂量为1 mg·d^-1的利培酮片口服治疗,最终剂量增加至2 mg·d^-1;2组患儿均治疗12周。在基线（T₀）、治疗6周（T₁）与12周（T₂）时,采用注意缺陷/多动评定量表（ADHD-RS）评价患儿总体ADHD症状变化情况;采用康纳斯行为评定量表（CRSR）教师用量表多动因子（CRSR-I）评价患儿多动症的改善情况;采用CRSR不注意缺陷-冲动因子（CRSR-H）评价患儿注意力缺陷的改善情况;采用临床整体印象-严重程度量表（CGI-S）及儿童总体评估量表（C-GAS）评分评价患儿整体功能。对患儿的相关临床指标进行常规监测,比较2组患儿药物不良事件与安全性。结果：与T₀时比较,阿立哌唑组患儿T₁与T₂时,ADHD-RS、CRSR-I、CRSR-H与CGI-S评分均显著降低（均P<0.05）,C-GAS评分显著提高（P<0.05）。利培酮组患儿T₂时,ADHD-RS、CRSR-I、CRSR-H与CGI-S评分均显著降低（均P<0.05）,C-GAS评分显著提高（P<0.05）。2组患儿的ADHD症状显著改善,多动症状与不注意缺陷-冲动症状显著改善,患儿的整体功能也显著改善。2组患儿主要的不良事件是食欲增加、体质量增加与嗜睡,但均没有发生严重的不良事件。T₂时,利培酮组患儿催乳素水平显著提高（t=9.619,P<0.001）,其他临床指标没有显著性差异（均P>0.05）。结论：阿立哌唑和利培酮能够通过减少ASD和ADHD共病患儿的注意力涣散和多动症症状来改善患儿整体功能,具有较高的疗效、安全性,值得临床推广应用。     

Whole-body retention of mercury and selenium and histopathological and morphological studies of kidneys and liver of rats exposed repeatedly to mercuric chloride and sodium selenite

Distribution and retention of mercury and selenium was studied in rats exposed repeatedly to HgCl₂ injections (0.5 mg Hg/kg to the tail vein every other day) and intragastrically to Na₂SeO₃ (0.5 mg Se/kg every day), applying combined and separate administration of these metals for 2 weeks. Whole-body retention of mercury in the presence of selenium was augmented by 20% and that of selenium in the presence of mercury by 4% with respect to the administered dose. Combined administration of mercuric chloride and sodium selenite brought about damage to the epithelial cells of renal proximal convolutions and formation of protein casts in their lumen. These changes had the same pattern as those induced by administration of mercuric chloride alone, but the intensity was lower. Submicroscopic studies revealed that repeated combined administration of sodium selenite and mercuric chloride did not completely abolish the mercury-induced mitochondrial swelling and contributed to chromatin destruction in the hepatocyte nuclei.This work was supported by the Section of Medical Sciences of the Polish Academy of Sciences (Agreement 537/VI)     

军地药品招标模式利弊分析及对军队药品招标的启示

目的分析现阶段全军统筹药材网上集中采购和地方基本药物招标采购实施情况,探索建立具有军队特色的药品招标模式。方法通过文献收集、实地调研和资料分析等方法,对军队和地方省市药品招标模式利弊进行分析。结果全军统筹药材网上集中采购在运行中存在一定问题,各省市基本药物招标有一定借鉴价值。结论建议总部组织专家,建立统一规范的药品质量评分指标体系和相关落实措施。     

阿立哌唑与利培酮治疗痴呆精神行为症状的疗效及安全性比较

目的观察阿立哌唑和利培酮治疗老年痴呆精神行为症状的疗效及安全性。方法采用随机对照研究,将具有精神行为症状的痴呆患者68例完全随机分为阿立哌唑组及利培酮组,各34例。阿立哌唑组患者服用阿立哌唑,起始剂量2．5mg／d,最大剂量不超过15mg／d;利培酮组患者口服利培酮,起始剂量0．5mg／d,最大剂量不超过3mg／d。疗程均为8周。治疗前和治疗第2、4、8周末采用痴呆病理分析评定量表（BEHAVE—AD）评定疗效,用副反应量表（TESS）评定不良反应,并于入组时和治疗第8周末分别检测2组患者空腹血糖、餐后2h血糖、TC、TG、LDL—C、HDL—C及体重。结果阿立哌唑组和利培酮组患者治疗2、4、8周后BEHAVE—AD评分均明显低于治疗前[阿立哌唑组：（14．8±4．2）、（10．2±3．6）、（6．8±2．8）分比（16．4±4．6）分;利培酮组：（15．2±3．9）、（11．8±3．8）、（7．2±3．0）分比（17．2±5．O）分,P〈0．05或P〈0．01]。2组患者间治疗前及治疗后BEHAVE—AD评分比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。2组不良反应发生率均为8．8％（3／34）,差异无统计学意义（P〉0．05）。利培酮组治疗8周末体重较治疗前增加明显[（71±6）kg比（66±6）kg,P〈0．05],TG及LDL—C升高[分别为（1．62±0．46）mmol／L比（0．96±0．29）mmol／L．（3．82±0．86）mmol／L比（3．08±0．74）mmol／L,而阿立哌唑组则改变不明显（均P〉0．05）。结论阿立哌唑治疗老年痴呆精神行为症状总体疗效、安全性与利培酮相当,但阿立哌唑对患者血糖、血脂及体重影响小于利培酮。