辛伐他汀对去势大鼠骨质疏松防治作用的试验研究

目的:观察辛伐他汀对去势大鼠骨质疏松防治的作用.方法:40只雌性SD大鼠,随机平均分为4组,即假手术组、去势对照组、雌激素组(苯甲酸雌二醇0.1 mg/kg,每三天皮下注射一次,连续用药至动物处死)、辛伐他汀组(辛伐他汀5 mg/kg.d灌胃连用2周,停用5周,再连用两周,停药处死动物).术后一个月开始药物干预.试验开始及处死动物后分别测定大鼠股骨的股密度,放射免疫法测定IL-6、BGP值,光镜下观察大鼠股骨病理学变化.结果:试验结束时,去势对照组大鼠骨密度BMD低于假手术组,雌激素组、辛伐他汀组的BMD高于去势对照组,均P＜0.05.去势对照组的IL-6的值高于假手术组,治疗组IL-6的值低于去势对照组,而雌激素组IL-6的值低于辛伐他汀组,均P＜0.05.去势对照组的BGP高于假手术组,而治疗组的BGP高于去势对照组,辛伐他汀组的BGP高于雌激素组,均P＜0.05.治疗组与去势对照组相比骨组织病理学变化均有改善.结论:辛伐他汀能增加骨质疏松大鼠的骨密度,改善骨组织病理学变化,提高BGP的水平,降低IL-6的水平,有效的防治骨质疏松.     

阿仑膦酸钠?辛伐他汀联合应用治疗大鼠骨质疏松的作用

目的:通过观察阿仑膦酸钠联合辛伐他汀对雌性去势大鼠骨质疏松的影响.来探讨两种药物联合应用治疗骨质疏松的可行性.方法:30只雌性sD大鼠随机分成6组,即去势对照组、去势阿仑膦酸钠组、去势联合用药组、假手术对照组、假手术阿仑膦酸钠组、假手术联合用药组.术后2周开始药物干预,3个月处死动物后分别测定大鼠股骨的骨密度,ELISA测定血清骨钙素(BGP)、骨保护素(OPG)、骨保护素配体(OPGL).结果:去势对照组大鼠骨密度低于假手术对照组.去势阿仑膦酸钠组高于去势对照组(P<0.05),去势联合用药组高于去势阿仑膦酸钠组(P<0.05).去势对照组大鼠BGP高于假手术对照组(P<0.05),去势阿仑膦酸钠组低于去势对照组(P<0.05),去势联合用药组低于去势阿仑膦酸钠组(P<0.05).去势对照组OPG低于假手术对照组(P<0.05),去势阿仑膦酸钠组、去势联合用药组高于去势对照组(P<0.05).去势对照组OPGL高于假手不对照组(P<0.05),去势阿仑膦酸钠组、去势联合用药组低于去势对照组(P<0.05).结论:联合应用阿仑膦酸钠和辛伐他汀双早独应用阿仑膦酸钠对雌性去势大鼠骨质疏松有更好的防治作用,并可能通过影响OPG、OPGL发挥作用.     

雌激素和维生素K对大鼠血清IL-6含量的影响

目的通过检测雌激素和维生素K对IL-6、BGP、IGF-1表达的影响情况,以反映骨转换,探讨雌激素和维生素K防治骨质疏松（OP）的机理。方法以去卵巢雌性SD大鼠作为绝经早期OP模型。将50只大鼠随机分为5组：假手术组（Sham组）、卵巢去势组（OVX组）、卵巢去势＋雌激素组（OVX＋E组）、卵巢去势＋维生素K组（OVX＋Vitk组）和卵巢去势＋雌激素＋维生素K组（OVX＋E＋Vitk组）。卵巢去势1月后分组给药,8周后集中统一处死。取左侧股骨检测骨密度,取右心室血清检测白介素-6（IL-6）含量。结果 OVX组与Sham组比较,雌激素（BMD）显著下降,血清IL-6测量值明显升高,表明造模成功。OVX＋E组与OVX组比较,血清IL-6差别有显著性;OVX＋Vitk组与OVX组比较,血清IL-6测量值低,差别有显著性;OVX＋E＋Vitk组血清IL-6含量与Sham组最为接近。结论去卵巢大鼠BMD下降,骨吸收指标IL-6升高,表明绝经早期骨代谢处于骨吸收大于骨形成的高转换状态,导致骨质疏松。雌激素水平下降是OP的一个重要致病因素。骨密度及血清IL-6含量检测表明,维生素K和雌激素防治OP均有效,二者联合用药的作用明显高于单一用药。     

雷洛昔芬对去势大鼠骨密度IL-6的影响

目的观察雷洛昔芬对去势大鼠骨密度、血清IL-6的影响,探讨雷洛昔芬抗骨质疏松的作用机制。方法48只3月龄雌性SD大鼠,随机分为假手术组(SHAM),单纯去势组(OVX),去势 雌激素组(OVX E2),去势 雷洛昔芬组(OVX R),每组12只。3个月后处死,取大鼠股骨测定各组骨密度。采集血清,用放射免疫分析法检测并比较各组IL-6的表达,用单因素方差分析进行统计学分析。结果雷洛昔芬组大鼠骨密度显著高于去卵巢组(P<0.05),血清IL-6浓度值显著降低(P<0.01)。结论雷洛昔芬治疗骨质疏松的作用与血清IL-6水平降低相关。     

PEMF对OVX-OP大鼠骨组织IL-6表达的影响及意义

目的 观察脉冲电磁场(PEMF)对骨质疏松的治疗作用,从IL-6变化的角度探讨其治疗骨质疏松的机理.方法 6月龄雌性未孕Wistar大鼠40只,按体质量随机分为模型组(OVX)、假手术组(Sham)、PEMF组(PEMF OVX PEMF)、雌激素治疗组(Estrogen OVX E).OVX、PEMF、E组行双侧卵巢切除术,Sham组行假手术.术后第9周开始治疗:E组行苯甲酸雌二醇肌肉注射,0.5mg/kg,1次/2周.PEMF组大鼠暴露于脉冲电磁场治疗,1h·次-1·d-1,OVX、Sham组不予以任何处理,作为对照组.治疗10周后处死各组实验动物,测量腰椎骨密度、椎体的最大载荷.采用免疫组化检测椎体骨组织中IL-6表达情况并以图像分析进行组间比较.结果 IL-6主要表达于成骨细胞、骨细胞.PEMF治疗组IL-6的表达较OVX组明显增强;骨组织结构较OVX明显改善;骨密度、生物力学性能优于对照组.结论 PEMF对OVX-OP大鼠具有明显治疗作用;其治疗作用与IL-6在成骨细胞、骨细胞中的表达减弱密切相关.     

性激素缺乏对大鼠骨折愈合的影响

目的初步探讨性激素缺乏对骨折后大鼠骨折愈合的影响.方法采用64只3月龄Wistar大鼠,通过切除性腺后立即行右胫骨人造骨折手术.建立雌雄大鼠的骨折模型,分别于术后2、4、6、8周处死大鼠,取材行各项指标测定.结果(1)在术后不同时间组之间血钙(F=9.12.P＜0.005)、血镁(F=3.46,P＜0.05)和AKP值(F=6.7,P＜0.005)有显著性差异.(2)在去势组与非去势组之间股骨近端(F=6.29,P＜0.05)、胫骨骨折区(F=6.03,P＜0.05)BMD均有显著性差异,去势组BMD相对较低.大鼠胫骨骨折区BMD值在骨折后不同时期(F=17.54,P＜0.005)有显著性差异,随着术后时间的增加BMD值逐渐增加.(3)放射学检查显示非去势组骨痂和股骨近端骨密度较去势组高.(4)组织学检查显示去势大鼠的骨痂骨密度低,局部及周围骨质疏松化,骨痂编织骨化、板层化延迟.结论性激素缺乏会导致骨形成吸收偶联失衡,从而影响骨折愈合.     

骨质疏松性骨折的小鼠模型探索

目的建立操作简单、重复性好的骨质疏松性骨折小鼠动物模型,以用于中老年女性绝经后骨质疏松性骨折愈合情况的研究。方法选取12周龄健康的C57BL/6J雌性小鼠50只,其中基线组10只,去势组20只,假手术组20只。常规饲养1周后,处死基线组小鼠并测量血清雌激素水平,去势组小鼠通过腹正中切口行双侧卵巢切除,假手术组小鼠切除双侧卵巢周围等量的脂肪组织。去势后4周对小鼠的左大腿行后外侧切口,暴露股骨,从膝关节处逆行插入钢针进行髓内固定,直视下用手术刀切断股骨中下1/3段部分,造成股骨的横行或斜行骨折。两组小鼠在骨折术后2周和4周分别处死10只,测量血清雌激素水平、骨痂处骨密度（BMD）及Micro-CT情况。结果术后2周和4周假手术组雌激素浓度均高于去势组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。术后2周和4周假手术组和去势组BMD、骨体积、骨体积分数比较,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。虽然术后2周假手术组和去势组骨小梁分离度（Tb.Sp）比较差异无统计学意义（P＞0.05）,但术后4周两组Tb.Sp比较差异有统计学意义（P＜0.05）,而术后2周和4周两组骨小梁结构模型指数比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论小鼠骨质疏松性骨折模型具有操作简单、直观稳定等优点;去势后的小鼠成骨能力明显下降,可用于原发性绝经后骨质疏松性骨折的愈合及其骨代谢的细胞、分子及信号通路的机制研究。     

运动对去势雌性大鼠不同部位骨密度影响实验研究

目的:探讨运动对去势雌性大鼠不同部位骨密度(BMD)的影响。方法:将24只9月龄雌性大鼠根据体重大小进行配伍分为三组:对照组、单纯去势组、去势后运动组。单纯去势组和去势后运动组大鼠均行双侧卵巢切除。去势后运动组大鼠卵巢切除后在跑台上进行中等强度运动(18m/min,1h/d,5d/w)12周。12周后处死动物后用双能X线骨密度仪对各组大鼠椎体和股骨骨密度进行测定,以体重变化为协变量,采用协方差分析对不同部位骨密度进行分析。结果:股骨BMD组间比较差异有显著性意义,对照组明显高于去势组,运动组高于去势组和对照组,差异非常显著。腰椎BMD各组间比较差异有显著性意义,对照组和运动组均高于去势组,运动组与对照组之间无显著性差异。结论:运动可以预防去势大鼠骨量丢失,在椎体表现为预防骨量的丢失,在股骨表现为骨量增加。在大鼠骨质疏松模型中应该根据研究重点的不同选择不同的观察对象。     

补肾中药对去卵巢大鼠骨密度、骨钙含量及骨组织形态学的影响

目的:研究补肾中药对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用及其机制。方法:70只SD大鼠分为5组:正常对照组、假手术组、模型组、雌激素组、补肾中药组。手术12周后开始给药,连续给药12周,检测骨密度、骨钙含量和骨组织病理变化。结果:与假手术组比较,模型组BMD、骨钙含量均显著降低(P<0.01)。治疗后,雌激素组较模型组BMD、骨钙含量均显著增高(P<0.05),中药组较模型组BMD、钙含量均显著增高(P<0.05)。但雌激素组与中药组比较无统计学意义。结论:补肾中药有明显抗去卵巢大鼠骨质疏松的作用,为临床应用补肾中药治疗绝经后骨质疏松提供实验依据。     

去卵巢大鼠颅骨IL-10表达水平的研究

目的 观察研究去卵巢SD大鼠前后颅骨组织中IL-10的表达水平,探讨绝经后IL-10对骨质疏松影响的机制.方法 SD雌性大鼠随机分为正常对照组和去卵巢(OVX)后第5周组、第7周组;双能x线吸收法测定骨密度(BMD);取颅骨采用免疫组织化学ABO法及图像分析技术观察颅骨组织中IL-10表达变化.结果 OVX组与对照组比较BMD明显下降;ILZ-10在骨小梁和骨髓的分布类似,IL-10分布在骨小梁周边成骨细胞中,骨髓基质细胞也成阳性染色,成骨细胞染色要浅于基质细胞.去势组骨小梁周边阳性成骨细胞要明显少于对照组,并且染色较对照组浅.结论 去势引起骨组织IL-10表达下降,IL-10在骨质疏松发病机制中起着重要作用.     

辛伐他汀对大鼠急性心肌梗死后心肌白细胞介素-6表达的影响

目的:观察辛伐他汀对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌组织白细胞介素- 6 (IL -6)基因及其蛋白表达的影响。方法:Wistar大鼠随机分 3组:辛伐他汀治疗组(MI- S组)、梗死对照组(MI C组)和假手术组 (Sham组 )。前2组大鼠结扎左冠状动脉前降支(LAD)制成AMI模型,MI S组给辛伐他汀 40mg/kg灌胃治疗,余 2组给予生理盐水灌胃。4周后,RT- PCR法和免疫组织化学法分别检测左心室梗死及非梗死区IL- 6mRNA和蛋白的表达,Westernblot法测定左心室非梗死区心肌IL- 6蛋白表达。结果:大鼠AMI后 4周,MI C和MI S组左心室梗死及非梗死区心肌IL- 6mRNA及蛋白表达均较Sham组明显升高(P<0. 05),MI S组IL- 6mRNA及蛋白表达均较MI C组低 (P<0. 05)。3组血脂差异无统计学意义。结论:辛伐他汀可减少AMI大鼠左心室心肌IL 6mRNA及蛋白表达,此改变不依赖其降脂作用。     

维生素K抗去势后大鼠骨小梁骨质疏松形态的实验研究

目的 探讨维生素K对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用.方法 以去双侧卵巢雌性SD大鼠作为绝经早期骨质疏松模型.大鼠卵巢去势1个月后先后经腹腔注射维生素K15mg·kg-1·3d共2周,8mg·kg-1·3d共2周,12mg·kg-1·3d共2周,15mg·kg-1·3d共2周,8周后集中处死.称体重、子宫湿重,测左侧股骨骨密度,右侧股骨病理切片做骨小梁形态计量观察,检测右心室血清IL-6(白介素-6),BGP(骨钙素)和IGF-1(胰岛素样生长因子-1)含量.结果 维生素K能使模型大鼠的骨密度显著增加,使血清IL-6含量显著降低,BGP及IGF-1含量显著升高,明显改善骨小梁形态,而子宫重量无变化.结论 维生素K可改善骨质疏松大鼠的骨小梁形态,增加骨密度,而对子宫无影响.其机制可能是通过促骨形成,抗骨吸收起作用.     

辛伐他汀不同干预方案对骨质疏松大鼠骨质量的影响

目的探讨和比较不同干预方案下辛伐他汀对去卵巢大鼠骨丢失和骨质量下降的干预效果。方法3月龄雌性SD大鼠32只,随机分为4组,每组8只:假手术(A)组、卵巢切除(B)组、卵巢切除加辛伐他汀前半程干预组(C)和后半程干预组(D)。除A组接受假手术外,其余各组大鼠行双侧卵巢切除术,C组于术后给予辛伐他汀(5 mg/kg/d)干预10周后停药,D组于术后10周开始接受辛伐他汀干预。术后20周处死所有大鼠,采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清I型前胶原氨基端前肽(PINP)、I型胶原羧基端交联端肽(ICTP)水平,取第3、4、5腰椎,双能X线法检测大鼠第3腰椎骨密度,压缩试验检测第4腰椎侧最大载荷、弹性模量等生物力学指标,微计算机断层扫描技术(micro-CT)检测第5腰椎松质骨骨量和微观结构。结果 (1)血清学检测结果:B、C、D组PINP和ICTP均显著高于A组;(2)骨密度:B组显著低于其余各组,C、D组显著低于A组(P0.05);(3)生物力学:最大载荷、弹性模量B组显著低于其余3组(P0.05)、C、D组显著低于A组(P0.05);4、micro-CT:A组骨容积率(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)显著高于其余3组,骨小梁分离度(Tb.Sp)显著低于其余3组(P0.05),C、D组Tb.Sp显著低于B组(P0.05)。结论大鼠去卵巢20周后发生明显骨量丢失和骨质量下降,选择前半程干预和后半程干预均能部分阻止该模型骨量丢失、微结构退变和力学性能下降,但骨密度均不能恢复到正常水平。     

益生菌对卵巢摘除致雌激素缺乏小鼠牙周组织中IL-17表达的影响及其意义

目的：探讨益生菌干预对雌激素缺乏小鼠牙周组织中白细胞介素17（IL-17）表达的影响,阐明雌激素缺乏与牙周炎关联性的可能机制。方法：选取8周龄健康雌性C57BL/6J小鼠15只,随机分为假手术组、卵巢摘除组和益生菌干预组（卵巢摘除术后行益生菌灌服）,每组5只。采用平均骨密度测量技术检测实验前后小鼠骨矿物质密度（BMD）,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测小鼠骨髓细胞和牙龈组织中IL-17mRNA表达水平,流式细胞术检测小鼠骨髓中辅助性T细胞17（Th17）占CD4⁺ TCRβ⁺细胞的百分率。结果：与假手术组比较,卵巢摘除组小鼠BMD明显降低（P<0.05）,骨髓细胞和牙龈组织中IL-17 mRNA表达水平均明显升高（P<0.05）,Th17细胞占骨髓CD4⁺TCRβ⁺细胞百分率明显升高（P<0.05）;与卵巢摘除组比较,益生菌干预组小鼠BMD明显增加（P<0.05）,骨髓细胞和牙龈组织中IL-17 mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）,Th17细胞占骨髓CD4⁺TCRβ⁺细胞百分率明显降低（P<0.05）;与假手术组比较,益生菌干预组小鼠股骨BMD、骨髓细胞和牙龈组织中IL-17 mRNA表达水平及Th17细胞占骨髓CD4⁺TCRβ⁺细胞百分率差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：益生菌干预能阻止雌激素缺乏导致的小鼠牙周组织中IL-17水平升高,对雌激素缺乏引起的牙周炎具有预防作用。     

雌激素联合孕激素间断应用对去卵巢大鼠的影响

目的　观察雌激素苯甲酸雌二醇 (E)联合间断应用孕激素黄体酮 (P)对双侧卵巢切除 (OVX)大鼠的影响。方法　 35只雌性大鼠随机分成 5组 ,每组 7只。①假手术 (Sham)组、②卵巢切除 (OVX)组、③卵巢切除加雌激素 (OVX E)组、④卵巢切除加孕激素(OVX P)组、⑤卵巢切除加雌激素和孕激素 (OVX E P)组。实验 1 0周后处死大鼠 ,称取大鼠子宫和股骨湿重量 ,并测定子宫内膜厚度、骨密度和血清脂蛋白。结果　与Sham组相比 :OVX组和OVX P组子宫重量、股骨重量和BMD减少 ,子宫内膜变薄 ,体重、血总胆固醇 (TC)和低密度脂蛋白 (LDL)增加 ,差异有显著性 (P <0 .0 5) ;OVX E组体重、股骨重量、BMD、TC和LDL差异无显著性 (P>0 .0 5) ,子宫重量增加、子宫内膜增厚、血HDL增高 ,差异有显著性 (P <0 .0 5) ;OVX E P组股骨重量、BMD、子宫重量、子宫内膜厚度和血脂均差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　单纯使用孕激素不能阻止OVX导致的骨丢失 ;单纯使用雌激素导致OVX鼠子宫重量增加和子宫内膜增厚 ;雌激素联合间断应用孕激素能阻止OVX导致的骨丢失和体重增加 ,并可避免OVX和雌激素对子宫内膜的不良作用 ;间断加入孕激素没有影响雌激素对OVX大鼠脂代谢的有利作用     

运动联合阿仑膦酸钠片对去卵巢大鼠RANKL/OPG平衡及MAPK信号通路的影响

目的观察运动联合阿仑膦酸钠片(Aln)对去卵巢(OVX)大鼠核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/骨保护素(OPG)表达及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法 90只6月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、OVX组、Aln治疗组(OVX+Aln组)、运动治疗组(OVX+EX组)、Aln与运动联合治疗组(OVX+Aln+EX组),每组18只,后4组大鼠切除双侧卵巢。大鼠切除卵巢8周后,各治疗组大鼠分别进行1mg/(kg·d)Aln灌胃和(或)跑台运动干预。干预12周后采用双能X线骨密度仪检测大鼠左、右股骨骨密度(BMD),ELISA法检测大鼠血清RANKL、OPG含量,real-timePCR检测大鼠骨组织RANKL、OPGmRNA表达,蛋白质印迹分析法检测骨组织c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p38MAPK(p38)、细胞外调节激酶(ERK)的磷酸化水平及c-Fos表达。结果干预治疗12周后:(1)与sham组相比,OVX组大鼠左、右股骨BMD降低(P<0.05),血清RANKL含量增加、OPG含量降低、RANKL/OPG比值增大(P均<0.05),骨组织RANKLmRNA表达增加、OPGmRNA表达减少(P均<0.05)。(2)与OVX组相比,OVX+Aln组、OVX+EX组及OVX+Aln+EX组大鼠左、右股骨BMD均增加(P均<0.05),血清RANKL含量降低、OPG含量增加、RANKL/OPG比值减小(P均<0.05),骨组织RANKLmRNA表达减少、OPGmRNA表达增加(P均<0.05)。(3)与OVX+Aln组和OVX+EX组相比,OVX+Aln+EX组大鼠左、右股骨BMD,血清RANKL、OPG含量,骨组织RANKL、OPGmRNA表达差异有统计学意义(P均<0.05)。(4)与sham组相比,OVX组大鼠骨组织p-JNK、c-Fos表达增加(P均<0.05);OVX+Aln组、OVX+EX组及OVX+Aln+EX组与OVX组相比,大鼠骨组织p-JNK、c-Fos表达降低(P均<0.05),但3组间表达差异无统计学意义;p-p38、p-ERK在各组间的表达差异无统计学意义。结论运动联合Aln治疗能够提高OVX大鼠左、右股骨骨密度,其作用可能与调节RANKL/OPG平衡、抑制JNK磷酸化及c-Fos表达有关。     

健骨二仙提取液对去卵巢大鼠胫骨中段皮质骨形态计量学的影响

目的探讨健骨二仙提取液对去卵巢大鼠皮质骨形态计量学的影响,进一步研究该药防治骨质疏松症的作用机理。方法将42只6.5月龄雌性近交系大鼠随机分为4组:假手术组、单纯去卵巢组(即模型组)、卵巢切除 健骨二仙提取液(即治疗组)、卵巢切除 倍美力组(即倍美力组),采用去卵巢方法进行骨质疏松造模,6周后药物干预治疗10周,采用皮下注射盐酸四环素和钙黄绿素进行骨表面的双荧光标记,全部处死大鼠取右胫骨中段不脱钙骨切片进行骨形态计量学参数测定。结果与去卵巢组相比较,治疗组骨髓腔总面积减小(P<0.05),外膜面的骨形成各项参数均无明显变化,治疗组和倍美力组骨内膜面的骨吸收参数均降低(P<0.01),治疗组内膜面骨形成参数降低(P<0.05或<0.01),使皮质骨转换水平比倍美力组更接近假手术组水平。结论健骨二仙提取液可抑制去卵巢后高转换型骨质疏松的形成,总体抑制骨吸收大于骨形成,减少了骨量丢失和骨结构退化,是该药防治骨质疏松症的机理之一。     

The more efficacious acupoints of Zusanli and Sanyinjiao than that of non-acupoints on bone mass in osteopenic Ovariectomized rats

Osteoporosis is an age-related disease charac-terized by loss of bone mass and deterioration ofthe architecture of bone tissue,resulting in in-creased bone fragility(1).Post menopausal womenare at highest riskfor osteoporosis,and the loss isassociated with reductions in estrogen levels(2).Hormone replacement therapy(HRT)has beenused for many years to slowdownthe developmentof osteoporosis and to help alleviate other menopa-usal symptoms.Traditional HRT can be quite ef-fective in reducing the…