用彗星试验研究低剂量辐射对荷瘤鼠放疗后DNA损伤的影响

目的　研究低剂量辐射对荷瘤鼠放疗后外周血淋巴细胞DNA损伤的影响。方法　采用中性单细胞凝胶电泳检测低剂量辐射对荷瘤鼠放疗后外周血淋巴细胞DNA双链断裂的情况。观察了尾长、彗星长、头DNA%、尾DNA%、尾矩、Olive尾矩等指标的变化。结果　2.0 Gy局部放疗前 6 h接受 5 cGy低剂量全身照射并连续 5d组, 其尾长、尾DNA%、尾矩、Olive尾矩均较单纯局部放疗组明显减小, 各项指标差异均有显著性(P<0.01)。结论　局部放疗前荷瘤鼠预先接受低剂量全身照射能减轻荷瘤鼠放疗后外周血淋巴细胞DNA损伤。     

单细胞凝胶电泳技术对离体和整体照射致细胞DNA断裂的一致性研究

目的 探讨整体照射与离体照射导致小鼠淋巴细胞DNA双链断裂的一致性,作为单细胞凝胶电泳技术应用于辐射生物剂量学的前期研究。方法 采用双层铺胶法进行中性单细胞凝胶电泳,观察小鼠淋巴细胞整体与离体照射后的DNA双链断裂,用CASP软件分析彗星图像,SPSS12.0进行数据的统计学分析。结果 彗星头部DNA%(HDNA%)、尾部DNA%(TDNA%)、彗星全长(CL)、尾长(TL)、尾矩(TM)和Olive尾矩(OTM)在整体照射和离体照射组之间的差别均无显著性。结论 离体血γ射线照后即刻进行中性单细胞凝胶电泳,可以客观准确地反映整体照射的淋巴细胞DNA双链断裂损伤。     

正己烷致大鼠外周血有核细胞DNA损伤的实验研究

目的研究正己烷(n-Hexane)对大鼠外周血有核细胞DNA损伤的影响,为其遗传毒性的研究提供实验数据。方法40只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分成5组,即低(75 mg/kg)、中(150 mg/kg)、高300 mg/kg)剂量染毒组,阴性对照组和阳性对照组(环磷酰胺),每组8只。经腹腔注射正己烷,染毒4周后,观察大鼠的一般状况和体重变化,用彗星试验技术(SCGE)检测大鼠外周血有核细胞DNA的损伤。结果各组大鼠体重均持续增加,但高剂量组较对照组增长缓慢,差异有统计学意义(P<0.05)。各染毒组动物无明显中毒症状。外周血有核细胞SCGE检测彗星尾长、尾DNA%、尾矩、Olive尾矩均增大。阳性对照组尾长(63.84±19.79)、尾DNA%(28.78±6.99)、尾矩(15.47±8.60)、Olive尾矩(10.60±4.89)分别与阴性对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。低、中、高剂量组与阴性对照组比较,尾长、尾DNA%差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。中、高剂量组与阴性对照组比较,尾矩,Olive尾矩差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。尾矩值与染毒剂量作相关分析,相关系数r为0.978,呈正相关(P<0.05)。结论正己烷可使大鼠外周血有核细胞DNA发生损伤,具有一定的遗传毒性。     

低浓度苯系物暴露与加油站工人淋巴细胞遗传损伤的关系研究

目的探讨低剂量接触苯系物对加油站工人外周血淋巴细胞的DNA损伤作用。方法采用彗星试验检测加油站暴露组与对照组工人外周静脉血淋巴细胞DNA损伤,采用气相色谱-质谱法检测相应工作区空气中苯系物的浓度。结果暴露区苯、甲苯、乙苯、二甲苯浓度均高于对照区(P0.001);暴露组彗星尾矩和Olive尾矩均高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论长期低浓度苯系物暴露可能导致加油站工人淋巴细胞DNA遗传损伤。     

锌对氟诱导小鼠成釉细胞DNA损伤的影响

目的研究锌与氟联合作用对小鼠成釉细胞DNA损伤的影响。方法体外培养小鼠成釉细胞,分别设立对照组和0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L氟化钠单独染毒组及5.00、10.00、20.00μmol/L硫酸锌单独染毒组以及0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L氟化钠+5.00、10.00、20.00μmol/L硫酸锌联合染毒组。小鼠成釉细胞经硫酸锌预处理24 h后,再与氟化钠联合作用。染毒24 h后收获细胞,采用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测DNA损伤情况。结果与对照组比较,氟化钠单独染毒小鼠成釉细胞的尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长值均明显升高(P<0.05),而硫酸锌单独染毒组以上指标均明显下降(P<0.05)。硫酸锌+氟化钠联合作用小鼠成釉细胞的尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长值低于对照组与相同剂量氟化钠单独染毒组(P<0.05)。与相同剂量氟化钠+10μmol/L硫酸锌联合染毒组比较,5.00和20.00μmol/L硫酸锌+氟化钠联合染毒组Olive尾矩均较高(P<0.05)。结论适量的锌对氟致小鼠成釉细胞DNA损伤有拮抗作用。     

钇对大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤作用

目的研究长期摄入稀土Y³⁺对大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用,为明确稀土的遗传毒性提供数据。方法刚断乳大鼠分别饮用含稀土Y³⁺为0,53.4,5340mg/L的饮用水,子代饮水同亲代。子代喂饮6个月后采用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术观察大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤状况。结果53.4和5340mg/L组大鼠淋巴细胞DNA形成的彗星尾部DNA含量、尾长、彗星长、Olive尾矩等指标均高于对照组。其中,低剂量组的彗星长(28.80±5.01)、高剂量组尾长(3.04±0.20)和彗星长(28.52±5.18)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论稀土Y³⁺可造成大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤,有一定的遗传毒性。     

胆红素对正己烷致体外外周血淋巴细胞DNA损伤的拮抗作用

目的 研究胆红素(bilirubin)对正己烷(n-hexane)致DNA损伤的影响。方法 应用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术和彗星图像分析系统,检测不同浓度正己烷对人外周血淋巴细胞DNA损伤,同时观察10umol／L胆红素对正己烷所致的DNA损伤的保护作用。结果 尾长、尾／头(长)、尾／头(光强)、迁移率、尾DNA％、Olive尾矩等指标与正己烷浓度存在明显的剂量一效应关系,发现胆红素能抑制正己烷的DNA断裂能力。结论 胆红素有抑制正己烷致DNA损伤的作用。     

焦炉工外周血淋巴细胞热应激蛋白的表达与细胞DNA损伤程度

目的 探讨焦炉工外周血淋巴细胞热应激蛋白90、60及27(HSP90、HSP60和HSP27)的表达水平与外周血淋巴细胞DNA损伤之间的关系.方法 选取某焦化厂焦炉作业工人288名为接触组,根据作业环境监测结果和工作岗位分为高剂量组(炉顶及炉侧工)172人,低剂量组(炉底及辅助工)116人;同时选取距该焦化厂2 km外、无有毒作业接触史的某医院医护人员和管理人员38名为对照组.取受试者的肘静脉血,应用Western blot法测定外周血淋巴细胞的HSP90、HSP60和HSP27水平,用彗星试验测定外周血淋巴细胞DNA的损伤程度.结果 高剂量组焦炉工淋巴细胞HSP90水平(0.24±0.32)明显高于低剂量组(0.12±0.30)和对照组(0.06±0.33),差异有统计学意义(P《0.05);各组HSP60、HSP27表达水平比较,差异均无统计学意义(P》0.05).高剂量组、低剂量组及对照组间彗星的尾长、Olive尾矩、尾惯量、尾/头(长)总体均呈现高剂量组》低剂量组》对照组的趋势,这4项指标分别在各组间的差异均有统计学意义(P《0.05).随接触剂量增高,DNA损伤程度逐渐加重,3组人群的DNA损伤分级的相关系数为-0.345,差异有统计学意义(P《0.01).结论 焦炉工外周血淋巴细胞HSP90表达水平及DNA损伤程度随多环芳烃接触剂量的增高而增高.     

低功率微波致雄性小鼠生殖细胞DNA损伤作用

目的 探讨低功率微波对小鼠雄性生殖细胞DNA的损伤作用.方法 选择清洁级昆明种雄性小鼠40只,随机分为1个对照组和3个辐照组,每组10只.微波辐射源平均功密度为250μW/cm²,频率为900 MHz的连续波,全身24 h暴露.分别于照射后5,10,15 d处死小鼠,观察小鼠睾丸细胞拖尾率、尾长、尾部DNA%和Olive尾矩(OTM)等.结果 微波辐射连续照射使小鼠睾丸细胞拖尾率、尾长、尾部DNA%和OTM明显升高,照射后15 d拖尾率达45.8%,尾长、尾部DNA%和Olive尾矩分别为(33.81±16.87)μm,(33.92±20.32)%和(11.08±8.54),与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01).结论 连续微波辐射对雄性小鼠生殖细胞DNA有损伤作用,具有时间效应关系.     

甲醛暴露工人XRCC1基因多态性与DNA损伤的关系研究

目的探讨甲醛暴露工人DNA修复基因XRCC1多态性与外周血淋巴细胞DNA损伤的关系。方法选择某密度板厂的151名甲醛暴露工人(暴露组)和某推土机厂的112名非甲醛暴露工人(对照组)为研究对象。用气相色谱法检测作业环境的甲醛浓度,应用彗星实验测定研究对象外周血淋巴细胞DNA损伤,以Olive尾距和彗星尾长反映DNA损伤水平,用PCR-RFLP方法分析XRCC1基因的多态性;用多元协方差分析调整工人的年龄、工龄、职业甲醛暴露及吸烟与饮烟情况,比较XRCC1基因不同基因型个体的Olive尾距和彗星尾长。结果使用多元协方差分析校正甲醛暴露工人的年龄、工龄、甲醛暴露水平和吸烟与饮酒情况后,携带Arg280His位点变异基因型个体的Olive尾距和彗星尾长(几何均值分别为4.30和13.42)均显著高于野生型基因型的个体(几何均值分别为3.38和11.71),差异均有显著性(Olive尾距:P<0.05,彗星尾长:P<0.01);未发现XRCC1基因其他3个位点的多态性与甲醛暴露工人Olive尾距和彗星尾长有显著关联。结论XRCC1基因Arg280His位点的多态性影响甲醛暴露工人的DNA损伤水平。     

温室土壤有机提取物遗传毒性研究

[目的]检测温室土壤中有机提取物的遗传毒性作用. [方法]以小鼠为实验动物,共分5组:阴性对照组(二甲亚砜)、阳性对照组(环磷酰胺)及土壤有机提取物低、中、高剂量组,染毒剂量分别为5、15和30g土壤干重/(kg小鼠体重·d),染毒方式为每日灌胃1次,连续染毒4周.用胞质分裂阻滞微核细胞试验和彗星试验分别检测有机提取物所致小鼠外周血淋巴细胞的染色体损伤作用和外周血细胞的DNA损伤作用. [结果]有机提取物剂量与微核率具有较明显的剂量-效应关系,显著高于阴性对照组;随着有机提取物作用剂量的增加,彗星尾长、尾部DNA含量和Olive尾矩显著升高. [结论]温室土壤中有机提取物可以诱使小鼠发生染色体和DNA损伤.     

3种溴虫腈制剂对小鼠淋巴细胞DNA的损伤作用

[目的]对溴虫腈农药的普通制剂、纳米制剂、纳米功能化制剂进行遗传毒性研究,为纳米农药制剂的开发应用提供参考依据。[方法]每个受试物分4.84、9.68、19.36mg/kg3个剂量组及1个对照组,每组6只动物,雌雄各半。一次性腹腔注射给药,24h后,用单细胞凝胶电泳技术检测3种制剂对小鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤作用。采用CASP软件分析彗星图像,得出彗星头部和尾部DNA百分含量、彗星尾长、尾矩和Olive尾矩5个指标。[结果]在上述剂量条件下,3种制剂处理组检出DNA损伤的指标与对照组之间差异显著(P<0.01),DNA的损伤程度符合剂量-效应关系。在相同剂量条件下,纳米制剂、纳米功能化制剂与普通制剂间表现出极显著性差异(P<0.01),而纳米制剂与纳米功能化制剂的检测指标间差异无显著性(P>0.05)。[结论]溴虫腈具有遗传毒性,同一剂量条件下纳米制剂和纳米功能化制剂的遗传毒性要明显小于普通制剂的遗传毒性。     

DHEA对辐射所致小鼠DNA损伤防护作用的研究

目的 探讨DHEA(17 a α-D-高炔雌二醇-3-乙酯)对辐射导致小鼠DNA损伤的防护作用。方法 IRM-2近交系小鼠照射前3 d、2 d、1 d连续3次给予DHEA,用单细胞凝胶电泳技术,检测2 Gy γ射线辐照后小鼠淋巴细胞DNA双链断裂。结果 DHEA低、中、高各剂量组、炔雌醇组(EE2)、尼尔雌醇组(523)的彗星尾部(TDNA%)、彗星尾长(TL)、尾矩(TM)和Olive尾矩(OTM)等指标的数值明显低于对照组,与对照组比较差异有统计学意义(P < 0.01),DHEA中剂量组的TDNA、TL、TM和OTM等指标的数值明显低于EE2组和523组,与EE2组和523组比较差异有统计学意义(P < 0.01)。结论 DHEA能明显减轻淋巴细胞DNA双链断裂损伤,对辐射导致小鼠DNA损伤具有明显的保护作用。     

苯作业工人外周血细胞DNA损伤的检测

目的研究苯暴露对苯作业工人外周血细胞DNA断裂损伤的影响,并进一步探讨苯暴露与DNA断裂损伤间的剂量-反应关系。方法用3M有机气体被动式采样器监测个体接苯浓度,计算8小时时间加权平均浓度(8hTWA)和累积接苯浓度。用单细胞凝胶电泳试验检测苯作业工人外周血细胞DNA损伤,观察指标包括Olive尾矩和DNA断裂分级。结果接苯工人(51人)Olive尾矩和DNA断裂分级两个参数,均明显高于对照组(31人)(F=3003,P<00001;χ2=2399,P<00001),并均与TWA浓度和累积浓度有剂量-反应关系。Olive尾矩与TWA浓度和累积浓度显著正相关。结论苯暴露导致外周血细胞DNA断裂损伤增加,且呈明显剂量-反应关系,累积接苯浓度比单纯苯浓度更能反映苯暴露水平。     

苯致小鼠淋巴细胞DNA、RNA损伤作用

目的研究苯对小鼠淋巴细胞DNA、RNA损伤作用。方法采用单细胞凝胶电泳方法和3H-胸腺嘧啶1、4C-尿嘧啶掺入技术检测不同剂量苯[100,200,400 mg/(kg.bw)]经腹腔注射染毒对小鼠外周血、脾脏、胸腺淋巴细胞DNA、RNA损伤情况。结果除了苯染毒为100 mg/(kg.bw)剂量组外,小鼠外周血淋巴细胞DNA彗星细胞率、彗星尾长均高于阴性对照组(P<0.05),3H-胸腺嘧啶和14C-尿嘧啶掺入计数每分钟衰变数(dpm)值明显低于阴性对照组(P<0.01)。结论苯可致外周血淋巴细胞DNA损伤,明显影响小鼠脾脏、胸腺淋巴细胞DNA和RNA合成而产生遗传毒性作用。     

慢性苯中毒小鼠DNA氧化损伤的单细胞凝胶电泳检测

目的比较苯对骨髓细胞和外周血淋巴细胞DNA损伤的程度。方法将小鼠按不同浓度进行静式吸入苯染毒60d,采用单细胞凝胶电泳技术对小鼠骨髓细胞和外周血淋巴细胞DNA损伤进行分析。结果高、低浓度组小鼠骨髓细胞DNA的迁移率显著高于阴性对照组,且两组之间差异有显著性,在同一浓度组的骨髓细胞与外周血淋巴细胞之间,DNA损伤差异有显著性,骨髓细胞DNA损伤比外周血淋巴细胞更为严重。结论慢性苯染毒可致骨髓细胞和外周血淋巴细胞DNA断裂损伤,且骨髓细胞DNA损伤较外周血淋巴细胞严重。     

GSH在H2O2致DNA损伤中的作用研究

目的：研究还原型谷胱苷肽（GSH）对H2O2致DNA损伤的影响。方法：应用新型彗星图象分析系统以及单细胞凝胶电泳（SCGE）。结果：应用该系统检测了GSH在H2O2致DNA损伤的作用，尾长、尾重心、Olive尾矩、尾惯量、尾分布矩、尾DNA％以及尾／头比等指标与H2O2浓度存在明显的剂量－效应关系，发现10μmol/L GSH能抑制H2O2的DNA断裂能力。结论：GSH有抑制H2O2致DNA损伤的作用，活性氧是DNA损伤的重要原因。