脊髓损伤后急性期醛糖还原酶的表达变化

目的研究醛糖还原酶(AR)在脊髓损伤(SCI)组织中的表达特点,并探索其与SCI的相关性,以期为脊髓损伤修复提供新的干预靶点及治疗途径。方法健康成年SD大鼠150只,用随机数字法分为3组:假手术对照组(Sham组,n=50只),脊髓损伤组(SCI组,n=50只),脊髓损伤+醛糖还原酶抑制剂(唐林,即依帕司他)干预组(ARI组,n=50只)。sham组只做T9、T10椎板切除术,SCI组和ARI组采用改良Allen法制备大鼠脊髓损伤模型。将大鼠分别于术后第3、12、24、48、72h处死切取以受伤节段为中心约8mm长的脊髓组织,行苏木精-伊红(HE)染色观察局部炎症反应,并用免疫组化、双抗体夹心法、逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹(Western-Blot)检测AR表达。结果在各组术后的相应时间点,SCI组和ARI组可见到醛糖还原酶在神经元、星形胶质细胞内均有较明显分布;SCI组AR含量明显高于Sham组和ARI组(P<0.05);SCI组醛糖还原酶mRNA表达明显高于Sham组和ARI组(P<0.05)。结论脊髓损伤后AR表达增高,其含量变化与脊髓损伤程度有一定的相关性。     

脊髓损伤后星型胶质细胞活化与线粒体融合蛋白2表达变化

目的探索脊髓损伤后星型胶质细胞(AS)活化与线粒体融合蛋白2(Mfn2)的表达规律及其意义,为脊髓损伤修复寻求合适的干预靶点及时机。方法建立成年SD大鼠脊髓损伤(SCI)模型,运用免疫荧光和Western Blotting方法,检测Mfn2及AS活化相关蛋白胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达变化。清洁级成年雄性SD大鼠48只,随机分为两组:假手术组(sham组,n=24),脊髓损伤组(SCI组,n=24),SCI组采用Allen’s法建立大鼠胸段脊髓损伤模型,sham组只行椎板切除术,分别于术后第1天、第3天、第7天、第14天4个时间点分批处死大鼠,取大鼠胸段脊髓组织,行组织免疫荧光染色观察脊髓形态变化,Western Blotting检测各个时间点Mfn2与GFAP的表达变化。结果脊髓损伤后,大鼠胸段脊髓灰质两背角之间会形成结构紊乱、边界不清的损伤灶;Western Blotting及免疫荧光结果显示脊髓损伤后,大鼠胸段脊髓Mfn2蛋白表达从第1天开始下降,与sham组相比,脊髓损伤组胸段脊髓Mfn2表达整体呈下降趋势,术后第3天开始明显下降,差异有统计学意义(P0.05);而GFAP表达随时间延长则逐渐增加,术后第3天开始差异有统计学意义(P0.05)。结论脊髓损伤后,AS的特异性标志物GFAP表达整体呈上升趋势,提示此时AS出现大量增殖;与此相反,Mfn2(增殖抑制基因)表达产物则明显减少。     

CB1大麻素受体激动剂抑制基质金属蛋白酶参与脊髓损伤后血-脊髓屏障通透性调节

目的探讨CB1大麻素受体激动剂在大鼠脊髓损伤后对血-脊髓屏障通透性调节的作用。方法将150只雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脊髓损伤组(SCI组)和CB1激动剂处理组(ACEA组)。采用改良Allen法建立T9脊髓损伤实验动物模型。Sham组仅行T9椎板切除术,SCI组和ACEA组以30 g·cm致伤力制作模型。ACEA组建模成功后,每日腹腔给药ACEA 3mg/(kg·d);Sham组和SCI组以生理盐水代替。建模术后12、24、72 h分时段处死动物,取T8~T10脊髓节段,Evans蓝含量测定法检测SCI后血-脊髓屏障通透性变化,定量RT-PCR法检测脊髓组织基质金属蛋白酶9(MMP9)表达水平。结果 Sham组脊髓通透性无改变,脊髓组织中无Evans蓝渗入,ACEA组Evans蓝通过血-脊髓屏障渗漏至脊髓,但渗漏量明显低于SCI组。ACEA组MMP9表达水平显著低于Sci组。结论 CB1受体激动剂ACEA能降低Allen's大鼠脊髓损伤模型血-脊髓屏障的破坏,其作用机制可能与MMP9的表达下调相关。     

大鼠中度脊髓损伤后两种后肢行为学评估标准的比较研究

目的 对大鼠中度脊髓损伤后两种后肢行为学评估标准进行评价.方法 24 只雄性 Wistar 大鼠随机分为假手术组和损伤组.损伤组采用Allen's打击法制作脊髓损伤模型,假手术组仅行椎板切除术.术后1、3、7、14、21天分别采用Tarlov评分和BBB(basso,beattie and bresnahan)评分对两组大鼠后肢运动功能恢复情况进行评估.结果 两组大鼠BBB评分值在伤后各时间点差异均非常显著(P<0.01),Tarlov评分值在伤后各时间点有显著性差异(P<0.05),但只在 1、3、7天时差异才非常显著(P<0.01);评分值按百分制换算后,假手术组大鼠两组评分值之间的一致性较好,仅在伤后7天时有显著性差异(P<0.05),损伤组大鼠两组评分值之间的差异较大,伤后1、3、7天时差异非常显著(P<0.01).结论 BBB评分的敏感性和区分度优于Tarlov评分,能更准确、客观地反映大鼠中度脊髓损伤后运动功能恢复情况.     

胰岛素对脊髓损伤后血管内皮生长因子的表达及血管再生的影响

目的 观察胰岛素对大鼠急性脊髓损伤后血管内皮生长因子（VEGF）表达及微血管再生的影响,探讨胰岛素在改善脊髓损伤微循环方面可能的作用。方法 60只SD大鼠随机分为损伤对照组和胰岛素治疗组,建立脊髓损伤（SCI）模型;术后采用斜板试验和改良的Tadov评分对大鼠急性脊髓损伤后的功能评估;采用免疫组织化学（S-P法）观察脊髓VEGF、微血管密度（MVD）的表达变化,并进行比较分析。结果 术后各时相斜板试验和改良的Tarlov评分,胰岛素治疗组明显高于对照组;胰岛素治疗绀各时相点VEGF的阳性表达均明显高于对照组;伤后14天,胰岛素组MVD计数明显增多,毛细血管密度增加,两组差异有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。结论 胰岛素可增强脊髓损伤后VEGF的表达,促进微血管再生,改善微循环。     

姜黄素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用及机制的初步研究

目的研究姜黄素对急性脊髓损伤的保护作用及其可能机制。方法采用改良Allen’s打击法建立大鼠急性脊髓损伤模型,将60只SD雌性大鼠随机平均分为假手术组、模型组、姜黄素低剂量组(40mg/kg,CUR-L组)、姜黄素高剂量组(100mg/kg,CUR-H组),每组各15只。术后7d采用脊髓损伤后后肢运动功能评分系统(BBB法)评测大鼠后肢运动功能;化学比色法检测大鼠脊髓组织中丙二醛(MDA)含量变化;蛋白质印迹(Western blot)及免疫组化检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)蛋白表达;苏木精-伊红(HE)染色观察脊髓组织的病理改变。结果与模型组相比,姜黄素组大鼠后肢功能明显改善;脊髓组织中MDA含量降低;Nrf2、γ-GCS蛋白的表达上调;脊髓组织病理损伤减轻。结论姜黄素对大鼠急性脊髓损伤有保护作用,其机制可能是通过激活Nrf2/抗氧化反应原件(ARE)通路从而上调γ-GCS蛋白表达来实现的。     

咯利普兰治疗脊髓损伤的实验研究

目的研究咯利普兰对SD大鼠脊髓神经丝蛋白（NF）、突触素（SYP）表达变化和运动功能的影响，探讨咯利普兰治疗脊髓损伤的可行性。方法SD成年雌性大鼠30只，体重220±20g，随机分成3组：即假损伤组；脊髓挫伤组（SCI组）及咯利普兰（ROL）组，用改良的Allen装置造成T12脊髓节段挫裂伤。在手术前及术后每天对大鼠进行BBB评分。手术后，脊髓挫伤后以0．4μmol·kg^-1·h^-1计算24小时ROL总量，分4次腹腔注射（每次间隔6h），持续10天。所有动物在伤后4周处死。术后置于25．5℃的温室内（以电暖气升温）。以4％多聚甲醛固定液灌注固定大鼠，取损伤节段上、下长约0．5cm脊髓入4％多聚甲醛后同定、修块、沉底。连续冰冻切片，片厚25μm，间隔取片后分别以抗神经丝蛋白、突触素抗体行免疫组化ABC染色。在光学显微镜下观察各组NF、SYP在SD大鼠脊髓的表达分布情况，进行统计学分析。结果ROL组轴突数目明娃多于SCI组，但仍低于似损伤组，差异显著（P〈0．05）。相应损伤节段SYP灰度值比较中，ROL组SYP灰度值明显低于SCI组．差异显著（P〈0．01）。SCI组、ROL组所有动物在术后第1天BBB评分为0。SCI后4周ROL组较SCI组神经学功能均显著提高，差异具有显著性（P〈0.05）。结论咯利普兰在脊髓损伤中后期明显促进其损伤后的再生，具有中远期疗效。     

NRG1基因修饰的骨髓基质干细胞移植对大鼠脊髓半横切损伤的修复作用及其机制

目的 探讨移植神经调节蛋白1(NRG1)基因修饰的骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠脊髓半横切损伤(SCI)的修复作用及其可能机制。方法 分离培养大鼠BMSCs,转染NRG1基因,采用ELISA法测定BMSCs裂解液和培养液上清中NRG1蛋白含量,细胞计数法检测BMSCs增殖活性。43只健康8周龄SD大鼠,随机分为对照组(n=10)、SCI模型组(n=10)、BMSCs组(n=10)与NRG1-BMSCs组(n=13)。建立大鼠脊髓半横切损伤模型后,原位移植BMSCs和NRG1-BMSCs。移植第1、7、14、21、28天,采用BBB评分、斜板实验评估大鼠后肢运动功能;移植第7天,应用荧光显微镜观察移植细胞迁移及分布情况;移植第28天,采用HE染色和Nissl染色观察大鼠脊髓组织病理学变化,TUNEL染色检测脊髓组织细胞凋亡情况,Western blotting检测脊髓组织内质网应激相关蛋白[X-box结合蛋白1(XBP1)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、转录激活因子4(ATF4)、ATF6和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)]及凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl...     

去铁敏对损伤脊髓一氧化氮合酶表达的影响

目的 研究去铁敏(DFO)对急性脊髓损伤大鼠的神经功能保护作用及对3种一氧化氮合酶(NOS)亚型表达的影响.方法 利用Allen's打击模型,致伤力为25gcf(10g×2.5cm),选用SD大鼠36只,随机分为3组(n＝12):空白组(C组);脊髓损伤组(生理盐水组,S组);去铁敏治疗组(DFO组).分别于伤后4小时取材,免疫组化方法检测3种NOS亚型的表达情况,并于伤后5周行BBB评分.结果 DFO组及S组伤后上述指标比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 去铁敏通过阻断铁离子引发的脊髓组织脂质过氧化反应而减轻脊髓组织的炎症反应,减少诱导型NOS(iNOS)的表达;并通过减轻脊髓组织细胞内钙超载,降低固有型NOS(cNOS)的活性,减少了脊髓组织的继发损伤程度.     

组织工程脊髓修复脊髓损伤的研究进展

脊髓损伤可以导致损伤平面以下神经功能的破坏性丢失,严重地影响身体多个系统.脊髓损伤的效应随着损伤部位不同而不同,这是脊神经有序地按照脊髓排列的缘故.除了损伤平面以下运动功能受损,同时还伴有感觉异常.其造成的功能缺陷包括心血管系统功能、呼吸系统功能、胃肠道消化功能、排汗功能、性功能以及排尿功能,这些缺陷可继发泌尿系感染、褥疮、肌肉痉挛、慢性神经性疼痛和感觉异常等,更严重的可致命.因此,脊髓损伤成为人类急需解决的医学难题之一,至今仍困扰着无数医学工作者。     

Malignant spinal cord compression

Back pain is a common affliction which usually does not require imaging. However there are instances when imaging is not only appropriate but essential and must be performed urgently. This article uses a case study to illustrate why patients presenting with back pain and loss of normal gait and sphincter control require urgent magnetic resonance imaging of the whole spine.     

Idiopathic spinal cord herniation

Idiopathic spinal cord herniation is a rare disease, few cases having been reported. We encountered a case of idiopathic spinal cord herniation presenting with severe spasticity in the right leg and urinary dysfunction. The spinal cord was herniated into a cavity created by duplication of the dura mater and resection of the inner layer improved the neurological deficits. MRI, myelography, and CT myelography were useful for diagnosing this disease. Four radiological signs of spinal cord herniation are described.