单纯疱疹病毒Ⅰ型感染培养细胞CV-1后微丝形态变化的观察

应用光镜和电镜技术,对疱疹病毒Ⅰ型感染后的培养细胞CV-1中微丝结构与功能的变化进行动态观察,探讨病毒感染造成的微丝形态及分布变化。观察结果,或染细胞微丝分布不均、结构不清。     

缺血性急性肾衰肾小管上皮细胞微丝的改变及其机制

目的了解缺血时肾小管上皮细胞 (TEC)微丝的改变 ,并探讨此改变的机制。方法用双肾蒂钳夹法建立缺血性急性肾衰模型 ,采用电镜和免疫组化法观察缺血 5、15和 45min时TEC微丝肌动蛋白的改变 ,并用高效液相色谱法测试细胞内三磷酸腺苷 (ATP)水平。结果缺血 5min即有细胞微丝肌动蛋白的损害 ,微绒毛融合、断裂 ,随着缺血时间的延长 ,微丝损伤加重 ,极性丧失 ,由细胞尖端分布变为胞浆内弥漫分布 ,微绒毛消失 ,与此同时细胞内ATP水平也迅速降低 ,微丝紊乱程度与ATP的下降呈一致。结论肾TEC微丝结构和极性的改变可能与细胞内ATP水平相关。     

siRNA干扰微管微丝交连因子1表达增强替莫唑胺诱导的胶质瘤细胞毒性

目的 研究微管微丝交连因子1(MACF1)在胶质母细胞瘤应对TMZ刺激中的作用.方法 替莫唑胺刺激人类胶质母细胞瘤细胞系U87细胞后,通过Western blot、RT-PCR和免疫荧光检测其蛋白表达和细胞内定位.通过RNA干扰技术干扰MACF1的表达.通过裸鼠皮下成瘤和免疫组化检测在活体中TMZ刺激后胶质母细胞瘤中MACF1的表达.结果 在体外培养和体内成瘤中均发现替莫唑胺刺激后胶质母细胞瘤MACF1的表达上调(差异约2倍),胞内分布改变(P＜0.01).敲除MACF1表达的胶质母细胞瘤细胞在TMZ刺激后其增殖能力下调约45％(P＜0.01).替莫唑胺诱导胶质母细胞瘤MACF1表达上调的同时,其细胞骨架发生重组.结论 MACF1可能成为胶质母细胞瘤治疗的一个潜在靶点.     

用光镜观察正常细胞与肿瘤细胞内的微丝

正常细胞(V_(79-8))与肿瘤细胞经考马斯亮兰染色后,显现出清晰的微丝结构。     

压力性尿失禁大鼠盆底肌肉微丝形态和结构改变与盆底功能的关系

目的观察大鼠压力性尿失禁(SUI)时盆底肌肉微丝形态和结构的变化,探讨盆底肌肉功能障碍的原因.方法取SUI模型大鼠及正常大鼠的耻尾肌(各5例),透射电镜下观察其超微结构改变,并用免疫组化检测肌肉中α肌动蛋白(α-actin)含量的变化.结果SUI大鼠盆底肌细胞中微丝的走行有明显的改变,其α-actin含量也较正常组减少.结论发生SUI时,盆底肌肉发生了退行性改变,造成了盆底功能障碍.     

脑出血周围组织神经微丝和胶质纤维酸性蛋白的变化

目的：通过对人脑出血周围组织神经微丝（NF）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）计数与计量观察，研究其病理发展过程。方法：用58例脑出血解剖标本，在血肿周围多方位自血肿壁向外连续取材1．0－2．0cm。采取免疫组化方法观察NF和GFAP的变化。结果：NF损伤程度在血肿周围、双侧皮层、双侧海马区随血肿形成时间延长而加重；GFAP染色强度随血肿形成时间延长而减弱。结论：血肿周围神经元和星形胶质细胞的细胞骨架损伤在脑出血后1周内进行性加重。     

用免疫荧光细胞化学法观察肿瘤细胞内的微丝分布

文章介绍了从鸡砂囊平滑肌中提取肌动蛋白抗原及抗肌动蛋白血清的制备,并用自制抗血清应用于间接免疫荧光染色技术,观察体外培养的5种正常细胞和3种肿瘤细胞株内的微丝结构。观察结果提示正常细胞中微丝的数量、分布,形态与细胞的不同时相、运动和形态变化有关。含肌动蛋白的微丝可呈现直纤维状的线型荧光或呈弥散的颗粒状荧光。肿瘤细胞内微丝的数量略有减少,排列稀疏,在细胞浆内分布不均匀。与正常细胞间存在一定差异。     

缺血性急性肾衰肾小管上皮细胞微丝的改变及其机制

目的 了解缺血时肾小管上皮细胞（TEC）微丝的改变,并探讨此改变的机制。方法 用双肾蒂钳夹法建立缺血性急性肾衰模型,采用电镜组化法观察缺血5、15和45min时TEC微丝肌动蛋白的改变,并用高效液想象以谱法测试细胞内三磷酸腺苷（ATP）水平。结果 缺血5min即有细胞微丝肌动蛋白的损害。微绒毛融合、断裂、随着缺血时间的延长,微丝损伤加重,极性丧失,由细胞尖端分布变为胞浆内弥漫分布,微绒毛消失,与此同时细胞内ATP水平也迅速降低,微丝紊乱程度与ATP的下降呈一致。结论 肾TEC微丝结构和极性的改变可能与细胞内ATP水平相关。     

金黄色葡萄球菌侵入人脐静脉内皮细胞初期细胞骨架的动态变化

目的探讨不同毒力的金黄色葡萄球菌（标准菌株ATCC25923,产肠毒素株FRS6B）感染人脐静脉内皮细胞（HUVEC）初期,细胞骨架动态变化情况。方法常规方法制备菌液,分别感染HUVEC,1、2、4h后流式细胞仪分析细胞凋亡,应用激光共聚焦荧光显微镜观察细胞骨架的动态变化。结果两种不同毒力的金黄色葡萄球菌与HUVEC共育1h后即有凋亡细胞发生,共聚焦显微镜观察可见两种细胞作用1h后细胞骨架微丝、微管均发生了改变,作用4h后细胞内聚集大量细菌,细胞骨架微丝、微管部分开始解离。结论两种金黄色葡萄球菌感染HUVEC初期,产肠毒素菌株FRS6B诱导细胞凋亡明显高于ATCC25923,细胞骨架的动态变化存在差异。     

细胞凋亡与细胞骨架的改变

细胞凋亡时,细胞形态会发生一系列特征性的改变.近年来,发现细胞骨架也会发生相应的变化,包括细胞骨架网状结构降解、凝聚和分布不均等.通过对细胞骨架蛋白的生物活性、功能及细胞凋亡时细胞骨架结构形态的动态变化、相关调控因素等研究,显示凋亡细胞骨架改变是细胞凋亡形态学改变的基础,提示可通过改变细胞骨架结构来诱导细胞凋亡,以达到治疗肿瘤及其他疾病的目的.     

巨细胞病毒感染细胞内微丝骨架重组异常

目的:探讨巨细胞病毒(CMV)感染对人胚成纤维细胞(HF)微丝骨架影响及与病毒复制状态的可能关系。方法:显微镜观察细胞形态;W estern-b lot法分别检测细胞内β型肌动蛋白(β-actin)、球状肌动蛋白(G-actin)和纤维形肌动蛋白(F-actin)的含量;间接免疫荧光标记病毒即刻早期抗原(IE);微丝骨架探针观察HF细胞内感染状况及微丝骨架变化。结果:HF细胞CMV感染率大于95%,IE抗原主要位于细胞核。受染细胞变粗、变圆,甚至脱壁,呈时间依赖性。与未感染组相比,CMV感染后细胞内β-actin蛋白质含量有所下降,但无显著性差异(P>0.05);G-actin水平在感染24 h后增加(0.941±0.061 vs 0.714±0.119,P<0.05),但在感染后72 h、96 h却下降(0.218±0.035、0.230±0.055 vs 0.714±0.119,P<0.05);F-actin水平在感染后24 h、72 h、96 h呈渐进性下降(0.256±0.021、0.127±0.032、0.026±0.008 vs 0.373±0.050,P<0.05)。受染细胞内微丝排列紊乱,极性消失;细胞融合,荧光强度明显减弱。结论:CMV引起HF细胞内肌动蛋白质、微丝骨架形态及重组异常,可能有助于其侵袭宿主细胞并进一步活化及复制。     

四种坐标函数对流式细胞术数据可视化的影响

目的：研究流式细胞术数据可视化中四种常见坐标函数的特点,探讨这四种坐标函数在数据可视化中的应用。方法对比分析线性、对数、HyperLog以及Logical四个坐标函数曲线的特点,使用不同坐标函数对同一个数据使用散点图进行显示,对比图形显示的差异。结果线性函数对数据呈等比例显示,但动态范围不足。对数函数能拉伸1附近的数值,压缩显示数值大的数值,但不能显示小于1的值。HyperLog与Logical函数数值小的时候近似线性显示,数值大时近似对数显示。结论不同的坐标函数有不同的特点,在进行流式细胞术数据分析时,要根据需要选择相应的坐标函数进行显示。     

浸润中的胃癌细胞及其邻近组织的超微结构变化

用电子显微镜观察浸润中的胃腺癌细胞及其邻组织-间质及靶器官组织的超微结构变化,发现癌细胞内微丝主要集中在足样突起内,而无突起形成或未浸润的癌细胞胞质内极少或未见微丝。说明微丝的出现与癌细胞的运动有关,系动态性合成与分解。由此也可圆满地解释文献中有关癌细胞内微丝增多或减少的争论。此外,癌细胞浸润到肌层时,未见到癌细胞对平滑肌细胞的直接破坏,提示平滑肌细胞的变性、坏死可能是间接作用所致。     

模拟微重力对人脐静脉内皮细胞微丝骨架的影响

目的研究模拟微重力对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVEC）形态及微丝骨架的影响。方法利用回转器模拟微重力,将原代培养的HUVEC分为回转组和静止对照组,培养72h,相差显微镜观察两组细胞的形态;电镜观察微丝（microfilament,MF）的形态分布。结果静止培养的细胞贴壁良好,形态规则,微丝在细胞核及细胞膜的周围多呈束状分布,回转组的细胞贴壁不好且微丝排列紊乱、微丝变短,微丝松散、稀少而且不成束排列。结论模拟微重力情况下细胞形态有所改变,微丝骨架分布的有序性降低。     

人牙髓细胞的体外培养及生物学特性研究

目的:从年轻恒牙的牙髓组织中分离培养牙髓细胞,研究其表型及生物学特性.方法:选取因正畸或阻生拔除的年轻健康双尖牙或第三磨牙,取出牙髓,组织块酶消化法分离培养人牙髓细胞,免疫细胞化学检测第3代人牙髓细胞表面标志,并对体外培养的人牙髓细胞的矿化能力进行研究.结果:体外培养的人牙髓细胞表达Ⅰ型胶原及波形丝蛋白,少数细胞增殖可...     

恶性瘤细胞的微绒毛结构及作用

将个旧肺腺癌、肺泡癌、胰腺腺泡癌、宫颈癌、绒癌、胃癌、脑胶质细胞瘤、食管癌、黑色素瘤的恶性细胞及正常纤维细胞、平滑肌细胞、内皮细胞等,分别培养在三维基质上,电镜观察到恶性瘤细胞表面有众多微绒毛,其数量及分布与细胞周期有关,其功能与癌细胞的营养、游走、侵袭活动有关。微绒毛活动的支撑骨架为微丝。     

4种脂蛋白对兔主动脉平滑肌细胞载脂蛋白E mRNA表达的影响

目的:观察4种脂蛋白对平滑肌细胞(SMC)ApoE mRNA表达的影响.方法:将兔主动脉SMC培养传至第3代,生长融合后,在培养液中分别加入无血清培养基(对照组)、普通型低密度脂蛋白(N-LDL)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、普通型极低密度脂蛋白(N-VLDL)、ox-VLDL,37 ℃温育24 h后,进行细胞固定,然后以地高辛标记的ApoE cDNA探针进行核酸原位杂交.结果:与对照组比较,N-LDL组、ox-LDL组、N-VLDL组及ox-VLDL组ApoE mRNA表达水平增高(P均＜0.05),其中N-LDL、ox-LDL的作用更显著(P＜0.05).结论:由SMC所分泌的ApoE可能在局部掺入到上述脂蛋白中,促进SMC以受体途径摄取脂蛋白,导致SMC细胞内脂质堆积.