VEGF、MMP-9在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在人脑胶质瘤中的表达及其与血管生成、瘤周水肿(PTBE)和肿瘤恶性程度的关系。方法采用免疫组化方法分别检测30例经手术和病理证实的脑胶质瘤瘤体和瘤周水肿区中VEGF、MMP-9的表达;通过计数微血管密度(MVD)来评估血管生成情况;根据CT和MRI的结果测定水肿指数;同时用透射电镜对瘤体区及瘤周水肿区的超微结构进行观察。6例来自颅脑损伤病人的正常脑组织作为对照。结果随着肿瘤级别增加MVD逐渐升高,在高级别胶质瘤体中MVD显著高于瘤周(P0.01);VEGF、MMP-9表达与胶质瘤中的MVD均呈显著正相关(P0.01),且两者与胶质瘤的水肿指数(EI)也均呈显著正相关(P0.01);高级别胶质瘤的EI显著高于低级别胶质瘤(Ⅰ级、Ⅱ级)(P0.05)。电镜下水肿明显者微血管内皮细胞胞浆内有较多小泡囊状细胞器和基底膜中有较多虫蚀样空洞等。结论 VEGF、MMP-9可能共同参与了脑胶质瘤血管生成和脑水肿的发生,并促进肿瘤的侵袭性生长。     

ILK及CD151在人脑胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨整合素连接激酶(ILK)及CD151在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测ILK及CD151在74例人脑胶质瘤及15例正常脑组织中的表达。按2007年WHO中枢神经系统肿瘤分类:低级别(Ⅰ、Ⅱ级)胶质瘤31例,高级别(Ⅲ、Ⅳ级)43例。结果高级别胶质瘤、低级别胶质瘤及正常脑组织ILK的阳性表达分别为83.72%、61.29%、20.00%,CD151阳性表达率分别为81.40%、54.84%、13.33%。ILK和CD151在胶质瘤中阳性表达明显高于正常脑组织(P0.05),在高级别胶质瘤中影响表达率显著高于低级别胶质瘤(P0.05);而且二者在胶质瘤组中的表达呈正相关(r=0.294,P0.05)。结论 ILK及CD151在人脑胶质瘤中的表达随胶质瘤恶性程度的增高而增高,二者可能共同促进胶质瘤的生长和浸润。     

胶质瘤生物学特性与相毗邻纤维束状态的相关性研究

目的 探讨胶质瘤生物学特性与相毗邻纤维束状态的相关性. 方法 对24例经手术及组织病理学证实的胶质瘤患者,术前行常规MRI、DTI检查,重建出肿瘤周围纤维束三维图,获得瘤周纤维束的状态:被推移、浸润或者破坏.应用SP免疫组织化学方法对瘤实体标本的MMP-9、CD44、VEGF、Ki-67的表达进行检测分析. 结果 VEGF与Ki-67的表达在高级别胶质瘤中高于低级别胶质瘤(P＜0.05),而MMP-9与CD44的表达在低级别和高级别胶质瘤中均无显著性差异(P＞0.05).高级别胶质瘤周围的纤维束较低级别胶质瘤其被侵犯的程度重(P＞0.05).此外,高表达VEGF或者Ki-67的胶质瘤,瘤周纤维束被侵犯的程度较低表达的胶质瘤重(P＜0.05);而CD44与MMP-9的表达与瘤周纤维束的状态则不具有相关性(P＞0.05). 结论 DTI可清楚显示胶质瘤与周围白质纤维的解剖位置关系及纤维束病理状态,胶质瘤的病理等级和增殖性可影响瘤周纤维束的状态,而其浸润性对瘤周纤维束的状态影响不大,有助于在影像学上对胶质瘤的生物学特性进行判断,指导治疗方案的制定.     

不同级别胶质瘤MMP-9、E-cad、nm23的表达变化

目的研究不同级别人脑胶质瘤MMP-9、E-cad、nm23的表达变化。方法采用免疫组化方法检测96例人脑胶质瘤组织中MMP-9、E-cad、nm23的表达。按照2007年WHO中枢神经系统肿瘤分类标准分级：Ⅰ级4例,Ⅱ级35例,Ⅲ级27例,Ⅳ级30例。另选取5例正常脑组织作为对照组,均为非颅内疾病死亡的尸检标本。结果随着胶质瘤病理级别增高,MMP-9表达显著增加（rs=-0.322,P〈0.01）,nm23表达显著降低（rs=-0.355,P〈0.05）。E-cad阳性表达与胶质瘤级别无明显相关性（P〉0.05）。MMP-9与E-cad表达呈显著负相关（rs=-0.440,P〈0.01）,E-cad与nm23表达呈显著正相关（rs=0.325,P〈0.01）。结论MMP-9、E-cad、nm23在不同级别胶质瘤中表达水平不一样。     

128层CT灌注成像在脑胶质瘤分级的应用价值

目的探讨128层CT全脑灌注成像在脑胶质瘤术前分级的应用价值。方法回顾性分析32例脑胶质瘤病例资料,低级别组(WHOⅠ~Ⅱ级,21例)和高级别组(WHOⅢ~Ⅳ级,11例),均行CT灌注扫描,测量肿瘤实质部分和对侧正常脑组织的CBF、CBV及r CBF、r CBV。结果与低级别组比较,高级别组胶质瘤病灶区CBF、CBV及r CBF、r CBV均明显升高,两组间差异具有统计学意义(P0.05)。结论 128层CT灌注成像在胶质瘤术前分级具有较高的临床应用价值。     

脑胶质瘤中SPOPL表达及其临床意义

目的探究SPOPL蛋白(speckle-type POZ protein-like)在胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法收集68例胶质瘤患者病例标本及瘤旁正常脑组织,其中低级别胶质瘤32例(WHOⅠ-Ⅱ),高级别胶质瘤36例(WHOⅢ-Ⅳ),用免疫组织化学法、蛋白质印迹法检测SPOPL蛋白表达,并分析临床指标与SPOPL表达量之间的关系。结果胶质瘤组织中SPOPL的表达低于瘤周组织(t=8.754,P0.05),高级别胶质瘤中SPOPL的表达低于低级别胶质瘤(t=13.552,P0.05);SPOPL的表达与病理级别有关(χ~2=4.023,P0.05);Cox回归模型提示肿瘤病理级别、SPOPL蛋白表达差异是胶质瘤患者预后的独立危险因素。结论 SPOPL蛋白的表达与胶质瘤病理级别及患者预后呈负相关,其可能是反应胶质瘤生物学特征及患者预后的的一个新的分子标记物。     

VEGF、MMP-2与人脑胶质瘤的病理分级和侵袭性的相关研究

目的　研究血管内皮生长因子 (VEGF)和基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )在人脑不同级别胶质瘤中的表达。探讨VEGF、MMP 2与肿瘤病理级别和侵袭性的关系。方法　采用免疫组织化学 (SP)法检测 5 6例脑胶质瘤中VEGF、MMP 2的表达。结果　胶质瘤中VEGF、MMP 2的表达水平在高级别组 (Ⅲ、Ⅳ级 )明显高于低级别组 (Ⅰ、Ⅱ级 ) ,两组间有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　VEGF、MMP 2在胶质瘤的血管生成与侵袭性生长中起重要作用 ,其表达水平与胶质瘤的病理级别有密切关系。     

脑胶质瘤病人脑脊液Midkine表达的临床意义

目的探讨人脑胶质瘤脑脊液中期因子(MK)水平与胶质瘤病理学的关系。方法 2015年5~10月手术治疗并经病理证实的胶质瘤25例,其中高级别胶质瘤(WHOⅢ~Ⅳ级)10例,低级别胶质瘤(WHOⅠ~Ⅱ级)15例。同期手术切除颅内良性肿瘤23例,非肿瘤性颅脑手术18例。酶联免疫吸附试验法检测所有病人术中以及脑胶质瘤术后腰椎穿刺术留取的脑脊液MK水平。免疫组化染色法分析胶质瘤组织MK表达水平。结果胶质瘤组脑脊液MK浓度明显高于良性肿瘤组(P0.001)和非肿瘤组(P0.001),高级别胶质瘤脑脊液MK浓度显著高于低级别胶质瘤(P0.05);胶质瘤组织MK阳性程度与脑脊液MK的浓度呈显著正相关(r=0.75;P0.001)。根据受试者工作特征曲线,脑脊液MK浓度2.55 ng/ml区分胶质瘤和非肿瘤的敏感性和特异性分别为72.0%和83.3%。脑脊液MK浓度2.11 ng/ml区分胶质瘤和良性肿瘤的敏感性和特异性为76.0%和82.6%。术后7~14 d,脑胶质瘤病人脑脊液MK水平[(2.22±1.23)ng/ml]显著下降(P0.05)。结论胶质瘤级别越高,肿瘤组织和脑脊液MK表达水平越高;切除肿瘤后脑脊液MK随之下降;脑脊液MK对术前诊断胶质瘤的具有较高的敏感性和特异性,同时对手术效果的评价也有重要意义。     

脑胶质瘤ADAM17与EGFR的表达及临床意义

目的探讨解聚素-金属蛋白酶17(ADAM17)与表皮生长因子受体(EGFR)在脑胶质瘤组织中的表达及临床意义。方法选择2014年2月至2016年8月手术切除68例新鲜脑胶质瘤标本,其中高级别胶质瘤42例,低级别胶质瘤26例。另选择同期颅脑损伤内减压术获取的正常脑组织标本10例为对照组。采用免疫印迹法和免疫组化染色检测ADAM17和EGFR表达。结果高级别胶质瘤ADAM17和EGFR表达水平均明显高于低级别胶质瘤(P0.05),而低级别胶质瘤ADAM17和EGFR表达水平均明显高于对照组(P0.05)。胶质瘤表达水平呈明显正相关(r=0.444,P0.001)。结论随着脑胶质瘤恶性程度的增加,EGFR和ADAM17表达水平明显升高,提示EGFRA、DAM17可作为脑胶质瘤恶性程度的评估指标。     

血管内皮生长因子与水孔蛋白4在胶质瘤及脑转移瘤中的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)与水孔蛋白4(AQP4)在胶质瘤及脑转移瘤中的表达,并探讨两者与胶质瘤及脑转移瘤的组织病理学关系及在瘤周水肿形成过程中的作用.方法 选择福建医科大学附属第一医院神经外科自1999年至2001年手术切除并经病理检查证实的胶质瘤石蜡组织标本73例和脑转移瘤组织标本15例,并另取正常脑组织标本8例作为对照,应用免疫组织化学方法检测组织标本中VEGF与AOP4的表达.结果 正常脑组织中未见VEGF表达:高级别胶质瘤与低级别胶质瘤之间、低级别胶质瘤与正常脑组织之间、脑转移瘤与正常脑组织及低级别胶质瘤之间VEGF阳性表达比较差异有统计学意义(P<0.05),而脑转移瘤与高级别胶质瘤之间VEGF阳性表达比较差异无统计学意义(P>0.05).AQP4在所有组织标本中均有表达,正常脑组织与高级别胶质瘤、脑转移瘤之间,低级别胶质瘤与高级别胶质瘤、脑转移瘤之间AQP4阳性表达比较差异有统计学意义(P<0.05),而正常脑组织与低级别胶质瘤之间、脑转移瘤与高级别胶质瘤之间AQP4阳性表达比较差异无统计学意义(P>0.05).Spearman相关分析显示两者在胶质瘤及脑转移瘤组织中表达呈正相关关系(r=0.516,P<0.05).结论 VEGF与AQP4是参与形成肿瘤周围水肿的重要分子生物学因素,且两者可能存在某种协同作用.     

胶质瘤VEGF基因表达与血管生成和脑水肿的关系

目的　探讨胶质瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因表达与血管生成和脑水肿的关系。方法　采用Northernblot和ABC免疫组化方法检测34例人脑胶质瘤和8例正常脑组织中VEGF基因表达;Ⅷ因子相关抗原单克隆抗体组织化学染色显示微血管,用微血管计数(MVC)测定肿瘤血管生成;从脑水肿与肿瘤本身的体积之比获得水肿指数(EI),估价脑水肿的程度。结果　34例脑胶质瘤和8例正常脑组织均可表达3.9Kb的VEGFmRNA片段。VEGFmRNA表达与脑胶质瘤的血管生成、瘤周脑水肿均呈显著正相关(r=0.836,P＜0.01;r=0.890,P＜0.01);高恶度胶质瘤VEGFmRNA表达、MVC、EI分别显著高于低恶度胶质瘤(P＜0.01);低恶度胶质瘤VEGFmRNA表达、MVC均显著高于正常脑组织(P＜0.05)。免疫组化染色显示,VEGF蛋白主要分布在高恶度胶质瘤组织的瘤细胞和内皮细胞,低恶度胶质瘤呈低水平表达。结论　VEGF可能通过参与胶质瘤血管生成和脑水肿发生,对胶质瘤的恶性演进起促进作用。     

人脑胶质瘤EPO与CD105表达及意义

目的 探讨人脑胶质瘤组织促红细胞生成素（EPO）和CD105的表达变化及其意义。方法 收集2002~2008年人脑胶质瘤标本152例,其中WHO分级Ⅰ级4例,Ⅱ级32例,Ⅲ级68 例,Ⅳ级48例;取同期颅脑损伤内减压术切除正常脑组织20例为对照,采用免疫组化染色分析EPO及CD105表达。收集2005~2008年人脑胶质瘤标本胶质瘤17例（WHO Ⅱ级6例,Ⅲ~Ⅳ级11例）,正常对照5例,采用实时荧光定量PCR检测EPO mRNA表达变化。术后随访截止2010年4月23日,应用Kaplan-Meier生存曲线分析高级别（Ⅲ~Ⅳ级）胶质瘤生存曲线。结果 胶质瘤EPO表达阳性率（60.5%,92/152）明显高于正常脑组织（10%,2/20;P<0.001）,胶质瘤EPO表达强度与病理分级呈正相关（rs=0.368,P<0.001）。EPO表达阳性组CD105阳性率明显高于阴性组（P<0.05）,EPO高表达组明显高于低表达组（P<0.05）。Ⅱ级胶质瘤组EPO mRNA表达水平明显高于正常组与Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组（P<0.05）。对于高级别（WHO Ⅲ~Ⅳ级）胶质瘤,EPO低表达组中位生存时间为12个月,高表达组为36个月;EPO低表达组累积生存率明显低于高表达组（P<0.05）。结论 人脑胶质瘤EPO蛋白的表达与病理级别及新生血管正相关;WHO Ⅱ级胶质瘤EPO mRNA在转录水平已上调;WHO Ⅲ~Ⅳ级组胶质瘤EPO表达高者生存期长。     

尿激酶型纤溶酶原激活剂及其受体在胶质瘤中的表达

目的 研究人脑胶质瘤组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA)及其受体（uPAR)的表达,探讨uPA、uPAR的表达与人脑胶质瘤恶性程度的关系。方法 采用半定量逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）方法,对49例人脑胶质瘤手术切除标本、U251等3株胶质瘤细胞,12例内减压术中切除的正常脑组织标本的uPA mRNA和uPAR mRNA表达水平进行检测。结果 随着胶质瘤恶性度的升高,其uPA及uPAR mRNA表达率和表达水平逐渐增高。U251等3株胶质瘤细胞也表达了较高水平的uPA及uPAR mRNA,而正常组织表达率及表达水平极低。结论 人脑胶质瘤中纤溶酶原激活系统活性较高,uPA、uPAR基因的高表达反映了胶质瘤的恶性生物学行为。     

NF—κB和uPA在人脑胶质瘤中的表达

目的 究人脑胶质瘤中核转录因子-κB（NF—κB）和尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）的表达，探讨二者在胶质瘤侵袭性生长和恶性进展中的作用。方法 用免疫组化SP法检测52例脑胶质瘤和5例正常脑组织中NF—κB和uPA的表达和分布情况.结果 NF-κB及uPA在正常脑组织中均未见表达；在52例脑胶质瘤中NF-κB有41例表达，其在高级别胶质瘤中的阳性表达率高于低级别胶质瘤（P〈0．01）。uPA在52例胶质瘤中则全部表达，其在高级别胶质瘤中的表达强度明显高于低级别胶质瘤（P〈0．01）。NF-κB和uPA在胶质瘤中的表达呈正相关（r=0.542，P〈0．01）。结论 脑胶质瘤中，活化的NF-κB可促进uPA表达．从而促进胶质瘤的侵袭性和恶性进展。     

胶质瘤患者肿瘤组织和血浆中MMP-9的表达及意义

目的探讨胶质瘤患者肿瘤组织和血浆中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达、两者之间的关系及意义。方法收集40例胶质瘤患者病理标本、患者术前血浆及临床资料,分成高度恶性组和低度恶性组。10例因重度颅脑损伤而行内减压手术切除的脑组织和患者术前血浆,作为对照组。运用免疫组织化学染色法对胶质瘤组织标本中MMP-9表达进行半定量分析。运用酶联免疫吸附测定法检测血浆中总MMP-9浓度。结果 MMP-9在正常脑组织中无表达,高度恶性组瘤组织中MMP-9的表达显著高于低度恶性组(P=0.027)和对照组(P=0.000)。各级别胶质瘤组MMP-9血浆浓度均显著高于对照组(P0.001)。瘤组织MMP-9强阳性表达组血浆MMP-9浓度显著高于阴性组(P=0.022)和弱阳性组(P=0.048),血浆MMP-9浓度与相应肿瘤组织MMP-9的表达水平呈正相关(rs=0.530,P=0.000)。结论瘤组织MMP-9表达与胶质瘤恶性程度呈正相关,其高表达可能与胶质瘤的侵袭转移有关;胶质瘤患者血浆MMP-9浓度一定程度上反映出瘤组织中MMP-9表达水平。     

苦参碱联合替莫唑胺对大鼠脑胶质瘤MMP2、MMP9、VEGF表达的影响

目的探讨苦参碱联合替莫唑胺对大鼠脑胶质瘤基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法建立大鼠C6脑胶质瘤模型,采用MRI扫描、HE染色、免疫组织化学确定模型建立成功。将C6脑胶质瘤模型大鼠随机分成4组,每组各20只:(1)对照组,腹腔注射生理盐水(100 ml/kg);(2)苦参碱组,腹腔注射苦参碱(20 mg/kg);(3)替莫唑胺组,腹腔注射替莫唑胺(25 mg/kg);(4)联合组,腹腔注射苦参碱(20 mg/kg)和替莫唑胺(25 mg/kg);每天给药1次,连续14 d。药物治疗后14 d处死大鼠,取胶质瘤组织,采用免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测MMP-2、MMP-9和VEGF蛋白和m RNA表达情况。结果大鼠注射胶质瘤C6细胞后7 d,MRI扫描可见脑胶质瘤的存在,HE染色发现组织表现出神经胶质瘤的侵袭性生长和细胞核分解,免疫组织化学结果显示也证明大鼠存在脑胶质瘤。与对照组相比,苦参碱组、替莫唑胺组与联合组MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白和m RNA表达水平均显著降低(P0.05);联合组MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白和m RNA表达水平均显著低于苦参碱组和替莫唑胺组(P0.05),而苦参碱组MMP-2、MMP-9、VEGF蛋白和m RNA表达水平均显著低于替莫唑胺组(P0.05)。结论苦参碱和替莫唑胺均可显著降低大鼠脑胶质瘤MMP-2、MMP-9、VEGF表达水平,而且,二者联用作用更强。     

尿激酶型纤溶酶原激活因子及其受体在人脑胶质瘤中的表达和意义

目的探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator，uPA)及其受体(uPAR)的表达与人脑胶质瘤恶性程度的关系。方法采用免疫组化法，对58例人脑胶质瘤手术切除标本，10例内减压术中切除的正常脑组织标本的uPA、uPAR蛋白表达水平进行检测。结果随着胶质瘤恶性度的升高，其uPA、uPAR蛋白表达率和表达水平逐渐增高，而在正常组织中均无uPA和uPAR表达。结论uPA／uPAR蛋白高表达反映了胶质瘤的恶性生物学行为。     

共刺激分子B7-H3和Ki-67在人脑胶质瘤中的表达及相关性

目的 研究共刺激分子B7-H3和Ki-67在脑胶质瘤中的表达及二者的相关性.方法 选取聊城市人民医院神经外科自2008年3月至2010年1月间手术切除并经病理证实的人脑胶质瘤液氮冻存标本46例,其中低级别21例、高级别级25例,另取同期10例脑外伤或脑出血患者在手术非功能区入路过程中必须切除的正常脑组织作为对照.应用免疫组织化学染色检测各标本中B7-H3和Ki-67的表达.结果 正常脑组织中B7-H3、Ki-67不表达,胶质瘤组织中B7-H3、Ki-67表达阳性率分别为65.22%、89.13%.与正常脑组织比较差异均有统计学意义(P＜0.05).低、高级别脑胶质瘤之间B7-H3、Ki-67表达阳性率比较差异均无统计学意义(P＞0.05).脑胶质瘤中B7-H3与Ki-67的表达呈正相关关系(r=0.417,P=0.014).结论 B7-H3和Ki-67是参与脑胶质瘤恶性发展的重要分子生物学因素,且两者可能存在协调作用.

Abstract：

Objective To study the expressions of costimulatory molecule B7-H3 and Ki-67 in human glioma and explore their correlation. Methods Forty-six human brain gliomas, collected in our hospital from March 2008 to January 2010, including 21 with low grade and 25 with high grade, were chosen;and 10 normal tissues, collected from patients with cerebral trauma or cerebral hemorrhage at the same period, were chosen. Immunohistochemistry with SABC and SP methods were employed to detect the expressions of B7-H3 and Ki-67. Results B7-H3 and Ki-67 did not express in the normal brain tissues, but their expressions were detected in all glioma tissues of different grades (positive rate of B7-H3: 65.22%, that of Ki-67: 89.13%), which had significant differences (P<0.05). High-grade gliomas showed no significant differences on B7-H3 and Ki-67 expressions as compared with low-grade gliomas (P>0.05);and a positive correlation was noted between B7-H3 and Ki-67 expressions (r=0.417, P=0.014).Conclusion Being the important molecular biological factors, B7-H3 and Ki-67 participate in the development of human glioma and exhibit a synergic effect in this process.