乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞相关性探讨

目的探讨乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)的相关性。方法抽取116例乳腺癌及20例乳腺纤维腺瘤患者外周静脉血5 ml,利用密度梯度离心法富集单个核细胞,通过荧光定量PCR技术检测所获单个核细胞中细胞角蛋白(cytokeratin,CK)19 mRNA表达阳性的CTC,分析乳腺癌分子分型与CTC的关系。结果 116例乳腺癌患者中CTC阳性率为31%(36/116),20例乳腺纤维腺瘤患者均未检测出CTC。36例CTC阳性患者的中位CTC水平为1.65(1.18,2.87)个MCF-7细胞/2μg总RNA;116例乳腺癌患者中各分子亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)所占比例分别为62.1%(72/116)、17.2%(20/116)、20.7%(24/116);各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性率分别为27.8%(20/72)、35%(7/20)、37.5%(9/24),差异无统计学意义(P=0.615),各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性患者的中位CTC水平分别为2.1(1.18,3.9)、1.37(1.12,2.12)、1.53(1.32,2.64)个MCF-7细胞/2μg总RNA,差异有统计学意义(P=0.046)。结论乳腺癌各分子亚型间CK-19 mR-NA阳性CTC水平存在差异,提示各亚型间临床异质性可能与患者CTC水平相关。     

凋亡基因Caspase3在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 探讨乳腺癌进展中Caspase3基因表达的临床意义.方法用免疫组织化学和Western Blot技术检测21例乳腺腺病、21例乳腺纤维腺瘤、96例原发性乳腺癌病灶中Caspase3蛋白表达情况.结果 乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤、乳腺癌中Caspase3蛋白表达阳性率分别为85.72%(18/21)、61.90%(13/21)、23.96%(23/96),乳腺癌Caspase3蛋白表达阳性率明显低于乳腺良性病变(P=0.000).乳腺癌Caspase3蛋白表达阳性率越低,淋巴结转移个数越多,临床分期越高(P=0.010).结论 Caspase3对判断乳腺良恶性疾病及乳腺癌的发展程度具有参考价值.     

Correlation between molecular subtypes and circulating tumor cells in breast cancer

目的 探讨乳腺癌分子分型与外周血循环肿瘤细胞( circulating tumor cell,CTC)的相关性.方法 抽取116例乳腺癌及20例乳腺纤维腺瘤患者外周静脉血5ml,利用密度梯度离心法富集单个核细胞,通过荧光定量PCR技术检测所获单个核细胞中细胞角蛋白( cytokeratinCK) 19 mRNA表达阳性的CTC,分析乳腺癌分子分型与CTC的关系.结果 116例乳腺癌患者中CTC阳性率为31％ (36/116),20例乳腺纤维腺瘤患者均未检测出CTC.36例CTC阳性患者的中位CTC水平为1.65(1.18,2.87)个MCF-7细胞/2μg总RNA;116例乳腺癌患者中各分子亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)所占比例分别为62.1％ (72/116)、17.2％( 20/116)、20.7％ (24/116);各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性率分别为27.8％ (20/72)、35％ (7/20)、37.5％ (9/24),差异无统计学意义(P＝0.615),各亚型(luminal型、HER-2过表达型、basal-like型)CTC阳性患者的中位CTC水平分别为2.1(1.18,3.9)、1.37(1.12,2.12)、1.53(1.32,2.64)个MCF-7细胞/2μg总RNA,差异有统计学意义(P ＝0.046).结论 乳腺癌各分子亚型间CK-19 mRNA阳性CTC水平存在差异,提示各亚型间临床异质性可能与患者CTC水平相关.     

VEGF和ER在乳腺癌组织中的表达与其生物学特征的关系

目的:研究乳腺癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)和雌激素受体(ER)的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学SABC法,检测85例乳腺癌及42例乳腺纤维腺瘤组织中VEGF和ER的表达情况,并评价其与乳腺癌临床病理学因素之间的关系。结果:乳腺癌组织中VEGF阳性率(57.65%,49/85)明显高于乳腺纤维腺瘤(4.76%,2/42)(P<0.0001)。VEGF表达与患者年龄、肿瘤大小、病理分型及ER无明显关系(P>0.05)。、期乳腺癌和淋巴结转移阳性组的VEGF表达阳性率明显高于、期乳腺癌和淋巴结转移阴性组(P<0.0001)。ER在乳腺癌中的阳性率为58.82%(50/85),在乳腺纤维腺瘤中无阳性表达。结论:乳腺癌组织中VEGF有异常表达,与乳腺癌的预后有关。     

乳腺癌中细胞外信号调节激酶-2磷酸化表达的意义

目的探讨乳腺癌中细胞外信号调节激酶磷酸化表达及其意义。方法采用免疫组织化学和Western blot技术检测乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤、原发性乳腺癌病灶中磷酸化细胞外信号调节激酶-2(extracellular signal-reg- ulated kinase 2,ERK2)表达情况。结果免疫组化检测在乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤、乳腺癌中磷酸化ERK2蛋白阳性率分别为38.10%(8/21)、66.67%(14/21)、87.50%(84/96),磷酸化ERK2蛋白表达在三种疾病之间有统计学意义(χ~3=25.044,P=0.000);Western blot技术检测乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤、乳腺原位癌、乳腺浸润性癌中磷酸化ERK2蛋白表达的平均OD值分别为0.655、0.818、0.882、0.933,乳腺癌中磷酸化ERK2表达量明显高于良性病变,结果与免疫组化检测结果一致;乳腺癌ERK2蛋白表达情况在不同年龄段有统计学意义(χ~2=5.677,P=0.017);乳腺癌ERK2蛋白表达与乳腺癌病理组织学类型、临床分期、生存率无显著相关性。结论在乳腺癌中ERK2磷酸化增强与癌细胞生长活性增加有关,ERK2在判断乳腺良恶性疾病时具有辅助价值。     

乳腺癌中bcl-2、bax基因蛋白表达的临床意义

目的探讨乳腺癌组织bcl-2、bax基因蛋白表达的临床意义。方法采用免疫组织化学技术、Western blot技术,检测bcl-2、bax蛋白表达情况。结果乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤、乳腺癌中bcl-2蛋白阳性率分别为95.24%(20/21)、76.19%(16/21)、61.46%(59/96)),bcl-2蛋白表达在三种疾病之间存在统计学意义(χ2=9.790,P=0.007);Western blot技术检测乳腺腺病、乳腺纤维腺瘤、乳腺原位癌、乳腺浸润性癌中磷酸化bcl-2蛋白表达的平均OD值的比值分别为0.828、0.719、0.524、0.520,结果与免疫组化检测结果一致。随着淋巴结转移数目的增多、临床分期的增高,乳腺癌bcl-2蛋白表达阳性率降低(P<0.05)。乳腺癌中bax蛋白表达阳性率明显高于乳腺良性疾病(χ2=22.822,P=0.000),与淋巴结转移数目及临床分期无统计学意义(P>0.05)。结论bcl-2在乳腺癌中的表达显著性低于乳腺良性疾病,bax在乳腺癌中的表达则显著性高于乳腺良性疾病,二者在判断乳腺良恶性疾病时具有重要辅助价值。bcl-2基因与乳腺癌的发展、预后有一定的相关性。     

ER、PR和HER-2在乳腺髓样癌中的表达及其临床意义

目的 探讨乳腺髓样癌的雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)的表达情况及其临床意义.方法 收集16例临床病理资料完整的乳腺髓样癌病例,采用MaxVisionTM试剂盒行免疫组化两步法检测16例乳腺髓样癌组织中ER、PR、HER-2的表达情况并分析其结果,取同期的53例乳腺浸润性导管癌作对照研究.结果 乳腺髓样癌的免疫组化显示乳腺髓样癌组ER阳性率为3/16(18.75%)、PR阳性率为4/16(25.00%)、HER-2阳性率为5/16(31.25%)、三阴性乳腺癌为8/16(50.00%);乳腺浸润性导管癌组ER阳性率为35/53(66.04%)、PR阳性率为32/53(60.38%)、HER-2阳性率为20/53(37.74%)、三阴性乳腺癌为6/53(11.32%);乳腺髓样癌组ER的阳性表达率明显低于乳腺浸润性导管癌组(2 =11.107,P<0.01),乳腺髓样癌组中的PR的阳性表达率明显低于乳腺浸润性导管癌组(2=6.164, P<0.05).乳腺髓样癌组中的HER-2阳性表达率与乳腺浸润性导管癌组差异无显著性(2=0.224,P>0.05).结论 乳腺髓样癌的三阴性乳腺癌所占比例较高,激素受体阳性率低,该类型乳腺癌患者预后是否良好,需待进一步随访观察.     

乳腺肿瘤患者细针抽吸细胞c-erbB-2的表达变化

目的 研究乳腺肿瘤患者细针抽吸(FNA)脱落细胞表皮生长因子受体-2(c-erbB-2)蛋白的表达变化.方法 运用免疫细胞化学(ICC)的方法检测71例乳腺肿瘤患者(28例导管内癌,22例浸润性导管癌,21例纤维腺瘤)FNA涂片c-erbB-2蛋白的表达.结果 FNA涂片脱落细胞c-erbB-2的表达在乳腺导管内癌患者中阳性率为57.1%(16/28),浸润性导管癌阳性率59.1%(13/22),纤维腺瘤阳性率仅为4.8%(1/21).结论 FNA涂片行ICC检测c-erbB-2的蛋白表达,对了解乳腺癌的生物学特征,指导乳腺癌诊断、治疗和预后判断都有重要意义.     

DNA双链断裂修复蛋白在乳腺癌和乳腺纤维腺瘤中的表达

目的 研究DNA双链断裂修复蛋白(Ku80、DNA-PKcs和ATM)在乳腺癌和乳腺纤维腺瘤组织中的表达,探讨3种蛋白在乳腺癌发生发展中的作用及相互关系.方法 应用免疫组化SP法检测55例乳腺癌和14例乳腺纤维腺瘤组织中Ku80、DNA-PKcs和ATM蛋白的表达情况.结果 Ku80、DNA-PKcs和ATM蛋白在乳腺癌患者中的阳性率分别为74.5%、54.5%和52.7%,在乳腺纤维腺瘤患者中的阳性率分别为92.9%、92.9%和71.4%;DNA-PKcs蛋白在乳腺癌组织中的表达显著低于乳腺纤维腺瘤组织(χ2＝6.975,P=0.008),而Ku80和ATM的表达虽在乳腺癌组织中的表达亦低于乳腺纤维腺瘤组织,但差异无显著性意义(均P>0.05).ATM和DNA-PKcs蛋白的表达在不同病理类型、肿块大小、临床分期和淋巴结转移状态的乳腺癌患者中差异无统计学意义(P>0.05);但Ku80的表达与患者的肿块大小和临床分期相关(P<0.01).Spearman等级相关分析提示:在55例乳腺癌患者中,Ku80与DNA-PKcs的表达呈正相关(r＝0.355,P=0.008);Ku80与ATM的表达亦呈正相关(r＝0.325,P=0.015).结论 DNA-PKcs蛋白可能在乳腺癌的发生发展中起重要作用;Ku80可以促进乳腺癌细胞生长;Ku80与DNA-PKcs及ATM存在密切关系.     

乳腺癌患者循环肿瘤细胞阳性率与预后的关系

目的:探讨乳腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(CTC)检测阳性率与原发肿瘤临床病理特征及预后的关系。方法:前瞻性收集41例乳腺癌患者术前外周血,密度梯度离心进行CTC富集,甲苯胺蓝染色,CK联合上皮黏附分子免疫细胞化学法鉴定CTC。采用χ~2检验分析CTC阳性率与临床病理特征及预后的关系。结果:乳腺癌外周血CTC阳性率与分子分型、原发肿瘤T分期及TNM分期具有明显相关性(均P<0.05)。与年龄、激素受体、Ki67、Her-2表达、淋巴结、远处转移无显著相关性(均P>0.05)。平均随访75.9±2.59个月,CTC阳性组与CTC阴性组在远处转移及死亡发生率方面均无显著性差异(P=0.555)。结论:乳腺癌外周血CTC的检测具有显著临床意义。     

乳腺钼靶摄影中乳腺癌影像学表现和相关肿瘤标志物表达的相关性

目的探讨乳腺钼靶摄影中乳腺癌阳性表现与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体2(HER-2)表达的相关性。方法收集合肥市第三人民医院2013年8月至2018年10月行乳腺钼靶检查并可见阳性征象的30例乳腺癌患者的临床资料进行回顾性分析,根据其影像学表现分为簇状钙化组、肿块组以及肿块合并簇状钙化组3组。分析影像学表现与组织学来源,影像学表现与免疫组化结果中ER、PR、HER-2的关系。结果影像学表现为单纯簇状钙化者10例(33. 3%),单纯肿块者7例(23. 3%),肿块合并簇状钙化者13例(43. 3%)。ER、PR、HER-2的阳性率分别为70. 0%(21/30)、60. 0%(18/30)和56. 7%(17/30)。来源于导管上皮的乳腺癌钙化率高于非导管上皮肿瘤(P <0. 05)。肿块合并簇状钙化组患者中HER-2表达高于其他两组(P <0. 05),且肿块边缘毛刺征象和HER-2表达呈负相关(r=-0. 265,P <0. 05)。结论簇状钙化、肿块以及肿块合并簇状钙化是乳腺癌钼靶检查中最重要的三种影像学表现,来源于导管上皮的乳腺癌钙化率较高。HER-2在肿块合并簇状钙化患者中表达最高,且和肿块影像学表现有关。     

乳腺导管造影对乳腺导管内病变良、恶性的诊断

目的 为早期明确诊断乳腺导管内病变提供客观依据。方法 对355临床表现为乳头溢液,经病理证实的乳腺肿瘤的导管造影表现进行回顾性分析、归纳、总结。结果 355例临床表现为乳头溢液的乳腺肿瘤（良性肿瘤334例,乳腺癌21例）的导管造影表现：226例分布在主导管及一级分支导管（良性肿瘤221例,乳腺癌5例）,129例分布在二、三级及小分支导管（良性肿瘤113例,乳腺癌16例）,348例导管内充盈缺损（良性肿瘤334例,乳腺癌14例）;86例导管中断（良性肿瘤76例,乳腺癌11例）,131例导管壁破坏（良性肿瘤117例,乳腺癌14例）,173例导管扩张（良性肿瘤168例,乳腺癌5例）,6例导管狭窄（良性肿瘤3例,乳腺癌3例）;乳腺良性肿瘤和乳腺癌在肿瘤发生导管部位、充盈缺损形态、导管中断、导管壁破坏上具有统计学差异。乳头状瘤、乳头状瘤病和乳腺癌导管造影诊断的灵敏度分别为80.1%、76.2%、76.2%。 结论 乳腺导管造影对鉴别导管内良恶性肿瘤具有重要价值。     

D—CIK治疗抑制进展期乳腺癌中循环肿瘤细胞的初步研究

目的探讨D-CIK治疗对进展期乳腺癌外周血中循环肿瘤细胞数的变化情况及意义。方法采用Cellseareh检测系统对32例明确诊断为进展期乳腺癌患者分别在CIK细胞回输治疗前后检测外周血中循环肿瘤细胞数目变化情况,同时观察治疗过程中患者的相关不良反应。结果患者接受D—CIK治疗后,循环肿瘤细胞的数目明显减少,由治疗前的5～18个／7．5ml减少为治疗后的2～11个／7．5ml,两者差异具有统计学的意义（P〈0．05）。治疗过程中未见明显不良反应。结论D-CIK治疗可明显降低患者外周血中循环肿瘤细胞的数目。     

以黑色素瘤抗原基因mRNA为特异标记检测乳腺癌患者外周血肿瘤细胞

目的：以黑色素瘤抗原-A1(MAGE-A1)和MAGE-A3基因mRNA为特异性标记物，检测乳腺癌患者外周血中的肿瘤细胞，并探讨其临床意义。方法：采集40例乳腺癌患者及20例非肿瘤患者的外周血，用巢式RT-PCR方法检测外周血单核细胞(PBMC)中MAGE—A1和MAGE-A3基因mRNA。同时用RT-PCR方法检测乳腺癌患者肿瘤组织中上述MAGE基因的表达。结果：12．5％(5／40)和17．5％(7／40)乳腺癌患者的PBMC中可分别检测到MAGE-A1和MAGE-A3基因的mRNA，而相应乳腺癌组织中MAGE-A1和MAGE—A3的表达率分别为15．0％(6／40)和22．5％(9／40)，在25．0％(10／40)的乳腺癌患者PBMC中至少可检测到一种MAGE基因mRNA，癌旁组织、乳腺癌组织中不表达MAGE基因的患者以及20例非肿瘤疾病患者的PBMC中均未测出MAGE基因mRNA。乳腺癌患者PBMC中两种MAGE基因mRNA的检出率与肿瘤TNM分期密切相关。结论：MAGE-A1和MAGE-A3基因mRNA可作为特异性肿瘤标记物用于检测乳腺癌患者PBMC中的乳腺癌细胞，巢式RT-PCR的敏感性及特异性较高，其检测结果可能有助于判断乳腺癌患者的预后。     

肿瘤细胞中脂肪酸合成酶和人表皮生长因子受体2的联系

肿瘤细胞的生理生化特性不同于正常的组织细胞,其中某些基因会出现异常表达.基因表达上调为靶向给药提供了靶点,从而避免在治疗肿瘤时伤及正常细胞.脂肪酸合成酶(fatty acid synthase, FAS)和人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor-2,HER2)都是在肿瘤细胞中高表达的分子.针对HER2的赫赛汀(herceptin)已应用于乳腺癌的临床治疗并取得了良好疗效,而针对FAS的药物浅蓝霉素也正在进行临床试验.近年来研究发现,FAS和HER2在某些肿瘤细胞(如乳腺癌细胞、卵巢癌细胞等)中同时高表达,相互之间存在着信号通路上的联系,而且用药后具有协同抑制作用.本文对肿瘤细胞中二者的相互联系作一综述.     

抑癌基因产物Rb蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究乳腺癌组织中Rb蛋白的表达及其临床意义。 方法:采用S-P免疫组织化学染色法对52例乳腺癌组织和20例良性乳腺病变组织中Rb蛋白的表达进行检测。 结果:Rb蛋白阴性表达率在乳腺癌组中为76.9%（40/52）,显著高于良性乳腺病变组织 ［15.00%(3/20)］(P<0.01);Rb蛋白的阴性表达与乳腺癌临床病理参数间无关联（P＞0.05）。随访46例乳腺癌患者,38例Rb蛋白阴性表达者局部复发或远处转移为10.5%,而8例Rb蛋白阳性表达者则为0,两者比较差异有显著性（P<0.01）。结论:Rb蛋白的阴性表达与乳腺癌的发生有关;作为抑癌基因产物,Rb蛋白可以在蛋白质水平估计乳腺癌的病情,为临床制定治疗方案、估计病情及预后提供一个有意义的客观指标。     

不可触及肿物乳腺癌的临床诊断

目的:探讨不可触及肿物乳腺癌的早期诊断.方法:对46例查体不可触及肿物的病例进行钼靶X线摄片及超声检查,有乳头溢液者均行乳管镜检查.结果:46例均经病理检查证实为乳腺癌患者,其中钼靶示结节或钙化、结构紊乱等提示乳癌34例,考虑良性肿瘤5例,未见病变7例;超声诊断乳癌31例,考虑良性病变6例,未见占位性病变9例;6例乳头溢液乳管镜均示占位性病变经定位活检确诊.结论:钼靶、超声是早期发现乳腺癌的重要手段,重视早期癌的体征,联合检诊,互相弥补,可提高乳癌的早诊率.     

雌激素受体β和HER2共表达对乳腺癌预后的影响

目的分析雌激素受体（ER-β）和人体表皮生长因子受体（HER2）共表达对乳腺癌的预后价值。方法收集308例原发性乳腺癌患者信息，采用免疫组化方法检测ER-β和HER2状态，评价其预后价值。结果免疫组化结果显示．ER-β阳性123例（40％），58例HER2阳性，44例ER-B及HER2共表达，呈显著相关性（P=0．018）。ER-β阳性与细胞低分化（P=0．01）、绝经低于45岁（P=0．031）、无远处复发时间（DDFS）相关，与总生存时间（OS）无关。HER2阳性与细胞低分化（P=0．001）、肿瘤大于3cm显著相关（P=0．011）。ER-13与HER2共表达与患者0S更短相关（P〈0．01）。结论ER-13．HER2阳性均可能促进乳腺癌转移，ER-β与HER-2患者其OS更短。     

循环肿瘤细胞在可手术乳腺癌患者中的检出率及特征分析

目的：探讨循环肿瘤细胞（ CTCs ）在可手术乳腺癌患者外周血中的水平及与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。方法收集T2～4 N0～3 M0可手术乳腺癌患者126例。抽取入组患者7.5 mL外周血,使用CellSearch系统检测CTCs。分析CTCs与可手术乳腺癌患者临床病理特征的关系。结果在126例患者中,有9例患者检测到CTCs,检出率为7.1％。 CTCs阳性组的Ki67为（51±20）％,CTCs阴性组的Ki67为（33±23）％（ P＝0.04）。可手术乳腺癌患者外周血检出CTCs与患者年龄、月经状态、肿块大小、淋巴结状态、AJCC分期、病理类型、病理学分级、ER、PR、HER2状态以及分子分型无关。结论7.1％的可手术乳腺癌患者检测到CTCs,CTCs与Ki67相关。     

多原发性恶性肿瘤20例分析

目的提高对多原发性恶性肿瘤的认识。方法回顾性分析20例多原发性恶性肿瘤患者的临床特点、发病间歇时间、肿瘤类型与治疗方法。结果20例患者第一原发癌为消化道恶性肿瘤9例,泌尿生殖系癌4例,乳癌2例,会厌癌、咽癌、甲状腺癌、肝癌、肺癌各1例,发病间隙期以3~5年多见。肺癌行根治性手术治疗8例,化疗8例,4例因经济困难未治疗。结论多原发性恶性肿瘤好发年限为3~5年,提高认识,减少误诊,可使相当一部分病人获得根治性治疗。