母鼠有机磷农药暴露对着床前期小鼠胚胎的细胞遗传学及生长发育的影响

[目的]研究妊娠初期有机磷农药暴露对母体生殖功能，对子代细胞遗传学及生长发育的影响。[方法]以有机磷农药敌百虫为受试物，以着床期胚胎为研究对象，以反映染色体异常的微核形成和反映胚胎生长发育状况的构成细胞数为指标。孕鼠腹腔注射100或200mg/kg剂量的敌百虫溶液，3d后，在体视显微镜下从其子宫中取出胚胎，进行其形态学分析，微核试验及胚胎构成细胞数的分析。[结果]敌百虫暴露组的胚胎微核发生率明显高于对照组，分别为200mg／kg暴露组为16．9％，100mg／kg暴露组16．1％，对照组为5．3％，并有明显的剂量-反应关系。此外，母鼠暴露于敌百虫，可造成子代生长发育迟缓，表现为胚胎构成细胞数明显下降(200mg/kg组44．1，对照组54．7)。[结论]妊娠初期有机磷农药暴露对着床前期胚胎的细胞遗传学及生长发育有明显影响。着床前期小鼠胚胎的微核试验是评价母体早期暴露有机磷农药导致子代细胞遗传学改变的简便、灵敏的指标，本结果为进一步对着床后胚胎的研究，奠定了基础。     

敌百虫暴露对小鼠及胎鼠生殖发育影响

目的研究母鼠器官形成期经口暴露较低浓度的有机磷农药-敌百虫,对母鼠生殖功能、内分泌功能及胚胎发育的影响。方法孕鼠随机分为对照组和3个实验组,在胎儿器官形成期即妊娠第6～15d经口灌胃染毒敌百虫,剂量分别为0,12.5,25和50 mg/kg。在妊娠第17d经眼球取血后处死孕鼠,研究在本实验剂量下,敌百虫对孕鼠生殖功能、内分泌功能以及胚胎发育的影响。结果（1）母鼠器官形成期经口暴露敌百虫,可导致各实验组胎鼠外观畸形发生率显著增高（P〈0.01）。（2）各剂量敌百虫暴露对孕鼠的生育力及妊娠结局无明显影响,表现在孕鼠的体重、卵巢脏器系数、胎盘脏器系数、黄体数、着床率、活胎数、死胎数、吸收胎数等与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）;（3）除50mg/kg剂量敌百虫的暴露可引起母鼠血清雌二醇浓度下降外,其他各剂量组母鼠血清和卵巢的雌二醇浓度均未见明显影响。结论在本实验剂量下,器官形成期雌鼠经口暴露敌百虫对子代胚胎的生长发育有影响,表现为胎鼠的畸形发生率增加,但对母鼠的生殖功能、内分泌功能未见明显影响。     

敌百虫对孕鼠血清白介素-1、白介素-2及胚胎发育的影响

[目的]研究孕鼠经口暴露有机磷农药敌百虫(trichlorfon)对免疫器官、血清白介素-1(interleukin-1,IL-1)、白介素-2(interleukin-2,IL-2)及胚胎发育的影响.[方法]孕鼠随机分为对照组和染毒组(3组),在孕鼠妊娠第6天至第15天每天经口灌胃染毒敌百虫1次,剂量分别为0mg/kg(对照组)、12.5mg/kg(低剂量组)、25mg/kg(中剂量组)和50mg/kg(高剂量组).在妊娠第17天经眼球取血后处死孕鼠,取孕鼠脾脏、胸腺进行脏器系数测定,用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清IL-1、IL-2含量,并进行胚胎着床率、活胎数、死胎数、吸收胎数等胚胎发育功能评价.[结果]①低剂量组引起孕鼠血清IL-1升高(P<0.01),高剂量组血清IL-1降低但与对照组比较差异无统计学意义;低剂量组血清IL-2水平未见明显改变,而高剂量组则血清IL-2降低(P<0.05);对脾脏、胸腺脏器系数无明显影响.②各剂量均未见对孕鼠体重、卵巢、胎盘脏器系数、黄体数、着床率及活胎、死胎、吸收胎个数方面有明显影响(P>0.05).[结论]在本实验中,敌百虫对IL-1分泌未见明显抑制,而低剂量可诱导IL-1分泌增加;高剂量对IL-2分泌明显抑制,但并未影响到胚胎发育;提示敌百虫对动物机体免疫系统中不同免疫细胞毒性作用可能不尽相同.     

呕吐毒素对小鼠精液质量和生育力的影响

目的探讨呕吐毒素即脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)染毒对小鼠精液质量和生育力的影响。方法将40只2~3月龄健康清洁级昆明雄性小鼠按体重随机分为4组,分别为对照(玉米油)组和10、30、50 mg/kg DON染毒组,每组10只。采用腹腔注射方式进行染毒,染毒容量为10 ml/kg,每天1次,连续染毒7 d。与未染毒的雌性小鼠合笼(雌雄比为2∶1);于妊娠15 d时,检测雄性小鼠精液质量和雌性小鼠生育力的变化情况。结果与对照组比较,各剂量DON染毒组小鼠的精子畸形率升高,而精子存活率和顶体完整率降低,差异均有统计学意义(P0.01,P0.05);且随着DON染毒剂量的升高,小鼠的精子存活率和顶体完整率均呈下降趋势,而精子畸形率呈上升趋势。与对照组比较,各剂量DON染毒组小鼠睾丸总精子数和精子日生成量以及20和30 mg/kg DON染毒组小鼠的附睾尾总精子数均下降,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);且随着DON染毒剂量的升高,小鼠的总精子数、精子日生成量和附睾尾总精子数均呈下降趋势。与对照组比较,各剂量DON染毒小鼠可使交配母鼠的妊娠率、着床胚胎数、活胎数降低,而妊娠流产率升高,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);且随着DON染毒剂量的升高,与各剂量DON染毒小鼠交配母鼠的妊娠率、着床胚胎数、活胎数均呈下降趋势,而妊娠流产率呈上升趋势。结论 DON染毒可降低雄性小鼠精液质量和生育力。     

邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯低剂量暴露对雄性小鼠生殖发育的影响

目的观察邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)低剂量暴露对雄性小鼠的生殖发育毒性作用。方法将清洁级ICR小鼠随机分为4个DEHP染毒组(1/120LD50,1/60LD50,1/30LD50,1/15LD50,即250、500、1000、2000mg/kg组),阳性对照组(环磷酰胺,40mg/kg)和阴性对照组(玉米油);DEHP染毒组和阴性对照组灌胃染毒30d,阳性对照组灌胃5d,每天1次。采用一般生殖毒性试验和显性致死突变试验的方法,研究DEHP低剂量暴露对雄性小鼠生殖细胞的损伤作用和生育能力的影响。结果一般生殖毒性试验结果显示,低剂量DEHP染毒雄性小鼠睾丸、附睾重量降低(r睾丸=-0.578,P<0.01;r附睾=-0.661,P<0.01),精子总数减少(r=-0.608,P<0.01),精子畸形率增高(r=0.836,P<0.01),精子活动度降低(P<0.05)。显性致死突变试验研究结果显示,250mg/kgDEHP染毒组小鼠受孕率降低,但与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);DEHP染毒组子代小鼠平均着床数减少(r=-0.892,P<0.01),与阴性对照组比较,差异均具有统计学意义(P<0.01);平均早期死亡胚胎数随染毒剂量增加而增加(r=0.996,P<0.01),250mg/kg染毒组与阴性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论DEHP低剂量暴露对雄性小鼠具有生殖毒性作用,可降低小鼠受孕率,使子代小鼠平均着床数减少,平均早期死亡胚胎数增加。     

避蚊胺致突变作用研究

目的 研究避蚊胺的致突变作用。方法 Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、大鼠骨髓细胞染色体畸变试验。结果 避蚊胺各剂量组在加或不加体外代谢活化系统（S9）的条件下,各菌株的每剂量平均回变菌落数（R＋）／自发回变菌落数（Rc)的比值（MR）小于2。各剂量组微核率与阴性对照组比较差别均无统计学意义（P＞0．05）各剂量组骨髓细胞染色体畸变细胞率与阴性对照组比较差别均无统计学意义（P＞0．1－0．75）。结论 在本实验条件下,避蚊胺对鼠伤寒沙门氏杆菌TA97、TA98、TA100、TA102 4个菌株未呈现遗传毒性,对小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率和大鼠骨髓细胞染色体结构畸变率均无影响。     

应用微核实验和彗星电泳实验评价氯化镧90d喂养对小鼠遗传毒性作用

[目的]应用微核实验和彗星电泳实验评价氯化镧亚慢性染毒致小鼠遗传毒性作用. [方法]将100只SPF级ICR小鼠随机分为5组:4个氯化镧染毒组和1个对照组,每组20只,雌雄各半.5个剂量组分别以灌胃的方式给予不同浓度的氯化镧溶液(0、10、20、50和100 mg/kg).每周染毒6次,连续染毒13周后,取小鼠外周血进行彗星实验及镧含量的测定,取小鼠骨髓观察骨髓细胞微核率. [结果]镧染毒剂量达50 mg/kg时,彗星细胞的尾长及尾部DNA含量与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05),小鼠骨髓细胞微核率与对照组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).4个氯化镧染毒组血液中均有不同程度的镧的蓄积,与对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05). [结论]稀土镧元素可以在血液中蓄积,具有一定的遗传毒性.     

胚胎植入前期苯和甲醛联合染毒致小鼠胚胎毒性

目的 研究在胚胎植入前期苯和甲醛单一或联合染毒对小鼠胚胎发育的影响,为居室环境毒物生殖毒性的评价提供依据.方法 采用2因素4水平析因设计(0、0.875、8.75、87.5 mg/kg苯和0、7.875、15.75、31.5 mg/kg甲醛),将受孕第1天清洁级昆明种小鼠随机分配入16个剂量组并行腹腔注射染毒(连续3 d),每组4只.于受孕第9天称重后,取子宫、卵巢及肝、脾、肾脏称重,计数每只子宫角的胚胎植入数并重量.结果 不同剂量的苯和甲醛联合染毒均可造成小鼠胚胎植入数目减少、每窝胚胎总重和胚胎均重降低,差异具有统计学意义(P<0.01).不同剂量苯和甲醛单独或联合染毒对孕鼠的肝脏、脾脏、肾脏、卵巢和子宫重量均无明显影响(P>0.05).甲醛单独染毒可减少孕鼠体重增加值(P<0.01).结论 在小鼠胚胎植入前期染毒,低剂量苯和甲醛具有明显的胚胎毒性,当剂量增加到一定浓度时,两者均可显著抑制胚胎着床和发育.     

氯化镍染毒对小鼠外周血网织红细胞微核形成的影响

目的研究氯化镍(NiCl2)诱导小鼠外周血网织红细胞微核形成的作用.方法将30只健康的成年雄性NIH小鼠随机分为6组,设生理盐水对照组、秋水仙素阳性对照组(剂量为0.75 mg/kg)、环磷酰胺阳性对照组(剂量为40.0mg/kg)和NiCl2染毒组(剂量分别为5.0、10.0、20.0 mg/kg),分2次腹腔注射染毒,间隔24 h,每次按0.1 ml/10 g体重腹腔注射.采用转铁蛋白受体荧光抗体和碘化丙碇染色,以疟原虫感染小鼠外周血红细胞为微核生物模型,调校流式细胞仪,检测秋水仙素、环磷酰胺和0、5.0、10.0、20.0 mg/kg NiCl2染毒后小鼠外周血含微核网织红细胞率的变化.结果秋水仙素和环磷酰胺染毒小鼠的外周血含微核网织红细胞率均明显高于对照组小鼠(P＜0.01),但不同剂量NiCl2染毒小鼠外周血含微核网织红细胞率均未见明显升高(P＞0.05).结论该研究条件下未观察到氯化镍有明显的诱导小鼠外周血网织红细胞微核形成的作用.     

氟化钠的体外遗传毒性

[目的]研究氟化钠对小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y TK+/-3.7.2c)微核的影响及其对中国仓鼠肺成纤维细胞(CHL)细胞染色体畸变及细胞凋亡的影响. [方法]以灭菌注射用水为阴性对照,采用胞质分裂阻滞微核细胞组学试验法,并以丝裂霉素(0.1 μg/mL)为阳性对照,研究氟化钠3个浓度组(100、75与50 μg/mL)对L5178Y TK+/-3.7.2c细胞总微核率、核分裂指数、核质桥发生率、核芽突发生率与含核突芽的双核细胞数/含Ⅰ型微核与含Ⅱ型微核的双核细胞数值的影响.以空白细胞为阴性对照,丝裂霉素(0.2 μg/mL)为阳性对照,氟化钠以600、360、216和130 μg/mL的浓度作用于CHL细胞,以观察其对CHL细胞致突变的作用.用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测氟化钠对CHL细胞凋亡的影响. [结果]与阴性对照组的相比:①阳性对照组(丝裂霉素,0.1 μg/mL)和75、100 μg/mL氟化钠组L5178Y TK+/-3.7.2c细胞微核率明显升高(P＜0.05),且氟化钠三个浓度的氟化钠染毒组细胞核质桥发生率、含核突芽的双核细胞数/含Ⅰ型微核与含Ⅱ型微核的双核细胞数值均升高(P＜0.01);②阳性对照组(丝裂霉素,0.2 μg/mL)CHL细胞畸变率明显升高(P＜0.05);氟化钠各染毒组畸变率差异无统计学意义(P＞0.05),其早期凋亡率随染毒浓度的增加而上升(r=0.814,P＜0.05). [结论]氟化钠对L5178Y TK+/-3.7.2c细胞染色体具有损伤作用,对CHL细胞没有致突变作用,可以诱导CHL细胞的早期凋亡,呈现剂量相关性.