槟榔提取物对人类口腔黏膜上皮角朊细胞分泌内皮素的影响

目的 通过观察槟榔提取物(areca nut extract, ANE)对体外培养的人类口腔黏膜上皮角朊细胞(keratinocytes, KC)分泌内皮素(endothelin, ET)的影响， 初步探讨KC和ET在口腔黏膜下纤维性变(oral submucous fibrosis, OSF)发生中的作用。方法 分别从正常(NM)及OSF的口腔黏膜组织中培养出KC， 向培养基中加入不同浓度的ANE， 用放射免疫法测定培养细胞上清液中ET的水平。结果 OSF－KC 48 h的ET分泌量为96.983±17.802 pg/ml， 高于NM－KC分泌量14.641±15.796 pg/ml(P＜0.05)； ANE在5～150　μg/ml范围内以浓度—效应依赖关系刺激KC分泌ET。结论 人类口腔黏膜上皮KC能分泌一定量的ET， 且OSF－KC分泌的ET水平高于NM－KC， ANE能刺激KC分泌ET， 提示ANE可能是一种能引起KC分泌ET水平上调的外源性刺激物， ANE可能是通过改变KC分泌细胞因子的水平而诱发OSF。     

槟榔提取物刺激口腔黏膜角朊细胞培养上清对成纤维细胞增殖活性的影响

目的：探讨槟榔提取物刺激口腔黏膜角朊细胞在黏膜下纤维性变发病中的作用。方法：采用不同浓度槟榔提取液刺激体外培养的角朊细胞,取细胞培养上清,MTT法观察细胞培养上清对成纤维细胞增殖的影响。结果：一定浓度槟榔提取液刺激的角朊细胞培养上清能促进成纤维细胞增殖;细胞培养上清对成纤维细胞增殖的促进作用存在个体差异。结论：槟榔成分可能通过改变口腔黏膜角朊细胞的活性而导致口腔黏膜下纤维性变的发生。     

槟榔提取物对人类口腔黏膜上皮角朊细胞分泌内皮素的影响

目的通过观察槟榔提取物(areca nut extract,ANE)对体外培养的人类口腔黏膜上皮角朊细胞(keratinocytes,KC)分泌内皮素(endothelin,ET)的影响,初步探讨KC和ET在口腔黏膜下纤维性变(oral submucous     

槟榔提取物抑制人类口腔粘膜角朊细胞生长的实验研究

目的：建立人类口腔粘膜上皮角朊细胞体外原代培养方法：探讨口腔粘膜下纤维性变患者上皮厚度改变的机理;方法;先对人类口腔粘膜上皮角朊细胞进行分离,培养和鉴定,然后用四唑盐比色试验检测ＯＳＦ患者和正常人口腔粘膜上皮ＫＣ增殖状况,并且观察槟榔提取物对ＫＣ增殖的影响。     

槟榔碱对口腔黏膜成纤维细胞分泌整合素α2的影响

目的：通过研究槟榔碱对体外培养的人口腔黏膜成纤维细胞（FB）表达整合素α2的影响,探讨整合素α2在口腔黏膜成纤维性变（OSF）发病机制中的可能作用。方法：体外培养人正常口腔黏膜成纤维细胞（FB）,培养基中加入不同浓度（0、10、20、40、80、160μg/ml）的槟榔碱孵育,MTT法12h后检测FB的增殖水平。RT-PCR法24h后检测0、10、20、40μg/ml浓度组整合素α2mRNA的表达水平。结果：槟榔碱浓度为20μg/ml时,FB增殖活性开始下降,与对照组相比无统计学差异（p〉0.05）,40μg/ml时下降明显与对照组相比有统计学差异（p〈0.05）。正常对照组整合素α2mRNA表达量低,随槟榔碱浓度增高其表达量呈增高趋势（p〈0.05）。结论：槟榔碱具有刺激FB表达整合素α2的作用,提示FB分泌整合素α2增多,进而诱导胶原合成增多,可能是OSF发生机制之一。     

槟榔提取物抑制人类口腔黏膜成纤维细胞生长的实验研究

目的通过比较正常口腔黏膜和口腔黏膜下纤维性变(OSF)组织中成纤维细胞(FB)增殖差异、检测槟榔提取物(ANE)对成纤维细胞增殖的影响,来探讨OSF的发病机理.方法对人类口腔黏膜成纤维细胞进行分离培养,然后用四唑盐(MTT)比色试验法检测OSF患者和正常人口腔黏膜FB增殖状况,并且观察ANE对FB增殖的影响.结果表示增殖水平的OD值在OSF-FB为0.254±0.045,高于NM-FB的OD值0.236±0.012(P<0.05),ANE以浓度-效应依赖关系抑制FB增殖.结论 OSF-FB细胞增殖率较NM-FB高;ANE对口腔黏膜FB有细胞毒作用,提示槟榔及其有效成分不完全是通过直接刺激FB增殖而诱发OSF.     

槟榔提取物抑制人类口腔黏膜成纤维细胞生长的实验研究

目的通过比较正常口腔黏膜和口腔黏膜下纤维性变(OSF)组织中成纤维细胞(FB)增殖差异、检测槟榔提取物(ANE)对成纤维细胞增殖的影响,来探讨OSF的发病机理.方法对人类口腔黏膜成纤维细胞进行分离培养,然后用四唑盐(MTT)比色试验法检测OSF患者和正常人口腔黏膜FB增殖状况,并且观察ANE对FB增殖的影响.结果表示增殖水平的OD值在OSF-FB为0.254±0.045,高于NM-FB的OD值0.236±0.012(P<0.05),ANE以浓度-效应依赖关系抑制FB增殖.结论 OSF-FB细胞增殖率较NM-FB高;ANE对口腔黏膜FB有细胞毒作用,提示槟榔及其有效成分不完全是通过直接刺激FB增殖而诱发OSF.     

肿瘤坏死因子α与口腔扁平苔藓

肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)主要由单核巨噬细胞合成和分泌,并通过与其相应受体结合,参与自身免疫的炎症过程,是介导自身免疫反应的重要效应因子之一[1].口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)为一种慢性皮肤粘膜疾病,研究显示免疫反应在口腔扁平苔藓的发病中占有重要地位[2].     

槟榔碱在口腔黏膜纤维性变及癌变发病机制中的作用

口腔黏膜下纤维性变(oral submucous fibrosis,OSF)是一种慢性、隐匿性、具有癌变可能的炎性疾病.咀嚼槟榔习惯与OSF的发生密切相关,本文对槟榔碱在OSF及癌变发病机制中的作用作一综述.     

槟榔碱对口腔颊黏膜成纤维细胞和血管内皮细胞增殖活性的影响

目的：比较槟榔碱对NM—FB、OSF—FB、EC增殖活性的影响。方法：0μ／ml、30μm／ml、60μg／ml、90μg／ml、120μg／ml槟榔碱干预三组细胞48h,60μg／ml槟榔碱干预三组细胞24h、48h、72h,倒置显微镜下观察细胞形态的改变,四唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖活性的变化。结果：槟榔碱以浓度、时间-依赖关系抑制细胞增殖,相同条件下存活率EC低于NM—FB、NM—FB低于OSF—FB。结论：槟榔碱有细胞毒作用,细胞损伤有先后时序关系;推测槟榔碱并不直接通过刺激FB增殖诱发OSF,可能通过改变FB性能和EC活性促进OSF的发生。     

槟榔碱对口腔黏膜肌成纤维细胞分化的影响

目的探讨口腔黏膜下纤维性变组织中肌成纤维细胞的来源。方法通过体外口腔黏膜角质形成细胞和成纤维细胞共培养，用免疫组化、反转录聚合酶链反应等方法观察α-平滑肌肌动蛋白的表达。结果体外培养的口腔黏膜下纤维性变成纤维细胞中α-平滑肌肌动蛋白的阳性率为（85.80±3.56）％，正常口腔黏膜成纤维细胞中阳性率为（3.82±0.76）％。槟榔碱直接干预成纤维细胞后α-平滑肌肌动蛋白的表达与对照组相比差异无统计学意义（P〉0.05）；角质形成细胞与成纤维细胞共同培养组成纤维细胞中α-平滑肌肌动蛋白的表达增强；角质形成细胞经槟榔碱预处理后与成纤维细胞共同培养组α-平滑肌肌动蛋白的表达强于无干预共同培养组。结论口腔黏膜下纤维性变组织中成纤维细胞向肌成纤维细胞分化可能是槟榔成分与角质形成细胞共同作用的结果。     

口腔黏膜下纤维性变发病机制的研究进展

口腔黏膜下纤维性变 (OSF)的发病机理尚不清楚 ,近年来研究发现 :口腔黏膜角朊细胞、多种细胞因子、铜、细胞免疫等因素与OSF的发生密切相关 ,本文就这些因素在OSF发生发展过程中的可能作用作一综述。     

口腔黏膜下纤维性变癌变的回顾性研究

目的 :探讨湖南地区口腔黏膜下纤维性变 (OSF)癌变情况。方法 :对近 2 0年来就诊于湖南数家大医院 1166名OSF病例及其癌变病例进行分析。结果 :1166例OSF患者 ,有 2 0例伴有口腔鳞状细胞癌 ,癌变率为1.7% ,其中男 18例 ,女 2例 ,癌变病例主要来源于湘潭地区 ,均为长期咀嚼槟榔者 ,18例 (90 % )有 15年以上吸烟史 ,癌变部位主要位于颊部 ,患者均存在不同程度的张口受限。另外 ,还有 74例 (6.3 % )伴有口腔白斑 ,3 7例(3 .2 % )伴有口腔扁平苔藓。结论 :OSF是一种与嚼槟榔有关的癌前状态 ,可以出现癌变。     

肿瘤坏死因子-α在口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:研究肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在口腔鳞癌组织中的表达,并探讨其在口腔鳞癌生物学行为中的意义。方法:应用免疫组化SABC法检测41例口腔鳞癌组织中TNF-α的表达,并用10例正常口腔黏膜组织作为对照。结果:口腔鳞癌组织中TNF-α的表达较正常组织增加,其差异具有统计学意义。口腔鳞癌中TNF-α阳性表达主要分布在癌细胞和间质细胞的胞质中,TNF-α表达与口腔鳞癌的分化、TNM分期及淋巴结转移有关。结论:TNF-α可能参与了口腔鳞癌的发展和转移。     

口腔粘膜下纤维性变患者角朊细胞分泌细胞因子水平变化

目的：探讨口腔粘膜上皮角朊细胞（ＫＣ）和细胞因子在口腔粘上纤维性变（ＯＳＦ）发生中的作用。方法：分别从正常及ＯＳＦ组织培养出ＫＣ（ＮＭ－ＫＣ）和ＯＳＦ－ＫＣ０,用放射免疫法和酶联免疫吸附法测定培养细胞上清液中内皮素（ＥＴ）和β１转化生长因子（ＴＧＦβ１）的水平。结果：ＯＳＦ－ＫＣ分泌ＥＴ和ＴＧＦ１水平均高于ＮＭ－ＫＣ,且两者呈正相关关系。     

槟榔碱诱导口腔角质形成细胞凋亡研究

目的:了解槟榔碱(arecoline)对体外培养的人口腔黏膜角质形成细胞(keratinocyte,KC)凋亡的影响。方法:不同浓度的槟榔碱以及在不同时间处理体外培养的KC,在荧光显微镜下观察KC凋亡形态学改变并计算凋亡百分率,用比色法检测Caspase-3活性的改变。结果:1)槟榔碱能以一定时间和浓度依赖方式诱导培养的KC发生凋亡,其细胞凋亡率较正常对照组明显增高(P<0.05)。2)槟榔碱作用KC,其Caspase-3活性较正常对照组明显增高(P<0.05)。结论:槟榔碱可诱导KC凋亡,Caspase-3可能参与了这一细胞凋亡过程的调控。KC凋亡异常可能是口腔黏膜下纤维性变的重要发病机理之一。     

肿瘤坏死因子α与OLP癌变的关系

口腔扁平苔藓（OLP）是一种常见的口腔黏膜慢性炎症性疾病。其发病原因和病理机制至今尚未明确。肿瘤坏死因子α是介导自身免疫反应的重要效应因子,许多研究表明肿瘤坏死因子。在OLP的发生发展过程中起着至关重要的作用。本文从肿瘤坏死因子α与口腔扁平苔藓癌变的关系方面做一综述。     

槟榔提取液对血管内皮细胞分泌内皮素 1 的影响

目的:观察在不同浓度槟榔提取液(aqueous areca nut extract,AANE)作用下血管内皮细胞(endothelialcell,EC)分泌内皮素 1(endothelin-1,ET-1)的变化,探讨 EC 及 ET-1 在口腔黏膜下纤维性变(oral submucous fibro-sis,OSF)发生发展中的作用.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,换入含终浓度分别为0、50、100、200、400、600、800μg/ml AANE 的无血清 DMEM 培养基,48 h 后用放射免疫法检测细胞培养上清液中 ET-1 的水平.结果:100μg/ml及以上浓度的AANE作用后,EC 分泌 ET-1 的量较未加 AANE 组显著增加,并呈浓度依赖性.结论:一定浓度的AANE 能使 EC 异常分泌 ET-1,可能参与OSF病理过程的发生发展.     

核因子Kappa B与肿瘤坏死因子α在口腔扁平苔藓中的相关性

目的：研究核因子KappaB（NF—KB）和肿瘤坏死因子α（TNF—α）在口腔扁平苔藓（OLP）中的相关性,及其两种因子的表达与OLP临床特征之间的联系。方法：30例OLP患者根据其临床表现分为萎缩-糜烂型及斑纹型,采用免疫组化方法研究OLP两种临床类型NF—KBp65及TNF-α的表达,并计算阳性细胞百分率。选取10例正常组织作为对照。结果：NF—KBp65阳性表达位于OLP上皮基底层及临近细胞的胞核内,而正常组织未见胞核着色。TNF-α阳性表达位于OLP上皮基底层细胞的胞质内,正常组织中仅有散在阳性表达。NF—KBp65和TNF—α的表达在不同临床类型、年龄及病损部位中有显著性差异（P〈0．05）,但与性别无关（P〉0．05）。NF—KBp65的胞核着色与TNF-α的高表达呈正相关（r=0．676,P〈0．01）。结论：OLP中NF—KB被激活与TNF-α的高表达密切相关。在NF—KB和TNF-α之间可能存在一个正反馈调节环,这种正反馈的机制可能加重了OLP的炎性反应,同时也可能保护了上皮细胞,避免了过多的凋亡。     

槟榔碱诱导上皮细胞cyclinDl表达下调

目的：探讨槟榔碱抑制上皮细胞增殖的分子机制。方法：应用光学显微镜、RT-PCR、报告基因、Westernblot、免疫沉淀等方法，研究槟榔碱对细胞增殖的影响及分子机理。结果：槟榔碱处理上皮细胞Hacat24h后，细胞增殖抑制，cyclinDl的转录抑制、启动子活性下调、蛋白表达降低及泛素化降解上调。结论：cyclinDl转录抑制和蛋白降解是槟榔碱抑制上皮细胞增殖的重要分子机制之一。