塞来昔布对肺癌细胞的增殖抑制、环氧化酶-2表达的影响和化疗敏感性

目的：探讨环氧化酶（COX）-2抑制剂塞来昔布（celecoxib）对肺癌A549细胞的增殖抑制、COX-2表达和化疗敏感性的影响。方法：用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（MTY法）检测塞来昔布单药及联合顺铂（DDP）对COX-2高表达的人肺腺癌细胞A549的增殖抑制，流式细胞术分析塞来昔布联合DDP对细胞周期及细胞凋亡的影响,Westernblot法分析不同浓度塞来昔布干预后对A549细胞内COX-2蛋白表达的影响。结果：MTT法检测显示，塞来昔布（0-100μmol／L）对肺腺癌A549细胞的抑制作用呈时间依赖性、剂量依赖性效应。联合用药组与单药组相比差异有显著性（P〈0．001）。流式细胞术分析显示，塞来昔布12．5μmol／L与25μmol／L联合DDP0．5ms／L时，A549细胞明显阻滞于c,o-Gl期，S期细胞比例减少，联合用药组的凋亡率明显高于单药组（P〈0．001）。Westem blot法分析显示，塞来昔布浓度超过50μmol／L时，COX-2蛋白的表达受到了抑制。结论：塞来昔布的抗肿瘤作用机制涉及到COX．2依赖性途径。塞来昔布能增加DDP的化疗敏感性，塞来昔布与DDP联用对人肺腺癌A549细胞有明显协同抗肿瘤效应，该作用可能是通过增强对A549细胞的增殖抑制、诱导凋亡来实现的。     

环氧合酶-2及其抑制剂在肝纤维化中的作用及机制

目的 探讨环氧合酶-2及其选择性抑制剂塞来昔布在肝纤维化中的作用及部分机制,为肝纤维化的防治提供理论基础.方法 雄性Wistar大鼠50只,随机分为正常组(10只)、模型组(10只.每只大鼠腹腔注射0.025 mL CCL4+0.15mL植物油,每周3次)、实验组(30只,分3组即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,每组各10只.每只大鼠腹腔注射0.025 mL CCL4+0.15mL植物油,2 h后分别依不同组给予10 mg/kg、20 mg/kg和40mg/kg塞来昔布灌胃,每周3次).8周后,检测血清谷丙转氨酶(札T)、谷草转氨酶(aspartate transminase,AST).检测肝组织羟脯氨酸含量,同时通过免疫组织化学的方法测定各组大鼠α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)和环氧合酶-2(cyclooxygenasa-2,COX-2)的表达.结果 模型组大鼠血清ALT、AST和羟脯氨酸含量较对照组显著增高(P<0.05),而实验组大鼠血清ALT、AST和羟脯氨酸含量较模型组显著增高(P<0.05);正常大鼠α-sMA微弱表达,未见COX-2表达;模型组大鼠肝组织α-SMA和COX-2较正常对照组显著增高(P<0.05);使用COX-2抑制剂后,实验组大鼠α-SMA和COX-2表达水平较模型组显著增高(P<0.05).结论 环氧合酶-2的表达可能对肝纤维化存在保护作用,使用选择性COX-2抑制剂加重肝纤维化程度.     

塞来昔布对人成骨细胞增殖的影响及其作用机制

目的：观察塞来昔布对人成骨细胞增殖的影响及其作用机制。方法将人成骨细胞分为3个组：空白对照组、IL-1刺激组(阴性对照组)、塞来昔布+ IL-1刺激组(药物干预组),用 RT-PCR 法和 Western blot 法分别检测三组成骨细胞环氧化酶-2( COX-2)、膜相关前列腺素 E2合成酶1(mPGES-1) mRNA 和蛋白的表达。 MTT 法检测塞来昔布对阴性对照组人成骨细胞增殖的影响。结果 RT-PCR 法和Western blot 法实验结果显示,同空白对照组相比,阴性对照组的人成骨细胞中 COX-2、mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达均增加;同阴性对照组相比,药物干预组的 COX-2、mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达均降低。塞来昔布对 IL-1刺激的人成骨细胞的生长具有抑制作用,呈现剂量依赖性,浓度越大,抑制作用越大;并且随着作用时间的延长,细胞的抑制作用增大。结论塞来昔布可以抑制炎性状态下人成骨细胞的生长,可能是通过调控 COX-2、mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达,使其表达下调而发挥作用。     

塞来昔布联合化疗治疗晚期胃癌疗效与安全性Meta分析

目的:系统性评价塞来昔布联合化疗治疗晚期胃癌的有效性、安全性。方法:检索CNKI知网、万方、维普和Pub Med数据库,搜集塞来昔布联合化疗治疗晚期胃癌的随机对照试验(RCT),检索时限为建库至2018年12月10日。在评价纳入研究的偏倚风险后,采用Stata14.0软件进行Meta分析。结果:共纳入8个RCT,结果显示塞来昔布联合化疗组治疗有效率[RR=1.42,95%CI(1.21～1.68),P<0.001]、疾病控制率[RR=1.15,95%CI(1.04～1.27),P<0.001]、生活质量改善状况[RR=1.61,95%CI(1.32～1.95),P<0.001]均优于常规化疗组,并且可降低恶心呕吐[RR=0.81,95%CI(0.69～0.96),P=0.014]、血小板减少[RR=0.78,95%CI(0.64～0.96),P=0.017]事件的发生率,但两组在贫血、白细胞减少、腹泻、手足综合征、外周神经炎等事件发生率方面比较差异无统计学意义。结论:塞来昔布联合化疗较单纯化疗在晚期胃癌治疗方面的疗效更好,且安全性较好。     

塞来昔布对大鼠急性坏死性胰腺炎肾损伤的防护作用研究

目的研究塞来昔布对大鼠急性坏死性胰腺炎肾损伤的防护作用,初步探讨其作用机制。方法①24只Wistar大鼠随机分为假手术组（c）组,重症胰腺炎（P）组,塞来昔布千预组（T）组;②模型制备6h后采集血标本、胰腺及左肾标拳。血浆标本采用生化分析仪测定血浆淀粉酶、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）。胰腺及肾组织观察组织学改变,并用免疫组化法检测胰腺及肾脏COX-2的表达。结果①与C组相比,P组血浆淀粉酶（AMY）、尿素氮（BUN）、肌酐（Or）明显升高（P均〈0．05）;与p组相比,T组血浆AMY、BUN、Cr均有所降低（P均〈0．05）;②与C组相比,P组胰腺及肾脏病理改变明显加重;与P组相比,T组胰腺及肾脏的病理损害有所减轻（P均〈005）;⑧与c组相比,P组胰腺及肾脏中COX-2含量有明显增加;与P组相比,T组胰腺及肾脏中COX-2含量有所减少（P均〈0．05）。结论①肾脏组织中COX-2的升高是肾损害的重要原因;②塞来昔布可以有效抑制COX-2的表达,对ANP肾损害具有保护作用。     

塞来昔布对大鼠化学性乳腺癌的抑制作用及机制

目的 观察环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)选择性抑制剂塞来昔布对化学致癌剂7,12-二甲基苯蒽(7,12-dimethybenz[a]anthracene,DMBA)化学诱发的大鼠乳腺癌的抑制作用并探讨其机制.方法 将DMBA油剂灌胃复制大鼠乳腺癌模型,大鼠分为对照组(24只)和实验组(25只),观察塞来昔布对大鼠乳腺癌的抑制作用,并采用基因芯片技术了解治疗后2组肿瘤的基因表达谱差异.结果 实验组塞来昔布处理后乳腺肿瘤的数目、直径、体积分别为(2.56±1.26)个、(1.162±0.355)cm、(1.967±1.725)cm.;明显小于实验前的(3.40±1.22)个、(1.948±0.481)cm、(8.794±6.389)cm3;明显小于对照组(3.88±1.73)个、(2.231±0.736)cm、(10.268±5.447)cm3,差异有显著性意义(均P＜0.01).对照组COX一2蛋白表达为62.5%(15/24),实验组COX-2蛋白表达为36.0%(9/25),差异有显著性意义(P＜O.05).基因表达谱显示两组之间表达丰度差异2倍及以上的基因共有243条,其中表达上调2倍或以上的基因片段124条,表达下调2倍或以上的基因片段119条,发现功能不明的新基因6条,其中表达上调的4条.结论 塞来昔布能抑制DMBA诱发的大鼠乳腺癌进展,其机制和多种基因改变有关.     

环氧化酶-2抑制剂塞来昔布对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）抑制剂塞来昔布对胰腺癌荷瘤裸鼠的治疗作用。方法构建胰腺癌荷瘤裸鼠模型,将成瘤裸鼠随机分为4组,分别给予纯水（对照组）和含有不同浓度（0．05％、0．1％、0．15％）的塞来昔布饮水,观测裸鼠肿瘤生长情况并测量不同时间的体积变化,于治疗28d后处死裸鼠,测瘤体重量,应用caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,免疫组织化学法检测肿瘤增殖指数（PI）和微血管密度（MVD）。结果治疗组裸鼠肿瘤体积的变化呈浓度依赖性和时效性;治疗28d后,治疗组瘤重量均明显低于对照组[（0．96±0．09）g、（0．78±0．06）g、（0．64±0．07）gvs（1．16±0．12）g,P〈0．01）];治疗组caspase-3相对活性明显高于对照组（0．021±0．002、0．026±0．003、0．031±0．002VS0．006±0．001,P〈0．01）。0．1％组、0．15％组的PI和MVD均明显低于对照组（P〈0．05）;0．05％组的PI和MVD虽均低于对照组。但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论COX-2抑制剂塞来昔布可显著抑制荷胰腺癌裸鼠的肿瘤生长,其作用机制可能是通过提高caspase-3活性来诱导细胞凋亡,通过抑制肿瘤细胞的增殖和新生血管的形成来发挥抗肿瘤效应,在临床上具有潜在的应用价值。     

塞来昔布诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的实验研究

目的探讨环氧化酶-2特异抑制剂-塞来昔布对喉癌Hep-2细胞增殖抑制和凋亡诱导作用及可能机制。方法以不同浓度的塞来昔布处理喉癌Hep-2细胞,以四甲基偶氮唑盐（Mar）法检测对细胞增殖的影响,Hoechst33342染色荧光显微镜下观察细胞核的形态改变,以Annexin V/PI双染法检测细胞的凋亡率,Western blot检测Bcl-2、Bax及COX-2的表达,Western blot分析Caspase-3裂解激活。结果MTT结果表明塞来昔布抑制Hep-2细胞的增殖呈时间和浓度依赖;Hoechst33342荧光染色见随塞来昔布处理时间延长,细胞核逐渐出现凝集、碎裂等凋亡表现;流式细胞术检测细胞凋亡率见塞来昔布处理细胞24h,70、100μmol/L组凋亡率分男q为（28．9±2．74）％、（32．7±3．96）％;Western blot分析蛋白表达,见随药物处理浓度增加,COX-2、Bcl-2表达降低,Bax表达增加,随药物处理时间延长Caspase-3出现裂解片段。结论塞来昔布能够有效地抑制Hep-2细胞增殖和诱导Hep-2细胞凋亡。其诱导凋亡作用机制可能与Bax/Bcl-2比值升高,Caspase-3蛋白裂解激活有关。     

COX-2抑制剂塞来昔布对大鼠脊髓损伤的保护作用

目的 观察选择性环氧化酶一2抑制剂塞来昔布（celecoxib）对大鼠脊髓损伤的保护作用。方法 48只SD大鼠，随机分为单纯损伤组及治疗组。采用改良Allen’s打击法制作脊髓损伤动物模型，分别在伤后12、24、72h测定脊髓标本的丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量。用苏木精-伊红染色观察损伤脊髓组织病理变化，原位末端标记法（TUNEL）标记凋亡细胞。同时采用Tarlov评分和斜板实验观察脊髓神经功能恢复情况，比较各组之间的差异。结果 治疗组较单纯损伤组神经功能明显改善（P〈0．05）。治疗组各时间点MDA含量较单纯损伤组明显降低（P〈0．05），SOD含量明显升高（P〈0．05），病理形态改变较轻且凋亡细胞少（P〈0．05）。结论 COX-2抑制剂塞来昔布可减少神经细胞凋亡，对继发性脊髓损伤起到保护作用。     

塞来昔布对喉癌Hep-2细胞COX-2和Caspase-3表达的影响

目的:探讨塞来昔布对喉癌细胞株Hep-2生长抑制及对环氧化酶-2(COX-2)和Caspase-3变化的影响。方法:将不同浓度塞来昔布作用于体外培养的人喉癌细胞株Hep-2,MTT法计算细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测COX-2表达,分光光度法检测Caspase-3活性。结果:塞来昔布呈剂量依赖性显著抑制Hep-2细胞生长,阻滞细胞G0/G1期转化,且可明显降低COX-2蛋白水平,增加Caspase-3活性。结论:塞来昔布能抑制喉癌细胞的生长,其机制可能与下调COX-2表达、增强Caspase-3活性有关。     

HDLF方案联合腹腔灌注化疗治疗晚期胃癌的疗效

目的:探讨羟基喜树碱(HCPT)、顺铂(DDP)、亚叶酸钙(CF)与氟尿嘧啶(5-Fu)静脉化疗联合DDP和5-FU腹腔灌注化疗治疗晚期胃癌的临床疗效和毒性反应。方法:采用生理盐水1 000mL+DDP 60mg+5-Fu 1.0g腹腔灌注化疗,联合HCPT 10mg,d1～5,CF 0.1g和5-Fu 0.5g静脉化疗治疗41例晚期胃癌患者。结果:41例患者总有效率(CR+PR)为58.5%。不良反应主要表现为消化道反应和骨髓抑制,且以1、2级为主。结论:HDLF方案联合腹腔灌注化疗治疗晚期胃癌的疗效较好,不良反应轻,安全有效,患者的化疗成功率高且生存质量改善,值得临床进一步研究。     

染料木素诱导人胃癌BGC-823细胞凋亡及其分子机制的研究

目的探讨染料木素(genistein)体外抑制人胃癌BGC-823细胞生长及诱导其凋亡的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测染料木素对人胃癌BGC-823细胞的增殖抑制效应;DAPI荧光染色观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测染料木素作用24h后BGC-823细胞的周期分布和凋亡率;RT-PCR方法检测环氧合酶-2(COX-2)在 mRNA水平的表达;进一步采用Western blotting法检测COX-2在蛋白质水平的表达。结果染料木素对BGC-823细胞具有增殖抑制效应,并有时间及浓度依赖性。染料木素作用24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为(81.04±1.03)、(31.85±2.26)、(20.73±2.11)μg/mL。10~80μg/mL染料木素作用24h后,BGC-823细胞出现核碎裂,呈现典型的凋亡特征,细胞被阻滞于G2/M期,随药物质量浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加,细胞内COX-2表达在 mRNA水平和蛋白质水平均下调。结论染料木素对人BGC-823细胞有较强的抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与抑制COX-2表达有关。     

奈达铂联合紫杉醇新辅助化疗方案在局部晚期宫颈癌患者中的应用效果

目的 探讨奈达铂联合紫杉醇新辅助化疗方案在局部晚期宫颈癌患者中的应用效果。方法 选取2010年9月至2013年3月徐州医学院附属医院收治的局部晚期宫颈癌患者60例,随机分成奈达铂组及对照组,每组30例。奈达铂组采用奈达铂联合紫杉醇新辅助化疗方案,对照组采用顺铂联合紫杉醇新辅助化疗方案,对比两组患者的疗效及不良反应。结果 奈达铂组与对照组患者短期总有效率分别为76.7%、80.0%,两组比较差异无统计学意义（χ²=0.098,P=0.754）。与化疗前相比,两组患者化疗后肿瘤直径较化疗前缩小[（5.3±0.9）vs（3.2±0.6）,（5.2±0.8）vs（3.3±0.7）];差异有统计学意义（P<0.05）。与对照组相比,奈达铂组患者治疗后Ⅰ~Ⅱ级恶心呕吐（36.7% vs 70.0%）、贫血（16.7% vs 40.0%）、肾功能损害（10.0% vs 36.7%）发生率较低,Ⅰ~Ⅱ级血小板降低（56.7% vs 30%）发生率较高,差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 奈达铂联合紫杉醇新辅助化疗方案治疗局部晚期宫颈癌疗效与顺铂类似,但不良反应少。     

血管内皮生长因子受体-1和 COX-2在胃癌中的表达及临床意义

目的研究血管内皮生长因子受体-1(Flt-1)和环氧合酶-2(COX-2)在胃癌中的表达及其临床意义。方法选择80例手术切除的胃癌标本为观察组,30例胃癌旁、40例慢性非萎缩性胃炎组织为对照组,应用免疫组织化学方法检测组织中Flt-1及COX-2的蛋白表达。结果Flt-1及COX-2在胃癌中的表达率均为52.5%,在癌旁及对照组的阳性率分别为13.3%、0%、7.5%、0%,差异均有统计学意义(P0.01),二者的表达与胃癌的TNM分期及浸润呈正相关,它们的阳性表达强度与肿瘤淋巴及血道转移呈正相关(P0.05),与肿瘤大小、分化程度无关(P0.05)。Flt-1、COX-2在胃癌组织中表达呈正相关(γ=0.608,P=0.000)。结论Flt-1、COX-2参与胃癌的发生、发展,二者在胃癌的发生、浸润转移中可能存在相互协同作用,联合检测Flt-1、COX-2可作为胃癌浸润、转移的重要判定指标。     

乳腺癌术后化疗联合槐耳颗粒的疗效及对部分标志因子的影响

【摘要】 目的 采用不同方案治疗乳腺癌术后患者,观察槐耳颗粒在乳腺癌术后化疗中的临床疗效及对环氧化酶2（COX 2）、胰腺癌相关抗原（CA199）、癌胚抗原（CEA）和血管内皮生长因子（VEGF）的影响。方法 选取2013年12月~2016年12月收治的96例乳腺癌根治术术后患者为研究对象,随机分为对照组及实验组,每组48例。对照组在接受常规治疗的基础上给予FEC方（氟尿嘧啶、表柔比星、环磷酰胺）治疗,实验组在对照组治的基础上加用槐耳颗粒治疗。比较两组临床疗效,观察不良反应发生率,观察血液COX 2、CA199、CEA和VEGF水平变化。结果 治疗后,实验组有效率（6250%）显著高于对照组,差异有统计学意义（P＜005）。两组不良反应发生率比较：实验组骨髓抑制（6042%）、胃肠道反应（1250%）及肝功能异常（208%）均低于对照组,差异有统计学意义（P＜005）。两组血清COX 2、CA199、CEA和VEGF水平分析比较,治疗后,均有所下调,且实验组下调水平显著高于对照组,差异均有统计学意义（P＜005）。结论 槐耳颗粒联合化疗治疗乳腺癌术后患者的临床疗效肯定,能够降低血清COX 2、CA199、CEA和VEGF水平,降低化疗期间不良反应发生率。     

幽门螺杆菌、环氧化酶-2及微量元素与胃黏膜疾病的相关性研究

目的：研究胃黏膜病变组织中环氧化酶-2（COX-2）蛋白、微量元素与幽门螺杆菌（Hp）的表达,探讨其与胃黏膜病变之间的内在关系。方法：选择60例胃癌（GCa组）、80例萎缩性胃炎[CAG组,包括40例异型增生（Dys组）及40例肠上皮化生（IM组）]、40例浅表性胃炎（CSG组）,N时期在我院行胃镜检查胃黏膜无明显病理学改变的志愿者40例作为对照组,各组采用快速尿素酶试验和组织学碱性品红染色法检测胃黏膜Hp感染状况,应用免疫组化法检测胃黏膜上皮细胞COX-2表达状况,并行血清微量元素检测。结果：GCa组Zn含量低于对照组、CSG组、IM组,Dys组Zn含量低于对照组、CSG组;GCa组Mn含量低于对照组、CSG组,Dys组Mn含量低于对照组、CSG组;GCa组Fe含量高于对照组、CSG组,Dys组Fe含量高于对照组、CSG组（P〈0．05）。对照组、CSG组、IM组、Dys组和GCa组Hp感染率阳性率分别为7．5％、32．5％、72．5％、65．0％、60．0％,COX-2表达阳性率分别为2．5%、7．5％、47．5％、52．5％、70．0％。结论：Zn、Mn降低和Fe升高可能为胃癌发生的癌前因素,其可诱发Hp的感染和COx-2的高表达而发生胃癌。COX-2蛋白高水平的表达与Hp感染有一定关系,联合测定Hp感染、胃黏膜COX-2蛋白表达及血清中微量元素可提高胃癌的诊断率,为研究胃黏膜癌变的发展提供一定的理论依据。     

复治的晚期胃癌患者应用氟特嗪胶囊的临床观察

目的 以替加氟+顺铂为对照组,观察氟特嗪胶囊(FTQ)+顺铂治疗晚期胃癌的安全性和有效性.方法 采用多中心、随机、单盲对照方法,试验组为氟特嗪联合顺铂治疗组,对照组为替加氟联合顺铂,共有111例既往曾化疗过的晚期胃癌患者进入随机临床研究,其中102例患者可评价疗效.结果 氟特嗪胶囊组和替加氟组的客观有效率分别为:28.3%(15/53)、4.1%(2/49)、临床好转率分别为50.9%(27/53)、24.5%(12/49),氟特嗪胶囊组均明显高于替加氟组.氟特嗪胶囊组的血液学毒性、消化道反应与替加氟组基本相同.结论 "氟特嗪胶囊+顺铂"的联合方案是治疗晚期胃癌有效且安全的方案.     

放化疗联合治疗复发食管癌的疗效及毒副反应

目的研究以顺铂/奈达铂为基础同步化疗方案治疗放疗后复发食管癌(Ⅲ～Ⅳ期)患者的近期疗效、生存时间及毒副反应。方法选取2010年6月～2015年6月本院收治的160例放疗后复查食管癌(Ⅲ～Ⅳ期)患者为研究对象,随机分为观察组(n=80)和对照组(n=80),两组患者均给予调强放疗(IMRT),化疗方案:对照组给予顺铂联合多西他赛、观察组给予洛铂联合多西他赛。所有患者随访3年,收集近期疗效、生存时间及毒副反应数据并进行比较。结果观察组患者总有效率为82.50%,高于对照组57.50%(P0.05);观察组患者的在1年、2年、3年的生存率分别为:66.25%、43.75%、27.50%,高于对照组的38.75%、28.75%、11.25%(P0.05);观察组患者的再次复发率及远处转移率分别为15.00%、3.75%,低于对照组32.50%、22.50%(P0.05);观察组患者的骨髓抑制、消化道反应、放射性肺炎及放射性食管炎的发生率均低于对照组。结论在放疗后复发Ⅲ～Ⅳ期食管癌患者中,应用奈达铂联合多西他赛化疗方案能够提高患者的治疗总有效率,延长生存时间,减少再次复发及远处转移率,各类不良反应发生率较低。     

COX-2在乳腺癌组织中的超微结构定位及其意义

目的：观察COX-2蛋白在乳腺癌组织中的超微结构定位及其意义。方法：采用胶体金标记免疫电镜方法检测22例乳腺癌组织标本,观察COX-2蛋白在乳腺癌组织中的定位。结果：胶体金标记免疫电镜显示,59.1%的乳腺癌组织中存在黑色、圆形、集中的胶体金颗粒。结论：COX-2蛋白超微结构定位于乳腺癌细胞的内质网与核膜上,可能与乳腺癌形成过程中蛋白质的合成和转运有关。