N-乙酰半胱氨酸对内质网应激介导的HepG2细胞凋亡的作用

目的 了解N-乙酰半胱氨酸(NAC)对内质网氧化应激介导的肝细胞凋亡的阻抑作用,探讨其治疗肝细胞损伤的作用机制.方法 用过氧化氢(H2O2)诱导HepG2细胞,建立内质网氧化应激凋亡模型,用NAC进行干预.通过四甲基偶氮唑盐、DNA梯度分析,Western blot、流式细胞仪检测细胞凋亡率及活性氧(ROS)的产生等方法,了解NAC对H2O2诱导HepG2细胞的凋亡率、凋亡信号蛋白的表达以及ROS产生的影响.结果 用不同浓度H2O2(0、1、3,5 mmol/L)诱导HepG2细胞6 h后,发现随着H2O2浓度增加,细胞活力下降,凋亡率增加,分别为0.7%±0.5%、26.4%±1.8%、29.7%±1.2%、51.2%±9.4%;细胞凋亡信号蛋白表达增加,ROS产生增多,分别为14.0%±0.5%、95.2%±0.1%、97.5%±0.25%、98.3%±0.2%;在3 mmol/L时出现典型内质网氧化应激凋亡形态学改变.用NAC(10、20 mmol/L)干预后发现,NAC可明显提高细胞活力、细胞凋亡率由29.7%±1.2%降至23.3%±4.7%和14.3%±1.2%,细胞凋亡过程中凋亡信号蛋白的表达减少、细胞内ROS的产生率由97.5%±0.2%降至52.2%±0.8%和51.2%±2.9%.结论 NAC能对氧自由基反应有直接抑制作用,阻断内质网氧化应激介导的肝细胞凋亡,减轻肝细胞损伤.     

骨髓增生异常综合征患者骨髓凋亡细胞类型及TRAIL表达水平研究

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓细胞凋亡累及的细胞类型,以及其与肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达水平的关系。方法用流式细胞术检测骨髓有核细胞总凋亡率、CD3+、CD3+4细胞凋亡率和TRAIL表达水平,运用CellQuest及ModFit软件对所测得结果进行数据分析。结果MDS患者骨髓有核细胞总凋亡率为(17.39±10.17)%,CD+3、CD3+4细胞凋亡率分别为(20.41±11.61)%、(21.32±12.17)%,TRAIL表达水平为(7.55±3.10)%,均显著高于正常对照组[(5.88±1.38)%、(5.47±1.65)%、(4.92±2.11)%、(1.26±0.46%)],P<0.05。早期MDS有核细胞总凋亡率为(21.95±9.44)%、TRAIL表达水平为(9.00±2.47)%,均高于进展期[(8.26±2.27)%、(4.65±2.04)%],P<0.05。骨髓有核细胞总凋亡率与骨髓原始细胞数呈负相关(r=-0.65,P<0.05),与TRAIL表达水平呈正相关(r=0.85,P<0.05)。结论MDS存在过度凋亡,凋亡累及早期造血细胞和淋巴细胞;TRAIL可能是引起凋亡增加的原因之一。     

乙酰半胱氨酸对小鼠肺成纤维细胞系3T3增殖及胶原合成的影响

目的 研究乙酰半胱氨酸(NAC)对小鼠肺成纤维细胞3T3增殖、凋亡和胶原合成的影响.方法 培养小鼠肺成纤维细胞3T3,不同浓度NAC处理后,MTT检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞周期,RT-PCR检测Ⅰ型前胶原mRNA表达的变化.结果 ①5、10、20、40 mmol/L NAC对3T3细胞生长均有明显抑制作用,且呈剂量依赖性;②5、10、20、40 mmol/L NAC作用24 h后,细胞凋亡率分别为(27.64±17.22)%、(33.73±14.82)%、(42.30±9.81)%和(69.27±11.50)%,均高于对照组(3.48±1.13)%(P<0.05或P<0.01);③5、10、20、40 mmol/L NAC能够引起G0/G1期细胞比例明显升高,S期比例明显降低(P值均<0.01);④5、10、20、40mmol/L NAC处理组3T3细胞Ⅰ型前胶原mRNA表达均低于对照组(P<0.05或P<0.01).结论 NAC可直接抑制小鼠肺成纤维细胞增殖,诱导其发生凋亡,并降低其胶原合成.     

抗凋亡治疗骨髓增生异常综合征

目的:探讨抗凋亡治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效及疗效和骨髓细胞凋亡、TNF-α的关系。方法:采用形态学方法检测骨髓细胞凋亡;ELISA方法检测骨髓单个核细胞(BMMC)培养后上清液中TNF-α浓度。用己酮可可碱、环丙沙星和地塞米松(PCD)联合治疗MDS。结果:抗凋亡治疗MDS有效率48.15%(13/27),1例难治性贫血(RA)完全缓解(3.7%),3例RA(11.1%)血液学三系明显进步。3例PCD联合治疗持续10~54个月的RA,疗效维持10~36个月。抗凋亡治疗有效的患者治疗前TNF-α浓度和骨髓细胞凋亡指数较无效患者高,但这种差异无统计学意义(P>0.05),有效的患者治疗后的TNF-α和骨髓凋亡细胞指数较治疗前下降。结论:抗凋亡治疗适用于BMMC上清液TNF-α浓度和骨髓凋亡细胞指数较高的MDS患者,尤其适用于低危MDS患者。     

体外脂肪变L02细胞Notch家族和脂质代谢变化研究*

目的 探讨脂肪变肝细胞Notch基因水平变化及其对脂质代谢的影响。方法 使用棕榈酸(PA)处理人L02细胞,构建体外脂肪变性细胞模型,采用不同浓度(0 mM、0.1 mM、0.25 mM和0.5mM)PA处理,并在0.25mM PA处理细胞,给予不同浓度(0μM、1μM、2μM、5μM和10μM)的γ分泌酶抑制剂(DAPT)干预L02细胞24 h,分别以0mM PA为对照组和0μM DAPT为模型组,采用实时定量PCR法检测Notch家族中Notch1、-2、-3及其下游Hes-1和Hey-1mRNA水平,采用比色法测定细胞谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)水平。结果 在0.25 mM和0.5 mM PA处理组,细胞Notch3 mRNA水平分别为(0.6±0.2)和(0.4±0.1),显著低于对照组【(1.0±0.1),P<0.01】,Hes-1 mRNA水平分别为(1.7±0.2)和(1.5±0.1),显著高于对照组【(1.0±0.1),P<0.01】;培养上清AST水平分别为(6.7±2.6)U/L和(12.4±1.6)U/L,显著高于对照组【(2.4±0.1)U/L,P<0.05】,ALT水平分别为(5.7±0.8)U/L和(10.3±0.7)U/L,显著高于对照组【(2.2±0.3)U/L,P<0.01】;细胞TG水平分别为(0.4±0.04)mmol/g和(0.4±0.04)mmol/g,显著高于对照组【(0.2±0.02)mmol/g,P<0.01】;在0.5mM PA处理组,细胞Notch1 mRNA、TC和FFA水平分别为(1.9±0.1)、(1.2±0.4)mmol/g和(0.07±0.004)mmol/g,显著高于对照组【分别为(1.0±0.1)、(0.2±0.02)mmol/g和(0.02±0.001)mmol/g,P<0.01】;采用不同浓度DAPT干预0.25mM PA处理细胞24 h,其中在2μM DAPT处理组,细胞Hes-1 mRNA、Hey-1 mRNA、培养上清AST和细胞TG水平分别为(0.5±0.1)、(0.6±0.3)、(6.4±2.9)U/L和(0.03±0.01)mmol/g,在5μM DAPT处理组分别为(0.4±0.2)、(0.6±0.1)、(7.3±1.3)U/L和(0.04±0.01)mmol/g,在10μM DAPT处理组分别为(0.3±0.2)、(0.4±0.1)、(4.9±0.7)U/L和(0.02±0.01)mmol/g,均显著低于模型组【分别为(1.0±0.1)、(1.0±0.04)、(12.2±0.3)U/L和(0.07±0.01)mmol/g,P<0.01】;在10μM DAPT干预细胞,TC水平为(0.2±0.03)mmol/g,显著高于模型组【(0.1±0.02)mmol/g,P<0.01】。结论 通过抑制Notch信号能有效降低体外培养的脂肪变细胞TG和培养上清AST水平,提示Notch信号通路可能参与了肝细胞脂质代谢过程,值得进一步的研究。     

5'-核苷酸酶在白血病中的分布特点

目的:研究5'-核苷酸酶(5'-NT)在不同类型白血病、骨髓增生异常综合征(MDS)、非白血病患者和正常人中的分布特点。方法:分离100例不同白血病、3例MDS患者、9例非白血病患者和6例正常人骨髓有核细胞,以5'-单磷酸胞嘧啶核苷(5'-CMP)为底物进行细胞组织化学反应,电镜半定量分析5'-NT阳性细胞率和阳性指数。结果:5'-NT阳性反应产物主要位于有核细胞胞膜。急性髓系白血病(AML)M1、M2a、t(8;21)、t(15;17)各组细胞阳性率和阳性指数依次降低,阳性率组间差异有统计学意义(P0.01),阳性指数差异无统计学意义;M1、M2a、t(8;21)、t(15;17)和M5患者5'-NT阳性细胞率和阳性指数均显著高于MDS、非白血病患者和正常人,差异有统计学意义(P0.01);急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者5'-NT阳性细胞率和阳性指数高于慢性淋巴细胞白血病(CLL),差异有统计学意义(P0.05);CLL、MDS、非白血病患者和正常人的5'-NT阳性细胞率和阳性指数低,组间及两两比较差异无统计学意义。结论:不同白血病患者胞膜5'-NT表达与白血病细胞分化程度负相关。     

N-乙酰半胱氨酸通过AMPK/SIRT1途径抑制缺氧诱导的大鼠脑血管内皮细胞损伤

目的研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对缺氧诱导脑血管内皮细胞损伤的调节作用及分子机制。方法选择SD大鼠分离培养脑血管内皮细胞,分为常氧组、缺氧组、0. 5 NAC组(缺氧+0. 5 mol/L NAC)、1. 0 NAC组(缺氧+1. 0 mol/L NAC)、NAC+8-bAMP组(缺氧+1. 0 mol/L NAC+1. 0 mol/L 8-bAMP)。采用MTS法检测细胞增殖活力,采用TUNEL染色检测凋亡率,采用试剂盒检测氧化应激指标,采用Western blot检测凋亡基因、AMPK/SIRT1通路分子的表达量。结果缺氧组细胞OD490值、T-AOC含量及B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、p-AMP活化蛋白激酶(pAMPK)、去乙酰化酶Sirtuin1(SIRT1)表达量均明显低于常氧组;缺氧组细胞凋亡率、细胞中活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)含量及bcl-2相关X蛋白(bax)、细胞色素C(Cyt-C)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)的表达量均明显高于常氧组。0. 5 NAC组、1. 0 NAC组细胞OD490值、T-AOC量及Bcl-2、pAMPK、SIRT1表达量均明显高于缺氧组; 0. 5 NAC组、1. 0 NAC组细胞凋亡率、ROS、MDA、8-OHDG含量及Caspase-3、Cyt-C、Bax的表达量均明显低于缺氧组。NAC+8-bAMP组细胞OD490值、T-AOC及Bcl-2、p-AMPK、SIRT1表达量均明显低于1. 0 NAC组; NAC+8-bAMP组凋亡率、ROS、MDA、8-OHDG含量及Caspase-3、Cyt-C、Bax的表达量均明显高于1. 0 NAC组。结论 NAC能够通过激活AMPK/SIRT1通路来减轻氧化应激及线粒体凋亡介导的脑血管内皮细胞损伤。     

N-乙酰半胱氨酸对毒胡萝卜素诱导的HepG2细胞内质网氧化应激凋亡的影响

目的 了解N-乙酰半胱氨酸(NAC)对内质网氧化应激介导的肝细胞凋亡的阻抑作用.探讨其治疗肝细胞损伤的作用机制.方法 用毒胡萝卜素(TC)诱导HepG2细胞,建立内质网应激凋亡模型,用NAC进行干预.噻唑蓝(MTT)、流式细胞仪、DNA梯形电泳检测凋亡率及活性氧(ROS),Western印迹检测葡萄糖调节蛋白(GRP)78、Caspase-12酶原及ADP聚合酶(PARP)表达.多样本间均数采用方差分析.结果 用2μmol/L TG诱导HepG2细胞0、24、36和48 h,随诱导时间延长,细胞活力逐渐下降;GRP 78、Caspase-12酶原及PARP表达增高;凋亡率逐渐增加.分别是0.7%±0.5%、27.6%±6.3%、29.7%±3.03%和47.9%±3.5%(P<0.05);ROS产生逐渐增加,分别是14.0%±0.5%、36.1%±300%、38.2%±6.0%和48.3%±12.4%(P<0.05);诱导36、48 h后细胞出现典型DNA梯形条带.10 mmol/L、20 mmol/L NAC分别与2/μmol/L TG共同温育HepG2细胞后发现,NAC可明显提高细胞活力;抑制GRP 78、Caspase-12酶原及PARP表达,细胞凋亡率分别降至14.0%±1.3%和11.0%±0.3%;细胞内ROS的产生减至34.7%±0.8%与31.5%±2.9%.结论 TG作为一种内质网特异的钙离子ATP酶抑制剂,能触发HepG2细胞内质网氧化应激凋亡;而NAC作为巯基合成的前体.直接抑制氧自由基反应,阻断内质网氧化应激介导的细胞凋亡,减轻肝细胞损伤,达到临床治疗肝功能衰竭的作用.     

二氮嗪联合环孢菌素A减轻突触核蛋白片段对PC12细胞凋亡的作用机制

目的探讨线粒体ATP敏感钾离子通道开放剂二氮嗪、线粒体膜渗透性转换孔抑制剂环孢菌素A,以及两者协同对α-突触核蛋白片段的非淀粉样成分(NAC)致PC12多巴胺能细胞凋亡的分子机制。方法采用25μmol/L的NAC对PC12细胞进行诱导建立帕金森病细胞模型,分为对照组、NAC处理组(NAC组)、NAC+二氮嗪干预组(干预1组)、NAC+环孢菌素A干预组(干预2组)、NAC+二氮嗪+环孢菌素A干预组(干预3组)。二氮嗪、环孢菌素A及两者协同对其干预48h,用流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞色素C、Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax比值情况。结果与对照组比较,NAC组细胞凋亡率、细胞色素C明显升高,Bcl-2、Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.01),Bax未见明显变化(P>0.05);与NAC组比较,干预1组、干预2组、干预3组细胞凋亡率、细胞色素C明显降低,Bcl-2、Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.01),Bax未见明显变化(P>0.05)。结论二氮嗪、环孢菌素A及两者协同作用通过抑制线粒体凋亡通路相关蛋白的表达来拮抗NAC的细胞凋亡作用。     

骨髓增生异常综合征骨髓细胞凋亡和TNF-α关系的研究

目的：探讨骨髓增生异常综合征(MDS)骨髓细胞调亡特征以及与肿瘤坏死因子α(TNF—α)的关系。方法：分别采用形态学和dUTP末端缺口标记(TUNEL)方法检测骨髓细胞调亡；采用ELISA方法检测骨髓单个核细胞培养后上清液中TNF—α的浓度，并与缺铁性贫血(IDA)患者进行比较。结果：形态学方法检测骨髓单个核细胞培养后细胞调亡指数，MDS明显高于IDA(P＜o．01)，MDS各分型(RA／RAS、RAEB／RAEB—t)之间细胞调亡指数差异无显著性意义(P＞0．05)。同一个体TUNEL法测得的骨髓细胞调亡指数均高于形态学观测的结果。TUNEL检测MDS细胞调亡指数RA／RAS＞RAEB／RAEB—t，但差异无显著性意义(P＞0．05)。MDS骨髓单个核细胞上清中TNF-α浓度高于IDA组，差异有显著性意义(P＜0．05)；MDS各分型之间RA／RAS显著高于RAEB／RAEB—t(P＜0．05)。结论：MDS骨髓细胞确实凋亡过度，早期MDS重于晚期MDS，并与TNF—α呈线性关系；采用TUNEL法检测凋亡细胞较形态学方法敏感。     

骨髓增生异常综合征患者骨髓不同细胞亚群凋亡的研究

目的:观察骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓单个核细胞(BMNC)及不同细胞亚群凋亡情况。方法:应用流式细胞仪、CD45单抗、Annexin-V/PI检测15例MDS患者骨髓细胞凋亡情况。结果:MDS患者BMNC凋亡(5.57％)明显高于对照组(3.19％)(P<0.05),淋巴细胞(R_1)凋亡(20.82％)明显高于对照组(9.98％)(P<0.05),且各细胞亚群之间比较,淋巴细胞(R_1)凋亡明显高于原始/粒细胞群(R_2)(10.22％)和红细胞群(R_3)(6.66％),差异有显著性意义(P<0.05)。红系凋亡并不增加,与原始/粒细胞群比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:MDS患者骨髓淋巴细胞凋亡增加,且可能为CD4~+T细胞(Th),从而使T细胞亚群Th/Ts比例失调,造成免疫调节异常,提示这种异常在MDS发病过程中起重要作用。     

骨骼肌诱导型一氧化氮合成酶基因表达和细胞凋亡在心力衰竭进展中的作用

目的探讨慢性充血性心力衰竭(CHF)患者骨骼肌中诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)基因表达与反映CHF进展指标及细胞凋亡的关系,进一步了解可能影响CHF进展的因素,为临床CHF的治疗提供理论依据.方法用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)以及脱氧核糖核酸转化酶分析方法分别测定21例CHF患者(扩张型心肌病14例,缺血性心肌病7例),其中NYHA分级Ⅱ级14例,Ⅲ级7例及8例健康人骨骼肌标本中iNOS基因表达和细胞凋亡,用心肺功能测定仪对症状限制性最大氧耗(VO2max)进行连续测定.结果健康人骨骼肌中无i-NOS基因表达及细胞凋亡,而21例CHF患者中有18例(85.7%)显示iNOS表达.NYHAⅡ级者iNOS基因表达较健康者有增高趋势,但差异无显著性意义(P＞0.05),而NYHAⅢ级者iNOS基因表达显著高于NYHAⅡ级(P＜0.01).iNOS基因表达与VO2max呈显著负相关(r=-0.6,P＜0.01).iNOS基因高表达(iNOS/GAPDH率≥0.3)患者骨骼肌细胞凋亡率高于iNOS基因中度表达(iNOS/GAPDH率＜0.3)患者的骨骼肌细胞凋亡率,P＜0.01.结论iNOS基因表达与NYHA分级和VO2max显著相关,iNOS基因表达可反映CHF疾病进展,iNOS在CHF患者骨骼肌细胞凋亡中起一定作用,抑制iNOS基因表达的治疗,可能对改善患者症状、提高生活质量有一定益处.     

嗜酸粒细胞在体外对美洲钩虫感染性幼虫的附着

作者等对嗜酸粒细胞附着钩蚴的能力进行了观察,并评价了特异性抗体及补体对细胞附着的影响作用。实验采用正常人血清(NHS)、钩虫患者血清(HNS)、第三期蜕鞘幼虫及97～99％嗜酸粒细胞群。培养基采用RPMI 1640。用0.15mM CaGl_2和0.5mM MgGl_2的巴比妥缓冲盐液(VB~(2+)),或20mM EGTA(VB~(2+)-EGTA),或20mM EDFA(VB~(2+)-EDFA)致     

外源性NO诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用机制

目的:探讨外源性一氧化氮(nitric oxide,NO)诱导中分化胃癌细胞株(SGC-7901)凋亡的潜在机制.方法:采用不同浓度的外源性NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)处理细胞,M T T法检测细胞的存活率;荧光显微镜检测细胞的凋亡形态及凋亡率.依据有无活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine,NAC)和SNP作用细胞,实验分4组:对照组、NAC组、SNP组、NAC+SNP组.采用荧光化学发光仪检测胞内ROS水平;流式细胞仪检测细胞的凋亡;Western blot检测铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-superoxide dismutase,Cu/ZnS O D)蛋白的表达.所有数据采用S P S S17.0分析.结果:(1)SNP可诱导胃癌细胞凋亡,且有浓度及时间依赖性;(2)NAC组和对照组在细胞凋亡率及胞内ROS水平上差异无统计学意义(P0.05);(3)较对照组,单独SNP可使细胞凋亡率及胞内ROS水平明显升高(P0.05);而经NAC干预后,SNP引起的细胞凋亡率和胞内ROS水平均下降(P0.05),但仍高于对照组;(4)SNP可引起细胞Cu/Zn-SOD蛋白表达的降低.结论:外源性NO可通过抑制胃癌细胞Cu/ZnSOD蛋白的表达而上调其ROS水平,该功能可能参与其诱导的胃癌细胞凋亡途径.     

顺铂对结肠癌细胞株HCT-116凋亡及存活素表达的影响

目的 探讨结肠癌细胞株HCT-116对化疗药物顺铂不敏感的原因与机制.方法　观察不同浓度顺铂(0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 μg/ml) 对HCT-116细胞凋亡及低浓度顺铂对抗凋亡基因存活素(survivin)mRNA及蛋白表达的影响,用流式细胞仪检测凋亡率;荧光定量PCR检测survivin mRNA的表达;Western印迹法检测survivin蛋白的表达.结果 高浓度 (5.0、10 μg/ml)顺铂对HCT-116细胞有较强促进凋亡作用,而低浓度 (0.1、0.5、1.0 μg/ml)顺铂干预24 h后,促进细胞凋亡的作用不明显;HCT-116细胞在1.0 μg/ml顺铂作用下, survivin mRNA及蛋白表达在24 h均有明显升高.结论 顺铂可诱导HCT-116细胞的凋亡,但该细胞对低浓度顺铂不敏感.survivin表达增高可能是HCT-116细胞对顺铂细胞毒性药物作用不敏感的原因之一.     

系统性红斑狼疮患者外周血TB淋巴细胞Fas FasL表达及与凋亡的关系研究

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T、B淋巴细胞Fas、FasL表达及与凋亡的关系.方法采用流式细胞术(FCM)检测了30例SLE活动期患者、30例SLE非活动期患者和30名正常人外周血T、B淋巴细胞的凋亡率及Fas、FasL表达率.结果T、B淋巴细胞的Fas表达率依次为:活动期组＞非活动期组＞正常对照组(P＜0.01);FasL的表达率除B淋巴细胞在SLE活动期显著高于正常对照组外(P＜0.01),其余各组间差异无统计学意义;细胞的凋亡率在活动期显著高于非活动期(P＜0.01),而非活动期与正常对照组差异无统计学意义(P＞0.05):SLE的活动性与T或B细胞的Fas、FasL表达率间无相关关系,而与T或B细胞的凋亡率呈正相关(P＜0.01);无论是T或B细胞,Fas、FasL的表达率与凋亡率间无相关性.结论SLE患者体内外周血淋巴细胞的凋亡受到多种因素影响,但最终仍表现为凋亡率的异常增高,特别是活动期SLE,推测外周血淋巴细胞凋亡率的增高在SLE发病机制中起着重要作用.     

补肾活血通络方治疗老年慢性再生障碍性贫血34例临床研究

目的观察补肾活血通络方治疗老年慢性再生障碍性贫血(CAA)的临床疗效,探讨其作用机制。方法将67例老年CAA患者随机分为治疗组(34例)和对照组(33例)。治疗组用补肾活血通络方加常规西药治疗,对照组单用常规西药治疗。并分别于治疗前后采用酶联免疫吸附双抗体夹心(ELISA)法检测骨髓细胞凋亡状况。结果治疗组与对照组的基本治愈率、缓解率、总有效率分别为41.18%、23.52%、85.29%和21.21%、18.19%、60.61%。两组疗效比较差异有显著性(P<0.01)。治疗前两组骨髓细胞凋亡指数较健康对照组明显增高(P<0.01),治疗后治疗组骨髓细胞凋亡指数较治疗前明显减低(P<0.01),与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论补肾活血通络方治疗老年CAA疗效可靠、不良反应少。其作用机制可能是通过阻抑老年CAA患者骨髓造血细胞的过度凋亡,从而实现骨髓造血功能恢复重建。     

老年骨髓增生异常综合征患者的临床特点和预后分析

目的 探讨老年骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic syndrome,MDS)患者的临床特点、临床转归及影响其预后的相关因素,评估国际预后积分系统(IPSS)在老年MDS预后中应用的意义.方法 选取2000年1月～2006年12月老年MDS患者(≥60岁)病例31例,因病采用不同治疗方案并追踪其临床病情变化情况.同期选取50例非老年性MDS患者(＜60岁)作为对照.所有生存率采用寿命表法,所有生存率函数曲线均采用Kaplan-Meier法分析.结果 31例老年MDS患者中位发病年龄为65岁.初诊时48.39%的患者有全血细胞减少,35.48%的患者合并感染.按WHO分型难治性白细胞减少伴多系增生异常(RCMD)和伴原始细胞增多的难治性蛋白-Ⅱ型(RAEB-Ⅱ)比例最高,共占84.62%.按1976年法、美、英三国制定的白血病分类法(FAB分型)RAEB患者比例最高,占61.29%.骨髓细胞形态学提示各系均有不同程度病态造血,以二系病态造血最多见(54.84%).19例骨髓活检患者中57.89%出现病态造血,47.37%出现幼稚前体细胞异常定位(ALIP)现象.13例患者进行细胞遗传学检查,染色体异常率为38.46%.截止随访结束,死亡26例(83.87%),中位生存期12.448个月,61.54%患者死于感染.老年组总存活期(overall survival,OS)显著低于非老年组患者(P＜0.000 1).IPSS不同危险组别的老年组(P＝0.004 5)和非老年组(P＜0.000 1)的总存活期均有显著差异.对各项临床指标的单因素分析结果表明,IPSS染色体分组(P＝0.002 4)和血小板计数(P＝0.041)是影响老年MDS预后的重要因素.不同治疗方法对老年MDS患者总存活期未见有明显区别(P＝0.912).结论 老年MDS患者以预后相对较差亚型常见,感染是其初诊及死亡的常见原因.相比非老年性患者,老年性MDS患者有显著较差的预后,IPSS及其染色体分组仍是判断老年MDS预后的重要指标.     

恶性髓系血液病患者血管内皮生长因子表达的检测及分析

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)在急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)患者中血管生成的作用。方法2002-06～2004-01南华大学第一附属医院用酶联免疫吸附双抗体夹心(ELISA)法检测初治20例AML及24例MDS患者骨髓单个核细胞培养上清VEGF的表达。结果AML患者骨髓细胞VEGF(412.30ng/L)均高于对照组(128.14ng/L),化疗后完全缓解组骨髓细胞VEGF明显下降(P<0.05),化疗后未缓解组的VEGF与治疗前比较无显著下降(P>0.05)。MDS高危型(RAEB或RAEBt)骨髓细胞VEGF与低危型(RA或RAS)及对照组相比明显升高(P<0.05)。其中RAEBt与AML患者相比差异无显著性(P>0.05)。结论AML及高危型MDS患者骨髓中存在血管新生,且VEGF在AML及MDS发病中起着重要作用,VEGF的表达与MDS病程进展有关。     

中药芪芍五味合剂对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡和坏死的影响

取240只4周龄Balb/c雄性小鼠,随机等分为6组(每组40只),即正常对照组(A组)、中药对照组(B组)、病毒对照组(C组)、中药治疗组(D组)、维生素C治疗组(E组)、病毒唑治疗组(F组).A、B两组每只小鼠均腹腔接种0.1ml不含病毒的Eagle's液,C～F组每只小鼠服腔接种0.1ml 107.5TCID/ml的柯萨奇B3(CVB3)病毒液.根据分组分别给予不同的药物治疗.结果病毒性心肌炎时心肌细胞的凋亡率和坏死率均显著增加.心肌细胞凋亡高峰在CVB感染后7～10天,而心肌坏死高峰出现在CVB3感染后14天,并且与组织形态学观察一致.应用中药黄芪、赤芍治疗后,心肌细胞凋亡率和坏死率均显著降低(P＜0.05),维生素C和病毒唑均可降低心肌细胞坏死率,但对心肌细胞凋亡影响不大.CVB感染3～7天内,各感染组心肌细胞凋亡率和坏死率均与心肌内病毒滴度呈正相关(r=0.76、P＜0.01,r=0.54、P＜0.05);而感染10～30天,凋亡率及坏死率与病毒含量无相关性.各感染组心肌细胞凋亡率与坏死率均与心肌病理积分呈正相关(r=0.55、P＜0.05,r=0.76、P＜0.01).中药黄芪、赤芍、五味子可明显减轻病毒性心肌炎小鼠的病理损害程度,显著降低病毒性心肌炎心肌细胞凋亡率和坏死率,对心肌细胞有保护作用,其效果超过维生素C、病毒唑.