忍冬植株不同器官中活性成分与生境土壤关系研究

目的探讨生境土壤对忍冬不同器官活性成分含量的影响。方法测定不同产地不同品种忍冬不同器官中绿原酸、木犀草苷、总黄酮、总酚酸含量及土壤养分、无机元素含量,采用SPSS19.0软件对数据进行相关性分析。结果道地产区山东平邑样品的活性成分含量总体水平较高,仅从活性成分含量考虑,PY-HBRD-1可作为平邑地区的适宜品种。土壤指标与忍冬各器官活性成分相关性分析表明,监控土壤中钾、锰等元素可对药材质量进行控制。结论本研究结果可为种植地区忍冬品种的选择提供指导,并为道地产区的研究提供资料。     

不同产地丹参的无机元素含量及其生长土壤的理化性质

目的 :为道地丹参提供土壤环境因子的依据。方法 :应用实地考察和室内化学分析研究丹参生长土壤的理化性质和药材的无机元素含量。所得数据用SPSS 10.0软件进行分析比较。结果 :主产区的丹参对铜和锌元素的吸收具有富集作用 ;在丹参生长土壤的主成分分析中 ,主成分不明显 ,说明丹参对土壤生境适应性强。结论 :土壤生态环境不是形成道地丹参的主导因子。     

穿龙薯蓣药材和土壤无机元素的相关性分析

目的:探讨穿龙薯蓣药材与土壤中无机元素的含量特征,并分析二者的相关性。方法:采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)对不同产地穿龙薯蓣原药材与生境土壤中13种无机元素的含量进行了测定,并利用SPSS软件进行了相关分析。结果:穿龙薯蓣原药材与土壤中无机元素含量无明显的相关性。穿龙薯蓣对钾的富集作用较明显,其次为镍、汞、镁、锌、铜、镉,其中黑龙江佳木斯地区穿龙薯蓣对各种无机元素的富集作用均较强。药材中13种元素间有多重相关。结论:穿龙薯蓣药材主要通过主动吸收调控无机元素的含量;穿龙薯蓣对无机元素的吸收积累具有一定的协同吸收作用。     

ICP-MS测定布渣叶无机元素的主成分分析和聚类分析

目的:研究布渣叶中无机元素的含量及分布特征。方法:采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法,对10批布渣叶样品中28个无机元素进行定量分析,并采用SPSS主成分分析和聚类分析对测定结果进行评价。结果:主成分分析提取了6个主因子,得出布渣叶的特征元素为56Fe、57Fe、Ti、Be、Ba、Ga;聚类分析将10批布渣叶样品聚为3大类,无机元素在不同布渣叶样品中存在差异。结论:该方法灵敏度高、准确性好,适用于布渣叶中无机元素的含量测定;主成分分析和聚类分析法是分析布渣叶中无机元素含量的有效方法。     

基于ICP-MS对不同产地藠头无机元素的主成分分析和聚类分析

目的:研究藠头中无机元素的含量分布特征,为中药材薤白的品质评价和质量控制提供实验依据。方法:采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法,对10个藠头样品中14个无机元素的含量进行定量分析,建立其无机元素指纹谱,并采用SPSS聚类分析和主成分分析对其特征元素进行评价。结果:主成分分析选出4个主因子,得出藠头的特征元素为Mn,Cu,Zn,Fe,Ni,Se,Cr;聚类分析将10个藠头样品聚为2大类,赤、白藠头在品质上存在一定的差异性,不同采集地的藠头体内无机元素的含量与其生长环境存在着一定的关系。结论:定量分析法可用于藠头无机元素的含量测定;主成分分析法和聚类分析法是藠头无机元素含量分析的有效方法。     

ICP-MS测定鸡蛋花无机元素的主成分分析和聚类分析

目的:建立同时测定鸡蛋花中无机元素含量的方法,并分析无机元素的分布特征。方法:采用电感耦合等离子体质谱法对10批不同产地鸡蛋花样品中28个无机元素进行定量测定,并应用主成分分析和聚类分析法对鸡蛋花中无机元素进行统计。结果:主成分分析提取了7个主成分,得出鸡蛋花的特征元素为56Fe,57Fe,Ti,V,Cr,Na;聚类分析将10批鸡蛋花样品聚为3大类,无机元素在不同产地的鸡蛋花样品中存在差异。结论:该方法灵敏度高、准确性好,适用于鸡蛋花中无机元素的含量测定;主成分分析和聚类分析法是分析鸡蛋花中无机元素含量的有效方法。     

土壤因子对麦冬活性成分影响研究

目的:研究土壤因子对麦冬活性成分的影响。方法:分别测定7个地区麦冬样品中多糖、总黄酮、总皂苷、水溶性浸出物及无机元素的含量,并分析相应土壤的理化性质和无机元素含量,相关数据通过通径分析和灰色关联度分析研究土壤环境对麦冬活性成分的影响。结果与结论:麦冬主要通过主动吸收调控药材中无机元素的含量;对麦冬药材活性成分影响较大的因子是土壤酶活性,其次为速效钾、酸碱性和有机质,且钾、铁、锰、硼、钡、锌等对麦冬活性成分的影响大于其他无机元素。     

ICP-MS测定东南亚进口燕窝无机元素的主成分分析和聚类分析

目的:研究东南亚进口燕窝中无机元素的含量分布特征。方法:采用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法,对25批燕窝样品中的20个无机元素进行定量分析,并采用SPSS主成分分析和聚类分析对测定结果进行评价。结果:主成分分析提取了6个主因子,得出燕窝的特征元素为Na、K、Ca、Mn、57Fe、Co、Zn、Se、Rb;聚类分析将25批燕窝样品聚为2大类,无机元素在不同燕窝样品中存在差异,但在白、红、黄燕窝之间的差异并不明显。结论:该方法灵敏度高、准确性好,适用于燕窝中无机元素的含量测定;主成分分析和聚类分析法是燕窝中无机元素含量分析的有效方法。     

ICP-MS测定茯苓与猪苓中无机元素的含量

目的:测定5个不同产地的茯苓与猪苓中无机元素的含量,探讨无机元素含量的地域差异性及药材中无机元素间的相关性,并探讨利尿作用与元素含量的相关性。方法:采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)对茯苓与猪苓中的无机元素进行全定量分析。应用MPP(12.6)软件对数据进行主成分分析(PCA)及聚类分析,SPSS 17.0软件对元素含量的相关性进行分析。结果:含量测定结果表明茯苓与猪苓中各无机元素的含量随原子序数增大呈现相似的规律性分布;主产地的茯苓与猪苓中无机元素含量高于其他产地。主成分分析和聚类分析表明,2种药材间无机元素的含量差异大,云南、广西与贵州茯苓间无机元素的含量相近,湖南与安徽茯苓间无机元素含量相近;山西、陕西与安徽猪苓中无机元素的含量相近,辽宁与吉林猪苓中无机元素的含量相近。相关性结果表明茯苓和猪苓中有55对元素具有相关性(P0.05),有121对元素具有显著相关性(P0.01);常量元素Mg与Na,K显著相关,绝大部分的微量元素之间具有显著相关性;常量元素与微量元素之间也具有显著的相关性。结论:该方法适合茯苓、猪苓药材中多种元素含量的同时测定;药材的种属亲缘关系及药材的资源品质与地域性密切相关;药材对无机元素的吸收具有选择性,其吸收比例可能与药材的药理活性及强弱有关。     

土壤中无机元素对茅苍术道地性的影响

目的 :了解土壤中无机元素对茅苍术道地性的影响。方法 :对不同产地茅苍术根茎及生长地土壤中15种无机元素含量进行测定 ,所得数据用SPSS10.0软件进行分析比较。结果 :发现道地产区茅苍术药材中镍的平均含量高于其他茅苍术的 3倍以上 ,其对钙的吸收有富集作用 ;相关系数分析表明茅苍术及土壤中无机元素元素的含量不相关。结论 :茅苍术主要是通过主动吸收调控药材中无机元素的含量 ;同时发现茅苍术对铁和铬、铁和汞、汞和铬、砷和铅及钴和锶的吸收积累有很好的协同作用。     

不同产地、不同海拔地区的甘松地上部分无机元素的多维统计分析

目的:比较不同产地甘松药材地上部分的无机元素含量差异,分析其无机元素分布特征,为评价市场上流通的甘松全草统是否科学、合理提供试验依据。方法:采用湿法消解-ICP-OES法同时测定不同产地甘松药材地上部分的无机元素含量,通过相关性分析、主成分分析、聚类分析、偏最小二乘判别分析、正交偏最小二乘判别分析方法对测定结果进行分析。结果:元素间具有显著的相关性,多维统计分析确定甘松地上部分特征元素为Pb,Se,As,Si,Mo,Co,Ni,Cd,Cr,Tl,Na,Sn;对地上部分样品能够较好地聚类;海拔在3 400~3 500 m时,甘松地上部分各无机元素含量大都达到峰值(对植物生长有益元素)。结论:基于甘松地上部分无机元素的角度考虑,3 400~3 500 m为甘松最适宜生长海拔高度,同时土壤作为关键因素;对于甘松药材入药部位甘松根及根茎、甘松全草及甘松地上部分这三者是否可以互为替代、甘松资源的合理分配提供理论支撑和参考。     

忍冬枝枯病对忍冬药材产量和质量的影响

目的:探究忍冬枝枯病对金银花产量、金银花和忍冬藤有效成分含量的影响,为忍冬枝枯病的防治和药材质量评价提供科学依据。方法:在金银花头茬花期比较各病级忍冬植株平均单株结蕾量,并称量花蕾的鲜重、干重;按照2015年版《中国药典》测定各病级忍冬植株金银花样品中绿原酸和木犀草苷的含量以及忍冬藤样品中绿原酸和马钱苷的含量。结果:忍冬0~7级植株平均单株结蕾量、鲜重、干重差异极显著(P0.01),其中健株结蕾量最多,7级植株结蕾量最少。病级越高,植株结蕾量越少,产量越低。各病级忍冬植株金银花样品绿原酸和木犀草苷以及忍冬藤样品绿原酸和马钱苷的含量均达到2015年版《中国药典》标准。金银花中绿原酸的质量分数为2.31%~3.46%,其中1级病树金银花中绿原酸的含量最高,健株(0级)金银花中绿原酸的含量最低。各发病等级植株金银花中绿原酸含量均高于健株,差异极显著(P0.01)。金银花中木犀草苷的质量分数为0.050%~0.065%,健株金银花中木犀草苷的含量最低。健株和其他各发病等级植株金银花中木犀草苷含量差异极显著(P0.01)。忍冬藤中绿原酸的质量分数为0.43%~0.54%,健康植株忍冬藤中绿原酸的含量高于其他各发病等级植株,差异极显著(P0.01)。忍冬藤中马钱苷的质量分数为0.82%~1.58%,各发病等级植株忍冬藤中马钱苷含量均低于健康植株,差异极显著(P0.01)。结论:忍冬枝枯病的发生,有利于金银花中绿原酸和木犀草苷的积累,但会显著降低忍冬藤中绿原酸和马钱苷的含量以及金银花的产量。     

干旱胁迫下忍冬全基因组DNA甲基化和转录组分析

目的 分析干旱胁迫下忍冬Lonicera japonica全基因组DNA甲基化水平变化、模式以及与基因表达的关系,为进一步探究忍冬响应干旱胁迫的分子机制奠定基础。方法 采用全基因组重亚硫酸盐甲基化测序法（whole-genome bisulfite sequencing,WGBS）,测定干旱胁迫下忍冬全基因组DNA甲基化水平,并联合转录组测序结果对差异甲基化基因相关的差异表达基因进行分析。结果 干旱胁迫下忍冬整体甲基化水平普遍上升;其中CG类型甲基化水平明显高于CHG或CHH甲基化类型;对不同干旱胁迫处理下的忍冬进行差异甲基化区域（differentially methylated regions,DMR）分析,发现1935、2158和1750个差异甲基化相关基因,基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG）富集分析表明,显著富集的通路主要包括亚油酸代谢,氮代谢通路和次生代谢物的生物合成通路等。通过转录组测序技术,发现差异甲基化基因相关的差异表达基因主要富集于次生代谢产物合成相关通路,同时筛选出4个在干旱胁迫下基因表达量上升显著的忍冬MYB（Lonicera japonica MYB,LjMYB）LjMYB转录因子。结论 干旱胁迫下忍冬甲基化水平上升,推测DNA甲基化调控基因表达是干旱影响金银花有效成分生物合成的作用机制之一。     

金银花压制饮片和传统饮片的比较

目的:对金银花压制饮片和传统饮片进行比较研究.方法:从外观和TLC鉴别对金银花压制饮片和传统饮片进行对比;以绿原酸含量和干膏率为指标,对金银花压制饮片和传统饮片的煎煮溶出情况及二者在复方银翘散中煎煮溶出情况进行对比;对压制饮片和传统饮片的绿原酸溶出曲线进行对比,并进行f2相似因子比较.结果:金银花压制饮片外观形态良好;压制饮片和传统饮片TLC斑点清晰、分离度好;在单味饮片和复方银翘散的煎煮中,压制饮片干膏率和绿原酸提取量均略高于普通饮片;f2相似因子比较表明压制饮片和传统饮片溶出行为相似.结论:金银花经压制后未改变药材质量,不影响金银花绿原酸成分的煎煮溶出,可保证汤剂煎煮质量.     

山东产忍冬不同药用部位挥发油成分分析及抗氧化活性

目的:对山东产忍冬花、茎、叶不同药用部位进行挥发性成分分析及抗氧化活性研究。方法:分别提取忍冬花、茎、叶的挥发油,利用GC-MS进行成分分析和比较;用70%乙醇分别提取忍冬花、茎、叶,提取液回收溶剂后分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,利用DPPH比色法对各萃取物、萃取后的水相部位及挥发油分别进行体外抗氧化能力比较。结果:从忍冬花、茎、叶中共分离鉴定了49种成分,三者共有成分11种,分别占各自挥发油含量的60.66%,77.98%和80.38%,含量最高的均为棕榈酸。忍冬花、茎、叶的不同提取物对DPPH自由基均有较好的清除作用,且清除能力随着浓度的增加而增加,但各样品间存在一定差异。乙酸乙酯萃取物清除能力最强,依次是正丁醇萃取物、水相、挥发油、石油醚萃取物;花的清除能力最强,茎和叶次之。结论:忍冬花、茎、叶中挥发油成分具有较高相似性;三者挥发油及不同极性提取物均具有较好的抗氧化能力。     

忍冬VIGS基因沉默体系构建

目的 以忍冬Lonicera japonica八氢番茄红素脱氢酶（phytoene desaturase,PDS）基因为标记基因,利用ZMBJ-CMV载体建立基于病毒诱导的忍冬基因沉默体系。方法 以忍冬为材料,通过选取同源性较高的片段设计PDS基因的特异性引物,克隆出片段长度为135 bp的序列作为目的基因片段,经双酶切后与黄瓜花叶病毒载体连接构建VIGS重组载体,转化根癌农杆菌后,侵染忍冬幼苗。此外,还对农杆菌吸光度（A）值和侵染方法对PDS基因沉默效率的影响进行了比较。结果 被侵染植株叶片PDS基因表达水平显著降低,叶绿素和类胡萝卜素含量显著下降,叶片出现白化表型。结论 建立了以ZMBJ-CMV载体诱导的忍冬基因沉默体系,农杆菌A值为0.8、注射后再进行真空浸润,能够提高忍冬目标基因的沉默效率,为开展忍冬关键基因的功能研究提供了技术支撑。     

忍冬叶总黄酮的测定及其体外抗菌活性

目的:研究忍冬叶总黄酮的分离工艺及其对9种常见病原菌的体外抗菌活性。方法:以河南封丘忍冬叶为研究对象,以总黄酮为主要考察指标,通过大孔树脂柱色谱分离得到忍冬叶总黄酮,并对其进行最小抑菌浓度(MIC),最小杀菌浓度(MBC),抑菌圈活性等体外抗菌评价。结果:建立了忍冬叶总黄酮简便、有效的分离工艺,证实了忍冬叶总黄酮对9种供试病原菌具有较好的广谱抑菌性(MIC为1.95~62.5 g·L~(-1),MBC几乎均为125 g·L~(-1))。此外,当忍冬叶总黄酮部位同时含有较多绿原酸(4.2%)时,不仅得率高(10.5%),活性也更强。结论:忍冬叶总黄酮具有较好的广谱抗菌性,可以将其开发抗畜禽病原菌药物或者饲料添加剂,这也为忍冬叶资源的合理开发利用奠定了坚实的基础。     

不同生长期甘松中无机元素含量分析

目的:测定不同生长期甘松地上和地下部分22种无机元素的含量,调查该药材的重金属含量。方法:样品经微波消解后分别采用原子吸收分光光度法测定Pb和Cd含量,原子荧光光谱法测定Hg和As含量。利用电感耦合等离子体原子发射光谱法测定Cu,P,S,K,Na,Ca,Mg,Fe,Mn等其他元素含量,等离子体射频发射功率1.20kW,等离子气流量15.0L·min-1,雾化器流量0.75L·min-1,辅助气流量1.50L·min-1,观察高度10mm,一次读数时间3.0s,稳定时间15s。结果:甘松不同部位中Pb,Cd,Hg,As,Cu含量均符合2010年版《中国药典》规定;K,Mg,P,Ca,S,Ba含量较丰富,Al,Fe,Na次之,微量元素Li,Mn,Sr,Ti,V,Zn含量均较低,所有样品中均未检测出Mo。结论:甘松不同部位中22种无机元素含量与药材生长期、生长环境均有一定联系,为该药材的规范化栽培和综合开发利用提供参考。     

何首乌不同产地及商品药材中无机元素的ICP-MS分析

目的建立何首乌药材Polygoni Multiflori Radix中无机元素的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析方法,并对不同产地何首乌及商品药材中无机元素进行分析比较。方法样品经微波消解后,采用ICP-MS法测定无机元素的量,并用SPSS 16.0对数据进行相关性分析、主成分分析。结果检测了何首乌药材中24种元素,元素之间有一定的相关性,K、Fe、Mg、Ca、P的量较高,重金属及有害元素的量应引起关注;主成分分析选出6个主因子,得出Fe、Si、Ca、Al、K、Be、Sb、Mn、Zn、Ba是何首乌的特征无机元素。结论为何首乌药材的质量控制及安全性评价提供依据。     

硫熏和烘干金银花中绿原酸、木犀草苷含量对比分析

目的:比较不同产地硫熏和烘干金银花中绿原酸、木犀草苷含量变化,考察硫熏工艺对金银花内在化学成分的影响。方法:采用HPLC测定不同产地、不同炮制方法金银花中绿原酸及木犀草苷含量。结果:硫熏后金银花中绿原酸含量明显升高,而木犀草苷含量变化不大。结论:硫熏对金银花中绿原酸含量影响较大,但对木犀草苷含量基本无影响,不同产地两种成分含量相差较大。