祛瘀生新法对脑梗死大鼠治疗性血管新生作用及机制研究

目的从促血管新生角度研究祛瘀生新中药对脑梗死大鼠缺血半暗带的作用及其作用机理。方法将大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组及祛瘀生新汤低剂量组、中剂量组和高剂量组,以线栓法复制脑梗死大鼠模型;各治疗组给予祛瘀生新汤灌胃,其余各组给予等量生理盐水灌胃。给药7d后进行检查。结果祛瘀生新汤各组VEGFmRNA表达水平、VEGF蛋白细胞的表达以及微血管密度均有所增强,特别是祛瘀生新汤中剂量组和大剂量组增强尤其明显。结论祛瘀生新中药可以增强线栓法脑梗死大鼠脑组织CD31阳性微血管密度,有一定的促血管新生作用,其作用可能是通过上调促血管生成因子的基因和蛋白表达来实现的。     

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑内血管内皮生长因子及内皮抑素的影响

目的:观察电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠梗死灶周围血管内皮生长因子(VEGF)及内皮抑素(ES)的影响.方法:40只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、模型组、电针组各10只,采用局灶性脑缺血再灌注模型,免疫组织化学(SABC)法观察电针对VEGF及ES的表达的影响.结果:电针组VEGF表达明显高于模型组(P＜0.01);ES的表达明显低于模型组(P＜0.01).结论:电针可增强脑缺血大鼠脑内VEGF的表达,降低ES的表达,可能为针刺促进脑梗塞大鼠缺血区血管新生的机制之一.     

冠心合剂对心梗后大鼠VEGF表达的影响

目的:观察冠心合剂对急性心肌梗死(AMI)大鼠血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth fac-tor,VEGF)表达的影响。方法:结扎冠状动脉左前降支法建立大鼠急性心肌梗死模型,观察冠心合剂对心梗后大鼠血清VEGF浓度、心肌VEGF蛋白表达及梗死面积的影响。结果:冠心合剂治疗组及阳性对照组血清VEGF浓度及心肌VEGF蛋白的表达增加,高于模型组和假手术组(P<0.05);随冠心合剂剂量的增加,梗死面积逐渐减小;冠心合剂大剂量组疗效与西药对照组无明显差异(P>0.05)。结论:冠心合剂可能通过促进心肌梗死大鼠心肌VEGF蛋白表达、分泌,从而促进梗死心肌血管新生。     

脑泰方提取物对局灶性脑缺血大鼠血管内皮生长因子表达的影响

目的:探讨脑泰方提取物对大鼠局灶性脑缺血后血管内皮生长因子(VEGF)及VEGF mRNA的影响。方法:30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、脑复康组、脑泰方低、中、高剂量组。通过月桂酸钠损伤血管内皮细胞来复制局灶性脑缺血模型,采用免疫组化和RT-PCR法检测各组大鼠脑内VEGF阳性细胞数和VEGF mRNA的表达,同时评价大鼠神经功能。结果:脑缺血后,药物组神经功能症状得到改善,尤以脑泰方中剂量组变化最显著(P<0.01);假手术组大鼠脑内有少量VEGF阳性细胞,脑缺血后VEGF阳性细胞表达增加,与模型组比较,脑泰方中剂量组VEGF阳性细胞数明显增多(P<0.01),而且VEGF mRNA的表达也显著加强(P<0.01)。结论:脑泰方提取物增强大鼠局灶性脑缺血后VEGF及VEGF mRNA的表达,可能是其抗脑缺血的作用机制之一。     

和血生络方对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子和血管生成素的影响

目的:研究和血生络方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其对血管新生的作用。方法:将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、和血生络方组,后两组制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/IR)模型,和血生络方组给予和血生络方灌胃,各组分别于1d、3d、7d、14d、21d时免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(Ang-1)的表达。结果:模型组各时间点VEGF的表达较正常组增加(P<0.05),在7d达到高峰,和血生络方组比模型组增加更明显,差异有显著性(P<0.05~0.01)。模型组各时间点Ang-1的表达较正常组增加(P<0.05),14d达到高峰,和血生络方组比模型组增加更明显,差异有显著性(P<0.05~0.01)。结论:和血生络方可能通过增强VEGF、Ang-1的表达来促进大鼠脑缺血再灌注后的血管新生。     

加味四物汤对荷骨肉瘤小鼠肿瘤VEGF及受体表达的影响

目的:探讨加味四物汤对对荷骨肉瘤小鼠肿瘤VEGF及其受体表达的影响.方法:建立KHOS成骨肉瘤原位移植模型,通过加味四物汤灌胃干预动物模型,采用RT-PCR方法定量检测移植瘤血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体KDR和Flt-1的表达.结果:加味四物汤高剂量组有明显抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用(P<0.05);中、低剂量组抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用不明显(P>0.05);中药高剂量组抑制肿瘤组织VEGF、Flt-1、KDR表达的作用优于中、低剂量组(P<0.05).结论:加味四物汤通过抑制VEGF、KDR、Flt-1的表达控制肿瘤新生血管的生长而达到阻止恶性骨肿瘤体内生长、转移的目的,但与药物浓度相关.     

蒙古族药阿给炭对胃溃疡大鼠溃疡组织VEGF, bFGF及其受体mRNA表达的影响

目的:研究蒙古族药阿给炭对应激型胃溃疡模型大鼠溃疡组织血管内皮生长因子(VEGF),碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及其受体mRNA表达的变化,探讨阿给炭促进胃溃疡愈合的分子机制。方法:84只SD大鼠分为7组,即正常组,模型组,阳性药云南白药组(0.18 g·kg-1),阿给生药组(1.35 g·kg-1),阿给炭药低、中、高剂量组(0.9,1.35,1.8 g·kg-1),除正常组外,其余各组采用水浸束缚应激方法复制急性胃溃疡大鼠模型。连续给药1周后,常规处死动物,剪取胃部溃疡组织,采用Western blot及RT-PCR技术检测VEGF及VEGF受体(VEGFR),b FGF及b FGF受体(b FGFR)mRNA及蛋白表达水平。结果:与正常组比较,急性应激性溃疡导致大鼠溃疡组织b FGF(P0.01)和b FGFR(P0.05)蛋白表达水平显著降低。与模型组比较阿给炭低剂量组明显升高了大鼠溃疡组织VEGF mRNA(P0.05)以及VEGF和VEGFR蛋白表达(P0.05),但无剂量相关性;其他各组与模型组无差异;中剂量、高剂量阿给炭和云南白药显著升高b FGF的蛋白表达(P0.01),高剂量阿给炭同时也升高了b FGF和b FGFR mRNA(P0.01)和b FGFR蛋白表达(P0.05)。结论:阿给炭促进胃溃疡愈合的分子机制可能与上调VEGF及其受体蛋白,b FGF及其受体蛋白有关,对VEGF,b FGF和b FGFR的调控是在转录水平,对VEGFR的调控是在后转录水平。     

丹参提取物对大鼠心肌梗塞后心肌组织VEGF表达的影响

目的探讨丹参提取物对大鼠心肌梗塞后心肌组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响及其可能作用机制。方法建立大鼠心梗模型后,随机分为模型组、丹参提取物3个不同剂量组,每组8只大鼠,另设假手术组8只。术后48 h,丹参提取物组分别给予低、中、高10,20,40 mg·(kg·d)-1灌胃;模型组和假手术组给予生理盐水20 ml·(kg·d)-1灌胃。8周后处死大鼠,取大鼠心肌组织,反转录PCR(RT-PCR)法测定VEGF mRNA的表达。应用免疫组化和免疫印迹法分析左心室心肌组织VEGF蛋白的表达情况。结果 RT-PCR结果表明,和模型组相比,丹参提取物各剂量组VEGF mRNA的表达均明显升高(P0.01)。免疫组化和免疫印迹分析结果表明,和模型组相比,丹参提取物各剂量组心肌组织胞浆中VEGF蛋白的表达均显著升高(P0.01)。结论丹参提取物可以通过上调VEGF的表达而促大鼠心肌梗塞后心肌组织的血管新生。     

穿山龙总皂苷对CIA大鼠滑膜血管内皮生长因子及其受体Flk-1的影响

目的:研究穿山龙总皂苷(TSRDN)对CIA大鼠滑膜血管新生的影响及其作用机制。方法:建立CIA大鼠模型,造模后给予TSRDN、雷公藤和薯蓣皂苷元灌胃,并采用免疫组化检测滑膜组织MVD、VEGF及Flk-1表达。结果:CIA模型组大鼠滑膜新生血管增多,MVD、VEGF及Flk-1表达升高(P<0.01),给药后大鼠滑膜新生血管数量减少,MVD、VEGF和Flk-1表达降低(P<0.01)。结论:穿山龙总皂苷可能通过抑制VEGF和Flk-1的表达来发挥抗血管新生作用。     

丹龙醒脑方对脑缺血再灌注损伤大鼠海马区VEGF及其受体Flk-1的影响

目的:研究丹龙醒脑方对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑海马区血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体血管内皮生长因子受体(Fetal liver kinase-1,Flk-1)的影响。方法:用改良Longa栓线法复制大脑中动脉闭塞模型,2h后开放血流再灌注。大鼠造模成功后被分为6组;丹龙醒脑方14.76g/kg、7.38g/kg、3.69g/kg剂量组,尼莫地平10.8mg/kg组,模型组,假手术组,灌胃7天后处死大鼠取脑,采用免疫组化方法测定海马区内皮细胞计数及微血管密度、VEGF、Flk-1的表达。结果:模型组与假手术组相比,大鼠脑海马区内皮细胞计数及微血管密度、VEGF、Flk-1蛋白表达均增强;丹龙醒脑方14.76g/kg、7.38g/kg、3.69g/kg剂量组与模型组相比表达明显增强。结论:丹龙醒脑方可以促进脑缺血区VEGF及其受体Flk-1的表达,其抗脑缺血再灌注损伤的机制可能与增强血管新生因子的表达有关。     

治疗性血管生成与中医药

近年来,中医药促性血管生成的报道逐渐增多。现将中医药治疗性血管生成研究作一个综述。中医药与治疗性血管生成　目前,治疗性血管生成的西医治疗方法有3种[1 ] :1应用多种血管生成诱导剂如局部使用血管内皮生长因子( VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子( b FGF)等,此方法存在着一定的副作用(如b FGF产生的急性低血压,VEGF引起的血管瘤的)。2血管生成相关的基因治疗方法此方法存在着如何选择有效载体,基因转移途径及安全性问题。3骨髓移植包括外源性骨髓细胞移植,内源性骨髓细胞动员两种方法,目前这方面的研究尚处于起步阶段。与此同时,中…     

祛淤生新法对药物流产后大鼠子宫蜕膜超微结构的影响

目的 探讨祛淤生新法的代表方剂生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜超微结构的影响.方法 40只受孕大鼠随机分为正常孕鼠组、模型组、益母草组、生化止血饮组,电镜下观察药物流产后大鼠子宫蜕膜超微结构.结果 正常孕鼠组均可见体积较大的蜕膜细胞;模型组均可见蜕膜细胞体积减小,细胞核曲度增加;益母草组部分蜕膜细胞开始凋亡,核皱缩;生化止血饮组蜕膜细胞已经凋亡被吞噬,未见蜕膜细胞.结论 生化止血饮可明显促进药流后大鼠子宫蜕膜细胞调亡脱落并加速子宫内膜修复.     

"祛瘀生新"内涵及机理探讨

“祛瘀生新”是临床应用广泛的中医治疗法则,历史源远流长。它通过祛除瘀血,疏通经络;调畅气机、流通气血;营养组织、促进新生这3个方面达到祛瘀血生新血、新络及新物的目的。同时,祛瘀是生新的前提,生新是祛瘀的基础,它们是相互促进、紧密联系的两个方面。     

“祛瘀生新”内涵及机理探讨

“祛瘀生新”是临床应用广泛的中医治疗法则，历史源远流长。它通过祛除瘀血，疏通经络；调畅气机、流通气血；营养组织、促进新生这3个方面达到祛瘀血生新血、新络及新物的目的。同时，祛瘀是生新的前提，生新是祛瘀的基础，它们是相互促进、紧密联系的两个方面。     

祛瘀生新法对药流后大鼠子宫蜕膜孕激素受体PRmRNA及凋亡基因Fas/FaslmRNA表达的影响

目的:探讨祛瘀生新法的代表方剂生化止血饮对药物流产后大鼠子宫蜕膜PRmRNA及Fas/FaslmRNA表达的影响。方法:40只受孕大鼠随机分为正常孕鼠组、模型组、益母草组、生化止血饮组,采用原位杂交方法检测大鼠子宫蜕膜PRmRNA及Fas/FaslmRNA表达。结果:生化止血饮可降低PRmRNA表达水平,增强Fas/FaslmRNA表达水平,生化止血饮组与模型组及益母草组之间具有显著性差异。结论:祛瘀生新法的代表方剂生化止血饮可明显促进药流后大鼠子宫蜕膜细胞调亡,加快蜕膜脱落,从而达到止血的目的。     

麝香通心滴丸对缺血性心力衰竭心肌纤维化和血管再生的影响机制

目的 评价麝香通心滴丸治疗缺血性心力衰竭（IHF）气虚血瘀证的临床疗效及对心肌纤维化和血管再生的影响机制。方法 将140例患者按1∶1随机数字表法分为对照组和观察组各70例，对照组脱落、失访3例，剔除1例，完成66例；观察组脱落、失访4例，剔除1例，完成65例。两组患者参照指南给予综合治疗措施。对照组口服麝香通心滴丸模拟药，2丸/次，3次/d。观察组口服麝香通心滴丸，2丸/次，3次/d。均连续治疗24周。进行治疗前后超声心动图检查，测量左心室射血分数（LVEF），心输出量（CO），左室舒张末期内径（LVEDd），左室后壁厚度（LVPW），左室质量指数（LVMI）和左室重构指数（LVRI）；进行治疗前后6 min步行试验（6 MWT），Lee氏心衰评分、气虚血瘀证评分和明尼苏达心力衰竭生活质量调查表（MLHFQ）评分；检测治疗前后N末端B型利钠肽原（NT-proBNP），转化生长因子-β₁（TGF-β₁），可溶性ST2（sST2），基质金属蛋白酶-2（MMP-2），基质金属蛋白酶抑制因子-2（TIMP-2），胰岛素样生长因子-1（IGF-1），血管内皮生长因子（VEGF），血管生成素1（Ang1）和血管生成素2（Ang2）。进行安全性评价。结果 观察组临床疗效总有效率为90.77%（59/65），高于对照组的74.24%（49/66）（χ2=6.179，P<0.05）；观察组LVEF，CO和LVRI均高于对照组（P<0.05），LVEDd，LVPW，LVMI均低于对照组（P<0.05）；观察组6 MWT多于对照组（P<0.01），Lee氏心衰、气虚血瘀证和MLHFQ评分均低于对照组（P<0.01）；观察组NT-proBNP，TGF-β₁，sST2，MMP-2水平均低于对照组（P<0.01），TIMP-2水平高于对照组（P<0.01）；观察组IGF-1，VEGF，Ang1水平均高于对照组（P<0.01），Ang2水平低于对照组（P<0.01）。没有发现服用麝香通心滴丸相关不良反应。结论 在西医常规治疗的基础上，给予麝香通心滴丸治疗IHF气虚血瘀证患者，可通过影响心肌纤维化和血管再生因子，改善心室重构，提高患者心脏功能，减轻临床症状，增加患者的运动耐量和生活质量，有着较好的临床疗效与安全性。     

Regeneration of Carthamus tinctorius from Jimsar

Objective To investigate the factors significantly affecting the shoot buds regeneration of Carthamus tinctorius from Jimsar(CTJ). Methods Through tissue culture experiments, the influences of culture temperature, illuminance, relative humidity, explants type, seedlings age, and plant growth regulators added in culture media on in vitro regeneration of CTJ were investigated. Results The culture temperature was set at 24 oC in daytime and 16 oC at night, illuminance at 9000 lx, and 60% relative humidity were suitable for CTJ regeneration. Cotyledons excised from 6-8 d old seedlings were more responsive than even-aged euphyll, hypocotyl, and root explants because of inducing adventitious buds. The highest percentage of regenerated shoots(79.1%) with about five adventitious buds per responding explant was obtained from MS basal medium containing 12.0 mg/L TDZ, 2.5 mg/L IBA, and 1.5 mg/L 2-ip(No. 14 medium). Regenerated shoot buds(80%) could elongate successfully after 1-2 weeks transferred to shoot elongation medium. Conclusion Suitable factors of shoot buds regeneration for CTJ were determined. It may also make a useful reference for regeneration researches of other C. tinctorius varieties in China.     

杂交景天组织培养和植株再生

以杂交景天子叶、胚轴为外植体,接种在附加不同激素组合的MS培养基形成的愈伤组织有红、绿两种类型。子叶在MS 6-BA1 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L和MS 6-BA 1 mg/L NAA 0.5 mg/L培养基上的愈伤组织诱导率高达80%~82%。愈伤组织用MS 6-BA2 mg/L NAA 0.5 mg/L可诱导产生丛生不定芽,壮苗生根培养基为1/2 MS。组培苗移栽成活率达80%。