检测血清、脑脊液中循环抗原用于脑囊虫病诊断及疗效评估的研究

以猪囊尾蚴囊液抗原免疫家兔制备抗体,用常规ELISA法和斑点ELISA法(Dot-ELISA分别检测脑囊虫病人血清和脑脊液(CSF)中循环抗原(CAg),结果两法用于检测的敏感性与特异性相近。以Dot-ELISA法检测,脑囊虫病人血清和(CSF中CAg检出率分别为72.2％和77.7％,特异性为93.7％。吡喹酮治疗后,CSF中循环抗原消失较血清中明显缓慢,2疗程治疗后CSF中CAg检出率仍达74％,而血清中CAg检出率为40.7％,说明常规吡喹酮治疗后脑囊虫较外周组织中囊虫死亡缓慢,因此治疗后检测CSF中CAg更能判定疗效。     

金标特异抗原单克隆抗体斑点免疫金染色用于检测脑囊虫病循环抗原的研究

应用金标记猪囊尾蚴囊液抗原为探针,以抗猪囊尾蚴抗原的McAb为联桥,建立了非常规Dot-IGS用于检测脑囊虫病患者CAg的方法,用4G_2McAb检测84例脑囊虫病人脑脊液(CSF),CAg阳性率为88.09％。检测63例其他疾病患者,出现2例假阳性。以1F_(11)McAb检测14例脑囊虫病人,13例检出CAg,阳性率为92.86％。检测其他疾病患者36例,均为阴性。用4G_2与1F_(11),株McAb可分别检出最小抗原量为1ng/ml和0.25ng/ml。本法敏感、特异、操作简单,可用于脑囊虫病的诊断。     

ELISA检测脑囊虫病患者脑脊液中囊尾蚴抗原

应用酶联免疫吸附实验(ELISA),以38例脑囊虫病人脑脊液(CSF)和26例脑部其它疾患的CSF为对照,用兔抗囊尾蚴抗血清进行了囊尾蚴抗原检测,28例呈阳性反应,阳性率73.68％;对照组26例全部为阴性。本方法特异性强,重复性和敏感性较好,简单迅速,有希望用于脑囊虫病的临床诊断。     

ELISA在脑囊虫病免疫学诊断中的应用

我室从1987年开始应用ELISA检测脑囊虫病人血清中的抗囊虫抗体,现将结果报告如下:1 材料和方法1.1抗原收集新鲜猪囊尾蚴液,56℃ 30min灭活,以4000rpm离心30min,取其上清液作抗原,Folin-酚试法测蛋白含量(2.89mg/ml),冰盒内保存。1.2 试验血清1.2.1 待测血清经IHA和病理检查及CT等综合方法明确诊断的脑囊虫病人血清172份.皮肌囊虫病人血清59份,脑囊虫病人脑脊液(CSF)71份。1.2.2 阳性对照血清经CT和手术证实的脑囊虫病人混合血清。1.2.3 阴性对照血清输血员混合血清。     

快速酶联免疫吸附试验检测脑囊虫病人血清抗体的实验观察

1986年我们在常规ELISA基础上进行改进,建立块速ELISA方法,一次试验仅需1h。在脑囊虫病临床诊断中,取得了满意结果。 材料和方法 一、抗原 抽取猪囊尾蚴囊液,经透析、离心、收集上清液,置低温冰箱保存备用。 二、试验血清 脑囊虫病人血清选择病史及临床症状可疑,间接血凝试验阳性者。阳性对照血清是用囊液抗原感染健康家兔制备出兔抗囊血清。阴性对照血清采自血库献血员。 三、酶结合物(一)酶标羊抗人IgG:自制。     

斑点ELISA在脑囊虫病免疫诊断中的应用

本文以猪囊尾蚴囊液为抗原作斑点 ELISA,105例脑囊虫病人血清和脑脊液的阳性率分别为93.3%(84/90)和93.4%(57/61),107例健康人血清均为阴性,与丝虫病、疟疾和华支睾吸虫病人血清无交叉反应。其他脑部疾病脑脊液的检测,全部阴性。结果表明此法诊断脑囊虫病具有较高的敏感性和特异性。     

金标免疫渗滤法在脑囊虫病诊断中的应用

为寻找简便可和的脑囊虫病诊断方法。将2株抗猪囊尾蚴囊液抗原McAb, 一个滴于硝酸纤维素膜上,另一与胶体金结合,建立了检测脑囊虫病患脑脊液（CSF）中循环抗原（CA）的金标免疫渗滤法（DIGFA）,本法中抗原=、抗体通过渗滤在膜上进行反应,10分钟内即可用肉眼观察结果,以该法检测48例脑囊虫病患CSF、26份健康人CSF及23例非囊虫病患CSF,对检测样本作了沸浴处理,处理前后的48例脑囊虫病患CSF阳性检出率分别是77.08%和93.75%,处理前后的对照CSF阴性符合率均未改变,26例健康人CSF,阴性符合率为96.15%;23例非囊虫病患CSF,1例出现阳性反应,交叉反应率为4.35%,该方法可检出最小抗原量为0.5ug/L沸浴处理可提高脑囊虫病人CSFR的CA阳性检出率,DIGFA敏感、特异重复性好,操作简便,无需特殊设备,可用于囊虫病的诊断。     

脑囊虫病患者脑脊液与猪囊尾蚴及肥头绦虫囊尾蚴抗原的免疫印迹反应

近年来,脑囊虫病受到了各国重视。由于难以获得充足的特异性抗原,限制了该病免疫诊断的应用和发展。本次研究以肥头绦虫ORF株囊尾蚴作为抗原,结合免疫印迹试验,检测脑囊虫病患者脑脊液(CSF)中的抗体,并以猪囊尾蚴抗原检测结果作对比分析研究。     

囊虫病快速免疫色谱测试法的建立和初步应用

目的：建立一种敏感，特异，简便快速的囊虫病免疫诊断方法。方法：以胶体金标记抗猪囊尾蚴抗原单克隆抗体，将另一抗猪囊尾蚴抗原单克隆抗体在硝酸醋酸混合纤维素膜上固定成一条线，制成免疫测试条，待测抗原与金标单克隆抗体结合后沿着硝酸醋酸混合纤维素膜移动，与膜上的特异性单克隆抗体结合形成肉眼可见的褐红色线，结果：当猪囊尾蚴囊液抗原量为5ng时，测试条仍呈阳性反应，检测脑囊虫病患者脑脊液（CSF）的阳性率为82．60％，检测健康人CSF的阴性符合率为100％，将本法检测CSF结果与ELISA比较，两方法的敏感性和特异性相似，结论：本方法敏感，特异，操作简便快速，试剂稳定，重复性好，在囊虫病的诊断中具有很好的应用前景。     

Dot-IGSS检测脑脊液中循环抗原诊断脑囊虫病的研究

应用斑点免疫金银染色法(Dot-IGSS)和Dot-ELISA检测96份确诊为脑囊虫病患者脑脊液(CSF)中的循环抗原(CAg),阳性率分别为94.79%和92.71%.检测51例非囊虫病者和62例其他脑部疾病患者的CSF,两种方法均为阴性.诊断指数分别为194.79%和192.71%,检测CAg的最小量Dot-IGSS为244ng/ml,Dot-ELISA为488ng/ml.试验表明两法诊断脑囊虫病均具有敏感性高、特异性强、重复性好和方法简便易行,有希望用于脑囊虫病的临床诊断.     

猪囊尾蚴液、固相多种抗原对囊虫病免疫诊断效果评价

目的　筛选适合多种寄生虫病流行区使用的特异性较高的囊虫病免疫诊断抗原。　方法　制备猪囊尾蚴各类型液相抗原和固相抗原 ,用ELISA或IEST检测囊虫病流行区患者阳性血清抗体 ,比较各种抗原的敏感性和特异性。　结果　猪囊尾蚴全囊及囊液尿素溶性抗原与水溶性纯化抗原ELISA检测囊虫抗体的特异性差异无显著性 (P >0 .0 5 )。固相抗原IEST有敏感性好、操作简易的特点。　结论　猪囊尾蚴全囊尿素溶性纯化抗原是较理想的囊虫病ELISA诊断抗原 ,有诊断应用价值。固相石腊切片抗原IEST较为适合流行区现场或基层应用。     

滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究

目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果　对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论　DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。     

脑囊虫病免疫诊断方法的比较

为了进一步比较皮内试验(ID)、IHA和ELISA在诊断脑囊虫病方面的应用价值,对136例经头颅CT诊断为脑囊虫病的患者进行了血清和脑脊液(CSF)免疫学诊断方法的比较。 检测对象 1 实验组 脑囊虫病患者136例中,皮下结节经活检证实为囊尾蚴者95例;单纯脑囊虫病者41例。     

ELISA法间接检测囊虫患者血清特异抗原的探讨

目的 探讨简便的检测囊虫抗原的方法。方法 囊液抗原包被酶标板，ELISA法检测待检血清与含ELISA法1：8( )的囊虫抗体兔血清的混合液的抗体，滴度低于1：2(#)为阳性。结果 囊虫患者阳性率在82．69％-85．37％之间。讨论囊液抗原间接检测囊虫患者血清特异抗原结果稳定，方法简便，临床符合率较高。     

囊尾蚴脑内寄生状态与免疫效应机制相关性研究

目的探讨脑囊虫病患者囊尾蚴脑内寄生状态与免疫效应机制的相关性。方法收集并筛选1996～2002年间确诊的脑囊虫病患者80例,以脑影像特征分为活囊型、脑炎型、混合型和钙化型,用免疫学方法检测各型患者血清中CAg、CIC、C3、CRA,并进行比较。另选20名健康成人作对照。结果与结论各型脑囊虫病人血清CAg、CIC均增高,与健康对照组比较,P<0.01;C3和CRA则降低。提示在脑囊虫病的发病机制中机体的免疫效应机制起着主导作用,机体的免疫状况影响囊尾蚴脑内寄生状态,表现为囊尾蚴同期感染不同期发育的影像学特征。     

高压液相色谱法分离提纯囊虫抗原的研究

<正> 囊虫病的免疫及免疫诊断的重要问题之一是抗原问题,本文首次应用Beckman344M型高压液相色谱仪分离制备囊虫不同部位抗原物质,应用ELISA试验,检测所分离的各不同组分的抗原活性,其结果报告如下。 材料和方法 一、制备粗抗原 按常规收集囊液制备囊液粗抗原(简称CF_0Ag)再分别制出全囊虫粗抗原(CW_0Ag)和头节粗抗原(CS_0Ag),分别测其蛋白含量后-20℃保存。 二、高压液相色谱法分离制备抗原     

猪囊虫体表抗原用于 ELISA 诊断囊虫病的研究

应用猪囊尾蚴体表抗原对66例临床确诊的囊虫病人用 ELISA 进行检测,同时以囊液粗抗原作比较观察。阳性率分别为95.5%和68.2%,两者差异非常显著(P<0.005)。两种抗原对同批血清的反应强度也呈现明显差异(P<0.05)。用囊虫体表抗原和囊液粗抗原同时检测50名健康人血清,假阳性率分别为2%与12%;两种抗原与10例包虫病人血清分别有8例和4例出现交叉反应。     

人体囊尾蚴抗原在临床试验中应用价值的探讨

目前 ,在囊虫病的临床血清学诊断试验中所用的抗原均采自猪体囊尾蚴。为探讨人体囊尾蚴抗原在临床试验中的应用价值 ,我们进行了下列试验。材料和方法1　抗原的制备　在无菌条件下 ,切除已确诊的人体皮下囊虫结节 ,置生理盐水中 ,洗涤数次。用 1ml的皮试针吸取囊液放入离心管中 ,2 0 0 0 r/min离心 2 0 m in后收集上清液 ,放入透析囊内置 4℃ ,以生理盐水透析 48h。然后测其蛋白含量(4 0 2 μg/ml) ,放 - 2 0℃ ,保存备用。2　试验血清　囊虫病病人血清 10 1份 ,均经囊虫血凝和囊虫酶标反复筛选。正常人血清 145份 ,采自济宁师专学生。3　结…     

McAb检测囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病试剂盒的研制

本文报道了McAb(4F_2)ELISA检测囊尾蚴循环抗原诊断脑囊虫病试剂盒的研制。实验对227例脑囊虫病患者脑脊液进行检测,循环抗原阳性率为84.58％,其中活动型脑囊虫病患者171例,循环抗原阳性率为93.57％。56例非活动型脑囊虫病患者,循环抗原阳性率为57.14％,前者的循环抗原强度也明显高于后者。83例患有其它中枢神经系统疾病的患者,1例阳性,阴性符合率为98.80％。本试验方法简便,结果客观,对脑囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高、特异性强。     

应用特异单克隆抗体测定猪囊尾蚴病人血清和脑脊液中的循环抗原

我们应用特异的抗猪囊尾蚴抗原的单克隆抗体(CCy1),建立了单克隆抗体抑制性ELISA方法以测定囊尾蚴病患者的循环抗原(CAg)。测定灵敏度为ng水平。83例囊尾蚴病患者血清的CAg阳性率为71.1％。其范围为0.16-128μg/ml。对41例囊尾蚴病患者,同时测定了血清和脑脊液中的CAg。单项或两项阳性的总阳性率为90.2％。114例正常人血清、107例其它寄生虫病患者(包括30例包虫病患者)的血清及10例非寄生虫病患者的脑脊液的CAg量均为零。有23例囊尾蚴病患者治疗半年到1年后,有21例抗原浓度为零。另2例分别为0.64μg/ml和1.6μg/ml。表明测定CAg不仅可以确定活动性囊尾蚴感染,而且可考核疗效。