广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原分析及其诊断价值的探讨

目的分析广州管圆线虫成虫尿素溶解性抗原,探讨其诊断价值。方法广州管圆线虫成虫匀浆后沉渣经尿素溶解,与成虫水溶解性抗原同时进行SDS-PAGE和Western-blot,分析蛋白谱与抗原谱;用ELISA检测不同样本中相应抗体。结果SDS-PAGE结果显示尿素抗原蛋白条带少于水溶解性抗原;尿素抗原与感染大鼠血清、免疫兔血清和广州管圆线虫病患者血清在32000Mr处均出现强反应带,尿素抗原的反应带条数较水溶性抗原少。两种抗原包被ELISA检测广州管圆线虫病疑似病人血清和感染大鼠血清的阳性率相同;尿素抗原用于检测血吸虫感染小鼠血清的交叉阳性率明显低于水溶性抗原,检测正常大鼠血清、献血员血清及其他非广州管圆线虫感染血清时,假阳性数较水溶性抗原少。结论广州管圆线虫成虫尿素抗原含有32000Mr抗原;广州管圆线虫尿素抗原用于诊断时,与水溶性抗原有同样的敏感性,而特异性高于水溶解性抗原。     

不同抗原在酶标记免疫吸附试验(ELISA)检测曼氏血吸虫病中的应用

<正> 作者用七种不同的曼氏血吸虫抗原,对曼氏血吸虫病人的特异抗体进行试验,以达到对 ELISA 有效抗原成份进行研究。制备下列七种不同的曼氏血吸虫抗原。①成虫抗原(AWA)②超速离心的成虫抗原(AWA-UC)③成虫膜抗原(TAA)④三氯醋酸提取的成虫多糖类循环抗原(AWA-TCA)⑤可溶性虫卵抗原(SEA)⑥(?)球蛋白 A 纯化的可溶性卵抗原,其成     

647例乙肝患者前S1抗原与HBV-M、HBV-DNA检测结果的评价

目的:探讨乙型肝炎前S1抗原与乙肝血清标志物(HBV-M)、HBV-DNA检测的实际意义。方法:采用ELISA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb前S1抗原,采用PCR法检测HBV-DNA。结果:292例HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)病人组中的前S1抗原阳性率为82.2%,HBV-DNA抗原阳性率为78.1%;134例HBsAg(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)病人组中的前S1抗原阳性率为29.9%,HBV-DNA抗原阳性率为10.4%;160例HBsAg(+)、HBcAb(+)病人组中的前S1抗原阳性率为31.3%,HBV-DNA抗原阳性率为15.6%;9例HBsAg(+)、HBeAg(+)病人组中的前S1抗原阳性率为88.9%,HBV-DNA抗原阳性率为88.9%;52例HBeAb(+)、HBcAb(+)病人组中的前S1抗原阳性率为9.6%,HBV-DNA抗原阳性率为7.7%;结论:前S1抗原与HBV-DNA、HBeAg阳性呈高度正相关,在防治中应引起重视。     

角膜MHC抗原与角膜移植

<正>MHC(major histocompatibility complex)抗原,即主要组织相容性抗原,小鼠的MHC为H-2抗原,人的则称为人白细胞抗原,又名组织相容性抗原或移植抗原,是引起移植物免疫排斥的主要抗原刺激物。已经证实,角膜的细胞上有(Human leukolyte antigen,HLA)抗原存在。研究角膜的抗原,在临床上具有重要意义。角膜抗原性与角膜移植关系密切,其中HLA抗原在角膜移植排斥反应中起主要作用。Roy-R等研究HLA、ABO、Lewis血组抗原相容性在高危或低危角膜移植患     

小鼠和沙鼠泡球蚴抗原ELISA诊断人泡球蚴病比较研究

通过 ELISA 法,比较研究了小鼠和沙鼠泡球蚴抗原(MAH&GAH抗原)计52例泡球蚴(AH)患者、59例非 AH 病患者和57名建康人的诊断价值。结果表明,MAH&-GAH 抗原的阳性率各为98.1%和100.0%,经统计学处理,两种抗原之间无显著差异;假阳性率两者相同,均为2.58%。但是,GAH 抗原在0.70以上高消光值中占96.15%,非常显著地高于MAH 抗原者(51.92%);抗体滴度在1:1600以上时,GAH 抗原占69.23%,也非常地高于MAH 抗原(占30.11%),按几何均数计,GAH 抗原为 MAH 抗原的2.87倍,说明诊断 AH 病宜用 GAH 抗原。以 SDS-PAGE 分离的蛋白质带带数,GAH 者为36条,MAH 者仅15条。     

嗜肺军团菌mip/flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体的构建及表达

目的 选取嗜肺军团菌mip/flaA优势抗原表位基因,构建mip/flaA二联优势抗原表位基因融合表达载体,并在原核系统中表达,为后续制备嗜肺军团菌蛋白疫苗提供初步的实验基础。方法 运用生物信息学方法对Mip和FlaA蛋白的二级结构和表面特性如理化性质、亲水性、可塑性、抗原指数以及胞外区等方面进行分析,选择其活性表位可能存在的区域为优势抗原表位区。通过PCR扩增和T4连接酶构建pET-mip、pET-flaA和pET-mip/flaA优势抗原表位基因融合表达载体,并诱导其在大肠杆菌中表达。结果 Mip和FlaA都存在多个潜在的抗原表位位点,选取其优势抗原表位区域进行克隆和表达获得成功,并成功表达了mip/flaA二联优势抗原表位融合蛋白。结论 DNA Star软件和Expasy在线蛋白分析系统能够成功预测嗜肺军团菌Mip和FlaA 抗原的表位;选取其优势抗原表位成功构建了pET-mip/flaA二联原核表达载体,并高效表达。     

一种新的肝癌糖蛋白抗原HCA_2的纯化与分析

应用单抗(McAb)亲和层析技术,从原发性肝癌(HCC)组织中分离出高纯度新的肝癌相关抗原。ELISA和免疫酶斑点试验表明抗原活性保持良好,纯化倍数达580倍;SDS—PAGE、Western Blotting、PAGE、糖蛋白染色证实该抗原的蛋白组份为94KD和58KD两亚基组成的糖蛋白;抗原酶解、高碘酸钠氧化及ConA亲和吸附试验表明抗原决定簇由糖链构成;糖链含α—甘露糖基;放射免疫试验证实纯化抗原与AFP、CEA无关。其免疫生化特性及免疫组化特征与已知的肿瘤抗原均不相同。     

伤寒杆菌L型与其细菌型抗原性比较

本文用因子血清检查伤寒杆菌H901株细菌型及L型的抗原结构,结果细菌型除Vi抗原缺失外,O和H抗原均完整;L型O_9抗原检测不出,但与AFO多价血清呈弱阳性,可能另有少量其他O抗原,如O_(12)抗原存在,H抗原仍保留不变。以伤寒杆菌L型和细菌型分别免疫家兔,将所获得的免疫血清与其相应的H与O抗原进行试管凝集1试验,结果L型免疫血清的O抗体及H抗体的凝集效价较细菌型的低(P<0.01,P<0.001),表明L型的抗原性降低。用L型抗原与细菌型免疫血清以及用细菌型抗原与L型免疫血清进行交叉凝集试验,两者之间有一定交叉凝集。而交叉凝集吸收,则见细菌型抗原能吸收掉L型免疫血清中全部的抗体,L型抗原却只能吸收细菌型免疫血清中部分抗体。     

胃黏膜特异表达JC病毒T抗原质粒构建及表达鉴定

 目的利用鼠胃黏膜上皮细胞中高活性的角蛋白19(K19)启动子构建K19-JCVT抗原表达质粒并进行鉴定。方法利用PCR方法突变JC病毒T抗原中的NdeⅠ位点,并在两端插入BclⅠ位点,通过BamHⅠ位点将DNA片段与K19启动子连接,构建K19-JCVT抗原质粒。利用酶切和DNA测序确认其DNA序列。免疫组化筛选细胞角蛋白19阳性胃癌细胞,对细胞角蛋白19表达阳性的胃癌细胞系AGS进行K19-JCVT抗原质粒转染,用Western
      blot方法检测JCVT抗原的表达情况。结果K19-JCVT抗原表达质粒成功构建,AGS胃癌细胞系高表达细胞角蛋白19并用于K19-JCVT抗原表达质粒转染,转染K19-T抗原质粒的AGS细胞系有T抗原表达。结论同义突变和相似连接在质粒构建中起到关键作用,酶切位点的甲基化也是值得注意的问题。     

乙型肝炎患者HBV-DNA与Pre-S1、Pre-S2抗原的相关性研究

目的探讨乙型肝炎患者乙型肝炎病毒DNA（HBV-DNA）与前-S1（pre-S1）抗原和前-S2（pre-s2）抗原的相关性。方法采用酶联免疫测定法检测800例HBeAg阳性慢性乙肝患者的前pre-S1抗原和pre-s2抗原,采用荧光定量聚合酶联反应法测定患者HBV-DNA。结果213例HBV-DNA阴性患者的Pre-S1抗原阳性率为15．02％,Pre-s2抗原阳性率为9．86％;587例HBV-DN阳性患者的Pre-S1阳性率抗原为87．39％,Pre-s2抗原阳性率为80．75％;HBV-DNA阴性患者的Pre-S1和Pre-s2抗原阳性率显著地小于HBV-DNA阳性患者（P〈0．05）;HBV．DNA载量与pre-sl抗原和Pre-s2抗原具有高度的相关性（均P〈0．001）。结论在HBeAg阳性慢性乙肝患者中,HBV．DNA载量与Pre-S1抗原和Pre-s2抗原高度相关,pre-S1和pre-s2抗原检测是HBV-DNA检测的有效补充。     

应用ELISA检测阿米巴脓抗原和循环抗原诊断阿米巴肝脓肿的价值

应用ELISA法检测阿米巴肝脓肿患脓液和血清标本中的阿米巴抗原。结果 42例患中有41例检出脓抗原,检出率为97．6％,其中包括8例镜检阿米巴滋养体阳性和33例镜检阴性;有39例检出循环抗原,检出率为929％。脓抗原阳性反应强度高于循环抗原(P<0.05)。各种对照标本的阿米巴抗原检出率为0。提示可用ELISA抗原检测法替代镜检和培养进行阿米巴肝脓肿的病原学诊断。     

肿瘤的免疫诊断

<正> 随着免疫学进展,人们已认识到肿瘤的发生与进展和机体的免疫状态密切相关。在肿瘤病人的病程中常能检出与肿瘤有关的物质。肿瘤的免疫诊断就是基于以上论点建立起来的。一、肿瘤相关抗原人类肿瘤对自身免疫原性很弱,迄今尚无公认的肿瘤性特异抗原被提纯,仅获得某些具有肿瘤特征抗原,将其统称为肿瘤相关抗原。可利用检出肿瘤相关抗原的量和质的不同来协助诊断或强化其他检查结果的价值,大致有:①胚胎抗原或称“返祖”抗原;②     

膀胱鳞状上皮癌血清SCC抗原的意义

血清鳞状上皮癌相关抗原(SCC抗原)是鳞状上皮癌特有的相关肿瘤抗原。作者观察了3例膀胱鳞状上皮癌的血清SCC抗原的变化。3例均为男性,在病理中均有复发。在第1次手术前,其SCC抗原均为阳性,且增高明显,术后均降至正常;当出现肿瘤复发时,其SCC抗原均明显升高;同样,如用放疗,当肿瘤缩小时,其SCC抗原亦明显降低。有一例在复发肿瘤     

惠州市门诊流感患者病毒抗原流行特征分析

目的分析惠州市某三甲综合医院门诊患者流感病毒抗原快速检测结果,了解门诊患者流感病毒抗原流行特征,为医院流感诊治、疫情报疫和医院感染防控提供科学依据。方法收集门诊流感样病例胶体金免疫层析法流感病毒抗原检测结果及就诊数据。结果 49 401份咽拭子标本,流感病毒抗原阳性检出9 651份(阳性率19.54%),甲型、乙型和混合流感抗原阳性率分别为10.85%、5.43%和3.26%;不同性别流感病毒抗原检出率差异无统计学意义(P>0.05),但其抗原构成存在差异;不同年份的流感病毒抗原阳性检出率差异有统计学意义,2016、2017和2018年阳性率分别22.57%、19.32%和5.61%,呈逐年下降趋势;不同年龄段,流感病毒抗原阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05),年龄段5～岁最高,为24.46%,15～岁次之,为21.66%,≥60岁最低为12.89%;混合流感抗原构成占比以年龄段0～最高,为33.42%,并随着年龄的增加,检出率下降,儿童混合流感病毒抗原检出率远超成年人;流感病毒抗原检出情况与流感流行趋势一致,呈现明显的季节性差异,存在交叉或共同流行的特征。结论应用胶体金免疫层析法检测流感病毒抗原结果,有利于为流感早期诊断和抗病毒用药提供临床依据,为医院流感疫情流行提供风险预警,对于医院流感诊治、疫情上报和预防控制具有重要意义。     

利用纳米和RNA干扰技术抑制HBV-DNA 在HepG2 2.2.15细胞中的复制和表达

目的：通过RNA干扰和纳米技术抑制HBV-DNA在体外的复制和HBV核心抗原的表达。方法：制备靶向HBV核心抗原（HBcAg）的纳米小干扰RNA（siRNA）,利用U6启动子质粒转染入HepG2 2.2.15细胞;RT-PCR和Western印迹检测转染细胞HBV核心抗原在mRNA和蛋白水平的表达情况;real-time PCR 检测上清液HBV-DNA,放射免疫法检测细胞HBV表面抗原（HBsAg）、e抗原（HBeAg）、核心抗原（HBcAg）。结果：成功构建了含磁性纳米的siRNA质粒;多种方法检测均显示转染后的细胞HBV核心抗原表达明显下降;其表面抗原、e抗原和HBV-DNA值均较对照组降低。结论：RNA干扰联合纳米技术可明显下调HBV核心抗原的表达,抑制HBV-DNA复制。     

ABH及Lewis组织-血型抗原异常表达与原发肺癌生物学行为的相关性研究

目的  探讨原发性肺癌组织中ABH及Lewis组织-血型抗原表达与肺癌生物学行为的相关性。方法  采用免疫组织化学SP法,检测30例正常肺组织、143例原发肺癌及相应41例转移灶中ABH与Lewis 血型抗原的表达。结果  A、B、AB、O（H）血型瘤体抗原阳性率分别为 49.02%、55.56%、35.00%、69.44%,各血型间抗原表达无统计学差异（P>0.05）, Lewisa、sialylLewisx在癌组织中的表达率高于正常肺组织（P=0.045, P=0.015）。低分化癌组织ABH缺失、Lewisa、sialylLewisx表达均高于中高分化癌组织（P<0.001）。转移组ABH抗原表达缺失、sialylLewisx抗原表达均高于未转移组（P=0.004,P＜0.001）,转移灶ABH抗原表达缺失、sialylLewisx抗原表达高于原发癌（P＜0.001）。ABH、sialylLewisx表达与未表达组5年生存率分别为32%、6%﹙P＜0.001）,7%、30%（P＝0.0012）。结论  原发肺癌组织中存在ABH 及Lewis相关抗原的异常表达;ABH血型抗原表达缺失和sialylLewisx表达增加与肺癌转移相关;Lewisa、sialylLewisx抗原异常表达与肺癌组织分化程度有关;ABH及sialylLewisx抗原检测对预测患者预后有重要意义。     

乙型肝炎病毒血清前S1抗原的检测及其临床意义

目的:探讨乙型肝炎病毒与前S1抗原的相关性。方法:采用ELISA检测419例乙型肝炎病毒感染者血清中的前S1抗原。结果:在172例HBeAg阳性标本中前S1抗原阳性的140例,阳性率81.4%;200例HBeAg阴性而抗HBe阳性的标本中前S1抗原阳性的76例,阳性率38.0%;47例HBeAg和抗HBe均阴性的血清中前S1抗原阳性仅10例,阳性率21.3%;前S1抗原在血清学表达上与HBeAg的阳性符合率高达81.4%。结论:乙型肝炎病毒前S1抗原与HBeAg阳性高度相关,血清前S1抗原是乙肝病毒在体内复制的可靠标志。     

三联抗原酶免疫试验诊断日本血吸虫病

用血吸虫成虫—卵—尾蚴三联抗原EIA,检测类卵阳性患者血清94份、非疫区有疫水接触史皮试阳性者血清190份、基本消灭血吸虫病地区人群血清205份,阳性率分别为100％、27.9％及10.2％。69份肝吸虫病人血清,虫卵抗原EIA假阳性率为1.4％;与72份肺吸虫病人血清未显交叉反应;153份献血员血清,其虫卵及尾蚴抗原EIA假阳性率分别为1.3％和2.6％。用三联抗原EIA、成虫粗抗原ELISA、COP及CHR检测94份粪卵阳性患者血清,仅卵抗原EIA 阳性率明显高于COP;成虫及尾蚴抗原 EIA的阳性率分别和成虫粗抗原 ELISA、CHR 的阳性率相同。     

不同的抗原修复方法在免疫组化染色中的应用

目的:选择最适宜的抗原修复法.方法:在免疫组织化学染色中,选用鼠抗人5种单克隆抗体,用不同的抗原修复法,对不同染毒剂量、正常对照暴露大脑皮质及海马,石蜡组织切片,依阳性颗粒表达的情况,确定适宜的抗原修复.结果:抗原修复的方法直接影响到组织中抗原的暴露,高压加热法能把被掩盖或交联变性的抗原暴露或修复,使免疫组化的结果更准确可靠,特别是核阳性组织,适用于高压加热法;电炉煮沸法,阳性结果不佳;酶消化抗原修复法,与高压锅加热抗原修复法的阳性结果无区别.结论:核阳性表达的抗体应选用高压锅抗原修复法,推测核阳性表达的抗体也适用于酶消化抗原修复法.     

急性白血病的抗原表达及其临床意义

目的　探讨成人急性白血病 (AL)的抗原表达及其临床意义。方法　采用直接免疫荧光法标记 ,流式细胞仪检测分析 6 9例 AL 的免疫表型。结果　 12 9例成人急性淋巴细胞白血病 (AL L)髓系抗原阳性表达率为 30 % ,其中 CD1 3为 2 0 .7% ,CD33 为 10 .3% ,T- AL L 和 B- AL L 髓系抗原表达无显著性差异 (P=0 .36 7) ;CD34表达阳性的 AL L 髓系抗原表达率明显高于 CD34表达阴性的 AL L 髓系抗原表达率 (77.8% vs13.3% ,P=0 .0 36 ) ;AL L髓系抗原阳性表达的 CR率明显低于髓系抗原阴性表达的 CR率 (33.3% vs80 % ,P=0 .0 2 0 3)。 2 40例急性髓性白血病 (AML)淋系抗原表达率为 30 % ,其中 CD7为 15 % ,CD1 9为 12 .5 % ,CD2 为 2 .5 % ,CD7主要分布在 M1 、M2亚型中 ;CD34阳性 AML 的淋系抗原表达率明显高于 CD34阴性 AML 的淋系抗原表达率 (6 1.1% vs4.5 % ,P=0 .0 0 0 12 5 ) ;AML 淋系抗原阳性表达的 CR率低于淋系抗原阴性表达的 CR率 ,但差异无显著性 (5 0 % vs71.4% ,P=0 .12 6 )。结论　成人 AL 的抗原错译表达率约为 30 % ;CD34阳性 AL 的抗原错译表达率明显高于 CD34阴性 AL的抗原错译表达率 ;有抗原错译表达的 AL 的 CR率低于无抗原错译表达的 AL 的 CR率