三七HPLC指纹图谱的建立

目的 :建立三七药材的高效液相指纹图谱 (HPLC-FP) ,在量上为三七的鉴定与合理应用提供依据。方法 :LunaC₁₈(2 )色谱柱 ,流动相 :(A)乙腈 (B) 0.05%磷酸梯度洗脱 ,0～8min(20%A ,80%B) ,8～20min(20%A～40%A ,80%B～60 %B) ,20～ 30min(40 %A～20 %A ,60 %B～80 %B) ,30～36min(20%A～100%A ,80%B～0) ,36～50min (100%A) ,50～65min(100%A～20%A ,0～80%B) ,流速 1.0mL·min^-1 ,检测波长 203nm。咖啡因为内标物。结果 :通过聚类分析 ,21个不同产地、不同规格的三七样品被聚为 4类 :地道药材优级品、地道药材、市售一般品和次品。通过相似度计算 ,21个三七样品的相似度均在0.9～1.0之间 ,8个常见伪品的相似度均小于0.9。结论 :该色谱图可作为三七的HPLC-FP ,用于三七的真伪鉴别和质量评价。     

野生天麻和栽培天麻的DNA指纹图谱分析

目的:对野生天麻和三种人工栽培天麻进行DNA指纹图谱的鉴别研究,了解其间遗传变异的大小,并建立天麻品种的检定方法。方法:采用RAPD技术。结果:从45个引物中筛选出23个扩增稳定且谱带清晰的引物,共得到209个遗传标记。DNA指纹图谱显示,各样品间有遗传差异,具有不同的遗传特征,据此可进行鉴别。结论:RAPD技术可作为天麻鉴别的参考方法。     

枸杞基因组DNA提取及指纹图谱分析

目的建立一种适于RAPD分析的快速提取枸杞叶片基因组DNA的方法,并利用RAPD技术研究枸杞属植物基因组DNA指纹图谱。方法采用改进的CTAB法提取枸杞冷藏幼叶的基因组DNA,利用RAPD技术对其进行指纹图谱分析。结果改进的CTAB法提取的10份枸杞材料基因组DNA均适于RAPD分析;可提供清晰的RAPD指纹图谱,利用筛选出的2个随机引物对供试材料DNA进行随机扩增,共得到56条带,其中多态性条带44条,多态性百分率为78.6%。结论表明改进的CTAB法提取的枸杞基因组DNA不需经氯化铯梯度离心或柱层析纯化,可以直接用于RAPD分析;RAPD对枸杞属植物进行指纹图谱分析是可行的。     

中药苍术炮制前后DNA指纹图谱研究

目的:探讨苍术炮制前后DNA指纹图谱研究方法。方法:采用RAPD技术对不同产地的茅苍术炮制前后进行DNA指纹图谱研究。结果:不同产地的茅苍术生品DNA指纹图谱一致,几种麸炒苍术的DNA指纹图谱与生品有较大差异。结论:DNA指纹图谱可用于鉴别同种药材的生品。     

野生天麻和栽培天麻的DNA指纹图谱分析

目的:对野生天麻和3种人工栽培天麻进行DNA指纹图谱鉴别研究,了解其间遗传变异的大小,并建立天麻品种的检定方法.方法:采用RAPD技术.结果:从45个引物中筛选出23个扩增稳定且谱带清晰的引物,共得到209个遗传标记.DNA指纹图谱显示,各样品间有遗传差异,具有不同的遗传特征,据此可进行鉴别.结论:RAPD技术可作为天麻鉴别的参考方法.     

三七药材指纹图谱研究

目的：应用HPLC法制定三七药材指纹图谱检测标准。方法：Nova-Pak′C18分析柱，乙腈-水梯度洗脱，流速1.0ml/min，检测波长210nm。结果和结论：建立了三七药材的指纹图谱检测标准，实验方法简便、准确、重复性好。     

中药材黄芪的DNA指纹图谱鉴别

为鉴别中药材黄芪的品种及其代用品,采用高盐低pH值法提取药材的基因组DNA,利用随机扩增多态DNA(RAPD)技术扩增药材基因组DNA样品。结果表明,高盐低pH值法较适用于黄芪类药材基因组DNA的提取,其中2个引物可作为高特异性引物,根据琼脂糖凝胶上显示的DNA带型差异准确鉴别黄芪和红芪。RAPD方法可以准确、快速地鉴定黄芪及其代用品。     

中药材黄芪的DNA指纹图谱鉴别

为鉴别中药材黄芪的品种及其代用品，采用高盐低pH值法提取药材的基因组DNA，利用随机扩增多态DNA（RAPD）技术扩增药材基因组DNA样品。结果表明，高盐低pH值法较适用于黄芪类药材基因组DNA的提取，其中2个引物可作为高特异性引物，根据琼脂糖凝胶上显示的DNA带型差异准确鉴别黄芪和红芪。RAPD方法可以准确、快速地鉴定黄芪及其代用品。     

中药乌梅炒炭前后DNA指纹图谱的研究

目的探讨乌梅炒炭炮制前后DNA指纹图谱特征。方法采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术扩增植物基因组DNA样品。从10个引物中筛选出能稳定扩增的引物S362(5'-GTCTCCGCAA-3')对不同产地乌梅进行扩增。结果此种分子生物学鉴别方法可以获得清晰可靠的DNA指纹图谱,不同产地的乌梅生品DNA指纹图谱一致,均有900bp、750 bp、650 bp、550 bp、300 bp、200 bp条带;经炮制后的乌梅炭DNA指纹图谱与生品有较大差异,缺少较长碱基对的扩增条带,均多出了400 bp的条带。结论 RAPD技术可作为乌梅生品道地品种的鉴定的参考方法。     

三七叶的HPLC指纹图谱的研究

目的 :用高效液相色谱法建立三七叶的指纹图谱分析方法。方法 :采用ZorbaxC1 8(4.6× 2 50mm)色谱分析柱 ,甲醇 4%磷酸水溶液 (65∶35)为流动相 ,检测波长为 2 0 3nm ,以人参皂苷Rb3为参照物。结果 :共有 1 2个共有峰。结论 :方法准确、可靠 ,为更好地控制三七叶的内在质量提供了科学依据     

三七药材及其制剂指纹图谱研究

目的 :应用Rp-HPLC(DAD)对三七药材、提取物及市售主含三七成分的注射液进行指纹图谱研究 ,为含三七主成分的注射液制定指纹图谱奠定基础。方法 :PolarisC₁₈-A分析柱 ,乙腈 水梯度洗脱 ,流速 1.5ml·min^-1,检测波长 203nm。结果和结论 :色谱图对三七药材、提取物及市售主含三七成分的注射液中各皂苷类成分均得到很好分离 ,可作为三七药材、提取物及含三七主成分注射液具有专属性的指纹图谱。     

山萸肉饮片高效液相指纹图谱的研究

目的:建立山萸肉饮片高效液相指纹图谱。方法:HPLC法。结果:建立了山萸肉饮片高效液相指纹图谱,不同产地不同批次山萸肉饮片HPLC指纹图谱相似度大于0.9。结论:HPLC指纹图谱可以用于山萸肉饮片质量的控制。     

三七药材-三七二醇皂苷指纹图谱及其物质群量值传递分析

目的:建立同时适用于三七药材及其乙醇提取液、树脂洗脱液、三七二醇皂苷(PDS)的HPLC指纹图谱方法,分析PDS制备的主要工艺环节物质群量值传递情况。方法:采用HPLC,以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,建立了三七药材及其中间产物,PDS的指纹图谱检测方法;采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)软件对制备过程各关键工艺环节多批次样品进行相似度评价,同时进行物质群的量值传递分析。结果:建立的HPLC指纹图谱方法精密度、重复性和稳定性良好,能有效分离三七药材、中间产物及PDS各组分,标定了12批三七药材的16个共有峰,指认了其中5个主要色谱峰;各批次样品与其相应的对照指纹图谱的相似度均≥0.9;工艺过程较好地去除了药材中三七三醇皂苷类成分,而三七二醇皂苷类药效成分完整传递至PDS。结论:建立的指纹图谱方法稳定可靠,能充分展示三七药材、中间产物及PDS物质群变化及其量值传递情况,为中药新药的开发与应用提供了精准工艺及质量控制研究新模式;现有PDS主要工艺流程科学合理。     

桔梗的HPLC-ELSD指纹图谱研究

目的:建立桔梗高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)指纹图谱的分析方法,研究不同产地桔梗药材的质量。方法:采用HPLC-ELSD,Welch Materials XB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸溶液,梯度洗脱,流速0.8 mL.min-1,柱温30℃,ELSD检测器漂移管温度50℃,氮气流速1.2 L.min-1。结果:建立了12批桔梗的HPLC-ELSD指纹图谱,共找到16个共有峰,并确定了桔梗皂苷E,桔梗皂苷D3和桔梗皂苷D。结论:该方法具有良好的重复性和稳定性,为有效控制桔梗药材的质量提供了依据。     

川麦冬药材中黄酮类成分HPLC指纹图谱的研究

目的:建立川麦冬药材中黄酮类成分的HPLC指纹图谱分析方法,为整体控制和评价川麦冬药材的质量提供依据。方法:采用Waters Symmetry C18柱(4.6mm×250mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸梯度洗脱,流速为1.0mL.min-1,检测波长296nm,柱温30℃。以甲基麦冬黄烷酮A为参照物,对10批市售川麦冬药材进行指纹图谱的分析。结果:建立了川麦冬药材黄酮类成分的HPLC指纹图谱共有模式,标定了13个共有峰,10批川麦冬药材的相似度在0.960～0.995。结论:该指纹图谱方法简便、准确、重复性好,可专属性地研究川麦冬药材的指纹图谱,为有效地控制该药材的内在质量提供了科学依据。     

丁香茄子的HPLC指纹图谱分析

目的:建立丁香茄子的HPLC指纹图谱分析方法,为该药材的鉴别及质量评价提供依据。方法:采用Agilent Extend-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 m L·min~(-1),检测波长300 nm,进样量10μL,分析丁香茄子的HPLC图谱,使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算相似度,并进行聚类分析、主成分分析、偏最小二乘判别分析。结果:方法学考察显示丁香茄子的液相色谱指纹图谱精密度、重复性、稳定性均可满足指纹图谱分析的需要;指纹图谱中呈现14个共有峰,10批广西地区的丁香茄子的指纹图谱相似度评价结果在0.70以上,表明广西不同产地丁香茄子的质量差异较大,通过聚类分析、主成分分析、偏最小二乘判别分析,丁香茄子分成三类,显示产地和采集时间与药材的质量相关。结论:建立的丁香茄子的液相色谱指纹图谱方法快速、简便,能够全面反映丁香茄子的生物碱化学成分信息,可用于丁香茄子的质量评价;玉林和桂林采集的丁香茄子质量较佳,可以作为丁香茄子来源产地。