实施核酸检测后献血者丙型肝炎病毒检测模式的探讨

目的 探讨献血者血液筛查中实施核酸检测(NAT)后去掉一次抗-HCV酶联免疫吸附试验(ELISA)检测后抗-HCV漏检的风险.方法 从献血者血样中留取常规抗-HCV ELISA双试剂(国产金伟凯或万泰及进口Ortho)2次筛查中任一试剂筛查不合格的献血者血样,进行NAT检测及重组免疫印迹(RIBA)抗体确证试验,并对ELISA单试剂不合格、NAT阴性但RIBA确证阳性或可疑标本进行追踪研究分析自然转归.分析去掉一次抗-HCV ELISA检测后抗-HCV漏检的风险性.结果 213970人份献血者血样中常规血清学双试剂检测HCV不合格953份(0.445％).该953份不合格标本中,有9份为国产试剂筛查合格NAT阴性但RIBA试验确证阳性,有10份为进口试剂筛查合格NAT阴性但RIBA确证阳性.如果去掉该进口ELISA,采用该国产ELISA试剂和NAT,那么将有4.20/10万(9/213970)的抗-HCV确证阳性血液会被漏检;如果去掉该国产ELISA,采用该进口ELISA试剂和核酸检测,将有4.66例/10万(10/213970)的抗-HCV确证阳性血液会被漏检;进口试剂和国产试剂漏检抗-HCV确证阳性血液的风险差异无统计学意义(P＞0.05).而另一方面,我中心自开展NAT研究及常规NAT检测以来(2007-2013年,约92万人次),尚未从“2次ELISA筛查”合格的血液中检出确证的HCV RNA单独阳性血液,因此“进口ELISA+NAT”或“国产ELISA+NAT”分别比“2次ELISA筛查”少检出4.66/10万及4.20/10万抗-HCV RIBA确证阳性的血液.结论 就献血者血液HCV筛查策略而言,实施NAT检测后,去掉两次ELISA检测中的一次ELISA检测需慎重.     

安阳市无偿献血血液检测阳性结果分析

目的:了解我站无偿献血血液检测阳性情况,探讨提高献血者血液检测结果反馈准确度的可行性,降低血液报废。方法:对我站647例实验室阳性血液进行统计分析;对154例HBsAg、抗-HCV阳性血进行病毒核酸检测,对结果进行统计分析。结果:阳性率最高为ALT,占实验室总阳性率的63.5%;HBsAg、抗-HCV灰区标本病毒核酸检出率分别为3.7%和3.2%,HBsAg、抗-HCV灰区标本ELISA假阳性率较高。结论:控制可引起ALT升高的因素,减少ALT阳性血液淘汰率,建议重新设定符合献血者特定人群的ALT临界值;建议对HBsAg、抗-HCV阳性标本进行核酸检测,对梅毒阳性标本进行TPPA确认试验,并以此结果对献血者进行结果反馈,提高血站实验室结果反馈准确度,减少纠纷,降低负面影响。     

核酸检测对酶联免疫吸附试验法检测乙型肝炎表面抗原、丙型肝炎病毒抗体结果呈灰区及弱反应性标本复检的必要性探讨

目的探讨乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测呈灰区、弱反应性标本采用核酸检测(NAT)的复检情况。方法选取2011年1月‐2016年12月于该院就诊并经ELISA法检测HBsAg、抗-HCV结果呈灰区及弱反应性的标本741例为研究对象,所有研究对象均采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)复检,对两种方法检测结果进行比较。结果 ELISA法检测HBsAg、抗-HCV双试剂灰区标本HBV-DNA、HCV-RNA阳性率均高于单试剂灰区,差异均有统计学意义(P0.05);ELISA检测HBsAg和抗-HCV单试剂、双试剂弱反应性标本NAT检测阳性率比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论 ELISA法检测HBsAg、抗-HCV结果呈灰区、弱反应性标本存在一定的HBV-DNA、HCV-RNA阳性漏检和误诊,NAT检测对于HBV和HCV感染的早期诊断、治疗以及避免医疗纠纷的发生具有重要作用。     

对HBsAg和抗-HCV ELISA筛查阳性献血者进行确认试验分析

目的 探讨对HBsAg和抗-HCV ELISA筛查阳性献血者进行确认试验分析的意义。方法分别采用中和试验对ELISA检测HBsAg阳性献血者和重组免疫印记试验(RIBA)对抗-HCV阳性献血者进行确认检测，并对确认试验阴性献血者进行NAT检测。结果38693份献血者中，ELISA筛查出HBsAg和抗-HCV阳性分别为381(0．98％)份和173(0．45％)份。在ELISA筛查出的381份HBsAg阳性献血者中，经中和试验确认HBsAg阳性352份，29份为阴性；173份抗-HCV阳性献血者中，RIBA试验确认79份阳性。59份阴性。35份为可疑；29份中和试验确认HBsAg阴性标本和94份RIBA确认抗-HCV阴性或可疑的标本．NAT检测HBV DNA和HCV RNA均为阴性。结论对献血者进行HBsAg和抗-HCV确认试验能够避免假阳性结果的发生，有利于保护献血者的利益和推动志愿无偿献血事业的开展。     

抗-HCV筛查反应性HCV核酸阴性献血者的确证结果分析

目的 探讨献血人群H CV筛检效果,为献血者血液筛查和归队策略提供科学依据.方法 收集ELISA抗-HCV反应性但核酸检测阴性的122份标本,采用重组免疫印迹进行抗-HCV确证试验,对结果进行汇总分析.结果 122份标本中确证试验阳性38份、不确定42份、阴性42份,确证阳性率为31.15％.ELISA试剂1单反应性的确证阳性率为0,ELISA试剂2单反应性为25.93％,试剂1、2均反应性为47.06％.确证试验条带主要以核抗原蛋白为主,其次为NS4蛋白.随着S/Co增高,确证试验的阳性预测值也增高.结论 ELISA和核酸联合检测能更好地保障血液安全,有必要对单试剂ELISA抗-HCV反应性献血者开展归队.     

抗-HCV筛查反应性HCV核酸阴性献血者的确证结果分析

目的 探讨献血人群H CV筛检效果,为献血者血液筛查和归队策略提供科学依据.方法 收集ELISA抗-HCV反应性但核酸检测阴性的122份标本,采用重组免疫印迹进行抗-HCV确证试验,对结果进行汇总分析.结果 122份标本中确证试验阳性38份、不确定42份、阴性42份,确证阳性率为31.15％.ELISA试剂1单反应性的确证阳性率为0,ELISA试剂2单反应性为25.93％,试剂1、2均反应性为47.06％.确证试验条带主要以核抗原蛋白为主,其次为NS4蛋白.随着S/Co增高,确证试验的阳性预测值也增高.结论 ELISA和核酸联合检测能更好地保障血液安全,有必要对单试剂ELISA抗-HCV反应性献血者开展归队.     

单试剂阳性的献血者追踪分析研究

目的对抗-HIV、HBsAg、抗-HCV和梅毒螺旋体抗体的ELISA单试剂阳性反应的献血者进行追踪研究,确定屏蔽献血者的解除屏蔽时间,避免误淘汰合格献血者,建立和加强固定献血者队伍。方法对检测结果异常的246名无偿献血者,包括血站血液常规检测项目:抗-HIV、HBsAg、抗-HCV、抗-TP等四项输血传染病标志物任何1项或1项以上单试剂检测阳性反应者,6个月后再抽取其血液标本,用两种不同试剂追踪检测研究,对检测结果统计分析。结果追踪研究各个检测传染病标志物项目的合格率分别为:HBsAg为35.5%、抗-HCV为39.4%、抗-HIV为33.3%、抗-TP为24.6%,总合格率为32.9%。经χ2检验,各项目追踪研究的合格率差异有显著统计学意义(P0.05)。在追踪研究前、后单试剂阳性反应标本中,HBsAg、抗-HCV、抗-HIV三者的进口试剂所占比率比国产试剂明显升高(P0.05),显示进口试剂灵敏度较高。抗-TP两次检测均使用国产试剂,两者比较差异无统计学意义(P0.05)。结论通过对单试剂检测不合格献血者四种输血传染病标志物的追踪检测和研究,排除检测方法学的误差,尽量消除因为试验假阳性等原因引起的献血者误淘汰,对无偿献血的宣传、招募和建立、保留固定献血者队伍具有重要意义。     

贵阳地区无偿献血人群HCV筛查的结果分析

目的 比较献血人群抗-HCV反应性、HCV核酸检测结果及HCV重组免疫印迹试验(RIBA)确证实验结果.方法 对2013年10月至2015年3月采集的无偿献血者血液标本,采用2个不同厂家的国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂检测和1个进口核酸检测试剂及配套检测系统对HCV进行筛查,对抗-HCV呈反应性或/和NAT检测阳性标本进行RIBA,将2种ELISA试剂检测反应性的结果与核酸检测结果、RIBA确证实验结果进行分析与比较.结果 共检测133 959例无偿献血者标本,其中覆盖核酸检测结果的标本113 380例,抗-HCV检测呈反应性标本比例0.19％(252/133 959),NAT检测阳性共27例,阳性检出的比例0.02％(27/113 380);HCV反应性标本经RIBA确证实验确证阳性的比例19.8％(50/252)、阴性的比例54.8％(138/252)、不确定的比例25.4％(64/252);27例核酸检测阳性的标本均为ELISA检测双试剂反应性和确证实验阳性;2家ELISA试剂检测结果、RIBA确证实验结果和核酸检测结果差异有统计学意义(P＜0.05).结论 选用2次ELISA+1次核酸检测的检测策略更为安全;针对较高比例的假阳性标本,应建立献血者跟踪随访制度,最大限度地保留献血人群.     

重庆市无偿献血者传染标志物筛查不合格结果分析

目的：研究该中心无偿献血传染标志物筛查不合格结果,为科学合理制订血液筛查策略,评估血液筛查试剂的检测效率提供依据。方法统计该中心2014年7月至2015年6月无偿献血传染标志物筛查不合格结果及检测试剂分布。结果该中心2014年7月至2015年6月共检测标本120756例,筛查出不合格标本共2854例,其中 ELISA 阳性／病毒核酸检测阳性（ELISA ＋／NAT ＋）标本768例,ELISA ＋／NAT -标本1748例,ELISA -／NAT ＋标本338例（111例 NAT 鉴别结果为 HBV）;抗-TP 、HBsAg 、抗-HIV 、抗-HCV 不合格标本分别为895、1012、276和444例,ELISA 双试剂不合格率依次为78．6％、77．3％、30．8％、26．1％。 NAT 检测不合格以 HBV 检出为主,仅 HBsAg 有 ELISA 单试剂阳性献血者,NAT 联检阳性且鉴别结果为HBV 的。结论在不违反相关法律法规及操作规范下,合理选择一遍 ELISA 加一遍 NAT 的检测策略切实可行。     

国产两种HBsAg ELISA诊断试剂在血液筛查中的应用

目的:探究国产两种HBsAg ELISA诊断试剂在血液筛查中的应用。方法:应用两个不同厂家ELISA试剂对29874份献血标本进行筛查,对筛查为HBsAg阳性的样本进行聚合酶链反应(PCR)确证实验,同时做HBsAg滴度分析,评估试剂灵敏度及特异性。结果:29 874份标本中共捡出HBsAg阳性241份,确证阳性为122份,阳性率为0.81%。在241份初筛阳性标本中,国产A试剂检出HBsAg阳性213份,国产B的HBsAg阳性为172份。国产A、国产B最低检出量分别为0.32ng/ml和0.45ng/ml。结论:不同厂家ELISA试剂的检出率存在差异,为降低经输血传播HBV的风险,血液筛查HBsAg要采用高灵敏度、特异性强的进口试剂或核酸进行筛查。     

抗—HIV阳性患者扁桃体手术探讨

目的：探讨抗-HIV性患者行扁桃体手术的可行性。方法：应用放射免疫沉淀试验法检36例抗0HIV阳性慢性扁桃体炎患者并行扁桃体切除术。6例在全麻下行扁桃体切除术。4例8岁患儿表面麻醉后行挤切术,其余26例均在局麻下坐位手术。另取30例抗体阴性患者作对照组。术后分别观察并发症的发生率及治疗对策。结果：36例患者均顺利渡过手术。1例因局部伤口感染术后6d发生扁桃体术后继发性出血,1例继发肺部感染,并发症发生率为5．6％。结论：扁桃体切除术亦适用于抗－HIV阳性患者。术后严密观察、及时发现和处理并发症至关重要。     

免疫组化阳性对照组织的选择

目的探讨在进行免疫组化质控时如何选择阳性对照组织。方法选择取材标本中良性扁桃体、阑尾组织和肿瘤旁正常的肝脏、肾脏、乳腺、结肠组织,切成0.3 cm×0.3 cm×0.4 cm大小的组织块,经过脱水、浸蜡、包埋等组织处理后制成阳性对照组织蜡块。将阳性对照块进行连续切片,厚度为4μm,进行CK5/6、P63、CD34、ER等40种抗体的免疫组化染色,对染色结果进行分析。结果 40种抗体中扁桃体30种阳性,阑尾32种阳性,肝脏26种阳性,肾脏19种阳性,乳腺21种阳性,结肠28种阳性。结论扁桃体适合做标记鳞状上皮、淋巴系统以及血管和淋巴管相关抗体的阳性对照,阑尾适合做标记腺上皮、平滑肌组织、神经内分泌系统、血管和淋巴管相关抗体的阳性对照,其他正常组织分别适合做同类组织肿瘤标本的阳性对照。     

HBsAg低值弱阳性的临床探讨

目的探讨乙型病毒性肝炎HBsAg弱阳性的临床意义。方法对临床标本进行时间分辨免疫荧光分析法(TRFIA法)检测,对检测出的30例HBsAg弱阳性患者标本进行ELISA(酶联免疫法)检测,HBV-DNA PCR定量测定及血清ALT、AST、GGT测定。结果ELISA检测中有14例阳性,复查阳性率为46.67%;PCR检测HBV-DNA结果,有4例患者为阳性,复查阳性率为13.33%;血清ALT、AST、GGT值分别为(19.80±14.30)U/L、(25.76±14.63)U/L、(28.50±18.71)U/L。结论对HBsAg弱阳性结果的处理,应用多方法比较并结合临床诊断,报告结果。