ELISA检测系统性红斑狼疮患者血清中抗可提取性核抗原抗体

抗可提取性核抗原 ( ENA)抗体是系统性红斑狼疮 ( SLE)疾病的重要的血清学标志。目前抗 ENA抗体的检测主要采用对流免疫电泳法 ( CIE)和免疫印迹技术 ( IBT)。本室自 1 996年开始试用酶联免疫吸附试验 ( ELISA)检测自身免疫性疾病的抗 ENA抗体 ,现将用 ELISA和 CIE同时检测 2 4 4例 SLE患者血清中抗 ENA抗体结果报告分析如下。材料和方法一、标本来源2 4 4例 SLE来自 1 996年～ 1 998年 1月我院皮肤科 ,内科门诊及住院病人 ,其诊断均符合美国风湿病协会诊断 SLE标准 [1] ,正常对照组为我院体检健康者 40例。二、试剂ELIS…     

ELISA检测系统性红斑狼疮患者血清中抗可提取性核抗原抗体

抗可提取性核抗原(ENA)抗体是系统性红斑狼疮(SLE)疾病的重要的血清学标志。目前抗ENA抗体的检测主要采用对流免疫电泳法(CIE)和免疫印迹技术(IBT)。本室自1996年开始试用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测自身免疫性疾病的抗ENA抗体,现将用ELISA和CIE同时检测244例SLE患者血清中抗ENA抗体结果报告分析如下。     

抗ENA抗体检测SLE方法比较

抗ENA抗体的检测时系统性红斑狼疮（SLE）的诊断具有重要意义。现在临床上多采用对流免疫电泳法和免疫印迹法检测抗ENA抗体。本文用上述两种方法检测了103例SLE患者的血清ENA。一、标本来源收集SLE患者血清标本103份，并取20例献血员的血清作对照，血清标本置一20℃冰箱备用。二、测定方法1．对流免疫电泳法Sm、SSA、SSB、RNP抗原由河北医科大学提供。以0.6％琼脂糖为载体，取端电压100V，先加血清电泳40min，然后加抗原继续电泳1h。标难血清系本室常规所用，经美国Scripps免疫中心提供的标准血清鉴定确认。2.免疫印迹法试剂由…     

间接免疫荧光法和欧蒙印迹法检测抗双链DNA抗体的比较

目的比较间接免疫荧光法和欧蒙印迹法检测抗双链抗体的阳性率及特点。方法采用间接免疫荧光法和欧蒙印迹法对240例患者血清标本进行抗dsDNA抗体的检测(其中系统性红斑狼疮患者80例,非系统性红斑狼疮患者160例)。结果经间接免疫荧光法检测,SLE中抗dsDNA抗体阳性为28例,阳性率为35.00%(28/80),非SLE中抗dsDNA抗体阳性为1例,阳性率为0.625%(1/160);经欧蒙印迹法法检测,SLE中抗dsDNA抗体阳性为41例,阳性率为51.25%(41/80),非SLE中抗dsDNA抗体阳性为2例,阳性率为1.25%(2/160)。两种方法检出的阳性率在SLE组做统计学比较,有显著性差异(P0.05)。结论在SLE患者的诊断中,欧蒙印迹法抗dsDNA阳性的敏感性高于间接免疫荧光法抗dsDNA阳性。     

抗可提取性核抗原抗体谱检测方法的对比研究

目的比较三种检测抗可提取性核抗原(ENA)抗体谱试剂的敏感性、特异性和检测结果一致性。方法分别采用免疫印迹法(WB)法万孚试剂及纯化抗原的免疫斑点法Trinity试剂和欧蒙试剂检测42例患者(22例SLE患者、10例RA患者和10例非自身免疫病患者)抗ENA抗体谱中的6种抗体(抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSa抗体、抗SSb抗体、抗Scl-70抗体和抗Jo-1抗体),分析各抗体检测结果的符合率。结果在SLE患者组欧蒙试剂检测抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗SSa抗体和抗SSb抗体检测敏感性均高于万孚试剂和Trinity试剂(P<0.05),三种试剂检测结果一致性除抗SSa抗体外均较高。这与检测抗SSa抗体的方法学有关。结论检测ENA抗体谱免疫斑点法优于WB法,三种试剂中以欧蒙试剂检测敏感度较高,且与临床诊断相符。     

二步免疫印迹法的建立及在诊断类风湿关节炎中的意义

建立类风湿关节炎(RA)的特异性诊断方法。方法 用制得的可溶性核提取物为抗原,用免疫印迹法检测类风湿疾病患者血清中的RA33抗体。再以ENA为抗原,第2次用免疫印迹法检测RA33抗体阳性的病人血清中的RNP和Sm抗体。结果和结论 60例RA病人中22例阳性(36.6％),60例系统性红斑狼疮(SLE)病人中12例阳性(20％),两病的RA33抗体阳性率有显著性差别(P<0.05),而122例其他风湿性疾病和正常对照血清全为阴性。第2次免疫印迹法检测发现83％的RA33抗体阳性的SLE病人抗RNP(75％)和(或)抗Sm(33％)抗体为阳性,RA病人全阴性。这样用二步免疫印迹法检测可相对特异地诊断RA。     

原发免疫性血小板减少症患者抗可提取性核抗原抗体分析

目的 探讨原发免疫性血小板减少症(ITP)患者抗可提取性核抗原(ENA)抗体分布状况.方法采用免疫印迹法检测76例ITP患者和30例健康者抗ENA抗体.结果 76例ITP患者抗ENA抗体总阳性率23.68%,30例健康者均为阴性,二者阳性率差异有统计学意义(P＜0.05).结论 抗ENA抗体检测有利于判断ITP患者由于伴发或有可能发展至SLE或其他自身免疫性疾病,对探讨 ITP与SLE、自身免疫性疾病之间相互联系及ITP发病机制有重要有意义.     

一步免疫印迹法同时检测抗RA33抗体和抗ENA抗体及其对RA患人的诊断价值

目的 提高抗RA33抗体诊断类风湿性关节炎（RA）的特异性。方法 建立一步免疫印迹法，可同时检测抗RA33抗体和抗ENA抗体。并对266例不同风湿性疾病患者血清和24例正常人血清进行了检测。结果 抗RA33抗体阳性率：RA38％（38/100），SLE35．8％（24/67），MCTD36．4％（8／22），SS8．3％（3/36）。抗RA33抗体阳性血清中抗ENA抗体的检出率：95．8％（23／24）SLE有抗Sm／ulRNP抗体，100％（8／8）MCTD有抗ulRNP抗体，100％（3／3）SS有抗SSA/SSB抗体，RA血清抗ENA抗体均为阴性。结论 本文建立的一步免疫印迹法可有效地鉴别抗RA33抗体阳性的RA和SLE、MCTD等病人。     

定量酶联免疫吸附试验检测各种结缔组织病患者血清中的抗可提取核抗原抗体

目的定量检测各种结缔组织疾病(CTD)患者血清中抗可提取核抗原(ENA)自身抗体滴度,并探索其临床意义.方法自制抗各种ENA单克隆抗体,以夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测128例CTD患者、50例非CTD患者及60名健康人血清的各种抗ENA自身抗体滴度.用健康人血清各ENA抗体滴度的均数加上3倍标准差(+3s)为cut off值,界定各种ENA抗体检出率.结果与健康对照组和非CTD患者组比较,抗Sm抗体在系统性红斑狼疮(SLE)、抗ul-RNP抗体在SLE和混合性结缔组织病(MCTD)、抗SSA和SSB在干燥综合征(SS)、抗Scl-70抗体在系统性硬化病(PSS)、抗Jo-1抗体在多发性肌炎/皮肤炎(PM/DM)患者中的水平和阳性率都明显升高(P<0.01).结论定量检测CTD患者血清中各种ENA抗体滴度,对CTD疾病的鉴别、诊断和分型具有重要价值.     

自身抗体检测对系统性红斑狼疮的诊断价值分析

目的探讨自身抗体检测对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断价值。方法对121例SLE患者、110例非SLE风湿类疾病患者及58例健康者进行抗核抗体(ANA)、抗双链脱氧核糖核酸(抗ds-DNA)及抗可提取性核抗原(ENA)抗体谱检测,对结果进行统计分析。结果 SLE患者抗ds-DNA、抗SmD1、抗SSA阳性率高于非SLE风湿类疾病患者(P<0.05),所有自身抗体指标阳性率均高于健康者(P<0.05);抗dsDNA、抗SmD1联合检测诊断SLE的约登指数最高,为0.669。结论 ANA检测仅可用于SLE筛查,应与抗ds-DNA、抗ENA抗体谱各指标组合形成不同的检测模式,从而提高SLE诊断特异度和灵敏度,避免漏检。     

定量酶联免疫吸附试验检测各种结缔组织病患者血清中的抗可提取核抗原抗体

目的　定量检测各种结缔组织疾病 (CTD)患者血清中抗可提取核抗原 (ENA)自身抗体滴度 ,并探索其临床意义。方法　自制抗各种ENA单克隆抗体 ,以夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA)定量检测 1 2 8例CTD患者、5 0例非CTD患者及 6 0名健康人血清的各种抗ENA自身抗体滴度。用健康人血清各ENA抗体滴度的均数加上 3倍标准差 ( x +3s)为cutoff值 ,界定各种ENA抗体检出率。结果　与健康对照组和非CTD患者组比较 ,抗Sm抗体在系统性红斑狼疮 (SLE)、抗ul RNP抗体在SLE和混合性结缔组织病 (MCTD)、抗SSA和SSB在干燥综合征 (SS)、抗Scl 70抗体在系统性硬化病 (PSS)、抗Jo 1抗体在多发性肌炎 /皮肤炎 (PM/DM)患者中的水平和阳性率都明显升高 (P <0 .0 1 )。结论　定量检测CTD患者血清中各种ENA抗体滴度 ,对CTD疾病的鉴别、诊断和分型具有重要价值     

免疫印迹法检测在自身免疫性疾病ENA多肽抗体谱及临床意义

目的探讨免疫印迹法检测自身免疫性疾病ENA多肽抗体谱的临床应用价值。方法应用免疫印迹法对系统性红斑狼疮(SLE)、混合性结缔组织病(MCTD)、干燥综合征(SS)、弥漫性硬皮病(PSS)、多发性肌炎/皮肌炎(PM/DM)、类风湿关节炎(RA)等140例自身免疫病患者进行可提取性核抗原(ENA)多肽抗体谱检测。一次性同时检测抗Sm、抗U1RNP、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70、抗JO-1、抗rRNP、抗DM-53、抗RA-54、抗D′E等10种自身抗体。结果6种疾病抗ENA谱阳性率依次为75.6%、90%、70%、50%、42.1%、25%,除出现单项自身抗体阳性外,均出现了两种或两种以上阳性结果,说明患者血清中含有多种自身抗体,ENA系列抗体有相应的疾病抗体谱。结论免疫印迹法检测ENA自身抗体操作简便、省时、特异性好、重复性好、用血量少、不需特殊设备,可同时完成对10种自身抗体的识别和过筛,对提高自身免疫性疾病的诊断水平有很大的帮助。     

系统性红斑狼疮患者血清抗核小体抗体检测的临床意义

目的探索抗核小体抗体(ANuA)在系统性红斑狼疮(SLE)患者发病和诊断中的临床意义。方法采用免疫斑点法,对101例SLE患者、260例其他风湿免疫性疾病患者(包括类风湿关节炎96例,骨关节炎61例,强直性脊柱炎30例等)血清ANuA进行了检测,同时检测抗核抗体(ANA)、抗双链DNA(ds-DNA)抗体、抗可提取核抗原(ENA)抗体等,并结合临床表现及实验室指标进行分析。结果 SLE患者血清ANuA检测的敏感性40.6%(41/101),特异性99.2%(2/260);活动组SLE患者ANuA阳性率(58.1%)明显高于稳定组(26.3%);ANuA阳性的SLE患者红细胞沉降率、ANA滴度、抗ds-DNA量、疾病活动度SLEDAI评分、狼疮肾炎和雷诺现象发生率等明显高于ANuA阴性患者(P<0.05),而补体C3、C4则低于ANuA阴性患者(P<0.01);ANuA检测与抗ds-DNA抗体、抗组蛋白抗体的检测具有一致性,而与其他自身抗体如抗Sm、SSA、心磷脂抗体等无关。结论 AnuA对SLE的诊断的一定敏感性和高度的特异性,它与SLE疾病活动性和狼疮肾炎的发生等相关。     

系统性红斑狼疮89例自身抗体检测结果分析

目的 探讨抗核抗体(ANA)、抗可提取核抗原抗体(ENA)及抗双链DNA抗体(dsDNA)检测在系统性红斑狼疮(SLE)中的阳性率极其联检的意义.方法 ANA和dsDNA采用间接免疫荧光法(IIF法).ENA采用欧蒙印记法分别对89例SLE患者进行检测.结果 SLE各种抗体阳性率不同:ANA、dsDNA和ENA抗体在SLE阳性率分别为81％、51％和70％,ENA中抗核小体抗体(AnuA)、Sm抗体、抗核糖体P蛋白抗体(rRNP)、u1RNP抗体、SSA抗体、SSB抗体、Scl-70抗体、Jo-1抗体、PCNA抗体、抗组蛋白抗体(Hist)抗体阳性率分别为63％、27％、13％、31％、45％、16％、1％、0％、2％和31％;同时SLE活动期患者与非活动期患者AnuA、dsDNA阳性率差异有统计学意义.结论 各项自身抗体在SLE中的阳性率不同,所揭示的临床意义也不同;dsDNA抗体和AnuA抗体与疾病活动性密切相关;自身抗体联合检测大大提高了SLE诊断的敏感性和特异性.     

系统性红斑狼疮40例自身抗体谱检测结果分析

目的探讨抗核抗体(ANA)、抗dsDNA抗体和抗ENA抗体对系统性红斑狼疮(SLE)的诊断价值,及ANA阳性的荧光核型特点。方法 ANA和抗dsDNA抗体采用间接免疫荧光法检测,抗ENA抗体检测采用酶免疫斑点法。结果 40例SLE患者中ANA、抗dsDNA抗体、抗SSA抗体的阳性率分别为95%、55%、50%,ANA阳性的荧光核型以均质型(60%)和斑点型(27.5%)为主。结论 ANA、抗dsDNA抗体是SLE重要的自身抗体,抗ds-DNA抗体与抗ENA抗体联合检测,对SLE的诊断、治疗、预后等均有重要价值。     

间接免疫荧光法及免疫印迹法检测抗核抗体在SLE中的临床价值

目的研究间接免疫荧光法(IIF)筛查的抗核抗体(ANA)和免疫印迹法(IBT)检测的特异性ANA谱在系统性红斑狼疮(SLE)患者的相关性和临床意义。方法对80例SLE患者(SLE组)、80例其他风湿病患者(疾病对照组)及80例健康体检者(健康对照组)分别采用IIF、IBT检测血清中的ANA。结果 SLE组ANA阳性率(96.25%)显著高于疾病对照组(32.50%)和健康对照组(5.00%),差异有统计学意义(P0.05);SLE组荧光模式主要是颗粒型(43例,53.75%)、均质型(16例,20.00%)、胞浆颗粒型(14例,17.50%)。SLE组ANA的阳性率为97.5%,其中抗nRNP/Sm抗体、抗Sm抗体、抗dsDNA抗体、抗核小体抗体、抗组蛋白抗体、抗Rib-P抗体阳性率均显著高于疾病对照组和健康对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论 ANA和ANA谱联合检测对SLE的诊断及治疗具有重要意义。     

自身抗体和补体联合检测对系统性红斑狼疮的诊断价值

目的探讨ANA、抗ds-DNA抗体、抗ENA抗体和补体联合检测在SLE中的诊断价值。方法应用ELISA法测定ANA和抗ds-DNA抗体,应用免疫印迹技术测定ENA,应用散射速率比浊法测定补体C3、C4。结果112例系统性红斑狼疮患者ENA阳性率为96.4%,抗ds-DNA抗体阳性率为72.3%,ENA总阳性率为56.3%,抗ds-DNA抗体和抗ENA抗体联合检测的阳性率为83.9%。40例对照组抗ds-DNA抗体和抗ENA抗体全部为阴性。SLE患者补体C3、C4明显低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。抗ds-DNA抗体和抗ENA抗体均为阴性的SLE患者补体C3、C4亦明显下降,与对照组有显著性差异(P<0.05)。结论多种血清学指标联合检测有助于提高SLE诊断准确率。     

297例自身免疫性疾病ANA和抗ENA抗体联合检测分析

目的分析其中ANA表达阳性而抗ENA抗体表达阴性的样本的检验学特征及意义。方法对297例样本运用间接免疫荧光法检测ANA,生物芯片技术检测抗ENA抗体,并采用双盲法分析ANA阳性标本的荧光核型。从已知的ANA阳性患者血清中筛选其ENA表达均为阴性的患者血清,比对其荧光核型并进行分析。结果 297例临床标本中,ANA阳性标本数为74例,阳性率为24.9%(74/297)。其主要核型为核浆颗粒型(43例,58.1%)、胞浆颗粒型(9例,12.2%)、核浆点型(9例,12.2%)。在74例ANA阳性标本中,抗ENA抗体为阴性的标本数为13例,占阳性标本的17.6%。13例标本中有11例表现为核浆颗粒型,占84.6%;1例表现为胞浆颗粒型,占7.7%;1例表现为核浆点型,占7.7%。结论在ANA阳性同时抗ENA抗体表达为阴性的患者血清中,核浆颗粒型明显高于胞浆颗粒型与核浆点型在ANA标本中的阳性率,并且远大于核浆颗粒型在抗ENA抗体表现为阳性的ANA阳性标本中的比例(52.5%),差异有统计学意义(χ2=5.018,P0.05)。在抗ENA抗体表现为阴性的ANA阳性标本中,荧光核型表现为核浆颗粒型有其自身特有的临床意义有助于筛选发现抗ENA抗体以外的新自身抗体。     

自身免疫性疾病患者可提取核抗原与体液免疫的关系

目的探讨可提取核抗原(ENA)抗体谱的临床意义及其与体液免疫指标的关系。方法对70例自身免疫性疾病患者血清样本,采用欧蒙斑点法检测抗ENA抗体,采用散射比浊法检测免疫球蛋白和补体。结果抗ENA抗体在自身免疫性疾病中有较高的检出率,其中抗Sm、抗dsDNA在系统性红斑狼疮(SLE)的阳性率为34.0%和32.0%,与健康对照组和抗体阴性组比较,抗ENA抗体阳性血清中IgG、Ig M及IgA增高,分别为(21.4±14.8)、(1.8±0.9)、(2.58±0.34)g/L,而C3、C4水平下降,为(1.10±0.35)、(0.23±0.13)g/L。结论抗ENA抗体阳性者体液免疫应答增加。     

ENA检测对诊断系统性红斑狼疮的应用及临床价值探讨

目的探讨ENA检测对诊断系统性红斑狼疮的临床应用及意义。方法采用免疫印迹技术检测抗ENA抗体对45例SLE患者和40例健康对照组进行了检测,并对结果进行回顾性分析。结果45例SLE患者检测ENA结果为抗Sm抗体阳性率为31.11%(14/45)、抗U1RNP抗体阳性率为8.89%(4/45)、抗SSA抗体阳性率为24.44%(11/45)、抗SSB抗体阳性率为6.67%(3/45)、抗核糖体抗体阳性率为11.11%(5/45)、抗RO-60抗体阳性率为46.67%(21/45)为最高。抗Scl-70抗体和Jo-1抗体没有检测到,其中SLE患者检测抗Sm抗体、抗SSA抗体和抗RO-60抗体与健康对照组比较,经χ2检验,P<0.01均有显著性差异。结论抗ENA多肽抗体谱检测灵敏度高、结果可靠、方法简便、易于推广,对SLE的诊断有重要的临床价值。