胰腺癌相关基因研究进展

胰腺癌是一种预后较差的消化系统恶性肿瘤,其发生发展过程是原癌基因、抑癌基因和DNA修复基因共同作用的结果。本文主要就近年来研究较多的与胰腺癌相关基因作一复习,并简述其与胰腺癌生物学特性和临床治疗的关系。     

胰腺癌相关基因的研究进展

<正>胰腺癌高度恶性,在西方国家中成为第四大消化道肿瘤的死因,在美国更是位列第二位,国内胰腺癌发病率也有逐渐增高的趋势。有研究显示,胰腺癌在确诊后5年生存率小于5%[1]。目前医学界对胰腺癌相关基因已经有了深入的研究,笔者就与胰腺癌发生、发展相关的癌基因进行了综述。1 Ras基因Ras基因首先在鼠肉瘤病毒(Ha2MSV)和Kirsten鼠肉瘤病毒(Ki2MSV)的子代基因中被发现,目前认为Ras基     

癌基因C-K-ras和抑癌基因Rb突变与胰腺癌发生的关系

目的:探讨癌基因C-K-ras和抑癌基因Rb点突变与胰腺癌发生的关系.方法:选择经病理学证实的原发性胰腺癌19例、胰腺癌恶性淋巴瘤1例、胰腺多形细胞癌2例和慢性胰腺炎5例的石蜡包埋组织样本,采用PCR-SSP法检测C-K-ras 12位密码子和Rb第21位外显子的点突变情况.结果:19例原发性胰腺癌石蜡包埋块样本中有7例C-K-ras 12密码子发生了点突变,占36.8%,其中1例为两种突变形式(GAT、GTT);有9例Rb第21位外显子发生了点突变,占47.3%;而在胰腺癌恶性淋巴瘤、胰腺多形细胞癌和慢性胰腺炎样本中均未检出上述突变情况.结论:C-K-ras 12位密码子和Rb第21外显子点突变与胰腺癌的发生有一定的相关性.     

小干扰RNA阻断MBD1基因对胰腺癌抑癌基因表达的影响

目的 观察阻断MBD1基因对胰腺癌抑癌基因表达的影响,探讨MBD1基因在胰腺癌发生发展中的作用.方法 设计并合成2条MBD1小干扰RNA(siRNA)序列,克隆进入pGCsi-U6/Neo/绿色荧光蛋白(GFP)构建重组质粒.重组质粒和空质粒转染人胰腺癌细胞系BxPC-3,将3组细胞(转染MBD1-siRNA重组质粒组、转染空质粒组和未转染组)接种于裸鼠,8周后取移植瘤行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MBD1基因和甲基化相关抑癌基因的表达情况.结果 成功构建MBD1-siRNA重组质粒并稳定转染胰腺癌细胞系BxPC-3,转染组中MBD1基因表达明显低于空质粒组和未转染组,而CDH1、RASSF1A、TIMP3、P14ARF、Rb等甲基化相关抑癌基因的mRNA水平转染组(179.7±8.1、155.6 4±10.0、256.7 ±15.7、199.0±7.9、210.1 q±9.4)要高于空质粒组(21.0±6.8、22.0±2.7、99.4±10.3、86.0±5.4、15.0 ±4.9)和未转染组(11.4±6.0、15.3±1.9、110.7±14.1、74.3±4.8、17.4±7.8,均P<0.05).结论 通过RNA干扰技术,可降低MBD1在胰腺癌中的表达,上调抑癌基因的转录,MBD1介导的转录抑制作用可能在胰腺癌的发生发展中起重要作用.     

Survivin基因在胰腺癌中的表达及与K-ras、c-myc和P53蛋白表达的关系

目的 探讨Survivin基因在胰腺癌中的表达及与k-ras、c-myc和P53蛋白表达的相互关系。方法 RT-PCR法检测62例胰腺癌、20例慢性胰腺炎和12例癌旁正常胰腺组织Survivin mRNA表达，免疫组织化学法检测K-ras、c-myc和P53蛋白表达，并将结果进行相关分析。结果 Survivin mRNA在胰腺癌组织中表达率为74．2％，在慢性胰腺炎及正常胰腺组织中不表达（P〈0.01）。Survivin基因表达与胰腺癌分化程度、临床分期及淋巴结转移无相关性（P〉0．05）。Survivin基因表达与c-myc、P53蛋白表达显著相关，与K-ras蛋白表达未见明显相关。结论Survvin基因在胰腺癌中表达上调，提示该基因对胰腺癌的发生和发展起重要作用；Survivin基因有望成为胰腺癌基因治疗的新靶点。抑癌基NP53的失活和癌基因c-myc的上调与Survivin基因的表达可能在胰腺癌的发生中起协同作用；Survivin和k-ras基因则可能通过各自不同的机制参与胰腺癌的发病机制。     

胰腺癌基因改变的研究进展

大量研究表明人类癌症是一种多基因病,与胰腺癌发生有关的基因改变主要包括K-ras、c-myc、c-fos、c-erbB-2等癌基因;p53、p16、DPC4/SMAD4、DCC等抑癌基因;EGF、FGF、HGF、PDGF、VEGF、TGF-β等生长因子及其受体.常见为K-ras、p53、p16、DPC基因改变,但胰腺癌的发生是一多步骤的现象,基因改变的积累至关重要.     

人胰腺癌组织中Cyclin D1基因表达

胰腺癌是常见的、预后最差的恶性肿瘤之一,其发生、发展与癌基因密切相关。目的　研究癌基因在胰腺癌发生发展中的作用,为胰腺癌的诊断、评估预后和指导治疗提供依据。方法　对21例胰腺癌手术切除标本和10例非肿瘤性胰腺组织进行免疫组化检测,所有检测均采用Envision二步法。结果　(1)21例胰腺癌中CyclinD1的表达率为76.2%(16/21)。与非肿瘤胰腺组织中的表达率相比,有显著差异(P<0.05)。(2)CyclinD1的表达与胰腺癌的病理分级、分期无关。结论　CyclinD1在胰腺癌发生、发展中发挥着作用。CyclinD1蛋白产物的检测有助于胰腺癌的诊断     

人类Latexin基因与恶性肿瘤相关性的研究进展

抑癌基因的表达降低以及癌基因的表达增加,激活致癌信号通路,与恶性肿瘤的发生、转移关系密切。人类Latexin(LXN)是目前在哺乳动物体内发现的唯一的羧肽酶A(CPA)抑制剂,其影响炎症发展,促进恶性肿瘤细胞凋亡,抑制恶性肿瘤细胞增殖。本文通过对近年来LXN在白血病、胃癌、食管癌、胰腺癌、肝癌、黑色素瘤等恶性肿瘤中相关性的研究进展进行综述,为今后恶性肿瘤的分子靶向治疗提供有价值的参考。     

胰腺癌相关新抑癌基因DPC4的初探

目的：通过对良恶性胰腺组织、胰腺癌细胞的DPC4(Delected in Pancreatic Cancer，Locus4)基因的9个外显子变化的检测，以探索胰腺癌早期诊断的新途径。方法：应用聚合酶链反应(PCR)、复合PCR(Multiplex PCR)、直接基因测序的方法，检测19例胰腺良、恶性组织物、2例正常胰腺组织、3个胰腺癌细胞株DPCA基因的纯合缺失及突变。结果：13例胰腺癌中11例DPCA的9个外显子PCR成功。2例未扩增出产物。经复合PCR证实为DPCA的纯合缺失，缺失率为15．4％(2／13)；3个胰腺癌细胞株中有1例纯合缺失(1／3)。PCR产物直接基因测序示：11例胰腺癌组织中有2例DPCA的第5／6外显子有1个碱基突变(A→T)，突变率18．2％(2／11)，2个胰腺癌细胞株中有1个在同样部位发生碱基突变(1／2)，2例胰岛细胞瘤、2例慢性胰腺炎、2例正常胰腺组织既无DPCA纯合缺失、也未检测到基因突变。结论：DPC4基因可能是胰腺癌候选抑癌基因之一。分析DPCA的变化有助于胰腺癌的诊断。     

鼻咽癌基因研究进展

肿瘤是一种严重危害人类健康的疾病，对于肿瘤癌基因和抑癌基因的研究具有重大意义，其中与鼻咽癌相关的癌基因以及候选瘤基因有LMP1基因、bcl—2基因、ras基因、c—erbB—基因、Tx基因、NAG23／FBXO30基因等，抑癌基因及候选抑瘤基因有p53、p16基因、p130／Rb2基因、nm23基因、NAG7基因、NAG11基因、NAG12基因、UBAP1基因、YH1基因、NGX6基因等，这些基因在鼻咽癌发生、发展过程中有着重要作用。     

人bcl-xL基因在转基因小鼠中的整合和表达

目的研究人bcl—xL基因在显微注射所产生的子代小鼠中的整合、转录和表达情况。方法采用PCR和Southern blot方法检测人bcl—xL基因在小鼠体内的整合；RT—PCR方法检测它们的bcl—xL mRNA水平；用Western blot及免疫组化法检测目的蛋白的表达情况。结果在显微注射所产生的转基因小鼠中，有4只为Southern blot检测阳性，并且在这4只小鼠及其子代中均检测到人bcl—xL的mRNA和过表达的目的蛋白。结论由于在这些小鼠中既有外源基因的整合，又有其mRNA和蛋白质的表达，所以，它们是真正的转基因动物。     

Quox-1基因在人类白血病骨髓细胞中的表达

Ｑｕｏｘ－１是从５ｄ胚龄鹌鹑的ｃＤＮＡ文库中克隆的同源盒基因,属于ＣｌａｓｓⅠＨｏｘ基因家族的特别成员,至今未分离出其人类同源基因。用免疫细胞化学技术（ＳＰ法）检测了４２例人白血病患者骨髓细胞的Ｑｕｏｘ－１表达。结果发现１０例急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）全部阳性,染色部位在细胞核,而在慢性髓性白血病（ＣＭＬ）、慢性淋巴细胞性白血病（ＣＬＬ）、急性髓细胞白血病（ＡＭＬ,包括Ｍ１～Ｍ７）中表达低甚至不表达,这为进一步从相应肿瘤中筛选、克隆Ｑｕｏｘ－１的人类同源基因提供了可能的肿瘤模型,并为临床诊断ＡＬＬ提供了一种参考指标。     

神经系统疾病的基因治疗——现状和展望

自1990年对一例严重的混合型免疫缺陷儿童应用基因治疗以来,有关人类疾病基因治疗的文献日益增多。从医学发展史的角度来看,有人认为基因治疗是继公共卫生的预防传染病、外科手术的麻醉,以及疫苗和抗生素应用之后的又一次革命性措施。虽然有关基因治疗的实验性研究不断增多,但是在临床应用上,特别是神经系统疾病方面却还没有成功的报告, 本文简要介绍了作为基囚转移载体的重组逆转录病毒、DNA病毒,以及各种基因修饰细胞及其相关基因治疗技术,并对神经系统基因治疗的现状和展望做了总结和分析。     

基因重组构建MDR基因表达载体及其表达研究

利用基因重组技术，成功地构建了ＭＤＲ Ｉ基因片断的表达载体ｐＧＥ－Ｈｍｄｒ－１，用氯化钙方法转化Ｅ．ｃｏｌｉ ＨＢ１０１，挑选２０个克隆扩增培养，经提质粒，酶切，Ａｇａｒｏｓｅ电泳检测证实：其中４个克隆含有重组质粒，选用含重组质粒载体的菌株扩增培养，经ＩＰＴＧ诱导，超声波破碎，抽提蛋白，ＧＳＨ－ａｇａｒｏｓｅ亲和层析纯化，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳检测证实：此重组载体已表达所需的目的蛋白（ＧＳＴ－ｍｄｒ     

BRCA2基因与RAD51基因的常见多态位点与乳腺癌的关系研究

目的 研究BRCA2基因的N372H和RAD51基因的135G/C位点的多态性与乳腺癌的关系.方法 应用变性高效液相色谱和限制酶片段长度多态分析技术,在71例乳腺癌患者和85例正常女性中,对上述两个多态位点的基因频率和基因型频率进行调查和比较.结果 在乳腺癌患者中.BRCA2基因的N372H位点的基因型HH的频率显著高于正常对照组(9.9%vs 2.4%X2=4.010,p=0.045),但RAD51基因的135G/C位点的多态分布在两组人群中的差异无统计学意义.结论 BRCA2基因的N372H位点的基因型HH与乳腺癌相关,可能是中国人群乳腺癌的风险遗传因子.     

P53 Gene Mutations in Non-Hodgkin's Lymphoma

ＳｏｆａｒＰ５３ｇｅｎｅｉｓｓｔｉｌｔｈｅｍｏｓｔｉｍｐｏｒ－ｔａｎｔｇｅｎｅｅｖｅｒｄｉｓｃｏｖｅｒｅｄｔｏｓｕｐｐｒｅｓｃａｎ－ｃｅｒ．Ｉｔｉｓｏｎｈｕｍａｎｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ１７Ｐ１３．１,ｅｎｃｏｄｅｓ５３ｋｕｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔ...     

荧光 MGB探针实时 PCR检测经典型苯丙酮尿症的基因突变

【目的】探讨荧光MGB探针实时PCR技术检测经典型苯丙酮尿症的基因突变。【方法】运用荧光MGB探针实时PCR检测经典型苯丙酮尿症33例,一级亲属43例,正常对照30例。检出R243Q突变的PCR标本进行测序验证。【结果】发现11例PKU具有R243Q突变,突变频率为33%,其中突变纯合子4例,突变杂合子7例,一级亲属检出R243Q杂合子突变9例,正常人未发现R243Q突变。所有突变均经测序证实。【结论】PAH基因第7外显子的R243Q点突变在中国PKU患者中有较高的突变率;荧光MGB探针实时PCR是PKU的基因诊断良好技术平台。     

先天性无虹膜与PAX6基因相关性的研究

先天性无虹膜是一种临床罕见的眼部发育性疾病,而PAX6基因被证明是先天性无虹膜疾病的致病基因。本文综述了先天性无虹膜疾病及PAX6基因及其表达产物的结构、功能和在动物眼球的进化、发育过程中的作用,着重总结了先天性无虹膜和PAX6基因相关性研究的进展和成果。     

多聚乙烯亚胺介导基因转染的试验研究

目的确定多聚乙烯亚胺最佳的转染条件，评价PEI替代其它转染试剂的可能性。方法以MTT法检测PEI的细胞毒性。以PEI为载体，在不同的N／P比值的条件下，将绿色荧光蛋白基因和荧光素酶基因分别导入小鼠骨肉瘤细胞，以荧光显微镜酶检测系统检测其转染效率。结果PEI的细胞毒性较低。当N／P比值为8时，PEI的转染效率最高。结论PEI是一种价格低廉、低毒性、高效率的基因转染载体，可以广泛应用于体内外基因治疗。     

基因工程与医学

目的：探讨基因工程研究与医学的关系。方法：对与医学有关的基因工程研究报告和最新成果,加以分析。结果：基因药物,基因诊断和治疗已在临床上取得一定应用。结论：基因工程研究促进医学的发展。