血吸虫重组BCG—Sj26GST疫苗接种BALB／c鼠后肝脏病？…

血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗是一种新型疫苗。本文用１０＾６克隆形成单位（Ｃｏｌｏｎｙ－ｆｒｏｍｉｎｇ ｕｎｉｔ,ＣＦＵ）和１０＾８ＣＦＵ疫苗皮下接种ＢＡＬＢ／ｃ鼠,接种后８ｗｋ用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后６ｗｋ剖杀小鼠,分离肝脏,观察其病理学变化,同时设ＰＢＳ对照组。光镜下观察发现肝脏病变明显减轻,肉芽肿数目少,体积小;电镜观察发现肝组织病变轻微,大部分肝细胞变性,肝纤维组织增生,     

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫小鼠保护力的观察

目的探讨日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗免疫鼠后对尾蚴攻击感染的保护作用。方法采用10^6和10^8CFU疫苗皮下接种免疫BALB／C鼠，免疫后8周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染，感染后6周剖杀小鼠，计算减虫率和减卵率，观察肝脏病理变化，测量虫卵肉芽肿周长和面积，测定血清中CAg、IgG及其亚类水平，同时设有PBS和BCG对照。结果疫苗接种组的减虫率为16．64％-46．20％，减卵率为55．75％-60．50％，肝组织病变明显减轻，虫卵肉芽肿的平均周长和平均面积显著减少，血清IgG和IgG2a水平明显升高，10^8CFU组CAg升高。结论日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗是一种新型比较理想的疫苗，值得进一步深入研究。     

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠T淋巴细胞亚群变化的研究

目的研究血吸虫重组BCG－Sj26GST疫苗对小鼠T淋巴细胞亚群的影响。方法实验一采用106和108CFU疫苗皮下接种BALB／c小鼠,接种后8WK用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染6wk剖杀小鼠,取脾制备脾细胞,同时设有PBS对照组。实验二分别用106CFU疫苗皮下和静脉注射免疫小鼠,分别于免疫后0、4、8、10、14和16wk各剖杀4只,分离脾脏,用FACsort流式细胞仪分析T细胞CD4＋和CD8＋亚群百分比。结果实验一疫苗免疫络小鼠经尾蚴攻击后脾T细胞CD4＋亚群明显升高,CD8＋亚群缓慢增加。实验二动态观察发现在皮下和静脉注射组,CD4＋亚群分别于免疫后10和18WK显著增加;皮下注射组CD8＋亚群在整个观察期间均无明显变化,静脉注射组则于免疫后4～16wk有轻度增加。结论T细胞CD4＋亚群可能在疫苗保护性免疫中起重要作用。     

血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗对小鼠保护性免疫力的影响因素

目的 探讨血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗对小鼠保护性免疫力的影响因素。方法 将实验动物随机分为 ,以免疫后不同攻击感染时间,不同免疫途径和不同免疫粢九为主要参数,。结果 各实验组经为２９．６９％～３９．７４％,各实验组减虫率和减卵率与对照组相比,差异均有显著意义（Ｐ〈０．０５）或极显著意义（Ｐ〈０．０１）。结论 ８周,ＳＣＩ组可诱导最佳的保护性免疫效果。     

日本血吸虫重组BCG-Sj26GST疫苗诱导小鼠脾细胞TNF-α和IL-1变化的研究

目的：研究日本血吸虫重组BCG－Sj26GST疫苗对小鼠脾细胞产生TNF－α和IL－1的影响。方法：实验1分别采用10 6CFU和10 8CFU疫苗皮下免疫BALB／C鼠,免疫后8W用日本血吸虫尾螺进行攻击感染,感染后66W剖杀小鼠,同时设有PBS对照组,实验2用10 6CFU疫苗皮下和注射分别免疫小鼠,于免疫后,0,4,8,10,14和16W各剖杀4只,分离脾脏,用Sj26或丝裂原刺激脾细胞,用ELISA法检测脾细胞上清液中TNFα水平,用成纤维细胞增殖法检测IL－1于免疫后4－8W达最高水平,静脉注射组TNF－α和IL－1分别于免疫后16w和4－8W达较高水平。结论：日本血吸虫重组BCG－Sj26GST疫苗促进小鼠脾细胞较早分泌TNF－α和IL－1,它们在血吸虫保护免疫中起重要作用。αααα     

多糖佐剂FQ_2对日本血吸虫rBCG-Sj26GST疫苗增效作用及其机理的初步探讨

为探讨多糖佐剂FQ2 对血吸虫疫苗保护性免疫力的增效作用及其机理 ,采用 1 0 8CFU日本血吸虫重组BCG -Sj2 6GST疫苗分别与 5 %、1 0 %、2 0 %浓度的佐剂FQ2 混匀皮下接种BALB/c小鼠 ,同时设对照组。接种后第 8W以日本血吸虫尾蚴攻击感染 ,感染后 6W剖杀小鼠 ,计算减虫率 ,测定血清中特异抗体水平和胸腺T淋巴细胞及其亚群。结果实验组获得了 33 49% - 4 0 50 %的减虫率 ,与对照组相比 ,胸腺细胞总数、胸腺活性细胞率、CD8+ 细胞率、CD4 + 细胞率均显著升高 ,尤其是疫苗 +1 0 %佐剂 ,疫苗 +2 0 %佐剂组差别有非常显著意义 (P <0 0 1 )。而各实验组IgG抗体水平无统计学差别。提示多糖佐剂FQ2 对日本血吸虫rBCG -Sj2 6GST疫苗有一定的增效作用 ,其免疫机制可能以细胞免疫为主     

日本血吸虫重组BCG—Sj26GST疫苗诱导小鼠血清IgG及其亚类免疫应答的研究

目的 研究日本血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗接种小鼠,尾蚴攻击后诱导的血清ＩｇＧ及其亚类变化。方法 采用１０＾６ＣＦＵ和１０＾８ＣＦＵ疫苗皮下接种ＢＡＬＢ／Ｃ鼠,接种后８周用日本血吸虫尾蚴进行攻击感染,感染后６周扑杀小鼠,收集血清,用常规ＥＬＩＳＡ法检测ＩｇＧ及其亚类。结果 疫苗免疫后８周血清ＩｇＧ水平明显升高;疫苗免疫,尾蚴攻击后６周血清ＩｇＧ２ａ显著培养,但ＩｇＧ１和ＩｇＧ２ｂ无明显变化。结论 日本血吸虫重组ＢＣＧ－Ｓｊ２６ＧＳＴ疫苗可能诱导宿 主产生高水平的ＩｇＧ和ＩｇＧ２ａ,从而提高其抗血吸虫感染的保护性免疫力。     

日本血吸虫重组Bb（pGEX—Sj26GST）疫苗免疫BALB／c小鼠脾细胞动态观察

目的观察日本血吸虫重组Bb（pGEX—Sj26GST）疫苗免疫BALB／c小鼠后脾细胞增殖、亚群和凋亡的动态变化。方法将疫苗分别经皮下注射（SC组）和鼻腔粘膜接种（IN组）免疫BALB／c鼠,在免疫后O～22周每2周每组随机剖杀4只小鼠,无菌取脾,制成单个悬浮脾细胞,用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测脾细胞增殖水平、用流式细胞仪（FACsort）检测T细胞亚群和脾细胞凋亡状况。结果未刺激及sjAWA刺激时SC组小鼠脾细胞增值水平于免疫后4～20周明显升高,ConA刺激时于4～18周显著升高,均于免疫后8周达最高水平;IN组脾细胞增殖水平原液组、SjAwA组和ConA组分别于2～18周、2～10周及14～18周、2～8周和12～18周显著升高,均于免疫后4周达最大值（P〈0．01或P〈0．05）。SC组和IN组CD＋T细胞分别于免疫后2～14周、2周及6～16周升高,并于8周达峰值（P〈0．01或P〈0．05）;两组CD＋T细胞均于2～20周轻微升高,分别于8周和6周达较高值（P〉0．05）。未刺激和ConA刺激时SC组脾细胞凋亡水平分别于免疫后2～4周、2～6周升高显著,均于免疫后2周达最大值（P〈O．01或P〈O．05）;IN组均于4周显著升高并达峰值（P〈O．01）。结论日本血吸虫重组Bb（pGEX-Sj26GST）疫苗可诱导脾细胞的增殖,增加cD＋T细胞的数目,抑制脾细胞的凋亡而发挥保护性免疫应答。     

日本血吸虫（中国大陆株）26kDa基因重组蛋白（rSjc26GST）对虫卵？…

用日本血吸虫虫卵肉芽肿的小鼠肺模型进行研究。ＩＣＲ雄性小鼠３２只,分成免疫组和佐剂对照组各１６只,免疫组小鼠经rＳjc２６ＧＳＴ免疫。免疫结束后第５天两组小鼠均由 尾静脉注射新鲜日本血吸虫虫卵悬液０．２ml（内含活卵１５００－２０００个）,于注卵后第８天、１６天和２１天分批剖杀小鼠,观察肺部形成的虫卵肉芽肿病变。结果发现免疫鼠肺内肉芽肿大小受到明显抑制,免疫后第８天、１６天、２１天肺肉芽肿平均直径分别为     

日本血吸虫中国大陆株 26kDa基因重组蛋白(rSjc26GST)对宿主肝肉芽肿形成的影响

目的探讨日本血吸虫中国大陆株２６ｋＤａ基因重组蛋白对宿主肝虫卵肉芽肿形成的影响。方法将 ＩＣＲ雄性小鼠分成 ２组,１组经 ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫,另 １组为对照。免疫结束后第 ５天,２组小鼠均感染日本血吸虫尾蚴 ４０条±１条／鼠,于 ６周后剖杀,取肝组织进行观察。结果免疫组与对照组肝表面虫卵结节数分别为５．６９±１．１９和２０．４７±１．８３,前者比后者减少７２．２０％;肝肉芽肿平均直径免疫组为 １４０．００ μｍ±３８．２４ μｍ,与对照组２４５．７２ μｍ±３２．７３ μｍ相比,减少４３．０２％;同时免疫组小鼠体内特异性抗ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ抗体水平明显高于对照组。结论ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ对日本血吸虫具有明显的抗病效果。     

日本血吸虫26 kDa基因重组蛋白免疫小鼠抗体内血吸虫生殖的作用

目的：探讨日本血吸虫２６ｋＤａ基因重组蛋白（ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ）抗日本血吸虫生殖作用及其免疫机制。方法：小鼠经ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫,攻击感染日本血吸虫尾蚴４０±１条,于６ｗｋ后解剖检虫体,计算虫数与肝组织和脾组织内的虫卵数,并对虫体主要生殖器官作透射电镜超微结构的观察。结果：证明ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ具有明确的抗生殖免疫作用。与对照组相比,免疫鼠减虫率为３０．０％,肝组织和脾组织内虫卵减少率分别为５７．１％与７９．９％,透射电镜观察显示免疫鼠体内雌虫的卵黄腺及雄虫的睾丸组织均产生不同程度的抑制作用,主要表现为卵黄细胞胞质中卵黄球、卵黄滴、脂滴和睾丸组织中精细胞、支持细胞胞质中的脂滴数量均有明显减少。结论：ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ有抗日本血吸虫生殖的作用,使虫体生殖器官受到损害     

日本血吸虫(中国大陆株)26kDa基因重组蛋白(rSjc26GST)对虫卵肉芽肿形成的影响

用日本血吸虫虫卵肉芽肿的小鼠肺模型进行研究。ＩＣＲ雄性小鼠３２只,分成免疫组和佐剂对照组各１６只,免疫组小鼠经ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ免疫。免疫结束后第５天两组小鼠均由尾静脉注射新鲜日本血吸虫虫卵悬液０．２ｍｌ（内含活卵１５００－２０００个）,于注卵后第８天、１６天和２１天分批剖杀小鼠,观察肺部形成的虫卵肉芽肿病变。结果发现免疫鼠肺内肉芽肿大小受到明显抑制,免疫后第８天、１６天、２１天肺肉芽肿平均直径分别为１００．００±１２．６μｍ,１０６．４３±１１．４μｍ,１０５．７０±１１．８μｍ,对照鼠在相应时间分别为１４１．９０±２３．４μｍ,１７６．６７±３４．９μｍ,１９９．５３±２１．７μｍ,抑制率从８天的２９．５％、１６天的３９．８％到２１天的４７．０％逐渐增加,并且免疫组肺相对湿重也较佐剂对照组有所减少,证实ｒＳｊｃ２６ＧＳＴ具有明确的抗肉芽肿病变效应。     

谷胱甘肽-S-转移酶多克隆抗体免疫金测定法检测日本血吸虫循环抗原的研究

目的探讨谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒＳｊ２６ＧＳＴ）多克隆抗体诊断日本血吸虫病的应用价值。方法以抗ｒＳｊ２６ＧＳＴ多克隆抗体力捕获并检测抗体，建立双抗体夹心斑点免疫金测定技术，用于检测日本血吸虫循环抗原，并以斑点免疫金测定法和ＥＬＩＳＡ检测抗体作对照。结果３种方法检测急性血吸虫病的敏感性均为１００％；对慢性血吸虫病的敏感性分别为７６．４％、９８．１％和９６．２％；特异性分别为９５．０％、９８．０％和９６．０％。结论ｒＳｊ２６ＧＳＴ抗原对日本血吸虫病具有诊断价值，可望有较好的应用前景。     

恶性疟原虫重组质粒DNA接种诱导BALB/c小鼠的免疫应答

目的：观察重组质粒DNA直接免疫接种诱导BALB／c小鼠的免疫应答水平，为恶性疟原虫DNA疫苗在动物和人体的应用提供依据。方法：构建编码多价保护性抗原的重组质粒pcDNA3－Pf8，PCR法检测免疫鼠的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、脾脏和肺组织中pcDNA3－Pf 8，ELISA、T淋巴细胞转化试验、体外抑制试验观察其诱导的体液免疫及细胞免疫水平。结果：用PCR法从上述组织中均检测到pcDNA3－Pf8，ELISA法测得免疫鼠血清的特异性抗体滴度达12560，淋巴细胞转化试验显示恶性疟原虫可溶性抗原能特异性地剌激免疫鼠脾细胞增殖，免疫血清在体外还能抑制恶性疟红内期疟原虫的生长、发育。结论：编码恶性疟原虫多价保护性抗原的重组质粒pcDNA 3-Pf 8 直接免疫接种, 能特异性地剌激BALB/c 小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答, 其免疫血清在体外对疟原虫生长发育具有明显抑制作用。     

弓形虫DNA疫苗免疫鼠体内重组质粒分布的探讨

目的 通过肌注弓形虫ＤＮＡ疫苗质粒ｐＢＫ－Ｐ３０、ｐＢＫ－Ｐ２２直接免疫小鼠,观察重组质粒在鼠体内不同器官组织的分布。方法 疫苗ｐＢＫ－Ｐ３０、ｐＢＫ－Ｐ２２经肌注免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠,５周和１０周后,分别取免疫鼠的肺、心脏、肝脏、脾、肌肉、肾脏及血液,抽提组织ＤＮＡ,并以此为模板进行ＰＣＲ扩增,扩增的产物经琼脂糖凝胶电泳分析。结果 免疫后５周,ｐＢＫ－Ｐ３０免疫组的上述各器官组织ＤＮＡ中均扩增出Ｐ     

恶性疟原虫DNA疫苗在小鼠组织中的表达

目的　探讨恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株环子孢子蛋白 (CSP) DNA疫苗在小鼠组织中的表达。　方法　用盐酸布比卡因对 BAL B/ c小鼠的骨骼肌进行了预处理 ,然后在同一部位注射重组真核表达质粒 p BK/ CSP。分别在免疫后 4周和 8周应用间接免疫酶法检测免疫小鼠注射部位肌肉组织中重组蛋白 CSP的表达。　结果　小鼠经 DNA疫苗免疫 4周和 8周后肌肉组织及其周围结缔组织均呈现特异性阳性反应。　结论　疟疾 DNA疫苗免疫小鼠后 ,肌肉组织及其周围结缔组织有重组 CSP蛋白的表达。