耐万古霉素金黄色葡萄球菌生物学特性改变与细菌鉴定

目的 了解金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药后生物学特性的变化及其对临床细菌鉴定结果的影响。方法 使用万古霉素体外诱导试验将1株临床分离的异质性万古霉素耐药金黄色葡萄球菌（h-VRSA）逐渐诱导为万古霉素中介耐药金黄色葡萄球菌（VISA）,观察原代菌和诱导菌的生长特征和生化反应,并使用VITEK32和MicroscanWalkAway40进行细菌鉴定。结果 h-VRSA和VISA的主要生物学特性改变为：菌落大小不等、色素由淡黄色变成灰白色、溶血环消失,血浆凝固酶、甘露醇、甘露糖等生化反应由阳性转为阴性;对杆菌肽由敏感变为耐药;仪器鉴定结果为溶血葡萄球菌或模仿葡萄球菌。结论 金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药后可表现出培养特征、生化反应等一系列表型特征的改变,并可导致临床细菌鉴定结果错误。     

基于免疫显色法分析137例儿童耐碳青霉烯革兰阴性菌的碳青霉烯酶表型

目的 对免疫显色法与PCR检测耐碳青霉烯酶表型的结果进行对比分析;分析2019-2020年住院患儿耐碳青霉烯类革兰阴性菌的耐药性,为临床合理使用抗菌药物及控制院内感染提供参考。方法 选用VITEK MS和VITEK 2 Compact全自动微生物质谱检测系统和全自动微生物鉴定仪对肠杆菌科细菌及非发酵菌开展鉴定和药敏试验;收集2019-2020年分离的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)75株,非发酵菌62株;选用PCR和免疫显色法分别检测这137株细菌的耐碳青霉烯酶表型。结果 肠杆菌科细菌以blaKPC和blaNDM表型为主;非发酵菌中,鲍曼不动杆菌以blaNDM表型为主,铜绿假单胞菌以blaKPC为主。免疫显色法与PCR法检测结果比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 本院住院患儿分离的肠杆科细菌和非发酵菌的耐碳青霉烯酶表型有多种,免疫显色法检测结果与PCR检测结果一致。     

2009年深圳武警医院细菌耐药性监测

目的了解2009年临床分离菌的分布和耐药特征,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用纸片扩散法进行抗菌药物敏感性试验并对肠杆菌科细菌进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)检测,按美国临床实验室标准化协会2006年标准判定药敏结果,用WHONET 5.4软件进行数据分析。结果 2009年该院共分离细菌134株,其中革兰阴性杆菌106株,占79.1%,革兰阳性球菌28株,占20.9%。大肠埃希菌和溶血葡萄球菌分别占革兰阴性杆菌和革兰阳性球菌的首位。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率分别为37.5%和21.4%。葡萄球菌属中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为50.0%和91.3%。从肠球菌属中检出1株粪肠球菌,为耐高浓度氨基糖苷类。结论从该院患者分离的细菌耐药性比较严重,应该加强监测,指导临床合理使用抗菌药物。     

一株栖稻假单胞菌海南变种的发现与鉴定

目的:鉴定从肺结核患者血液中分离出的病原菌的生物学性状并鉴定至种.方法:按常规鉴定方法进行细菌表型特征的鉴定;提取细菌基因组DNA,使用16S rDNA通用引物,做16S rDNA PCR扩增及序列测定.结果:所分离的病原菌的表型特征基本符合栖稻假单胞菌鉴定标准,但也有诸多不同之处,故称为栖稻假单胞菌海南变种;经16S rDNA扩增及测序结果在NCBI上比对结果为栖稻假单胞菌.结论:海南省首次发现栖稻假单胞菌海南变种引起的菌血症,应引起医务人员及有关部门的重视,变异的核苷酸序列定位,有待进一步研究.     

尿路感染的病原学调查及耐药性分析

目的 分析本地区尿路感染的病原菌分布及耐药情况,指导临床合理用药。方法 对本院2000年1月~2004年5月间尿培养分离出的129株细菌的种属分布及耐药性进行分析。结果 大肠埃希氏菌为尿路感染的常见病原菌.占34.1％,其次为肠球菌属,葡萄球菌属、肠杆菌属、克雷伯菌属等。药敏试验结果显示除肠杆菌科细菌对亚安培南,肠球菌属和葡萄球菌属细菌对万古霉素100％的敏感以外,对其他抗菌药都有较高的耐药性。结论.肠杆菌科细菌、肠球菌属和葡萄球菌属细菌是尿路感染的主要致病菌,临床医生应注意其耐药性变化,合理使用抗菌药物。     

某医院2013-2017年细菌耐药性趋势分析

目的分析医院2013-2017年临床常见分离菌对抗菌药物的耐药特点及变迁趋势,为临床合理使用抗菌药物提供参考依据。方法采用VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定仪进行菌科鉴定,纸片扩散(K-B)法测定细菌对受试抗菌药物的敏感性,使用WHONET 5.6软件收集耐药性数据,分析临床常见分离菌的耐药特点。结果2013-2017年大肠埃希菌占比始终位于首位,鲍曼不动杆菌占比明显下降,肺炎克雷伯菌、屎肠球菌和粪肠球菌占比有所上升。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌耐药率主要呈下降趋势,肠球菌耐药率处于波动中;其中大肠埃希菌耐药率普遍高于肺炎克雷伯菌,鲍曼不动杆菌耐药率普遍高于铜绿假单胞菌,屎肠球菌对多数抗菌药物耐药率高于粪肠球菌。结论肠球菌耐药率控制效果不佳,临床应进一步发挥抗菌药物科学化管理团队的作用,促进抗菌药物合理使用,延缓细菌耐药。     

迁徙状细菌最佳分离条件探讨

在临床细菌培养、分离、鉴定过程中经常遇到迁徙状细菌和其它细胞混合生长,给临床细菌鉴定、药敏试验带来困难。本文就迁徙状细菌——变形杆菌、铜绿假单胞菌和其他细菌混合生长最佳分离条件作一探讨,现将实验方法、结果报告如下：三材料与方法1．l菌种来源①奇异变形杆菌、②铜绿假单胞菌、③大肠埃希氏菌、④金黄色葡萄球菌、⑤肠球菌均由我科分离保存菌种。1．2培养基不同琼脂浓度的血培养基。不同石碳酸浓度的经典血球服系我科自行配制。1．3接种、培养将上述各种培养16～18h细菌刮下制成0．5ml／管麦氏比浊管悬液稀释成104cfu／ml,…     

2010年某院临床常见细菌分布及耐药性分析

目的 了解2010年临床分离菌株对抗菌药物的耐药情况.方法 细菌鉴定采用手工法,药敏试验采用纸片扩散法.结果 2010年各临床科室送检标本中,真菌、克雷伯菌、大肠埃希菌、假单胞菌、肠球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌为主要病原菌.革兰阴性菌中以假单胞菌耐药性最高,其次为大肠埃希菌、克雷伯菌.革兰阳性菌中金黄色葡萄球菌感染呈下降趋势,而凝固酶阴性葡萄球菌感染呈上升趋势,耐药率也随之增长.结论 临床科室应注意微生物实验室所提供的细菌耐药情况,合理使用抗生素.     

四川省细菌耐药监测网2011年川西地区细菌耐药性监测数据分析

目的总结分析川西地区6个市(州)17家医院2011年度临床分离病原菌的分布及对抗菌药物的耐药性。方法采用K-B法或自动化仪器分析法对临床分离细菌进行药物敏感试验,依据CLSI 2010年标准,采用WHO-NET5.4软件进行统计分析。结果共分离出病原菌株20079株,其中革兰阴性菌14454株,占分离菌的71.99%;革兰阳性菌5625株,占分离菌的28.01%。前10位病原菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、表皮葡萄球菌、阴沟肠杆菌、肺炎链球菌、屎肠球菌、流感嗜血杆菌。肠杆菌科细菌对亚胺培南仍保持较高的敏感率(>93.0%)。未检测到万古霉素及利奈唑胺耐药的葡萄球菌。粪肠球菌对替考拉宁和万古霉素耐药率分别为1.30%和0.70%,屎肠球菌为5.40%和4.00%。结论产超光谱β内酰胺酶的发酵菌及多重耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌呈逐年上升趋势。耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)和耐糖肽类的肠球菌是抗菌药物治疗中的难点。临床应根据细菌的耐药表型和药敏试验结果合理选用抗菌药物。     

多重PCR同时检测病原菌及其耐药基因

目的建立一种多重PCR方法,在同一扩增体系内同时检测病原菌及其β-内酰胺类耐药基因,探讨采用多重PCR同时鉴定病原菌及其耐药基因的可行性。方法根据细菌基因序列和对β-内酰胺类抗生素耐药特点,设计一对细菌鉴定通用引物和三对β-内酰胺类耐药基因引物,并在同一扩增体系内行PCR扩增。结果 MRSA和大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的产酶标准菌株的bla mecA、blaTEM、blaSHV和16S-23S rRNA基因间隔区（ISR）多重扩增均为阳性,对本实验室内保存的50株多重耐药的葡萄球菌（包括40株表型筛查为MRS菌株及10株非MRS菌株）及30株ESBLs阳性的大肠埃希菌及30株肺炎克雷伯菌的多重PCR结果显示：MRS阳性菌株均同时扩增出了葡萄球菌特有的多态性及blamecA指纹图谱,而多重耐药的非MRS菌株也都扩增出了blamecA,ESBLs表型阳性的大肠埃希菌多以blaTEM为主,而肺炎克雷伯菌多以blaSHV为主。结论多重PCR与传统的培养及药敏试验相比敏感、特异、迅速,对于解决难培养或不能培养的微生物的鉴定和药敏试验,是一种很有前景的方法。     

881例尿培养细菌分布及耐药分析

目的 了解某医院泌尿系感染患者分离菌的分布及耐药情况。方法 收集2011年1月1日至2012年12月31日住院患者中段尿细菌培养标本5 524例,共培养出881株细菌,阳性率为15.95%;鉴定和药敏试验使用美国BD公司生产的phoenix 100全自动微生物鉴定/药敏系统,统计分析数据应用WHONET5.4软件。结果 分离的881株细菌中革兰阴性菌567株,占64.36%;革兰阳性菌314株,占35.64%;大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检出率分别为59.26%和51.19%,未发现对亚胺培南和美罗培南耐药的肠杆菌科细菌。葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为33.33%,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为47.92%。未检出对万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺耐药的葡萄球菌和肠球菌属细菌。结论 尿路感染细菌种类繁多,耐药性较高,应根据药敏试验结果合理使用抗菌药物。     

2010年临床分离病原菌分布特点及耐药性分析

目的 分析2010年西安交通大学医学院第一附属医院分离的3 476株感染病原菌的分布及抗生素耐药性,为临床合理用药提供参考依据.方法 细菌鉴定方法应用VITEK全自动细菌鉴定分析仪和API鉴定系统鉴定菌株;药敏试验应用K-B纸片扩散法.结果 2010年医院临床标本分离病原菌3 476株,分离率居前10位的细菌分别为大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、阴沟肠杆菌.其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分离率达到72.9%,产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌分别为58.7%和63.4%,万古霉素、替考拉宁、利奈唑胺对革兰阳性球菌保持较强的抗菌活性,未发现耐药菌株;肠杆菌科的细菌对碳青霉烯类及头孢哌酮/舒巴坦等抗生素的敏感性较强,非发酵菌中鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌呈多重耐药性.结论 医院感染病原菌的多重耐药相当严重,检验科加强对病原菌的分布及耐药性监测,对指导临床合理应用抗生素具有重要意义.     

3株抗菌药物活性评价用标准菌株的建立与评价

目的 参照《病原微生物菌(毒)种国家标准菌株评价技术标准》(WS/T 812-2022),在实验室条件下对保藏于中国医学科学院病原微生物菌(毒)种保藏中心药用微生物相关菌(毒)种保藏分中心的大肠埃希菌CCPM(A)-P-000101、肺炎克雷伯菌CCPM(A)-P-000102、金黄色葡萄球菌CCPM(A)-P-000100菌株,分别测定病原微生物学特征,推动这3株细菌成为抗菌药物活性评价中使用的标准株。方法 进行菌落形态和革兰染色观察,根据生化鉴定、抗生素敏感性测试、16S rDNA测序,以及多次传代后,观察和比较不同代次间细菌生长、药敏特性以及感染实验动物的100%最小致死量的差别,了解3株细菌的传代稳定性,明确其病原微生物学特征。结果 菌落形态、革兰染色、生化鉴定、16S rDNA测序结果证明CCPM(A)-P-000101、CCPM(A)-P-000102、CCPM(A)-P-000100菌株具备大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌对应的典型特征,除对青霉素、氨苄西林等少数抗生素具有耐药性,3株细菌对多数受试抗生素具有敏感性表型。3株细菌的G10菌株与G1菌株比较,生长曲线...     

2622株泌尿系感染病原菌的分布及耐药性分析

目的收集我院2008-2010年尿培养阳性菌株2622例,分析病原菌的分布和耐药状况,帮助临床合理有效的选用抗生素.方法对尿液培养中分离出的2622株病原菌使用VITEK TOW自动微生物鉴定系统进行鉴定和药敏实验,并对ESBL菌株进行耐药监测.结果在引起泌尿系感染的病原菌中,大肠埃希菌检出率最高为32.38%,其次为念珠菌17.47%,肠球菌14.72%.在药敏分析中,ESBL+肠杆菌科细菌对亚胺培南耐药率最低,哌拉西林/他唑巴坦,阿米卡星,头孢匹肟,头孢哌酮/舒巴坦耐药率较低,也可选用.葡萄球菌对糖肽类的耐药率均为0,对呋喃妥因,磷霉素等耐药率低.肠球菌对利奈唑胺、替考拉宁、万古霉素的耐药率较低.结论在导致泌尿系感染的病原菌中,以大肠埃希菌、真菌和肠球菌为主,细菌的耐药率呈上升趋势.细菌耐药监测为临床合理使用抗生素提供依据.     

西安地区2014年度细菌耐药监测分析

目的：分析西安地区2014年度临床分离病原菌的分布和耐药特征,为医药管理部门和临床抗菌药物合理应用提供病原菌耐药监测数据。方法常规方法分离培养医院内感染病原菌,并应用半自动或全自动细菌鉴定分析仪鉴定到种,药敏试验方法按美国临床和实验室标准化协会相关标准进行。采用 WHONET5．6软件进行数据统计分析。结果2014年度共分离出病原菌31013株,革兰阴性菌20029株,占64．58％,革兰阳性菌9888株,占31．88％,真菌1096株,占3．54％;临床分离占第1位的细菌为大肠埃希菌（占20．29％）,未发现对万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌;屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素耐药率分别为3．00％和1．00％,对利奈唑胺的耐药率都为1．00％;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β‐内酰胺酶的产生率分别为65．0％和56．0％。结论对院内感染的重要病原菌,如耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、抗万古霉素肠球菌、碳青霉烯类药物耐药的肠杆菌科细菌、泛耐药的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌应进行重点监测,并且应与临床加强沟通,使检验结果更好地服务于临床。     

血流感染病原菌的临床分布及耐药性分析

目的分析长海医院2009年1月至2013年12月血流感染病原菌的菌种构成比、临床分布及耐药性分析,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用VITEK2-Compact系统鉴定细菌及药敏试验。采用WHONET5.6软件分析血培养标本所分离的病原菌分布情况和药敏试验结果。结果 1 641株血流感染病原菌中,革兰阳性菌373株(22.74%),肠杆菌科细菌933株(56.85%),非发酵菌291株(17.73%),真菌44株(2.68%)。分离率为前5位的病原菌分别是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和凝固酶阴性葡萄球菌。药敏试验结果显示,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为61.70%,未发现对万古霉素耐药的葡萄球菌,耐万古霉素肠球菌为4.23%,肺炎克雷伯菌对亚胺培南耐药率达到13.30%,非发酵菌表现为多重耐药。结论长海医院血流感染以肠杆菌科细菌为主,其次为阳性球菌和非发酵菌,除细菌外,念珠菌血流感染也越来越常见,临床应重视血流感染的病原菌及耐药趋势,控制院内感染。     

2013年昆明某院临床分离致病菌的分布及耐药分析

目的：了解2013年昆明医科大学第一附属医院临床分离致病菌的分布特点及耐药情况。方法收集2013年1～12月该院临床标本中分离的致病菌4266株,采用 VITEK2型全自动细菌分析仪进行鉴定和药敏试验。按美国临床和实验室标准化协会（CLSI）2012年版标准判断结果,应用 Whonet 5．6软件进行统计分析。结果4266株致病菌中革兰阳性菌1487株（占34．8％）,革兰阴性菌2779株（占65．2％）。排列前三位的革兰阳性菌为葡萄球菌、肠球菌和溶血性链球菌;排列前三位的肠杆菌科细菌为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌。以呼吸道标本、尿液标本、血液标本为主。其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌检出率分别为30．1％和62．8％,未发现耐万古霉素和利奈唑胺的葡萄球菌,但出现了对替考拉宁中介的葡萄球菌;屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素的耐药率分别为0．6％和0．7％,屎肠球菌未发现利奈唑胺耐药,而粪肠球菌对利奈唑胺的耐药率为0．7％。产超广谱β‐内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的检出率分别为57．4％和33．3％,大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对亚胺培南的耐药率分别为0．8％和17．5％;鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药率达50．0％以上,铜绿假单胞菌对常用的有抗假单胞菌活性的药物耐药率小于25．0％。结论2013年度该院分离细菌耐药现象较为普遍,开展细菌耐药性监测,对指导临床合理使用抗菌药物,降低医院内感染率和控制细菌耐药性有重要意义。     

2016—2018年11所医院儿童血培养分离菌的耐药性分析

目的了解2016-2018年11所医院儿童血培养阳性细菌的分布及耐药情况。方法根据全国细菌耐药监测网技术要求,对血培养阳性分离菌进行鉴定和药敏试验,按照2018年美国临床和实验室标准化协会(CLSI)标准进行结果判读,用WHONET 5.6软件对数据进行统计分析。结果2016-2018年自血培养中共分离得病原菌14078株,其中革兰阳性菌9141株,占64.9%;革兰阴性菌4937株,占35.1%,前五位分离菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌、大肠埃希菌、嗜麦芽窄食单胞菌、克雷伯菌属和肠球菌属细菌。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株(MRSA、MRCNS)的检出率分别为31.6%和81.4%。除四环素外,粪肠球菌对其他抗菌药物的耐药率均低于屎肠球菌,肺炎链球菌对青霉素G的耐药率仅为1.6%,未检出耐万古霉素和利奈唑胺的细菌。碳青霉烯类耐药大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为4.4%和21.5%。结论儿童血培养分离菌以革兰阳性菌为主,MRSA仍然是革兰阳性菌感染中的主要问题。碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌逐年增加,应加强医院感染防控和抗菌药物临床应用管理,以遏制此类菌株的传播扩散。     

抗生素敏感性与菌种鉴定

随着对细菌耐药机理研究的不断深入，抗生素敏感性试验（药敏）结果与菌种间的相关性越来越密切，通过某些药敏试验结果可以修正或确认菌种鉴定，同样，利用准确的菌种鉴定也可推测所试菌株的抗生素敏感性表型。１　抗生素敏感性结果可用于菌种鉴定和确认１．１　葡萄球菌　在凝固酶阴性葡萄球菌种间鉴定中，新生霉素或多粘菌素Ｂ是经常应用的２种抗生素［１］。对新生霉素耐药的常见葡萄球菌有１１个种：腐生葡萄球菌、孔氏葡萄球菌孔亚种、孔氏葡萄球菌解脲亚种、木糖葡萄球菌、科氏葡萄球菌、马胃葡萄球菌、阿尔莱特葡萄球菌、鸡葡萄球菌…     

临床分离细菌的分布特征及耐药性分析

目的:了解本院临床分离细菌的分布特征及耐药谱,为合理使用抗生素提供依据。方法:大多数分离细菌的鉴定和药物敏感试验利用BD Phoenix仪,少数利用手工鉴定和Kirby-Bauer法。数据分析用WHONET5.4软件。结果:共分离出3 094株细菌,前3位为铜绿假单胞菌(11.2%)、大肠埃希菌(11.1%)和金黄色葡萄球菌(8.4%)。肠杆菌科耐药率<10%的为亚胺培南和头孢哌酮/舒巴坦,非发酵菌耐药率<10%的为头孢哌酮/舒巴坦。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶的检出率为47.5%和55.6%。革兰阳性球菌对万古霉素敏感率100%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌甲氧西林耐药率为52.1%和74.8%。结论:本院细菌耐药率居高不下,应加强抗生素的合理使用以降低耐药率。