染料木黄酮对MDA-MB-453乳腺癌细胞VEGF表达的影响

目的:观察染料木黄酮(genistein,Gen)对MDA-MB-453乳腺癌细胞血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响,探讨Gen抗HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成的分子机制。方法:5×10-5mol/LGen处理MDA-MB-453细胞24、48、72h后,应用免疫组织化学、Westernblot及RT-PCR法检测MDA-MB-453乳腺癌细胞VEGF的表达变化。结果:Gen处理MDA-MB-453细胞24、48、72h后,VEGF的mRNA和蛋白表达量随着处理时间的延长逐渐下降。结论:Gen能在转录和翻译水平下调HER-2/neu高表达乳腺癌细胞VEGF的表达,这可能是Gen抑制HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成的机制之一。     

染料木黄酮对人乳腺癌细胞雌激素样作用机制研究

目的 探讨染料木黄酮(genistein,GEN)对人乳腺癌细胞增殖影响及作用机制.方法 MTT法测定GEN对雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7和非雌激素依赖性乳腺癌细胞MDA-MB231增殖作用,应用雌激素受体拮抗剂IC1182780观察GEN的雌激素样作用途径,采用流式细胞术分析乳腺癌细胞周期情况.结果 GEN可促进MCF-7细胞的增殖,使G1期向S期转变,增殖作用可被雌激素受体拮抗剂所拮抗;对非雌激素依赖性MDA-MB231细胞增殖无影响.结论 GEN通过雌激素受体(ER)介导而发挥雌激素样活性作用.     

染料木黄酮对人胃癌细胞生长抑制作用研究

目的 :　探讨染料木黄酮对体外培养的人胃癌 SGC- 790 1细胞的抑制和诱导细胞发生凋亡的作用。方法 :　用 MTT法、集落形成实验、透射电镜及流式细胞仪的方法 ,观察染料木黄酮处理 SGC- 790 1后细胞生长和细胞凋亡。结果 :　 (1 ) MTT法和集落形成实验证实染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞生长有抑制作用 ,抑制作用呈剂量 -效应关系 ;　 (2 )透射电镜可见 SGC- 790 1细胞在形态学上出现典型的细胞核固缩、碎裂等凋亡细胞的形态学改变 ;　 (3)流式细胞仪检测到凋亡峰。结论 :　染料木黄酮对 SGC- 790 1细胞有抑制作用 ,而这一作用的机制之一是通过诱导人胃癌细胞发生凋亡 ,即诱导肿瘤细胞发生凋亡是染料木黄酮抑制肿瘤细胞生长的重要机制之一     

人Rb94基因联合γ-辐射抑制乳腺癌细胞生长的研究

目的 构建含有人类视网膜母细胞瘤94基因(Rb94基因)的腺病毒表达载体,研究其联合γ-辐射抑制人恶性肿瘤细胞生长的作用.方法 从人类胚胎中提取总RNA,经逆转录得到目的cDNA,用PCR技术扩增目的基因片段,将其连接入载体pENTRTM1A,然后经LR重组再转入到表达载体 pAd/CMV/V5-DESTTM中,对重组体进行鉴定.然后联合γ-辐射作用于乳腺癌细胞,观察细胞生长曲线的变化.结果 成功构建了含Rb94基因的腺病毒表达重组体并通过鉴定,联合γ-辐射作用于乳腺癌细胞后有更强的抑制效应.结论 本实验构建的人Rb94基因重组腺病毒表达质粒是成功的,与γ-辐射联合共同作用于肿瘤细胞有更强的抑制肿瘤细胞生长的作用.     

染料木黄酮对人成骨细胞凋亡的影响

目的: 观察染料木黄酮(Gen)对人成骨细胞凋亡的影响。方法: 将体外分离到的人骨膜成骨细胞在高糖DMEM(含10 %小牛血清)中进行纯化扩增至第三代,然后接种于无酚红高糖DMEM培养液中(含10 %经活性碳-葡聚糖苷处理的胎牛血清,CDT-FBS),4 d后用0.25 %的胰蛋白酶消化、收集细胞,用PBS洗涤2次后,用于各项实验。指标包括:流式细胞仪分析细胞凋亡比例,琼脂糖凝胶电泳检测DNA断裂条带,免疫组化观察Gen对Bax、Bcl-2及caspase-3表达的影响。结果: 无雌激素(E2)血清培养可诱导成骨细胞发生凋亡(45.7 %),加入10-8 mol/L E2、10-6 mol/L 和10-5 mol/L Gen对细胞处理48 h,成骨细胞凋亡率分别降低到15.3 %、36.3 %及28.4 %(P<0.05)免疫组化结果表明,同E2类似,Gen可抑制Bax和capsase-3的表达,而促进Bcl-2蛋白的表达。结论: 染料木黄酮可能是通过影响雌激素受体途径而发挥其骨保护作用的。     

染料木黄酮抗辐射作用的研究进展

染料木黄酮(Genistein,Gen)是大豆异黄酮的主要成分之一,化学名称为5,7,4’-三羟异黄酮,生物学作用非常广泛,因此受到普遍关注。电离辐射可诱发自由基,造成组织损伤。Gen可清除自由基,表现出抗辐射作用。此外Gen可调     

染料木黄酮对MCF-7细胞肿瘤相关基因表达的影响

目的:用基因芯片技术观察染料木黄酮(genistein,GS)对雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7肿瘤相关基因表达的影响。方法:75×10-6mol/LGS对MCF-7细胞处理72h,收集细胞并提取总mRNA,用Cy5和Cy3两种荧光染料通过逆转录反应将mRNA分别标记成两种探针,与载有一组靶基因的人肿瘤相关基因表达谱芯片杂交、经计算机扫描分析得出GS处理后的差异表达基因。结果:筛选出包括与细胞增殖、细胞凋亡、雌激素反应等相关的差异表达基因共22条(7.3%,22/300)。18个下调基因(占81.8%)主要是促进细胞增殖活力的原癌基因和与肿瘤细胞逃逸、扩散有关的肿瘤细胞表面抗原基因;4个上调基因均为雌激素反应性基因。结论:GS所影响的基因多与细胞增殖和肿瘤细胞免疫逃逸调节有关,调节此类基因的表达可能是GS发挥抗癌防癌作用的主要机制;GS上调的4个基因均属于雌激素上调基因,表明GS与雌激素受体结合后,除产生抗雌激素样效应外,还能激活雌激素反应元件而表现一定的雌激素效应。     

染料木黄酮抗辐射研究进展

染料木黄酮的化学名为5,7,4’-三羟基异黄酮,是大豆异黄酮的主要成分及其生物活性基础。近年来大量研究发现,染料木黄酮具有较强的抗氧化活性,可以淬灭辐射诱导的自由基增多和增加抗氧化酶的活性,抑制膜的脂质过氧化;还可通过调节细胞周期、抑制细胞凋亡、调控细胞基因表达等减轻辐射损伤,促进损伤修复,表现出较强的抗辐射作用。     

染料木黄酮抗辐射作用的实验研究

目的 研究染料木黄酮(Genistein,Gen)对照射小鼠的保护作用,为抗辐射功能食品的开发提供实验依据。方法 雄性昆明小鼠,经7.5 Gy γ射线照射,观察补充不同剂量的Gen对小鼠30 d死亡率、平均存活时间的影响;4.0 Gy γ射线照射,观察补充Gen对外周血白细胞、血小板、淋巴细胞、骨髓有核细胞(BMC)、内源性脾结节、以及骨髓嗜多染红细胞微核率的作用。结果 Gen可以提高受照射小鼠30d活存率,延长受照射小鼠存活时间,保护系数达1.44;可以升高受照射小鼠血小板、淋巴细胞计数和脾结节数,降低骨髓嗜多染红细胞微核率。结论 Gen对辐射小鼠有保护作用。     

染料木黄酮的诱变性研究

目的检测和评价染料木黄酮的诱变性,为其安全应用提供毒理学依据。方法采用小鼠淋巴瘤细胞实验(微孔板法)评价染料木黄酮的诱变性,诱变性检测采用3h和24h染毒两种处理方式观察受试物对L5178Y细胞的诱变性。结果在染料木黄酮诱变性检测中,3h染毒时,随着剂量增加,tk位点总突变频率升高,5、10和20μg/mL剂量组tk位点总突变频率与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P0.01);24h染毒时,随着剂量增加,tk位点总突变频率升高,与溶剂对照组比较,5、10μg/mL剂量组tk位点总突变频率高于溶剂对照组,差异有统计学意义(P0.01);3h染毒和24h染毒相同剂量组间比较,tk位点总突变频率差异无统计学意义(P0.05)。结论在此实验条件下,染料木黄酮(5~20)μg/mL能诱导L5178Y细胞TK基因突变,并呈良好的剂量反应关系,但3h和24h处理的突变频率差异无统计学意义(P0.05)。     

染料木黄酮对胃癌细胞侵袭转移的抑制作用

目的:研究染料木黄酮(genistein)对胃癌细胞侵袭转移的影响,并初步探讨其作用机制。方法:运用MTT法观察染料木黄酮对人胃癌细胞系SGC-7901细胞粘附能力的影响;用BoydenChamber膜侵袭系统,观察对SGC-7901游走和侵袭的影响;免疫细胞化学法观察对SGC-7901细胞TGF-β1表达的影响。结果:染料木黄酮作用后,SGC-7901细胞粘贴率降低(P<0.05),游走穿膜细胞数(83±4)和侵袭穿膜细胞数(35±3)均明显低于对照组(114±7,60±4,P<0.05),并且能降低TGF-β1的表达。结论:染料木黄酮能有效抑制胃癌侵袭转移。其作用机制可能与通过降低TGF-β1的表达,抑制胃癌细胞异质粘附、运动能力有关。     

染料木黄酮对MDA-MB-453乳腺癌细胞uPA表达及PTK活性的影响研究

目的: 观察染料木黄酮(亦称三羟异黄酮,genistein,Gen)对MDA-MB-453乳腺癌细胞尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)表达及蛋白酪氨酸激酶(protein tyrosine kinase,PTK)活性的影响,探讨Gen抗HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成的分子机制。方法: 5×10-5mol/L Gen处理MDA-MB-453细胞24、48、72 h后,应用Western blot、免疫沉淀、RT-PCR及激酶活性分析法检测Gen对MDA-MB-453乳腺癌细胞uPA表达、HER-2/neu受体蛋白磷酸化水平及PTK活性变化。结果: Gen处理MDA-MB-453细胞后,uPA的mRNA和蛋白表达量下调,HER-2/neu受体蛋白磷酸化水平降低,PTK活性下降,且这种作用具有时效性。结论: Gen能有效抑制乳腺癌细胞HER-2/neu受体的PTK活性和蛋白磷酸化水平,在转录和翻译水平下调uPA的表达,从而抑制HER-2/neu高表达乳腺癌血管生成。     

葡多酚对人乳腺癌细胞增殖的抑制作用研究

目的研究葡多酚(GPC)对人乳腺癌(MCF-7)细胞增殖活性的影响及雌激素受体(ER)的调节作用。方法将GPC与MCF-7细胞共同培养,共设肿瘤细胞对照组、高、中、低(200、100、10μg/ml)剂量GPC组、ER阻断剂对照组(ICI10-6mol/L)和ER阻断剂(ICI10-6mol/L)+GPC(200μg/ml)6个组。用MTT法测定各组乳腺癌细胞的增殖活性水平,用免疫组化方法检测乳腺癌细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)和Bax蛋白的表达水平。结果与肿瘤细胞对照组比,高剂量GPC组乳腺癌细胞的增殖活性水平和PCNA阳性表达率降低,Bax蛋白阳性表达率升高(P<0.05);ER阻断剂+GPC组乳腺癌细胞的增殖活性水平、PCNA阳性表达率,均较高剂量GPC组升高,Bax蛋白阳性表达率降低,各项差别均有显著性意义(P<0.05)。结论GPC可有效抑制人乳腺癌细胞的增殖,并促进其凋亡;其作用与ER调节有密切关系。     

硒、维生素A、E对人类乳腺癌细胞增殖的影响

本文研究了Se、VA和VE及其联合作用对人类乳腺癌细胞BCaP-37增殖的影响,结果提示Se对该细胞的增殖有双向作用,浓度高于5μM抑制细胞生长,低于该浓度则刺激细胞生长。醋酸维生素A酯浓度在1.0—10.0mg/L范围内对该细胞生长有明显的抑制。维生素A酸对该细胞的生长仅有很弱的抑制作用。VE对细胞也有弱抑制生长的作用。在稍高于生理浓度的水平下,Se(5μm)与VA(2mg/L)和VE(20mg/L)三者联合处理细胞,细胞核酸含量明显降低,提示Se、VA和VE能协同抑制BCaP-37细胞的增殖,而且这种抑制有可逆的趋势。联合使用Se和VA或VE未观察到二者间对细胞生长有协同抑制。上述结果表明联合使用Se、VA和VE对乳腺癌的防治可能是有益的。     

三羟异黄酮对乳腺癌细胞系MCF-7生长的影响

目的探讨三羟异黄酮(Genistein)对乳腺癌细胞系MCF-7的生长、细胞周期及诱导细胞凋亡的影响。方法培养MCF-7细胞,在其对数生长期加入三羟异黄酮,通过MTT试验,流式细胞仪技术及Giemsa染色法,观察三羟异黄酮对MCF-7生长的影响。结果(1)MTT试验显示,细胞培养第1天,三羟异黄酮20、40、80、160μmol.L-14个剂量组的吸光度值(该值反映对MCF-7细胞生长的抑制作用)分别为0.460±0.018、0.450±0.020、0.440±0.020、0.385±0.040,明显低于对照组(0.520±0.023,P<0.05),第2、3、4天的变化趋势相同于第1天。(2)三羟异黄酮80、160μmol.L-12个剂量组的细胞周期G2%分别为50.0%、57.5%,而对照组为6.8%。(3)三羟异黄酮10、80μmol.L-12个剂量组晚期细胞凋亡率分别为6.51%、20.03%,而对照组为0.50%。结论三羟异黄酮对MCF-7的生长有明显的抑制作用;能阻滞细胞周期的正常进行,但主要在细胞周期的后期(G2期)发挥作用;能诱导细胞凋亡。     

芹菜素对人胃癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用的研究

目的:了解芹菜素对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法检测芹菜素在体外对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测细胞的周期分布;DAPI荧光染色和DNA Ladder实验检测细胞凋亡;Western blotting方法检测了凋亡相关信号分子caspase-3和Bcl-2的蛋白表达情况。结果:芹菜素在体外可以明显抑制人胃癌细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡。Western blotting实验结果表明,芹菜素可以诱导SGC-7901细胞中凋亡相关信号分子caspase-3活化片段的产生并抑制Bcl-2蛋白的表达。结论:芹菜素在体外可以抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,且对于caspase-3的活化及Bcl-2蛋白表达的下调作用可能是其诱导细胞凋亡的机制之一。