肝细胞生长因子对骨髓移植小鼠造血重建的促进作用

目的 观察肝细胞生长因子（HGF）对骨髓移植小鼠造血重建的促进作用。方法 用BALB／c小鼠建立同基因骨髓移植模型，随机将BALB／c小鼠分A、B两组，B组移植后叶7d皮下注射HGF，A组皮下注射PBS，移植后1、7、14、21和28d检测小鼠血红蛋白、白细胞、血小板、骨髓单个核细胞及骨髓造血细胞面积。结果 B组血红蛋白在移植后7、14d与同期A组无差异（P〉0．05），B组血红蛋白在移植后21d高于同期A组（P〈0．05）；B组血小板在移植后7、14及21d高于同期A组（P值分别小于0．01、0．01和0．05）：B组白细胞在移植后7、14、21及28d高于同期A组（P值分别小于0．01、0．01、0．05及0．05）；B组骨髓单个核细胞及骨髓造血细胞面积在移植后7、14、21和28d高于同期A组（P值分别小于0．05、0．01、0．01及0．05）。结论 HGF对骨髓移植小鼠造血重建有一定的促进作用。     

大蒜新素对小鼠脾细胞Th1/Th2类细胞因子表达的影响

目的 :探讨大蒜新素 (即大蒜素注射液 )对正常BALB c小鼠脾细胞Th1 Th2 类细胞因子表达的影响。方法 :BALB c小鼠被随机分成大蒜新素处理组和生理盐水对照组 ,用双抗体夹心ELISA法检测小鼠脾细胞Th1 类细胞因子IL - 2 ,IFN -γ和Th2 类细胞因子IL - 4 ,IL - 10表达水平。结果 :大蒜新素能诱导正常BALB c小鼠脾细胞Th1 类细胞因子IL - 2和IFN -γ的表达显著增加 (P <0 0 1) ,Th2 类细胞因子IL - 10表达明显下降(P <0 0 1) ,而对I- 4的表达无明显影响 (P >0 0 5 )。结论 :大蒜新素明显抑制IL - 10的表达 ,以解除IL - 10对Th1 细胞分化的负性调节作用是其上调Th1 类细胞因子表达 ,增强特异性细胞免疫反应而发挥抗细胞内病原微生物感染效应的机制之一。     

登革病毒2型感染BALB/c小鼠的IL-4、IFN-γ产生动态观察

目的 :探讨登革病毒 2型 (DEN2 )临床分离株感染BALB/c小鼠后其血浆中IL 4、IFN γ产生动态及相关关系。方法 :用不同剂量DEN2临床分离株经皮下多点注射 ,建立BALB/c小鼠感染模型 ,并用双抗体夹心ELISA法检测感染后不同时间各组动物血浆中IL 4、IFN γ浓度。结果 :DEN2感染可使BALB/c小鼠产生IL 4、IFN γ增加 (P <0 0 5 ) ,且细胞因子浓度与病毒感染剂量有关。初次感染阶段两者水平均有升高 ,而再次感染阶段以IL 4升高为主。结论 :在初次感染阶段TH1/TH2应答均发挥重要作用 ;而再次感染阶段以TH2应答为主。     

TH1反应在铜绿假单胞菌二次感染小鼠中作用的研究

目的　探讨TH1对铜绿假单胞菌(PA) 2次感染小鼠的保护作用。方法　将6 8只12周龄、雌性、BALB/C小鼠,随机分为3组。A组2 0只为1次感染组,B组2 8只为2次感染组,C组2 0只为非感染组。在首次用生物被膜PA接种小鼠肺部2周后进行第2次接种,建成小鼠PA 2次肺部感染模型,用A组和C组作对照组。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠肺组织中白介素IL - 4 ,干扰素IFN -r、IL - 4 /IFN -r及IL - 12水平。结果　白介素IL - 4B组明显下降,与A组和C组间差别均有非常显著性意义(P <0 . 0 1) ,干扰素IFN -rB组明显升高,与C组比较差别有非常显著性意义(P <0 . 0 1) ,但B组与A组未见明显差别(P >0 .0 5 )。结论TH1主导的细胞因子反应在铜绿假单胞菌对2次感染小鼠起一定的保护作用。     

泡状棘球蚴感染纯系小鼠诱导免疫耐受的实验研究

目的探讨感染泡球蚴的小鼠皮肤移植后免疫系统的变化对移植物的影响。方法采用小鼠尾部皮肤移植建立小鼠皮肤移植模型。将64只C57BL/6小鼠及64只BALB/c小鼠各随机分为4组,每组各16对小鼠,其中16只C57BL/6小鼠为供体,16只BALB/c小鼠为受体。A组:空白对照组(非同系移植不予以任何干预);B组:实验组1,以健康C57BL/6小鼠尾部皮肤移植至BALB/c小鼠(感染泡球蚴1个月后);C组:药物对照组,采用非同系移植加药物[西罗莫司(商品名:雷铂霉素)]干预,皮肤移植术后5d每日给予西罗莫司1.5mg/kg干预;D组:实验组2,以健康C57BL/6小鼠尾部皮肤移植至BALB/c小鼠(感染泡球蚴3个月后)。术后观察BALB/c小鼠尾部移植皮肤生长情况。每组留8只用于观察BALB/c小鼠术后尾部移植皮肤生存期,每组于术后3、5、7、9d4个时间点各取2只小鼠尾部移植皮片,用于观察小鼠尾部移植皮肤病理变化情况。结果 A、B、C、D组移植皮肤存活时间平均为(6.00±0.76)、(7.50±0.93)、(13.25±1.04)、(11.5±0.93)d。C组小鼠移植皮片存活时间较D组长,差异有统计学意义(P<0.05)。C、D组移植皮肤存活时间较A、B组延长,差异有统计学意义(P<0.01)。组织病理学检查:A、B组移植皮片均在术后1周左右发生明显的逐渐加重的急性免疫排斥反应,C、D组移植皮片的免疫排斥反应较A、B组轻。结论小鼠感染泡状棘球蚴后有利于同种异体移植皮片的存活,可以延长移植皮片的生存时间。该模型为研究感染泡球的免疫实验研究提供了良好的实验平台,为进一步研究泡球蚴感染后机体免疫状态的变化提供了理论依据。     

T淋巴细胞在小鼠肾缺血再灌注损伤中的作用

目的研究T淋巴细胞在肾缺血再灌注损伤(IRI)导致的急性肾损害中的作用。方法BALB/c小鼠和BALB/c裸小鼠各24只,分别随机分为A1-4组和B1-4组,每组6只。双肾蒂阻断45 min后恢复血流建立肾IRI模型,假手术对照组I、RI后24、48和72 h时检测Scr、尿蛋白定量及肾病理学,A组检测脾T细胞亚群;对比BALB/c小鼠和BALB/c裸小鼠的肾功能下降、组织学损害程度以及脾T淋巴细胞亚群变化。结果A2-4组和B2-4组均有Scr和尿蛋白定量明显升高(P<0.05),且A组损害程度明显重于B组(P<0.05);A2-4组出现典型的IRI组织损害表现(P<0.05),B2-4组无明显IRI组织损害(P>0.05);A2-3组脾CD3 T细胞百分比较A1组升高(P<0.05),而CD4 /CD8 比值无明显变化(P>0.05)。结论T淋巴细胞是小鼠肾IRI导致急性肾损害的重要病理生理学因素。     

FTY720对小鼠异基因骨髓移植后急性GVHD的预防作用

目的评估FTY720对小鼠异基因骨髓移植诱发急性移植物抗宿主病(aGVHD)的预防作用.方法 36只受体BALB/c小鼠,接受直线加速器一次性全身照射后4 ～ 6 h内,经尾静脉注射供体小鼠骨髓和脾脏细胞.受体小鼠分为移植方式对照组(A组)和异基因移植治疗组(B组);同时A组分未移植组(A1)、同基因移植组(A2)和异基因移植对照组(A3),B组分CsA 5 mg/kg组(B1),FTY720 0.3 mg/kg组(B2)和FTY720 1 mg/kg组(B3).移植后受体小鼠,根据生存时间、体重变化和病理组织学检查,评估各组aGVHD严重程度.结果异基因移植各组在移植后第7 d造血开始恢复,第14 d流式细胞仪检测显示异基因骨髓细胞已植入,病理组织学检查A3组发生重度aGVHD;与B1和B2组比较,B3组aGVHD严重程度最低.结论小鼠异基因骨髓移植后给予FTY720具有预防aGVHD作用,以剂量为1 mg/kg时作用显著.     

非清髓性骨髓移植的动物实验研究

目的　建立非清髓性骨髓移植的小鼠动物模型 ,探讨非清髓预处理条件下能否实现异基因造血细胞的植活 ,探讨输入的异基因造血细胞数量和移植植活的关系。方法　以雌性C5 7BL/ 6小鼠为异基因骨髓移植的受者 ,雄性BALB/c小鼠为异基因骨髓移植的供者 ,采用非致死剂量的环磷酰胺腹腔注射 (2 0 0mg/kg)加γ射线全身照射(5Gy)为非清髓性预处理方案 ,将移植受鼠分为A、B、C 3组 ,每组 10只 ,分别给予 2× 10 7、8× 10 6和 2× 10 6个供鼠骨髓细胞 ,移植后第 36天用聚合酶链式反应检测受鼠骨髓细胞内Y染色体特异性基因检测移植物植活。结果　在移植A、B和C组中分别有 8、3和 0只小鼠检测到了异基因造血细胞的植活 ,经过统计学检验发现A组小鼠的植活比例高于其余两组。结论　非清髓的预处理条件下可以实现异基因骨髓移植的成功植入 ;加大移植物中造血前体细胞的数量有助于克服移植供、受者间主要组织相容性 (MHC)间的差异和促进移植物植活     

IL-2与TCRγ独特型DNA疫苗联合诱导小鼠特异性免疫反应

目的:观察白细胞介素 2 (IL- 2)与TCRγ独特型DNA疫苗诱导BALB/c小鼠抗肿瘤独特型免疫反应。方法: 24只 6~8周的健康纯系雄性BALB/c小鼠随机均分为 3组,在小鼠双侧股四头肌肌内注射 2. 5g/L盐酸布比卡因,每侧 50μl, 1次 /d, 5d后分组免疫。各小鼠分别于第 1周、2周、4周各免疫 1次,共 3次。①A组: 每次于股四头肌肌内注射pcDNA3. 1 100μg; ②B组:每次于股四头肌肌内注射pcDNA3. 1 TCRγ100μg;②C组:每次于股四头肌肌内注射pcDNA3. 1 -TCRγ100μg及IL 2 5μg。于末次免疫接种后第 5d将每组小鼠随机选 2只处死,分离出胫前肌,RT PCR法检测重组质粒在小鼠骨骼肌中的mRNA表达;间接免疫荧光法检测小鼠血清中抗体生成情况。结果:在pcDNA3. 1 TCRγ组及pcDNA3. 1- TCRγ+IL- 2组小鼠中用RT PCR法均检测到了重组质粒在肌肉中的mRNA表达。pcDNA3. 1- TCRγ组及pcDNA3. 1 -TCRγ+IL 2组小鼠血清中均产生了特异性抗独特型抗体。在第 6周时,pcDNA3. 1 -TCRγ组小鼠抗体滴度最高达 1160;pcDNA3. 1 TCRγ+IL 2组小鼠抗体的滴度最高达 1640, 2组差异有统计学意义 (P< 0. 01 )。结论:TCRγ表达载体pcDNA3. 1 -TCRγ可以诱导小鼠产生特异性抗淋巴瘤细胞独特型抗体;应用IL -2免疫佐剂可使TCRγ独特型DNA疫苗     

非清髓性预处理联合髓腔内骨髓细胞输注诱导免疫耐受的实验研究

目的本研究通过非清髓性预处理方案联合髓腔内骨髓移植建立异基因小鼠免疫耐受模型,并探讨其诱导耐受的机理.方法受鼠C57BL/6(B6)于第0天接受60Coγ射线全身照射(TBI,550-cGy),4 h内输注雄性BALB/C(H2d)小鼠来源的骨髓细胞,2 d后腹腔注射环磷酰胺(CTX,200 mg·kg-1).通过皮肤移植、混合淋巴细胞反应(mixed lymphocyte reaction, MLR)检测耐受状态,并应用体外过继转移实验、IL 2逆转实验等探讨免疫耐受机制.结果经骨髓移植的B6小鼠对BALB/C小鼠的皮肤移植物平均存活时间超过300d,较空白组明显延长(P＜0.001);MLR结果证明B6小鼠获得供体特异性耐受,该耐受可以被IL 2逆转且可被过继转移;所有受鼠均未出现GVHD表现.结论非清髓预处理联合髓腔内骨髓移植可以有效诱导异基因小鼠的免疫耐受.     

剔除CCR5基因供者小鼠细胞加重急性移植物抗宿主疾病

目的评价供者CCR5在经过强化预处理的骨髓移植动物模型受者体内的作用,为异基因造血干细胞移植的临床应用提供科学依据。方法经过致死剂量照射的BALB/C小鼠接受异基因C57BL/6小鼠骨髓移植。根据回输的细胞不同分为4组:1)B6 CCR5 KO组,受者接受C57BL/6 CCR5-/-小鼠骨髓和脾脏细胞;2)B6 WT组,受者接受野生型C57BL/6小鼠骨髓和脾脏细胞;3)B6 CCR5 KO BMC组,受者只接受C57BL/6 CCR5-/-小鼠骨髓细胞;4)B6 WT BMC组,受者只接受野生型C57BL/6小鼠骨髓细胞。结果与B6 WT组比较,B6 CCR5 KO组小鼠以更快的速度死于急性移植物抗宿主疾病(GVHD);其受者体内的CD8+T细胞大量增生;T细胞恢复后产生更多的干扰素-γ(INF-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),T细胞有丝分裂原刀豆素水平处于较高水平,进一步促进T细胞增生。组织学检测提示移植剔除CCR5基因受者细胞的小鼠肾脏出现病理损伤,肝脏存在更为严重的病理变化。结论剔除CCR5基因的异基因骨髓移植使GVHD发病率增加,供者CD8+T细胞在受者体内增生加重肝肾损害。提示CCR5在异基因骨髓移植中起着重要作用。     

白细胞介素11联合粒细胞集落刺激因子对小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病影响的研究

目的探讨重组白细胞介素11(rhIL-11)联合重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)用于供者对小鼠异基因骨髓移植后移植物抗宿主病(GVHD)的作用及其机制。方法建立同种异基因骨髓移植急性GVHD模型,以C57BL/6H-2b为供鼠,rhIL-11、rhG-CSF或二者联合应用作为动员剂,BALB/CH-2d受鼠经致死剂量(8·0Gy)照射后随机分为5组,A组为单纯照射组(10只),B组为GVHD对照组(18只),C组为G-CSF移植组(18只),D组为IL-11移植组(18只),E组为联合移植组(18只),在照射后4h移植供鼠骨髓细胞和脾细胞。观察移植后小鼠的生存期和病死率,应用流式细胞仪测定嵌合体形成情况,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测混合淋巴细胞反应,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)等细胞因子的分泌情况,并进行组间比较。结果E组小鼠生存时间明显长于其他各组(B、C、D),差异有统计学意义(P<0·01),30d存活率B、C、D、E组分别是:0、27·3%(3/11)、36·4%(4/11)、63·6%(7/11)。B组小鼠均出现GVHD病理改变,其程度与发生GVHD的时间密切相关,GVHD发生越早,病理改变越重;E组有3只小鼠在移植后20d内发生GVHD,病理程度改变较其他各组轻。与B、C、D组相比,E组移植后14d脾细胞培养上清中IFN-γ水平较低(92pg/ml±14pg/mlvs172pg/ml±31pg/ml、132pg/ml±23pg/ml、117pg/ml±28pg/ml,均P<0·01),IL-4的水平较高(36pg/ml±7pg/mlvs16pg/ml±4pg/ml、26pg/ml±4pg/ml、24pg/ml±4pg/ml,均P<0·05),D、E组肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平相近,但明显低于B、C组(均P<0·01),并且E组对宿主抗原的淋巴细胞增殖均低于B、C、D组(0·22±0·08vs0·87±0·14、0·54±0·21、0·49±0·18,均P<0·01)。结论rhIL-11联合rhG-CSF用于供者能产生协同作用,减轻GVHD,其机制可能与受者体内T细胞向Th2细胞因子极化、炎症介质如TNF-α降低有关。     

非T细胞来源细胞因子在小鼠心脏移植急性排斥反应模型中的表达

目的研究急性排斥反应性细胞因子在小鼠心脏移植中的表达状况,进一步阐明器官移植急性排斥反应的复杂发生机制。方法采用C57BL/6和Balb/c近交系小鼠,建立小鼠腹腔异位心脏移植模型。随机分为Balb/c-Balb/c同基因对照组(A组)和C57BL/6-Balb/c急性排斥反应组(B组)两组,每组26只。分别于移植术后1、3、5、7 d各处死5只小鼠留取移植心脏标本,采用RT-PCR及W estern印迹方法动态检测组织中IL-15、IL-2、TNF-α及IFN-γ的表达状况,同时行HE染色检测。另外,A、B两组各保留6只小鼠设为亚组,观察移植心脏存活时间。结果A组移植心均获长期存活(>100 d),B组移植心存活时间为8.0 d±0.9 d(t=251.95,P<0.01)。A组各个时间点移植心均未发现排斥现象,B组术后第3天开始出现排斥反应。A组各时间点IL-15 mRNA与TNF-αmRNA呈弱表达,IL-2 mRNA与IFN-γmRNA无表达。B组IL-15 mRNA、TNF-αmRNA、IL-2 mRNA及IFN-γmRNA均明显升高,于第5天达到高峰。A组各时间点可见IL-15、TNF-α、IFN-γ和IL-2蛋白的低水平表达;B组IL-15与IL-2自术后第3天始、TNF-α与IFN-γ自术后第1天始,蛋白表达水平开始升高。结论多种细胞因子,包括非T细胞来源细胞因子,参与了同种异体急性排斥反应的发生。     

同种异体近交系小鼠原位气管移植模型的建立

目的:建立近交系小鼠同种异体原位气管移植模型.方法:供受体体质量配对后,C57BL/6 和BALB/c小鼠随机分为2组,每组各10对,A组为C57BL/6(供体) → BALB/c(受体)组,B组BALB/c(供体) →BALB/c(受体)组,昆明种小鼠10对作为C组即KM(供体) →KM(受体)组. 利用颈前肌肉及周围组织被覆移植气管提供血供建立同种异体小鼠原位气管移植模型. 使用HE染色以及扫描电镜对同种异体小鼠原位气管移植模型进行评估,观察比较上皮积分、淋巴细胞计数以及无核软骨细胞/全部软骨细胞等指标.结果:A, B组全部存活,C组存活6只. A, C组移植气管均发生一定程度的排斥反应,B组无排斥反应发生. A, B, C三组上皮积分分别为: 1.094±0.120分,2.872±0.059分及0.995±0.444分;无核软骨细胞数/骨细胞总数比值分别为:(27.22±1.09)%, (10.60±1.01)% 及(31.40±6.43)%;淋巴细胞计数分别(20.18±1.31)个/HPF,≤5个/HPF及(22.55±4.87)个/HPF. A, B组及C,B组各项指标相比均有统计学意义,而A,C组相比则差异无统计学意义;且C组各数值离散程度均大于A组.结论:成功建立了C57BL/6(供体) → BALB/c(受体)小鼠原位气管移植模型. 近交系及封闭群模型均能反应移植气管的各种病理生理变化,但封闭群模型稳定性较近交系差.     

Toll样受体4单克隆抗体对急性期溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜中促炎因子及信号传导通路的影响

目的探讨Toll样受体4单克隆抗体(TLR4mAb)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的急性期溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜的促炎因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-1β以及信号传道通路P38MAPK、磷酸化P38MAPK、c-fos、c-jun蛋白表达情况的影响。方法18只BALB/c小鼠分为对照(A)、急性期溃疡性结肠炎模型(B)及干预(C)组。A组小鼠饮用蒸馏水7 d;B、C组小鼠饮用5%DSS水溶液7 d,以产生急性期溃疡性结肠炎模型。C组小鼠在造模开始的同时,腹腔内注射TLR4mAb,观察其干预作用。造模及干预7 d后处死小鼠,观察指标包括疾病活动指数(DAI)、结肠组织病理学炎症损伤评分(HPS),采用逆转录-聚合酶链反应检测各组结肠黏膜TNF-αmRNA、IFN-γmRNA、IL-1βmRNA表达,采用Western印迹法测定各组结肠黏膜P38MAPK、磷酸化P38MAPK、c-fos、c-jun蛋白表达。结果①造模第8天,B组的DAI明显高于A、C组(P值均<0.01),A与C组间的差异无统计学意义(P>0.05)。C组小鼠予TLR4mAb干预1周后,HPS明显小于B组(P<0.01),而与A组的差异无统计学意义(P>0.05)。②B组TNF-αmRNA、IFN一γmRNA和IL-1βmRNA均显著高于A和C组(P值均<0.01),而后两组间的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。③B组的P38MAPK蛋白、c-jun蛋白表达明显高于A组(P值均<0.01)和C组(P值分别<0.01和0.05),后两组间的差异也有统计学意义(P值均<0.01)。3组间磷酸化P38MAPK、c-fos蛋白表达的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论TLR4mAb可能通过抑制TLR4-P38MAPK-c-fos/c-jun信息传导通路,降低信号传导通路中P38MAPK、c-jun蛋白的表达,下调小鼠结肠黏膜促炎因子TNF-αmRNA、IFN-γmRNA、IL-1βmRNA表达而发挥其干预作用。     

CpG ODN 对卵清蛋白致敏的哮喘小鼠模型的免疫调节作用研究

[目的]研究寡核苷酸免疫刺激序列CpGODN(CpGOligodeoxyneucleotide)对卵清蛋白(OVA)致敏哮喘小鼠的免疫调节作用,探讨哮喘的非激素治疗方法。[方法]以OVA免疫BALB/c小鼠,致敏前和致敏阶段腹腔注射CpGODN ,分别用地塞米松和生理盐水作为激素治疗组和哮喘对照组。流式细胞仪检测各组哮喘小鼠的外周血T淋巴细胞亚群;ELISA法检测各组小鼠血清IL - 4 ,IFN -γ,Ig -E水平;HE染色观察各组哮喘小鼠肺组织病理变化。[结果]与哮喘对照组相比,CpG组能明显降低血清IL - 4水平,NS组:(10 6 .97±13.4 0 ) pg/mL ,CpG组:(87.6 9±13.2 5 )pg/mL ;降低血清Ig -E水平,NS组:(4.78±1.6 5 )IU/mL ,CpG组:(3.5 2±0 .2 3)IU/mL(P <0 .0 5 ) ;增加血清IFN -γ含量,NS组:(34.76±1.5 1) pg/mL ,CpG组:(49.93±9.18) pg/mL(P <0 .0 5 ) ;上调CD4 /CD8的比值,NS组:(3.5 3±0 .37) ,CpG组:(3.73±0 .5 5 ) (P <0 .0 5 ) ;CpG组和地塞米松组均能抑制肺组织中嗜酸细胞的浸润(P <0 .0 5 )。[结论]CpGODN能有效促进哮喘小鼠体内TH2反应向TH1反应,可作为哮喘的预防和治疗的非激素手段。     

大小鼠之间造血干细胞嵌合体抗异种移植物抗宿主病

目的探讨克服异种骨髓移植间强烈的移植物抗宿主病(GVHD)的措施。方法(1)将12只SD大鼠经5.0 Gy亚致死剂量全身照射后,4 h内每只经尾静脉输入28只正常BALB/c小鼠骨髓细胞8×107个。2 d后从腹腔注射环磷酰胺(Cy)100 mg/kg·b.w.,诱导形成对BALB/c小鼠产生特异性免疫耐受的嵌合体大鼠10只。(2)24只BALB/c小鼠接受9.0 Gy致死剂量全身照射后随机均分为3组,照射后4 h内经尾静脉注射骨髓细胞进行移植。A组输注正常SD大鼠的骨髓细胞4×107个;B组输注正常SD大鼠的骨髓细胞4×107个和脾细胞2×107个;C组输注嵌合体SD大鼠的骨髓细胞4×107个和脾细胞2×107个;观察GVHD的发生情况。结果A组有2只小鼠死于感染和放射损伤,所有对象均未观察到明显GVHD表现。B组平均累积存活时间为10 d[95%可信区间为(8,12)],死前均出现不同程度的典型GVHD表现。而C组除2只小鼠分别于移植后18、31 d死亡外,其余的均存活超过150 d。三组间比较有统计差异(P<0.002)。结论对有受者嵌合体的供者进行异种骨髓移植,有助于克服异种移植物抗宿主病。     

外源性mFasL-cDNA基因干预后骨髓造血细胞功能的实验研究

目的:探讨FasL基因转移后造血细胞活性是否到影响,骨髓移植(BMT)后受者骨髓造血功能是否受改变。方法:FasL-cDNA经鉴定后,常规收集BalB/c小鼠和BAC小鼠股骨和胫骨骨髓单个核细胞(BMMNC),采用脂质体转移法将FasL基因转入BalB/c小鼠BMMNC,然后按1∶0.625体外与BAC鼠BMMNC混合培养,6d后实验组(第3组)尾静脉输注给经致死量照射的BalB/c小鼠,同时设立:第1组(空白对照组即未移植细胞);第2组(未转染基因BalB/c鼠BMMNC+BAC鼠BMMNC);第4组(同基因BMT组)。观察移植后受者鼠造血功能及细胞来源,移植物抗宿主病(GVHD)及生存率。结果:BMT后10,20d,第4组白细胞及血小板计数明显高于第2、3组(P<0.01);第2、3组间差异不显著(P>0.05);30d,各组间均无显著性差异(P>0.05);第1组小鼠相继于1周内死亡,死亡后取脾观察未见脾结节形成。第2组、第3组存活的11只雌性BalB/c小鼠BMMNC中,Y染色体出现率为(79.35±6.77)%。第2组、第3组、第4组2月生存率分别为30%、80%、100%。第3组生存率明显高于第2组(P<0.01),与第4组无显著差异(P>0.05)。第3组少数及第2组中大部分鼠移植30d出现GVHD表现,两组死亡鼠及第2组存活鼠组织因子改变符合Ⅱ-Ⅲ度GVHD病理变化,第3组存活7只鼠中有Ⅰ度GVHD病理变化。结论:转基因自体造血细胞与异基因供体BMMNC混合培养后移植,能使受者获给供体来源的造血重建,并明显降低GVHD发生。     

IFN-γ抗结核分枝杆菌感染的实验观察

目的　观察IFN -γ抗结核分枝杆菌感染的作用。方法　将BALB/c小鼠制成结核分枝杆菌感染模型 ,随机分为 4组 ,分别以IFN -γ、LVFX、IFN -γ +LVFX及PBS治疗 ,检测重要脏器菌落数 ,观察小鼠平均生存时间。结果　各治疗组肝、脾、肺组织菌落数均显著低于对照组 ,尤其IFN -γ +LVFX治疗组效果更为明显 ;治疗组小鼠平均生存期均显著高于对照组 (P <0 .0 1)。结论　外源性IFN -γ可减少肝、脾、肺组织中结核分枝杆菌菌落数 ,延长动物生存时间 ,促进Th1细胞的免疫应答 ,在抗结核分枝杆菌感染中起着重要作用。     

山莨菪碱对创伤性肺损伤细胞因子及其mRNA表达的影响

为研究山莨菪碱 (6 5 4- 2 )对创伤性急性肺损伤 (AL I)家兔血浆中肿瘤坏死因子 - α(TNF- α)、白细胞介素 - 6 (IL- 6 )的含量及其在内脏组织中 m RNA表达的影响 .用 EL ISA和 RT- PCR方法测定 2 4只大耳白兔血浆中 TNF-α,IL - 6的含量及其在内脏组织中 m RNA的表达 .结果 :创伤性 AL I家兔与正常组比较 ,血浆中 TNF- α,IL- 6的含量升高 (P<0 .0 5 ) ,内脏组织中 TNF- α,IL - 6 m RNA的表达显著增多 (P<0 .0 1) .6 5 4- 2治疗后明显降低 AL I家兔血浆中 TNF-α,IL - 6的含量 (P<0 .0 5 ) ,抑制内脏组织 TNF- …