食管鳞状细胞癌p53基因突变及其蛋白表达

食管鳞癌常伴有ｐ５３基因突变和（或）ｐ５３蛋白积聚。文献报道ｐ５３基因改变与ｐ５３蛋白积聚常出现不一致的现象〔１，２〕。我们应用ＰＣＲＳＳＣＰ及免疫组化方法探讨食管鳞癌ｐ５３基因突变与ｐ５３蛋白表达的关系。１　材料和方法１１　材料　取食管癌新鲜组织３０例，同一标本分为２份，１份按常规方法提取ＤＮＡ，另１份经福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片。１２　ＰＣＲＳＳＣＰ〔３〕　ＰＣＲ常规扩增反应后，取１０μｌＰＣＲ产物与等量电泳缓冲液混合，９６℃变性５ｍｉｎ后立即置冰浴，电泳后，凝胶经固定、银染、…     

中国人食管p16基因突变分析

为了解ｐ１６基因与中国人食管癌遗传易感性的关系，应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法和ＤＮＡ序列测定法对４０例食管癌及相应手术端正常组织ＤＮＡ标本ｐ１６基因进行研究，结果在４０例食管癌标本ＤＮＡ中共发现ＤＮＡ变异１４例，其中９例存在有ｐ１６基因的错义突变和剪接位点突变，５例分别在密码子４１和１４０存在与白种人已发现的相同的正常多态现象，而相应的正常手术切端组织标本中未发现有错义突变和剪接位点突变。提示：（１     

中国人食管癌 p16 基因突变分析

为了解ｐ１６基因与中国人食管癌遗传易感性的关系，应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法和ＤＮＡ序列测定法对４０例食管癌及相应手术切端正常组织ＤＮＡ标本ｐ１６基因进行研究，结果在４０例食管癌标本ＤＮＡ中共发现ＤＮＡ变异１４例，其中９例存在有ｐ１６基因的错义突变和剪接位点突变，５例分别在密码子４１和１４０存在与白种人已发现的相同的正常多态现象，而相应的正常手术切端组织标本中未发现有错义突变和剪接位点突变。提示：（１）中国人食管癌中存在较高频率的ｐ１６基因突变，并以错义突变为主；（２）高发区和普通人群食管癌标本中ｐ１６基因突变频率未见差异；（３）正常对照手术切端组织未发现相应体细胞突变。表明ｐ１６基因突变在中国人食管癌发展过程中属较晚期的改变。     

转化生长因子、碱性纤维细胞生长因子、在胃肠道癌组织的表达

一、材料和方法１促血管内皮细胞生长因子的抗体：兔抗转化生长因子（ＴＧＦβ３）和碱性纤维细胞生长因子（ＢＦＧＦ）均由美国ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司供应。２组织来源：１３例胃癌，１６例肠癌和１９例肝癌组织均为手术切除标本，正常胃（５例），肠（３例）及...     

c-erbB-2、p53、bcl-2和nm23-H1在肺癌中的表达

目的：探讨ｃｅｒｂＢ２、ｐ５３、ｂｃｌ２和ｎｍ２３Ｈ１基因在肺癌发生发展过程中的作用。方法：用免疫组化ＡＢＣ法对原发性肺癌组织中４种基因的表达和突变进行检测。结果：５８例肺癌中,３１例（５３４５％）ｐ５３过度表达,１８例（３１０３％）ｂｃｌ２过度表达。ｃｅｒｂＢ２与ｎｍ２３Ｈ１在１０例小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）中未见表达。而在４８例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣｓ）中两者过度表达率均为５０％。ｃｅｒｂＢ２与ｎｍ２３Ｈ１表达呈正相关（Ｐ＜００５）。腺癌ｎｍ２３Ｈ１的表达明显高于鳞癌（Ｐ＜００５）。ｐ５３、ｂｃｌ２蛋白表达在肺癌分化程度中呈负相关（Ｐ＜００５）。ｎｍ２３Ｈ１、ｐ５３和ｂｃｌ２的表达与患者的生存率有关（Ｐ＜００５）。结论：ｃｅｒｂＢ２、ｐ５３、ｂｃｌ２和ｎｍ２３Ｈ１基因蛋白产物的检测对肺癌患者的诊治和预后评估有积极意义。     

子宫颈癌组织中HPV16癌基因及p53基因的检测

利用ＨＰＶ１６Ｅ６、Ｅ７基因特异性引物，ＰＣＲ技术及抗癌基因ｐ５３外显子７特异性引物，ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术对３５例进展期子宫颈癌组织进行研究，发现：（１）３５例标本中ＨＰＶ１６Ｅ６、Ｅ７ＤＮＡ的总检出率为７１．４２％（２５例），其中同时检出Ｅ６、Ｅ７为３１．４２％（１１例），另外８．５７％及３１．４２％（３例及１１例）仅分别检出Ｅ６、Ｅ７序列。（２）全组未见１例有ｐ５３基因外显子７的点突变及等位基因缺失。该结果说明ＨＰＶ１６与本地区妇女子宫颈癌发生有密切关系，并且癌组织中ＨＰＶ１６Ｅ６、Ｅ７亚基因的分布是不均一的，ｐ５３基因外显子７的改变并不常见。在实验中我们还建立了使用生物素标记的ｄＵＴＰ进行ＰＣＲ－ＳＳＣＰ的技术。     

星形细胞瘤p16与Rb蛋白的表达及其相关性研究

目的检测ｐ１６与Ｒｂ蛋白在原发性星形细胞瘤中的存在状况，以探讨不同病理类型星形细胞瘤中ｐ１６与Ｒｂ蛋白表达及其相关性。方法使用抗ｐ１６及Ｒｂ蛋白抗体对１０２例星形细胞瘤手术标本进行免疫细胞化学检测。结果低度恶性星形细胞瘤（ＷＨＯⅠ～Ⅱ级）中ｐ１６及Ｒｂ蛋白均为阳性表达，在高度恶性星形细胞瘤（ＷＨＯⅢ～Ⅳ级）中其阳性表达分别为４８．１％（２６／５４）和５７．４％（３１／５４）。在３１例Ｒｂ蛋白阳性标本中，有２４例（７７．４％）显示ｐ１６蛋白表达缺失或低表达，而在２３例Ｒｂ蛋白阴性标本中却有１９例（８２．６％）显示ｐ１６蛋白阳性或强阳性。结论（１）ｐ１６及Ｒｂ蛋白参与星形细胞瘤细胞增殖过程并影响其细胞分化；（２）ｐ１６与Ｒｂ蛋白之间阳性表达的相互抑制，可能是高度恶性星形细胞瘤的标志之一。     

非小细胞肺癌中p16 INK4／CDKN2基因的缺失和点突变

目的为了探讨周期素依赖性激酶４抑制因子基因（ｐ１６ＩＮＫ４）与肺癌发生的关系。方法采用双重ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和序列分析方法，对３１例原发性非小细胞肺癌中ｐ１６ＩＮＫ４基因的存在状况进行了研究。结果３例存在ｐ１６基因缺失（３／３１），其中１例整个ｐ１６基因发生缺失，另两例则分别为外显子１和外显子２缺失；ｐ１６基因点突变２例（２／３１），外显子１和外显子２各一例；并发现在这五例基因异常样品中，４例（２例缺失和２例点突变）样品均为淋巴转移的非小细胞肺癌（４／２０）。结论提示ｐ１６基因失活和某些非小细胞肺癌（５／３１）的发生有关，并且可能发生在癌症的晚期。     

肺癌CDKN2/p16基因纯合缺失的研究

目的　研究 Ｃ Ｄ Ｋ Ｎ２／ｐ１６ 基因的缺失与肺癌发生、发展的关系。方法　采用多重聚合酶链反应技术,对８９ 例肺癌进行了 Ｃ Ｄ Ｋ Ｎ２／ｐ１６ 基因第１ 、２ 外显子纯合缺失的分析研究。结果　标本取材方法的改良提高了聚合酶链反应技术对基因缺失的检出率,８９ 例肺癌中检出第１ 外显子缺失率１９ ．１ ％ （１７／８９） ,第２ 外显子缺失率２２ ．５ ％ （２０／８９） ,有１４ 例第１ 、２ 外显子共同缺失,第１ 或（ 和） 第２ 外显子总缺失率为２５８ ％ （２３／８９） 。 Ｃ Ｄ Ｋ Ｎ２／ｐ１６ 基因的缺失集中发生于非小细胞肺癌, 并与转移和分期有关。结论 Ｃ Ｄ Ｋ Ｎ２／ｐ１６ 基因的缺失是非小细胞肺癌的遗传易感因素,并在其恶性进展中起一定作用。     

p16蛋白在肾细胞癌中的表达及其与细胞增殖活性和预后的关系

抑癌基因ｐ１６在多种肿瘤中有缺失或突变〔１〕。本文应用免疫组化方法观察５６例肾细胞癌（ＲＣＣ）中ｐ１６蛋白的表达，结合观察增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达状况，分析ｐ１６蛋白表达与ＲＣＣ细胞增殖活性及预后的关系。１材料和方法５６例ＲＣＣ中，男性４０例...     

Wilm瘤中p16基因缺失一例报告

为调查ｐ１６基因在Ｗｉｌｍ瘤中的改变，采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ法对手术治疗的２４例Ｗｉｌｍ瘤患者肿瘤组织标本，进行了ｐ１６基因第１，２，３外显子的突变筛查，结果未发现异常泳动带。用双重对照ＰＣＲ，发现一例ｐ１６基因的纯合缺失。这一结果支持Ｗｉｌｍ瘤的发生涉及多个基因改变的假说     

宫颈癌中HPV16E6基因表达与p53蛋白积累

宫颈癌中ＨＰＶ１６Ｅ６基因表达与ｐ５３蛋白积累宋建明王一理司履生一、材料和方法５１例宫颈癌标本取自我室存档的福马林固定、包埋的蜡块，其中Ⅰ级６例、Ⅱ级４２例、Ⅲ级３例。１．聚合酶链反应：石蜡切片脱蜡，经一步消化法提取模板ＤＮＡ，ＨＰＶ１６Ｅ６引物对为...     

人肺癌组织中p53,Rb基因突变研究

为探讨肺癌发生的分子遗传学机理，采用聚合酶链反应及聚合酶链反应－单链构象多态性技术，对４１例人肺癌组织中ｐ５３基因外显子５～８及Ｒｂ基因外显子１４～１６、２２～２３进行了突变分析。结果显示：ｐ５３基因突变１６例（１６／４１，３９％），分布于外显子５～７；Ｒｂ基因异常４例（４／４１，９．８％），其中外显子１４～１６区域部分缺失和外显子２２～２３区域突变各２例；在９例小细胞肺癌标本中，７例发生ｐ５３及Ｒ５基因的突变，其中１例存在ｐ５３基因两个外显子突变，另１例同时存在ｐ５３及Ｒｂ基因的突变。对部分ｐ５３基因突变标本序列分析，均在１个或３个密码子上存在导致ｐ５３蛋白异常的单碱基置换或插入突变。以上结果表明：肺癌、特别是小细胞肺癌的发生可能与ｐ５３及Ｒｂ基因的突变有关。     

细胞周期调节蛋白在胃癌中的表达异常及其意义

一、材料与方法１．标本来源：４０例原发性胃癌标本选自上海第二医科大学瑞金医院普外科１９９８年５月～１０月间手术切除并经病理检查证实的组织。患者中男性２７例，女性１３例，年龄３１～８２岁，中位年龄６０．１岁。按国际统一的ＴＮＭ分期法，Ⅰ期８例，Ⅱ期８例，Ⅲ期２１例，Ⅳ期３例。２．免疫组化：采用ＡＢＣ法免疫组化染色，微波抗原修复，切片经多聚赖氨酸（Ｓｉｇｍａ公司）预处理以防脱片。即用型ＳＡＢＣ试剂盒购自武汉博士德试剂公司，兔抗人ｐ１６多抗、兔抗人Ｒｂ多抗为ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品，即用型鼠抗人细胞…     

附睾乳头状囊腺瘤1例

患者男，３０岁。右侧附睾头部结节１０余年。手术见为右侧附睾头部一个约２５ｃｍ×２ｃｍ×２ｃｍ的肿块。病理检查：附睾结节（２８ｃｍ×１７ｃｍ×１ｃｍ）与一段输精管相连，结节表面包膜完整，切面呈蜂窝状，内容为清亮液体，最大囊腔约花生米大小，囊壁内附...     

转化生长因子β1和β3在前列腺癌的表达及意义

一、材料与方法１标本：选用我院１９８６～１９９６年间前列腺癌４６例，年龄５３～８４岁，平均６８２±９１岁。组织学分级（Ｇｌｅａｓｏｎ标准）：２～５分（高分化）２５例，６～８分（中分化）１９例，９～１０分（低分化）２例。临床分期（Ｊｅｗｅｔｗｈ...     

鼻咽癌组织中bcl-2、bax和p53的表达及其与瘤细胞凋亡的关系

目的：了解鼻咽癌组织中瘤细胞ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达及其与瘤细胞凋亡指数（ａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｅｘ,ＡＩ）的关系。方法：对３８例未经治疗的鼻咽癌组织,应用免疫组化ＬＳＡＢ法检测瘤细胞ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达;末端标记细胞死亡检测法（ＴＵＮＥＬ）计算癌细胞的凋亡指数。结果：（１）３７例（９７４％）中有９０％左右的瘤细胞呈ｂｃｌ２过表达;（２）３８例（１００％）中有７０％左右的瘤细胞过表达ｂａｘ;（３）２９例（７６３％）呈ｐ５３过表达;（４）３８例活检组织的平均ＡＩ为２６０２±２６４２／ＨＰＦ;（５）ＡＩ与ｂｃｌ２、ｂａｘ和ｐ５３的表达无相关性。结论：（１）本组大多数鼻咽癌组织的绝大部分瘤细胞均呈ｂｃｌ２和ｂａｘ高表达;（２）由于ｂｃｌ２和ｂａｘ的表达已在高水平达到相对平衡,因此在大多数人体鼻咽癌中它们可能并不起到介导瘤细胞凋亡的主导作用;（３）鼻咽癌组织中过表达的ｐ５３蛋白可能已失去了调节ｂｃｌ２和ｂａｘ的表达进而影响细胞凋亡的功能。     

幽门螺杆菌感染与慢性胃炎不同病变的相关性研究

１　材料和方法１１　病例来源　本科１９９７年诊断的７７６例慢性胃炎（ＣＧ）。１２　幽门螺杆菌（ＨＰ）检查方法　①尿素酶试验，②胃粘膜组织革兰染色，③细菌培养。以上三项检查中两项或两项以上阳性者诊断为ＨＰ阳性。１３　数据处理和分析２　结果２１　一般情况　在７７６例研究对象中，慢性浅表性胃炎（ＣＳＧ）５５９例，慢性萎缩性胃炎（ＣＡＧ）２１７例：４５８例男性，３０８例女性，年龄１４～８０岁，平均４０９６岁。２２　年龄、性别与ＨＰ感染的关系　～３０岁、～４０岁和＞４０岁组的ＨＰ感染率分别为：…     

p16与细胞周期调节蛋白在食管癌中的表达

细胞周期的调控异常与肿瘤的发生密切相关。其中，ｃｙｃｌｉｎＤ１细胞周期依赖性蛋白激酶４（ＣＤＫ４）ｐ１６，这一以ＣＤＫ４为中心的细胞周期调控途径较为明确，且其各组分的异常与肿瘤的关系十分密切，我们用免疫组化方法对４３例原发食管癌中的ｐ１６、ｃｙｃｌｉｎＤ１、ＣＤＫ４蛋白的存在状态进行了研究，旨在探索其相互的作用及与食管癌发生的关系。一、材料和方法１．标本：４３例食管癌组织取自河南医科大学第二附属医院和河南省肿瘤医院１９９６～１９９７年的手术切除标本。患者术前未接受过放、化疗。每例标本分别取癌…     

p170,p53,p16和p21蛋白在膀胱癌中表达的意义

ｐ１７０、ｐ５３、ｐ１６和ｐ２１蛋白在膀胱癌中表达的意义杨毅郭雪西高伟陈丽张辉朱振庆一、材料和方法５０例膀胱癌标本取自我院病理科１９８６～１９９４年手术切除标本，膀胱移行细胞癌４６例，其中Ⅰ级６例，Ⅱ级１４例，Ⅲ级２６例，鳞癌４例。另取６例正常膀胱粘...