肿瘤坏死因子(TNF)介导的鼠天然细胞毒活性

已知小鼠天然的细胞介导的细胞毒活性与自然杀伤(NK)细胞和自然细胞毒(NC)细胞两类效应细胞有关。两者在对其靶细胞类型的选择,细胞表面特征以及对调节因子的敏感性等力面有所不同。测定鼠NK活性的典型靶细胞是YAC-1淋巴母细胞系,而测定NC活性的主要靶细胞是WEHI-164。鼠NK细胞表面含有asialo-GM_1、及Ly_5、Qa_5、NK_1和NK_2等表面抗原,有些鼠还表达Thy-1抗原。但用抗     

人早孕滋养细胞与蜕膜基质细胞共培养对外周NK细胞的影响

为了分析人早孕母-胎界面功能细胞对外周NK细胞表型及功能的调节作用,我们模拟母-胎界面微环境,建立滋养细胞和蜕膜基质细胞共培养系统,并将此共培养体系与外周NK细胞共培养,采用流式细胞术分析NK细胞的表型和细胞因子的表达,用细胞毒检测试剂盒检测NK细胞的细胞毒活性。研究发现,母-胎界面滋养细胞与蜕膜基质细胞共培养体系能够显著上调外周NK细胞抑制型受体KIR2DL1的表达,下调外周NK细胞杀伤性受体NKp44的表达;显著上调Th2型细胞因子IL-10的表达水平,下调外周NK细胞穿孔素perforin表达及其细胞毒活性。结果表明,母-胎界面功能细胞能够诱导外周NK细胞的耐受表型及Th2型优势,下调外周及蜕膜NK细胞的细胞毒活性,从而有利于形成母-胎界面免疫耐受微环境。     

MiR-191过表达抑制NK细胞的肿瘤杀伤活性和细胞凋亡

目的研究miR-191过表达对自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)的凋亡和肿瘤杀伤活性的影响。方法通过免疫磁珠阴性分选方法从小鼠脾脏中分离NK细胞,体外用IL-2刺激扩增5～7 d后,采用流式细胞术分析NK细胞的细胞毒活性和凋亡情况。制备小鼠骨髓、脾脏、淋巴结和胸腺的单细胞悬液,计算细胞总数后,采用流式细胞术分析NK细胞的比例和数量。结果与野生型(WT)小鼠相比,miR-191过表达转基因TgmiR-191小鼠NK细胞的凋亡率及其对小鼠淋巴细胞瘤细胞RMA-S的特异性杀伤活性均显著降低。miR-191过表达可显著增加脾脏和淋巴结的NK细胞数量。结论 miR-191过表达对NK细胞的肿瘤杀伤活性和细胞凋亡有明显的抑制作用。     

人类红细胞的NK增强因子的鉴定

NK细胞是一类与免疫监视有关的一类淋巴细胞,也是造血的重要调节细胞.RBC是外周血中主要的细胞成分,占全血容量的50%.文章作者以前的研究发现在RBC存在的情况下,NK细胞能明显提高其对肿瘤细胞的细胞毒活性.文章研究了对NK细胞的活性有提高作用的红细胞成分.从健康供血者采血经密度梯度离心分离PBL和RBC,PBL用于NK活性检测作为效应细胞.RBC用蒸馏去离子水低渗破坏,20000g离心15分钟,将细胞膜与细胞溶质分开.NK活性检测为标准4小时~(51)Cr释放     

HC对NK细胞毒活性的负调节作用

传统观点一直认为NK的细胞的细胞毒作用与MHC无关，近年来发现MHC对NK细胞毒活性具有负调节作用。本文综述了NK细胞毒活性特异性抑制型受体的克隆、表达；探讨其效应的可能机制；提出在临床疾病诊断及治疗中的潜在前景。     

卵巢肿瘤患者外周血NK细胞受体NKG2A、NKG2D及NK活性检测的临床意义

通过研究卵巢癌及良性卵巢肿瘤患者外周血NK细胞表面受体的表达情况及NK活性的变化,分析探讨宿主NK细胞受体与肿瘤免疫逃逸的关系及其临床价值。分离受检者外周血单个核细胞,应用MTT法检测NK细胞的细胞毒活性,流式细胞术检测NK细胞受体NKG2D和NKG2A的表达,并结合临床病理因素作比较分析。结果显示,与良性卵巢肿瘤组和正常组相比,卵巢癌患者外周血NK细胞的细胞毒活性降低,NK细胞表面NKG2D的表达水平降低,而NKG2A的表达水平明显升高,其变化与卵巢癌的病情进展有关。此结果表明,卵巢癌患者机体NK细胞杀伤活性下降,NKG2D与NKG2A二者之间的平衡表达可能对NK细胞的功能状态起着重要的调节作用。     

羊膜间充质干细胞抑制NK细胞的细胞毒活性和单核细胞的功能

目的探讨人类羊膜来源间充质干细胞(human amnion-derived mesenchymal stem cells,HAMs)的免疫抑制功能。方法利用NK细胞可以靶向杀死K562细胞的原理,HAMs和NK细胞共培养后,收集NK细胞并用其作用K562细胞,通过流式细胞技术(FACS)检测K562细胞的死亡率,进而评估NK细胞毒活性变化及HAMs对NK细胞毒活性的影响,探讨HAMs的免疫抑制功能;利用单核细胞分泌细胞因子TNF-α和IL-6的特性,HAMs和单核细胞共培养后,通过FACS检测单核细胞对TNF-α和IL-6表达率的变化,进而评估HAMs对单核细胞分泌功能的抑制能力,探讨HAMs的免疫抑制功能。结果 HAMs抑制NK细胞的细胞毒活性和单核细胞的因子分泌功能。结论 HAMs具有免疫抑制功能。     

139例恶性肿瘤患者外周血自然杀伤细胞活性的研究

本研究采用细胞介导微量细胞毒测定法检测139例恶性肿瘤患者和355例健康个体外周血自然杀伤细胞(NK细胞)对用~(125)IUdR标记的K562靶细胞的细胞毒直接杀伤效应。结果表明,肿瘤患者NK细胞活性显著低于健康个体,其中,肝胆肿瘤和晚期肿瘤患者NK活性降低尤为显著,临床治愈者NK活性恢复到正常人水平。不同临床阶段肿瘤患者经过肿瘤手术切除以及药物加放射线治疗好转者NK活性均显著升高。健康个体随着年龄增长NK活性下降,说明非特异免疫监视能力减弱与肿瘤的发生、发展关系密切。     

NK细胞的形态学

十多年来,一些学者研究了人及动物NK细胞的性质.越来越多的迹象表明NK细胞有多种功能:包括对肿瘤,对病毒、对其他微生物感染、对骨髓移植的天然抵抗力.现就NK细胞的形态学、NK与K细胞的关系、NK细胞的细胞毒机理、NK细胞的调节作用、NK细胞与肿瘤及感染等的关系分别加以讨论.一、NK细胞的特征Santoli等(1979)从单个核细胞组分中除去粘附的及吞噬细胞,发现增强了细胞毒活性,并发现细胞毒组分富含于带有IgGFc受体的细胞而不含于具有IgMFc受     

紫草萘醌提取物对小鼠NK细胞活性的增强作用

本文研究了紫草萘醌单体提取物(Lm)对小鼠NK细胞毒活性的调节作用。每日经腹腔注射每公斤体重6mg的Lm,连续5天,小鼠脾细胞NK细胞毒提高约20%(p<0.001).细胞毒动力学分析的结果显示:给药小鼠的动力学实验参数Vmax和Kmapp均明显增加而Vmax/Kmapp则无明显变化,提示Lm增强NK活性的机理为增加了杀伤细胞的频率.     

自然杀伤细胞发生学的研讨

发现自然杀伤细胞(NK)以来,关于其抗肿瘤、抗病毒、调节机体免疫等方面,人们已进行了不少的研究.但关于NK细胞发生学方面的研究,尚处于初级阶段,有待于探讨的问题很多.本文就NK细胞在该方面的研究现状加以综述.一、关于NK细胞的起源和分化目前几乎已经肯定NK细胞发源于骨髓干细胞,尔后分布于外周组织.主要是脾和外周血中.在人类胸腺、肠系膜、淋巴结、扁桃体及骨髓中,均无明显的NK细胞活性     

血小板T细胞活化抗原1分子在NK细胞上的作用研究

目的 研究血小板T细胞活化抗原1（PTA1）分子在NK细胞杀伤过程中的作用。方法 应用重民地向细胞毒实验,探讨了PTA1分子对混合淋巴细胞反应中活化的NK细胞杀伤作用的影响。结果 在重导向细胞毒实验中,PTA1 McAb能明显上调NK细胞及CTL的杀伤活性。结论 PTA1分子在NK细胞上具有刺激性受体的功能。     

白细胞介素15与天然免疫

白细胞介素 15 (IL 15 )是一种广泛分布于人体组织和细胞的一种细胞因子。它与白细胞介素 2 (IL 2 )具有某些相同的生物学活性和受体组成。它能促进B细胞的分化增殖 ,诱导NK细胞增殖、细胞毒活性、细胞因子的产生等。本文主要就IL 15在NK细胞和巨噬细胞 (MΦ)相互调节中的作用 ,IL 15对γδT细胞及NK T的作用特点 ,IL 15与粘膜免疫 ,以及IL 15抗病毒作用的最新研究结果作一综述     

急性白血病患者治疗前后骨髓中NK细胞活性和数量的对比研究

通过比较急性白血病患者治疗前后骨髓中NK细胞活性和数量的变化,探讨其在白血病治疗中的意义和白血病治疗的免疫学方法.用淋巴细胞分离液分离骨髓和外周血中单个核细胞,用MTT法测定NK细胞的活性,用流式细胞仪测定NK细胞的数量.结果显示:30例初发组白血病患者NK细胞活性[(13.52±5.82)%]和数量[(6.63±2.95) %]与缓解组NK细胞活性[(30.50±9.67)%]和数量[(13.57±4.48)%]相比均明显降低,两者存在统计学差异(P＜0.01).结论:急性白血病患者完全缓解后骨髓中NK细胞的活性和数量均明显提高.     

卵巢恶性肿瘤患者红细胞CR1密度相关基因多态性与NK细胞活性相关性研究

对 5 1例卵巢癌、 43例良性肿瘤和 40例正常妇女采用PCR PFLP方法测定红细胞CR1(ECR1)密度相关基因多态性 ,采用K5 6 2细胞毒试验测定NK细胞活性。发现卵巢癌患者NK细胞活性明显低于正常人和良性卵巢肿瘤患者 (P <0 0 1)。ECR1密度相关基因多态性高表达型 (HH )的NK细胞活性明显高于ECR1中表达型 (HL )的NK细胞活性 ,而ECR1密度相关基因组HL型的NK细胞活性明显高于ECR1低表达型 (LL )的NK细胞活性。这些结果表明红细胞增强NK细胞活性与红细胞CR1密度相关基因组多态性型别密切相关     

IL-15通过ERK1/2信号途径对NK细胞活性的调节

目的 阐明IL-15在NK细胞功能调节中的作用及信号转导途径的活化。方法 直接免疫荧光证实NK-92细胞膜表达表达IL-15Rα链，制备NK-92细胞的全细胞提取物进行Western blot检测IL-15诱导的信号转导途径，MTT方法评价IL-15对NK细胞增殖和细胞毒能力的调节作用。结果 NK-92细胞表面存在IL-15Rα链的表达，构成IL-15与NK相互作用的分子基础。在IL-2依赖性NK细胞系NK-92中，较低剂量的IL-15（25-100U/ml)可以完全替代IL-2以维持NK细胞的杀伤活性并对NK细胞的生长起促进作用。免疫印迹显示IL-15迅速活化ERK1/2（extracellular regulated kinase 1and2)信号途径，而其它信号分子（STAT1，STAT3，STAT6，P38MAPK，PI-3K，NF-кB)并不被IL-15活化，提示ERK1/2是IL-15调节NK细胞功能中重要的信号分子。结论 IL-15对NK细胞具有强大的调节作用。IL-15通过ERK1/2信号途径完成对NK细胞活性的调节。     

人类自然杀伤细胞毒因子(NKCF):IFN-α的作用

自然杀伤(NK)细胞是淋巴细胞中一异质性细胞群,在体外它无须致敏即对靶细胞有广谱的细胞毒作用.NK细胞溶解靶细胞的机制尚未完全清楚,最近人们提出在同适宜诱导细胞接触的NK细胞的上清中,有一种可溶性细胞毒因子——NKCF,它参与NK介导的细胞溶解.干扰素(IFN)和IFN诱导剂可在体内、外刺激自然细胞毒性.IFN似乎可以诱导前体细胞分化为成熟细胞毒效应细胞,并可活化成熟NK细胞.但IFN激活NK细胞的机制仍不清楚.本文证明:人类NK细胞产生NKCF总与IFN-α的产生相关,NKCF的产生和它的溶细胞活性似乎都依赖于IFN-α.首先,作者将去粘附细胞的淋巴细胞用Percoll密度梯度离心获取各种组分,再将     

NK-IL-2-IFN系统与免疫调节

NK细胞以其自然性抗肿瘤、抗病毒效应而引人重视.在深入探讨NK如何获得这些功能活性的研究中,发现IL-2和IFN在NK细胞的增殖、分化及活化过程中,起到重要的调节作用;而且在一定条件刺激下,NK细胞本身即可产生IL-2、IFN等淋巴因子.NK细胞在人体内的发育分化过程,大体经历先躯细胞(progenifor,Pro-NK)、前身细胞(Pre-NK)和成熟细胞或自然活性细胞等三个阶段.Pro-NK和Pre-NK出现于造血组织(骨髓),成熟型NK则进入血流及脾脏等周围淋巴组织.对于这些不同发育阶段的NK细胞的增殖、分化及活化,IL-2和IFN是必不可缺的调节因     

LAK细胞活性:血与脾脏中效应细胞及其前体细胞的特征

LAK细胞为IL-2激活的杀伤细胞,这些细胞不但能溶解NK敏感靶细胞,也能溶解NK抵抗靶细胞,对新分离的自体和同种肿瘤细胞亦有细胞毒作用。研究表明,NK细胞也可在IL-2的作用下,释放γ-干扰素。多数血或脾淋巴细胞介导的LAK活性,均系IL-2刺激NK细胞产生。靶细胞对NK细胞溶解敏感与否是相对的,有时,未经刺激的NK细胞,可溶解“NK抵抗”靶细胞。各种增强NK活性的因子(干扰素、IL-2),不仅能提高NK细胞对抗NK敏感靶细胞的反应性,也可诱     

携带鼠白细胞介素-12基因腺病毒载体(AdCMVIL-12)抗B16黑色素瘤的实验研究

白细胞介素12(interleukin-12，IL-12)能显著增强NK细胞和特异性CTL细胞的细胞毒活性；促进T细胞、NK细胞增殖；刺激T细胞及NK细胞分泌多种细胞因子，特别是IFN-γ，诱导Th1细胞的分化，显示出其在肿瘤的免疫治疗中将起重要作用。