Bcl-2基因与大鼠局灶性脑缺血再灌注后的细胞凋亡

细胞凋亡 ( apoptosis)是细胞死亡的一种形式 ,是由基因介导的主动的细胞自杀现象。以往人们认为坏死是脑缺血后神经细胞死亡的唯一方式。近年来随着生物技术进展 ,更多证据表明脑缺血后神经元死亡由凋亡和坏死共同引起 [1 ] ,此过程中有凋亡相关蛋白表达。目前认为 bcl- 2基因是一种重要的内源性抗凋亡因子 [2 ] ,对维持局灶性脑缺血再灌注后某些神经细胞的生存具有重要作用 ,但其作用机制仍不清楚。本文就脑缺血再灌注后 bcl- 2基因家族与细胞凋亡的关系作一综述。1　 Bcl- 2基因家族1.1　 Bcl- 2基因的定位和分子结构 :Bcl- 2基因是Tsu…     

依托咪酯后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤氧化应激反应的影响

缺血性脑血管疾病的发病率逐年增高,敏感的脑组织需要及时恢复血流再灌注,缺血后再灌注引起机体氧化应激反应增强,进一步导致组织损伤和功能障碍,怎样抑制缺血再灌注的损伤成为焦点.依托咪酯预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究中表明：预处理可明显减少大鼠脑梗死体积,提示依托咪酯对大鼠局灶性缺血再灌注损伤有保护作用.本实验通过建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型探讨依托咪酯后处理对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激反应的影响.     

钙蛋白酶抑制剂calpeptin对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的 应用大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,研究钙蛋白酶抑制剂calpeptin对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响.方法 32只SD大鼠随机分为4组,每组8只.单纯缺血组(I组):大脑中动脉闭塞2h;calpeptin组(C组)大鼠在2h的大脑中动脉闭塞前30min经侧脑室注射calpeptin50μg;二甲基亚砜(DMSO)组(D组)大鼠在2h的大脑中动脉闭塞前30min经侧脑室注射DMSO 5μL;对照组(S组)不闭塞大脑中动脉,其余手术操作同其他组.各组大鼠在2h的缺血后均再灌注48h.分别在再灌注12、24、48h行神经功能学评分,在再灌注48h后应用TTC染色法测定脑梗死体积.结果 S组大鼠在再灌注后各时间点的神经功能学评分与术前相比无明显变化,手术后48h未发现梗死灶.C组大鼠各时间点的神经功能学评分及再灌注48h脑梗死体积均低于I组和D组(P＜0.05),而I组和D组之间无显著性差异(P＞0.05).结论 缺血前应用钙蛋白酶抑制剂可以显著减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤.     

大鼠局灶性脑缺血/再灌注后NF-kB表达和细胞凋亡

目的:研究脑缺血再灌注后大鼠脑组织半暗区核因子(nuclear factor kappa B,NF-kB)基因表达的变化与神经细胞凋亡的关系。方法:用插线法制作大鼠大脑中动脉(M CAO)栓塞/再灌注模型,原位杂交法检测大鼠脑重度缺血(3h)及再灌注损伤不同时间点(2、3d)半暗区NF-kB表达;TUNEL法测定凋亡细胞。结果:脑缺血再灌注后,缺血半暗区NF-kB的表达明显升高(P<0.01)。凋亡细胞数量亦显著增加(P<0.01)。细胞凋亡的时程变化与NF-kB的表达基本一致。结论:局灶性重度脑缺血再灌注后可引起NF-K b表达的增加,参与缺血再灌注神经细胞损伤机制。     

转化生长因子β1对大鼠局灶脑缺血/再灌注后细胞凋亡的影响

近年来,有学证实转化生长因子β1(TGF-β1)可减少缺血所致神经元损害,但其具体方法及作用机制目前还处于探索阶段,国内尚处于开始阶段。本研究中,我们通过给予外源性TGF-β1观察它对大鼠脑缺血再灌注损伤及细胞凋亡的影响,现报告如下。     

红景天苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用

目的探讨红景天苷(salidroside,Sal)对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的神经保护作用及其机制。方法健康成年♂SD大鼠36只,随机分为3组:假手术组(sham)、模型对照组(MCAO组)、红景天苷给药组(MCAO+Sal组)。通过线栓法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤模型,Longa评分法对大鼠神经功能损伤评分,焦油紫染色法对神经细胞内尼氏(Nissl)小体染色,RT-q PCR技术检测大鼠缺血侧脑组织Neun、Nogo-A与Ng R m RNA的表达,Western blot法检测大鼠缺血侧脑组织Bcl-2、Neun、BDNF、NGF、Nogo-A与Ng R蛋白的表达。结果与MCAO组比较,红景天苷能明显降低神经功能损伤,增加Nissl阳性细胞的数量,促进Bcl-2、Neun、NGF、BDNF的蛋白表达,降低Nogo-A及其受体Ng R的m RNA及蛋白表达。结论红景天苷能够降低MCAO模型大鼠神经功能损伤,增加Nissl阳性细胞数目,提高Neun的表达,具有神经保护作用,此作用是通过促进抗凋亡因子Bcl-2及神经营养因子NGF、BDNF的蛋白表达,下调轴突生长抑制因子Nogo-A及其受体Ng R的蛋白表达所实现。     

硫酸镁对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

急性脑缺血再灌注后神经损伤在临床上发生率高 ,病人预后差 ,目前尚缺乏确切有效的治疗手段。研究表明Ｎ 甲基 Ｄ 天门冬氨酸 (ＮＭＤＡ)受体介导的神经兴奋毒性在缺血性脑损伤中起关键性作用。硫酸镁是ＮＭＤＡ受体的非竞争性拮抗剂 ,本实验意在探讨其对大鼠脑缺血再灌注后神经损伤的保护作用 ,为临床应用硫酸镁防治脑缺血损伤提供实验依据。方法和结果方法 :选 50只ＳＤ大鼠 ,参照Ｌｏｎｇａ ｓ插线法 ,制备左侧局灶性脑缺血—再灌注动物模型 ,4小时后拔除插线。将大鼠随机分为 5组 ,每组 10只。 ( 1)再灌注前高硫酸镁组 (ＨＢ) ,于再灌…     

白藜芦醇对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨白藜芦醇对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及相关机制。方法用线栓法制备大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型,对神经行为进行评分,再灌注6h后测定大鼠脑组织中MDA含量、GSH-Px及SOD活性。结果白藜芦醇能明显改善大鼠行为障碍,提高GSH-Px、SOD酶活力,降低MDA含量。结论白藜芦醇对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与提高抗氧化酶活性、抗自由基损伤等作用有关。     

Notch1对局灶性脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响

目的研究Notch1对脑局灶性缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响,为缺血性脑血管病临床治疗寻找新的靶点。方法 72只SD雄性成年大鼠随机分为等量4组:假手术组(Sham组),缺血再灌组(I/R组),Notch1抑制剂组(DAPT组),溶剂对照组(Vehicle组)。采用线栓法大脑中动脉阻塞(MCAO)模型制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血90 min为标准。Sham组仅分离血管,不插入线栓,Notch1抑制剂组或Vehicle组在模型建立再灌注恢复后立即向缺血对侧侧脑室分别注射DAPT或单纯溶剂(PBS+DMSO),每天1次,分别于术后1、3、7 d断头取脑,病理学观察缺血再灌注侧皮层损伤情况,TUNEL法检测神经细胞凋亡指数(AI),Weatern blot检测PARP裂解片段含量、Notch1活性片段NICD、Akt和Bad磷酸化水平。结果与Sham组相比,I/R组神经细胞凋亡指数及PARP裂解片段含量增加,NICD、磷酸化Akt及Bad水平升高,差异有明显统计学意义(P<0.05);与I/R组相比,给予Notch1抑制剂DAPT后,神经细胞凋亡指数及PARP裂解片段含量明显增加,NICD、磷酸化Akt及Bad水平明显下降,差异有显著性(P<0.05),而溶剂对照Vehicle组的各项指标无明显差异。结论 Notch1在脑缺血再灌注损伤中具有抑制神经细胞凋亡作用,其作用机制可能与增强Akt磷酸化水平,促进Bad失活有关。     

松龄血脉康对大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤和细胞凋亡的影响

目的探讨松龄血脉康对局灶性脑缺血-再灌注损伤和细胞凋亡的作用及机制。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型。观察松龄血脉康对脑缺血-再灌注损伤大鼠行为学、海马CA1区凋亡细胞数、细胞超微结构的影响;运用免疫组织化学法检测海马凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白免疫反应阳性细胞表达。结果松龄血脉康显著降低MCAO模型大鼠神经功能缺损评分,明显减少海马组织凋亡细胞数,促进海马神经元修复,松龄血脉康组海马Bcl-2的表达明显增加、Bax的表达降低。结论松龄血脉康可减少脑缺血-再灌注损伤后神经元的凋亡而发挥脑保护作用,机制可能与增强Bcl-2的表达及抑制Bax的表达有关。     

大鼠脑缺血再灌注损伤后c-myc蛋白和mRNA表达及细胞凋亡的研究

目的　研究大鼠局灶性脑缺血再灌注后即早基因c- myc蛋白和c-mycmRNA表达及细胞凋亡的变化。方法　采用线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。应用免疫组织化学法、原位杂交法检测c -myc蛋白和mRNA表达 ,利用原位杂交法和转移酶介导dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)研究凋亡细胞的变化。结果　脑缺血再灌注后c -myc蛋白和c- mycmRNA表达较正常对照组及假手术组表达明显增强 ;凋亡细胞显著增多(P <0 . 0 1)。结论　局灶性脑缺血再灌注能够引起c- myc蛋白和mRNA表达增加 ,从而参与脑缺血再灌注损伤的发病机制 ,引发神经细胞凋亡。     

黄芪提取物对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后炎症因子及细胞凋亡的作用

目的研究黄芪提取物(EA)对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法采用线栓法大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,以免疫组化法观察EA对缺血再灌注后大鼠脑组织中TNFα表达的影响、以放免法观察对IL1β水平的影响、以TUNEL法观察对脑组织细胞凋亡的影响。结果与模型组比较,EA(20、40、80mg·kg-1,ig)能减少TNFα的表达、降低IL1β水平和减少细胞凋亡数。结论EA对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织中TNFα及IL1β的升高和神经元的凋亡有明显的抑制作用。     

后适应对大鼠实验性局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的研究后适应对大鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用与氧自由基的关系。方法大脑中动脉线拴法(MCAO)制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型:50只♂性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、脑缺血/再灌注模型组(MCAO)、预适应组(MCAO+preconditioning)、后适应组(MCAO+postconditioning)和尼莫地平组(MCAO+nimodip-ine),每组10只大鼠。术后对大鼠进行神经缺陷评分,并取脑组织测量梗死体积。另取50只大鼠,分组、实验方法及步骤同上,术后取梗死侧脑组织做成匀浆,检测脑组织中丙二醛(MDA)、乳酸(LA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽(GSH)含量。结果后适应能减少大鼠实验性局灶性脑缺血的梗死体积、降低脑含水量,改善其神经行为。脑组织匀浆生化指标检测发现缺血后适应能降低脑组织中MDA和LA含量;升高SOD和GSH含量,与MCAO模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论缺血后适应能诱导脑缺血耐受,对脑缺血/再灌注损伤产生保护作用,其保护作用与增加脑组织的抗氧化能力有关。     

神经节苷酯对大鼠脑缺血神经细胞凋亡的影响

目的研究神经节苷脂(GM)对大鼠脑缺血神经细胞凋亡的抑制作用及可能机制。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型,♂SD大鼠,随机分成假手术组、模型对照组、GM低、中、高剂量治疗组,缺血48 h后各组大鼠神经功能缺陷评分,测定脑组织一氧化氮(NO)的含量,检测脑细胞凋亡率,分析脑缺血区诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和Caspase-3 mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型对照组、GM低、中、高剂量治疗组神经功能缺陷评分、NO含量、凋亡率、iNOS和Caspase-3表达量均增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组和GM低剂量治疗组比较,GM中、高剂量治疗组均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);模型对照组和GM低剂量治疗组之间差异无统计学意义(P>0.05),GM中剂量治疗组和高剂量治疗组之间差异也无统计学意义(P>0.05)。结论神经节苷酯减少iN-OS生成,抑制细胞凋亡,对缺血神经细胞产生保护作用。     

右美托咪定不同处理方式对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的干预研究

目的通过大鼠右侧大脑中动脉阻闭再灌注模型,探讨右美托咪定(Dex)3种不同干预方式对大鼠局灶性脑缺血再灌注脑损伤的影响、机制及差异性。方法将100只健康雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(L/R组)、Dex预处理组(Dex1组)、Dex后处理组(Dex2组)和Dex预处理联合后处理组(Dex3组),每组20只。应用Dex对动物模型做预处理、后处理、预处理联合后处理3种方式的干预,并检测各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量。结果①与Sham组比较,其他4组大鼠脑组织SOD活性降低,MDA含量升高,血清NSE含量升高(P<0.05)。②与L/R组比较,3个Dex组脑组织SOD活性均显著升高,MDA含量降低,血清NSE含量降低(P<0.05)。③Dex1组、Dex3组脑组织MDA含量和血清NSE含量低于Dex2组(P<0.05);Dex3组脑组织MDA和血清NSE含量低于Dex1组(P<0.05);Dex3组脑组织SOD活性高于Dex2组(P<0.05)。结论三种不同干预方式的Dex处理均能减轻局灶性脑缺血再灌注损伤。Dex预处理联合后处理能够产生效果更佳的脑缺血再灌注损伤保护作用。Dex抑制过度氧化应激反应,减少过量氧自由基生成,可能是其脑缺血再灌注损伤的保护作用机制之一。     

浅谈子宫内膜癌的药物治疗

子宫内膜癌是发生于子宫内膜的上皮性恶性肿瘤,绝大多数为腺癌,又称子宫体癌,好发于围绝经期和绝经后女性,70%～75%为绝经后妇女,是最常见的女性生殖系统肿瘤之一,占女性生殖系统恶性肿瘤的20%～30%,其发病率仅次于宫颈癌,是导致死亡的第三位常见妇科恶性肿瘤(仅次于卵巢癌和宫颈癌)。     

黄体酮防治大鼠缺血再灌注脑损伤中神经功能缺失及细胞凋亡

目的 :探讨黄体酮 (progesterone ,PROG)对脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法 :采用SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 (transientmiddlecerebralar teryocclusion ,MCAO)。将大鼠随机分为 6组 :假手术组、ischmia reperfusion (I R)组、溶剂 (二甲基亚砜dimethylsulfoxide ,DMSO )对照组、PROG预防组、PROG治疗组、PROG预防并治疗组 ,对各组动物脑缺血 再灌注后神经功能缺陷进行计分 ,并应用细胞死亡原位末端标记 (insituendlabeling ,ISEL)法研究脑组织细胞凋亡情况。结果 :(1)缺血 2h再灌注2 4h后神经功能缺陷计分 :假手术组为 0分 ,I R组为 1.38± 0 .92 ,DMSO组为 1.0± 0 .5 3,预防组为0 .35± 0 .5 1,治疗组为 0 .6 2± 0 .5 2 ,防治组为 0 .2 5± 0 .4 6。 (2 )高倍视野下凋亡细胞数 :假手术组为1.88± 0 .2 5 ,I R组为 4 1.38± 3.85 ,DMSO组为38.13± 5 .6 9,预防组为 2 2 .88± 2 .70 ,治疗组为2 5 .6 3± 2 .93,防治组为 2 0 .88± 2 .30。以上指标各药物处理组 (预防组、治疗组及防治组 )与I R组、DMSO对照组之间差异具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :PROG可减少局灶性缺血再灌注脑损伤动物模型神经功能缺失的发生 ,减轻局灶性缺血再灌流脑损伤 ,减少大鼠缺血再灌注后脑细胞凋亡。     

天麻素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨天麻素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,缺血2 h、再灌注24 h后检测大鼠的神经功能并评分,取大脑用红四氮唑染色后测定脑梗死灶面积和脑含水量,生化法测定大鼠脑组织匀浆中丙二醛(MDA)的含量,超氧化物歧化酶(SOD)和Na+-K+-ATP酶的活性.结果 天麻素能改善中动脉闭塞所致局灶性脑缺血大鼠的神经功能,明显缩小梗死面积,降低脑含水量,提高脑组织内Na+-K+-ATP酶和SOD的活性,降低MDA含量.结论 天麻素对大鼠脑缺血再灌注损伤有显著的保护作用;其机制可能与抗氧化、清除过多自由基和改善能量代谢有关.     

大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的动态变化

目的观察大鼠脑缺血再灌注后大脑皮质和纹状体神经细胞凋亡的动态变化。方法采用大鼠脑缺血2h,再灌注1h,6h,12h,24h和48h的脑缺血再灌注模型。用HE染色体和TUNEL标记的方法,观察大鼠大脑皮层和纹状体神经细胞凋亡的变化。结果在脑缺血再灌注早期有部分神经细胞发生凋亡,随再灌注时间的延长,凋亡细胞数目逐渐增多。24～48h达高峰。结论在脑缺血再灌注损伤时神经细胞凋亡起着重要作用。     

蝙蝠葛碱对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的治疗作用

目的研究蝙蝠葛碱(dauric ine,Dau)对脑缺血再灌注损伤的治疗作用和可能机制。方法线栓法阻断大鼠一侧大脑中动脉制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,于脑缺血后即刻、再灌注后11 h和23 h分别腹腔注射给予Dau 2.5、5和10 mg.kg-1。观察不同剂量Dau对脑缺血再灌注大鼠的神经功能状态、脑梗死面积、脑水肿程度及缺血侧脑组织病理学改变和髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)活性的影响。结果脑缺血后给予Dau,可明显降低缺血侧脑梗死及脑水肿程度,使神经病学症状得到明显改善;可减弱神经细胞损伤和脑实质内中性粒细胞浸润;能降低缺血再灌注损伤后脑组织内MPO的活性。结论蝙蝠葛碱对脑缺血再灌注损伤具有良好的治疗效果,其作用机制可能与其抗炎作用有关。