干细胞移植中畸胎瘤形成机制及其预防策略

干细胞具有在体内和体外分化的潜能,临床上可以应用干细胞移植修复组织器官损伤,尤其是治疗一些由细胞死亡或功能失调所致的疾病。干细胞移植在临床实践方面尚不成熟,仍有许多需要解决的问题,在受者体内形成畸胎瘤就是其中之一。本文将对干细胞在移植过程中形成畸胎瘤的机制以及近年来的预防方法做一综述。     

菲立磁标记胚胎干细胞移植肝损伤小鼠体内示踪研究

目的 观察菲立磁标记胚胎干细胞肝损伤模型移植后在体内迁徙、定居、增殖及与损伤肝脏整合.方法 将129/SvJ小鼠随机分为肝损伤和无肝脏损伤组,将最适菲立磁标记细胞数量经肝脏包膜下途径移植,通过对移植后第1、2、3周行肝脏MRI扫描观察移植细胞受体内定居增殖情况及受体肝内迁徙、定居情况.结果 菲立磁标记胚胎干细胞效率达到91.5%以上,体外有效引发MRI信号改变的最适移植细胞数量为1×105.肝脏MRI扫描,可观察到移植的标记细胞在受体肝内能定居并增殖,且与受体肝板有良好整合.结论 通过MRI活体示踪可以动态连续监测移植菲立磁标记胚胎干细胞体内的分布和增殖.     

脐带间充质干细胞分化为内皮细胞促进血管新生

目的 探讨脐带间充质干细胞能否在体内外分化为内皮细胞,参与血管新生.方法 体外实验采用内皮细胞生长因子和碱性成纤维细胞生长因子对脐带间充质于细胞进行诱导,观察其形态变化.体内实验将脐带间充质干细胞移植到小鼠后肢缺血模型中,采用免疫组织化学鉴定细胞在体内的迁移和分化,激光多普勒血流成像仪鉴定缺血局部血流恢复情况.结果 在体外脐带间充质干细胞能够形成血管网样结构.在体内脐带间充质干细胞能够分化为内皮细胞,表达CD31抗体,参与实验组的动物血管重建.与小鼠的血管网络发生整合,实验组的动物后肢血流灌注明显好于对照组.结论 脐带间充质干细胞能够分化为内皮细胞,参与血管新生,为治疗性血管新生提供新的细胞选择.     

磁性颗粒在干细胞移植示踪中的应用

干细胞是近年医学研究的热点之一,并且显示了良好的应用前景。移植干细胞在体内的迁移、分布、存活、增殖和分化等生物学变化是影响其疗效的重要因素。其中,干细胞在体内的迁移和分布是其发挥作用的第一步,加强对其监测对于我们理解移植干细胞在体内的生物学变化、进而提高干细胞疗法的疗效具有重要意义。目前,常用的干细胞标记和示     

神经干细胞移植改善脑缺血大鼠的神经功能研究

目的 探讨大鼠神经干细胞移植改善脑缺血所致神经功能损伤的可行性。方法 制作大鼠大脑中动脉夹闭致脑缺血模型，记录并比较损伤和移植干细胞前后大鼠的神经功能。6周后杀死大鼠，研究干细胞在体内分化和迁移的情况。结果 接受干细胞移植大鼠神经功能的改善显著好于未移植干细胞的对照组。免疫组织化学方法证实移植后干细胞在脑内分化成胶质细胞和少量的神经细胞，并向损伤区域迁移。结论 神经干细胞体内外均具有多向分化潜能。神经干细胞移植能够有效改善脑缺血大鼠的神经功能。     

干细胞活体示踪的研究现状

个性化的干细胞或经基因修饰的干细胞移植正在成为临床治疗手段[1].尽管发展迅速,但目前从动物实验到临床,尚未解决的问题还很多,如移植细胞的体内分布、迁移到靶器官的数量、在靶器官的分化、转归等.现就目前常用的活体示踪技术在干细胞移植治疗中的作用作一综述.     

不同移植时间对胚胎脊髓源性神经干细胞体内分化为神经元影响的实验研究

目的 探讨不同移植时间对胚胎脊髓源性神经干细胞体内分化为神经元影响,为胚胎脊髓源性神经干细胞移植防治骨骼肌失神经萎缩的最佳移植时间点的选择提供实验依据.方法 从孕龄14 d SD大鼠胚胎脊髓组织中分离、获得并鉴定脊髓源性神经干细胞.90只SD大鼠分为9组,分别于胫神经切断后0、1、2、3、4、6、8、12及16周,移植胚胎脊髓源性神经干细胞至切断胫神经远端神经外膜下,移植后4周取胫神经冰冻切片行免疫组化方法 计数神经元数量并进行图像分析.结果 损伤后1周移植时,神经元数量最多,其次为损伤后6周,损伤后16周组无神经元存在.结论 对胚胎脊髓源性神经干细胞体内移植后分化为神经元影响最小的时间点是损伤后1周,因此我们可以推断胚胎脊髓源性神经干细胞移植防治骨骼肌失神经萎缩的最佳移植时间点是损伤后1周.     

小鼠孤雌胚胎干细胞系的建立

目的利用化学激活的技术,建立小鼠孤雌胚胎干细胞系。方法用钙离子载体A23187和6-二甲基氨基嘌呤（6-DMAP）处理小鼠卵母细胞,待囊胚形成后,分离内细胞团,细胞传代、扩增。待传至37代时,核型检测查染色体,用微卫星技术进行纯合性鉴定,用免疫荧光技术检测胚胎干细胞表面标记Oct-4、SSEA-1及SSEA-4的表达情况,并用畸胎瘤试验检测其多向分化能力。结果该细胞株为孤雌来源,表现为正常二倍体核型,表达ALK,表面标志物Oct-4、SSEA-1阳性,SSEA-4阴性。体内注射后,在局部形成含三个胚层组织的畸胎瘤。结论通过钙离子载体A23187和6-DMAP化学激活小鼠卵母细胞,可以得到具有胚胎干细胞特性的细胞株。     

人胚胎干细胞系NJGLLhES1的建立

目的:使用人类冷冻胚胎建立新的人胚胎干细胞系。方法:将人类冷冻胚胎解冻后培养至囊胚,用免疫外科法分离内细胞团,以ICR小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,机械法传代。将此细胞系命名为NJGLLhES1,检测其核型,对其碱性磷酸酶和特异性标记物(Oct-4,SSEA-3,SSEA-4,TRA-1-60,TRA-1-81)进行鉴定,并进行类胚体形成实验及畸胎瘤成瘤实验,对其体内外分化能力进行检测。结果:NJGLLhES1已在体外培养逾1年时间。细胞呈人胚胎干细胞克隆样,具正常人类核型,碱性磷酸酶和胚胎特异性标记物的表达为阳性,可形成类胚体和畸胎瘤。结论:成功建立人胚胎干细胞系NJGLLhES1,此细胞系具人胚胎干细胞形态特征,可长期稳定增殖且保持不分化状态,核型正常,在体内外具有多向分化潜能。     

干细胞移植治疗心血管系统疾病在体示踪影像学研究进展

干细胞移植治疗心血管疾病在动物实验和临床实验中均有很大的进展,采用有效的无创伤性技术监测和追踪干细胞移植治疗的效果,并对移植体内的细胞分布、迁移进行动态的在体观察,对干细胞移植在动物实验研究和临床应用方面起到了促进作用。近年来,用来示踪心血管系统疾病中干细胞移植的各种显像技术和造影剂也有了长足的发展。现对光学成像、放射性核素标记干细胞显像及铁纳米颗粒标记干细胞显像等在体示踪技术进行综述。     

脂肪干细胞在治疗2型糖尿病膀胱功能障碍大鼠模型中的研究

目的制造2型糖尿病膀胱功能障碍的大鼠模型,探讨脂肪干细胞移植在糖尿病膀胱功能障碍中的治疗作用及治疗机制。方法制造2型糖尿病膀胱功能障碍大鼠模型,提取脂肪干细胞然后移植入大鼠体内,检测膀胱功能,并留取膀胱组织行组织学检测。结果脂肪干细胞可显著加快2型糖尿病膀胱功能障碍的修复,治疗组膀胱组织内血管数目显著增加。结论脂肪干细胞能够促进大鼠模型膀胱功能的恢复,促进血管形成是脂肪干细胞治疗过程中的重要的反应。     

脊髓损伤修复展望——神经干细胞和基因治疗

对神经干细胞进行遗传修饰,使其携带治疗基因。然后将细胞移植入脑部疾病动物模型体内。这些基因治疗及细胞移植技术正被用于研究脊髓损伤修复。人类中枢神经系统内也发现了神经干细胞,与啮齿类神经干细胞特点相似。这些干细胞能够在神经损伤和疾病后促进神经再生。移植研究证实神经干细胞和前体细胞能够根据移植部位的环境而进行相应的分化,并与宿主组织相结合。神经干细胞能够从多个部位分离出来,在培养     

自体骨髓CD34+干细胞移植治疗严重肢体缺血的实验研究

目的探讨自体骨髓干细胞移植是否能增加缺血肢体的新生血管形成.方法抽取5只犬骨髓20 ml,经Ficoll分离单核细胞,免疫磁珠分离CD34+细胞,在体外经血管内皮细胞生长因子诱导分化为内皮细胞,并经vWF抗染色鉴定.建立犬双侧肢体缺血动物模型,将Dil荧光标记的内皮细胞植入缺血肢体中.结果 CD34+干细胞移植4周后,激光共聚焦显微镜证实缺血肢体中移植的自体骨髓干细胞参与了新生血管形成;动脉造影见干细胞移植的肢体侧枝循环明显增加,微血管密度检测移植组也明显高于对照组(12.0±2.8 vs. 5.0±1.6/每高倍镜视野,t=4.17, P<0.05);干细胞移植的肢体ABI平均为0.58±0.14,对照肢体ABI平均为0.32±0.11,差异有统计学意义(t=2.95, P<0.05).结论自体骨髓干细胞移植能有效的促进缺血组织内的新生血管形成.     

同种异体器官移植联合造血干细胞移植与免疫耐受

过去10年,我们对移植免疫排斥机制的理解有了很大提高.在一些同种异体器官移植联合造血干细胞移植的病例,不用免疫抑制剂治疗,受体对移植物仍然保持长期免疫耐受,有作者把这一耐受现象归功于联合了造血干细胞移植.本文就从对这些案例的分析出发,回顾同种异体器官移植后供体特异性移植耐受形成的理论基础和历史沿革,最后阐明供体特异性移植耐受与造血干细胞移植之间并没有直接联系.     

自体骨髓干细胞移植治疗晚期肝硬化综述

干细胞是一类具有自我更新、增殖和多向分化能力的细胞,具有不对称分裂和无限增殖的特点,按来源可分为胚胎干细胞和成体干细胞.骨髓干细胞肝脏移植是将患者自体骨髓干细胞移植到其肝脏内,分化为有功能的实质细胞,以替代因退变、损伤、基因缺陷或自身免疫而受损的肝细胞,重构组织器官的结构和功能具体方法是从患者体内抽出少量骨髓,用先进的细胞分离技术分出移植所需的干细胞,通过介入把提取的干细胞注入病肝.目前,骨髓干细胞移植已具有较为完备的理论及实验基础,而自体骨髓移植、肝动脉插管介人治疗等均为临床上已经成熟的技术,因此在理论与技术方面均为干细胞肝脏移植提供了保障.我国是肝病尤其是病毒性肝炎的高发区,各种原因导致的肝硬化患者众多,在药物及原位肝移植治疗之外,自体骨髓源性干细胞移植治疗失代偿期肝硬化是一种全新而有效的新方法,其虽不能给肝病患者带来治愈性的效果,但可在很大程度上控制肝硬化的进展速度,提高肝硬化患者的生存质量.     

同种异体骨髓间充质干细胞关节腔内成软骨分化的实验研究

目的检测同种异体间充质干细胞在不接受免疫抑制治疗的正常羊关节腔内分化形成软骨能力。方法将同种异体间充质干细胞复合β-磷酸三钙陶瓷植入正常羊关节腔内。在进行干细胞体内植入前进行淋巴细胞混合试验,确保供体与受体动物间存在免疫排斥反应。异体干细胞植入8周后,取出植入物进行组织学与免疫组化分析。将其结果与自体间充质干细胞复合β-磷酸三钙陶瓷关节腔内植入以及无细胞复合的单纯β-磷酸三钙陶瓷关节腔内植入相应检测结果进行对比分析。通过检测受体血清内产生的针对供体细胞的特异性抗体,评估系统性免疫反应。结果未检测到针对同种异体间充质干细胞移植所产生的特异性免疫排斥反应。在复合异体干细胞的植入物内没有发生明显炎性细胞浸润,并且没有检测到有针对异体细胞的抗体产生。组织学和免疫组化分析表明在复合异体及自体间充质干细胞的植入物内有新生软骨形成。在无细胞复合的植入物内未检测到软骨形成。结论受关节腔环境影响,同种异体间充质干细胞能够分化形成软骨组织。在被移植到不经免疫抑制治疗的同种异基因动物体内后,细胞陶瓷复合体不引起特异性免疫排斥反应。     

骨髓间充质干细胞与移植免疫的研究进展

骨髓间充质干细胞是目前倍受关注的一类具有多向分化潜能和高度自我更新能力的组织干细胞.除具有支持体外造血、促进体内造血功能重构外,还具有较低的免疫原性和抑制异体T淋巴细胞增殖的作用,在调节移植免疫方面发挥着重要作用.     

间充质干细胞治疗激素耐药的重度急性移植物抗宿主病的Ⅱ期临床研究

重度移植物抗宿主病(GVHD)是异基因造血干细胞移植的致命性并发症,糖皮质激素是急性GVHD的一线治疗药物,但激素治疗的有效率仅为30%～50%,且激素耐药的重度急性GVHD患者预后极差.间充质干细胞(MSC)可以调节体内外的免疫反应,因此MSC可用于治疗异基因造血干细胞移植后急性GVHD.本研究旨在观察骨髓MSC治疗激素耐药的重度急性GVHD的疗效.     

细胞微囊技术在再生医学领域的应用

细胞微囊具有良好的免疫隔离作用.微囊体内移植仍面临炎性细胞浸润和纤维化包襄的难题,微囊制备、材料选择及体内移植部位对提高其生物相容性尤为重要.目前细胞微囊化技术在再生医学领域的应用受到广泛重视,转基因干细胞微囊化后可持续分泌组织再生所需生长因子,微囊创造的微环境也为干细胞分化提供了有利场所.     

干细胞在肝硬化中的应用进展

肝硬化在我国的发病率较高,其治疗效果欠佳。近年来,随着对干细胞研究的深入,通过干细胞移植治疗肝硬化的研究越来越多。可用于移植的细胞有肝源性和非肝源性两种。对于诱导干细胞在体内和体外向肝细胞的转化都取得了成功。同时干细胞在肝硬化环境中的转归也进行了许多研究。随着干细胞在肝硬化中的研究进展,必将为肝硬化的治疗提供新的策略。