胃癌组织中p16基因甲基化水平以及mRNA表达的关系

目的探讨胃癌组织中抑癌基因p16基因甲基化水平与基因表达的关系。方法选取抚顺市中心医院2005至2008年普外切除胃癌标本50例,应用逆转录PCR(RT-PCR)方法及甲基化特异性PCR(MSP)方法分别检测胃癌标本抑癌基因p16的表达及甲基化情况,并探讨二者关系。结果①胃癌原发灶标本中p16基因甲基化率为28%(14/50)。②发生甲基化的胃癌标本mRNA表达量为(0.12±0.05),未发生甲基化的胃癌标本mRNA表达量为(0.77±0.13),下调明显(P<0.01)。结论 p16基因的异常甲基化是胃癌发生、发展过程中的频繁事件。p16基因启动子区CpG岛过甲基化是此基因在胃癌中表达缺失或下调的原因之一,在胃癌的发生发展中起一定作用,可能成为胃癌的早期诊断及治疗靶点基因之一。     

结直肠癌患者p16基因甲基化的研究

目的检测p16基因启动子区异常甲基化发生情况,探讨p16基因异常甲基化作为结直肠癌临床辅助诊断分子生物学标志物的可能性。方法应用甲基化特异性PCR（MSP）技术,检测结直肠癌患者肿瘤组织中p16基因的异常甲基化情况。结果应用MSP方法,DukesA、B期病人和DLlkes C、D期病人p16启动子区甲基化率分别为23．8%和59．4％。结论分析患者DNA的p16基因异常甲基化有可能成为辅助结直肠癌诊断的有效方法之一。     

乳腺癌p16基因甲基化和蛋白表达的检测及其临床意义

目的:探讨p16基因在乳腺癌中甲基化状态、表达情况及其与临床的关系.方法:应用甲基化特异性的聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测48例乳腺癌中p16基因甲基化状态,应用免疫组化检测p16基因的蛋白表达情况.结果:p16基因在乳腺癌中甲基化率为27.1%(13/48),有淋巴结及远处转移的甲基化率(52.6%,10/19)高于无转移的甲基化率(10.3%,3/29)(P＜0.05);13例甲基化病例中P16蛋白失表达率(76.9%,10/13)高于非甲基化病例(8.6%,3/35)(P＜0.05).结论:p16基因高甲基化是乳腺癌中常见的分子生物学改变之一,p16基因高甲基化和乳腺癌浸润及转移有相关性;P16蛋白表达和其高甲基化呈负相关,甲基化是p16抑癌基因失活的主要方式之一.     

乳腺癌p16基因甲基化和蛋白表达的检测及其临床意义

目的:探讨p16基因在乳腺癌中甲基化状态、表达情况及其与临床的关系.方法:应用甲基化特异性的聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测48例乳腺癌中p16基因甲基化状态,应用免疫组化检测p16基因的蛋白表达情况.结果:p16基因在乳腺癌中甲基化率为27.1%(13/48),有淋巴结及远处转移的甲基化率(52.6%,10/19)高于无转移的甲基化率(10.3%,3/29)(P＜0.05);13例甲基化病例中P16蛋白失表达率(76.9%,10/13)高于非甲基化病例(8.6%,3/35)(P＜0.05).结论:p16基因高甲基化是乳腺癌中常见的分子生物学改变之一,p16基因高甲基化和乳腺癌浸润及转移有相关性;P16蛋白表达和其高甲基化呈负相关,甲基化是p16抑癌基因失活的主要方式之一.     

5-氮杂-2′-脱氧胞苷诱导卵巢癌细胞系p16基因去甲基化及其表达

目的观察去甲基化制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对体外培养的卵巢癌细胞CAOV3p16基因启动子区甲基化状态及表达的影响,探讨卵巢癌细胞p16基因失活的机制及去甲基化制剂对p16基因表达的调控。方法应用不同浓度的5-Aza-CdR(1×10-7mol/L,5×10-7mol/L,1×10-6mol/L,5×10-6mol/L)处理体外培养的卵巢癌细胞CAOV3后,甲基化特异性聚合酶链反应(PCR)(MSP)法检测用药前后细胞中p16基因的甲基化状态,RT-PCR法及Western-blot法检测用药前后细胞中p16 mRNA及蛋白表达的变化。结果p16基因在卵巢癌细胞系CAOV3中启动子区呈异常甲基化状态,在 mRNA及蛋白水平低表达。经过5-Aza-CdR处理后,p16基因启动子区呈去甲基化状态,其 mRNA及蛋白表达显著增强(P<0.01)。结论启动子区异常甲基化是卵巢癌细胞p16基因失活的主要原因之一,去甲基化制剂-5-Aza-CdR能逆转p16基因甲基化状态,从而调控p16基因表达。     

肺癌组织中p16基因的异常甲基化分析

DNA甲基化具有多方面的生物学意义,它是由甲基转移酶介导,以S-腺苷-L-甲硫氨酸为甲基供体,在胞嘧啶5位碳原子上加入一甲基基团,DNA甲基化是最常见的复制后调节方式之一,在基因表达、胚胎发育、基因组印迹等方面发挥重要作用^[1]。     

肺癌患者p16基因启动子异常甲基化检测及临床意义

目的评价组织和血浆中p16基因启动子区甲基化对肺癌的诊断价值。方法用甲基化PCR的方法检测106例肺癌患者组织和血浆p16基因启动子区域甲基化,并评价其对肺癌的诊断价值。结果106例肺癌患者血浆及对应的肿瘤组织中,p16基因甲基化的检出率分别为36.8%(39/106)和41.5%(44/106),二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。血浆p16基因启动子异常甲基化阳性率在第2轮PCR扩增后显著增高(P<0.05)。结论血浆标本中p16基因甲基化作为一项肿瘤标志物为早期诊断肺癌提供了依据。     

p16基因在肺癌中的表达及意义

p16基因对肺癌的发生和发展有重要的影响,p16在肺癌组织中表达失活的主要原因是启动子区的高甲基化,本研究是p16基因的分子生物学特性以及它和肺癌的关系的综述。     

系统性红斑狼疮外周血单个核细胞p53基因及蛋白的表达

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)p53mRNA及蛋白表达水平变化,从而了解p53是否通过异常的凋亡调节参与SLE的发病。方法以SLE疾病活动指数(SLEDAI)评价疾病活动性,流式细胞术检测p53 蛋白,半定量RT PCR检测p53mRNA。结果(1)SLE患者PBMC p53蛋白表达水平显著高于正常人(P<0 05)。(2)活动期与缓解期SLE患者PBMC p53蛋白的表达无显著差异, p53 蛋白水平与SLEDAI评分无关(P>0 05)。(3)SLE患者PBMC p53mRNA表达量与阳性率与正常相比无显著性差异(P>0 05)。结论(1)p53蛋白通过增加表达量而导致异常的淋巴细胞凋亡参与SLE发病,但与疾病活动性无关。(2) SLE患者PBMCp53mRNA表达未见异常。     

多发性骨髓瘤中p15基因甲基化及其mRNA表达的研究

目的探讨p15基因的甲基化及其mRNA转录阻抑与多发性骨髓瘤（MM）的发病和进展之间的关系。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测54例初治和复发MM患者及40例正常骨髓的p15基因启动子区的甲基化状态,并对MSP产物进行序列测定;采用荧光实时定量PCR（RT-qPCR）方法检测MM患者及对照组p15基因mRNA表达情况。结果p15基因启动子区甲基化阳性率为27.78%（15/54）,与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。p15基因甲基化率与患者的性别、年龄、病程阶段差异无统计学意义（P〉0.05）。MM组与正常对照组,甲基化组与非甲基化组,初诊组与复发组相比较p15基因mRNA表达均无显著降低,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论p15基因的甲基化与MM的发病有关,与患者的性别、年龄、病程阶段无关。p15基因甲基化与其mRNA转录阻抑的相关性不高。     

霉酚酸酯在系统性红斑狼疮中的应用进展

霉酚酸酯作为一种新型免疫抑制剂，已经成功应用干预防器官移植过程中的急性移植物抗排斥反应．它也应用于治疗多种自身免疫性疾病。对系统性红斑狼疮的治疗主要集中在增殖性狼疮肾炎，目前霉酚酸酯正用于控制狼疮的其他症状，如狼疮病情活动、血液系统症状以及难治性皮肤性狼疮。现综述霉酚酸酯在治疗系统性红斑狼疮中的进展。     

系统性红斑狼疮患者血浆内皮微粒和狼疮抗凝物检测的意义

目的检测系统性红斑狼疮（SLE）患者血浆内皮微粒（EMP）和狼疮抗凝物（LA）的变化,探讨EMP和LA是否与SLE患者的血栓形成有关。方法应用流式细胞术检测血浆中内皮微粒的水平,ELISA方法检测血浆E-选择素水平,应用全自动血凝仪检测血浆狼疮抗凝物水平,并且分析相关性。结果 SLE患者血浆EMP、E-选择素和LA的检测水平明显高于正常对照组（P〈0.01）。EMP和E-选择素水平升高的患者LA水平也明显升高,呈一定的相关性（P〈0.05）。有血栓症状的SLE患者EMP、E-选择素和LA的水平明显升高。结论 SLE患者血浆EMP、E-选择素和LA的检测水平明显增高,其可能与SLE患者体内血栓的形成密切相关。     

贝利木单抗治疗系统性红斑狼疮的模型化疗效评价

目的:贝利木单抗是一种完全人源化IgGl-X单克隆抗体,可特异性结合可溶性B细胞刺激因子(BLyS),阻止BLyS与B细胞结合,促进B细胞凋亡,是FDA批准的第一个治疗系统性红斑狼疮(SLE)的新药。本研究基于该药物的全球临床文献数据,通过建模分析,评价贝利木单抗治疗SLE效应,定量表达其药效特征,并探索其潜在影响因素,从而建立贝利木单抗治疗SLE的疗效尺度,为治疗SLE的药物开发提供参照。方法:在Pubmed数据库中进行文献检索,纳入贝利木单抗治疗SLE的临床试验研究,提取受试者基线期人口学特征、用药剂量、给药方式、疗效和安全性等信息,建立分析数据库,再构建药效学模型,评价本药的药效特征。采用多种模型评价方法评价模型的稳健性。结果:最终有5篇含疗效文献纳入,涉及11个剂量组(N=3493)纳入模型构建;协变量筛选显示,种族(亚洲人群或非亚洲人群)、年龄、病程、Anti-dsDNA阳性对贝利木单抗治疗SLE的疗效无显著影响,最终未发现对模型参数有显著性影响的因素。模型评价显示本研究建立的模型能较好地描述贝利木单抗治疗SLE的量效关系。最终模型提示,疗效指标SRI应答率在第52周已接近峰值(约达峰值水平99%)。安慰剂组、贝利木单抗1 mg/kg静注、10 mg/kg静注和200 mg皮下注射在第52周的SRI应答率分别为46.1%、52.9%、57.9%和60.9%。扣除安慰剂效应后,贝利木单抗1 mg/kg静注、10 mg/kg静注和200 mg皮下注射在第52周的SRI应答率(药物纯效应)分别为6.8%、11.8%和14.8%。结论:贝利木单抗治疗SLE患者的疗效(SRI反应率)在第52周已接近峰值。贝利木单抗1 mg/kg静注、10 mg/kg静注和200 mg皮下注射在第52周的SRI应答率分别为52.9%、57.9%和60.9%。     

抗核小体抗体与系统性红斑狼疮疾病活动及狼疮肾的关系

目的 探讨抗核小体抗体(AnuA)与狼疮活动及狼疮肾炎的关系.方法 用酶联免疫吸附方法(ELISA)检测75例系统性红斑狼疮(SLE)组患者、50例其它风湿性疾病(NSLE)组患者以及30例健康对照组血清AnuA水平,同时检测患者血清抗dsDNA抗体、抗-Sm抗体、抗rRNP抗体.分析AnuA对SLE组的诊断价值以及与疾病活动及狼疮肾的关系.结果 AnuA在SLE患者的敏感性和特异性分别为 69.3% 和98%,敏感性高于抗dsDNA抗体、抗-Sm抗体、抗rRNP抗体,而特异性与它们没有区别;AnuA在狼疮肾炎(LN)患者中的阳性率为85.4%,在非LN患者中的阳性率为40.7%,二者差异极显著(P＜0.01),疾病活动组AnuA阳性率显著高于疾病稳定组(P＜0.05),AnuA阳性组患者口腔溃疡及肾炎的发生率显著高于AnuA阴性组(P＜0.05).结论 AnuA是SLE的又一标志性抗体,AnuA与抗dsDNA抗体、抗-Sm抗体、抗rRNP抗体联合检测,可提高SLE的诊断率.AnuA的检测有助于SLE患者疾病活动及LN的判断.     

Treatment of systemic lupus erythematosus with epratuzumab

Systemic lupus erythematosus is a prototypic autoimmune disease characterized by abnormalities in the activity of B-cells and T-cells. A novel specific treatment for autoimmune diseases is B-cell depletion with monoclonal antibodies. Epratuzumab is a monoclonal antibody that targets CD22 antigen on B-cells. Initial phase II and two terminated early phase III studies suggest that treatment of systemic lupus erythematosus with this immunomodulatory agent is effective, well tolerated and significantly improves the patient's quality of life. In vitro studies and clinical trials with non-Hodgkin lymphoma patients indicate epratuzumab can potentially serve as a complementary drug in combination therapy with another inhibitor of B-cell activity, rituximab, which is a monoclonal anti-CD20 antibody.     

系统性红斑狼疮的靶向药物研究进展

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种以多器官损伤为特征的慢性自身免疫性疾病,发病原因较复杂.目前SLE的全球发病率逐年上升,且具有较高的死亡率.由于该疾病存在异质性,临床仍无较确切的治疗方法.本文就近年SLE治疗药物开发现状作一综述,旨在为临床诊治SLE提供参考.     

Pharmacotherapy of systemic lupus erythematosus

The pharmacological management of systemic lupus erythematosus (SLE) is challenging owing to its unpredictable clinical course, the variable organ system involvement and the lack of clear understanding of disease pathogenesis. The widely used corticosteroids and immunosuppressive drugs, which can control disease activity, have serious, potentially fatal, side effects. In the last decade, a better understanding of lupus pathogenesis has led to the development of biological agents that are directed at biomarkers. However, these biologicals also exert side effects due to infections resulting from completely eliminating immune cells (e.g., B cells) or cytokine signals (e.g., interferon-α) or affecting molecular targets outside the immune system (CD40L on platelets). New biomarker-driven clinical trials are ongoing to evaluate the safety and efficacy of B-cell depletion, blocking of interferon signaling, inhibition of the mTOR pathway, and restoration of glutathione deficiency in lupus T cells.