免疫亲和柱净化-HPLC光化学柱后衍生荧光法测定植物油中的黄曲霉毒素

目的建立免疫亲和柱净化-HPLC光化学柱后衍生荧光检测法,用于测定植物油中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2。方法样品用乙腈-水(20+80,体积比)混合液提取,提取液经免疫亲和柱净化,净化液经C18色谱柱分离,用光化学柱后衍生器衍生、荧光检测器进行检测,采用外标法进行定量。结果在优化的条件下,4种黄曲霉毒素能达到很好的分离效果,黄曲霉毒素B_1、G_1在0.2~20.0 ng/ml范围内线性关系良好,检出限为0.04μg/kg;黄曲霉毒素B_2、G_2在0.1~10.0 ng/ml范围内线性关系良好,检出限为0.02μg/kg,4种黄曲霉毒素的回收率为82.5%~95.3%,RSD为2.4%~5.9%。结论该方法快速、简单、准确、灵敏、重现性好,是测定植物油中的黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的可靠方法。     

免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-HPLC法检测茶叶中黄曲霉毒素

目的建立免疫亲和柱净化-光化学柱后衍生-高效液相色谱(HPLC)-荧光法测定茶叶中黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的检测方法。方法样品经甲醇-水(7∶3,V/V)提取,提取液经过滤、稀释后,滤液经过免疫亲和色谱柱纯化,以甲醇-水(45∶55,V/V)为流动相洗脱,Cloversil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)分离,采用光化学衍生器衍生,荧光检测器在激发波长360 nm、发射波长440 nm处测定。结果 AFB1、AFG1在0.50μg/L~20μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.50μg/kg,AFB2、AFG2在0.15μg/L~6.0μg/L时具有良好的线性关系,检出限为0.20μg/kg,其相关系数均0.999 2,回收率为82.6%~94.4%,相对标准偏差10%。结论该方法具有快速、灵敏、简便、准确等优点,适用于测定茶叶中的黄曲霉毒素AFB1、AFB2、AFG1、AFG2。     

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定参苓白术片中黄曲霉毒素

目的 考察参苓白术片中污染黄曲霉毒素的情况,为制订标准和科学管理提供依据,确保公众用药安全。方法 采用免疫亲和柱-高效液相色谱法(IAC-HPLC)对参苓白术片及其原药材中的黄曲霉毒素进行限量检查,并比较四分法分样与研磨法分样对原药材莲子中黄曲霉毒素测定结果的影响。结果 免疫亲和柱-高效液相色谱法线性关系良好(r> 0.999),回收率为70.32%～85.15%,相对标准差(RSD)为0.49%～9.35%。检测了54批市售参苓白术片,33批检出黄曲霉毒素,检出率为61%,其中2批超过《中国药典》2020年版的限量规定,合格率为96.08%。11味原药材中仅有莲子检出黄曲霉毒素,四分法分样变异系数大,容易造成假阴性的结果。结论 市售参苓白术片中存在黄曲霉毒素污染的风险,原因是生产企业对原药材莲子进行检测时所采用的分样方法不合理,导致黄曲霉毒素检测结果出现假阴性。     

免疫亲和柱净化-酶联免疫吸附法检测普洱茶中黄曲霉毒素B_1

目的 建立普洱茶中黄曲霉毒素B1（AFB1）的免疫亲和柱净化-酶联免疫吸附检测方法。方法 粉碎后的普洱茶样品经三氯甲烷提取,水浴挥干后用甲醇-PBS溶解,样品液通过黄曲霉毒素B1免疫亲和柱净化洗脱,在450nm波长使用酶联免疫试剂盒（ELISA）定量检测黄曲霉毒素B1含量。结果 该方法在2.0~100.0μg/kg浓度范围内百分吸光率和浓度对数呈良好的线性关系,相关系数达0.999 8,样品最低检出限为1.0μg/kg,重复测定相对标准偏差为4.72%,3个水平（1.0、10.0、50.0μg/kg）的样品加标回收率为83.00%~104.90%。结论 本法具有简单、快速、高效等优点,适用于普洱茶复杂样品的AFB1定量检测。     

多功能柱净化-光化学柱后衍生高效液相色谱测定食品中黄曲霉毒素

目的:研究建立了光化学柱后衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的方法。方法:乙腈/水提取样品中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2,经多功能柱净化、高效液相色谱分离、光化学柱后衍生,荧光检测器测定。结果:黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检出限分别为0.50μg/kg、0.15μg/kg、0.50μg/kg和0.15μg/kg,回收率为86.7%～97.2%,相对标准偏差(RSD)0.41%～2.40%。结论:该方法简便快速、灵敏度高、重现性好,满足食品中黄曲霉毒素检测的需要。     

高效液相色谱法测定婴幼儿食品中的黄曲霉毒素B_1

黄曲霉毒素B_1(简称AFT_(B1))是霉菌毒素中毒性及致癌性最强的物质,为保障婴幼儿的健康成长,我国食品卫生标准(GB2761—81)除对各类食品的黄曲霉毒素 B_1含量作限量规定外,特别规定婴幼儿食品中的AFT_(B1)含量为不得检出。食品中AFT_(B1)我国现行的法     

高效液相色谱法测定玉米粉中黄曲霉毒素B_1含量的不确定度评定

目的评定高效液相色谱(HPLC)法测定玉米粉中黄曲霉毒素B1含量测量的不确定度。方法依据《化学分析中的不确定度的评估指南》(CNAS-GL06),对HPLC法测定玉米粉中黄曲霉毒素B1含量进行不确定度分析。结果玉米粉中黄曲霉毒素B1含量测定扩展不确定为10.05%,样品含量为(2.59±0.26)μg/kg,影响含量测定的最主要影响因素为标准曲线的拟合及方法的提取回收率。结论本研究建立了简便易行的玉米粉中黄曲霉毒素B1含量检测结果的不确定度评定方法。     

柱后衍生-高效液相色谱法测定酸枣仁中黄曲霉毒素G_2、G_1、B_2、B_1

目的:建立酸枣仁中黄曲霉毒素G2、G1、B2、B1的HPLC测定方法。方法:样品经70%甲醇提取、免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱-柱后衍生-荧光检测器进行分析测定。结果:黄曲霉毒素G2、B2在1.5~60 pg范围内线性关系良好,黄曲霉毒素G1、B1在5~200 pg范围内线性关系良好,r0.9999。回收率在60%~120%之间。结论:该法快速简便,准确,可用于酸枣仁中黄曲霉毒素的测定。     

免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法测定广式月饼中的伏马毒素B_1、B_2

目的建立广式月饼中的伏马毒素(FB_1、FB_2)定性和定量的液相色谱-串联质谱法。方法广式月饼样品经甲醇-水(8∶2,V/V)溶液均质提取后,用免疫亲和柱净化,经PBS洗脱,以乙酸铵溶液(5 mmol/L,p H=4.5)和乙腈为流动相,流速为400μl/min,柱温为30℃,在C18色谱柱上梯度洗脱分离,采用电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式测定。结果 FB_1、FB_2的质量浓度为0.1 ng/ml~50.0 ng/ml时,标准曲线的线性关系良好;用本法测定的2种伏马毒素的回收率为79.2%~102.3%,相对标准偏差(RSD)为3.6%~8.7%。采用该方法对市售的5种广式月饼中的伏马毒素进行分析,其中1份广式月饼样品能够检测到含有痕量的FB1(0.56μg/kg)和FB2(0.73μg/kg)。结论该方法具有简单、快速、准确、可靠等特点,适用于广式月饼中2种伏马毒素的同时测定。     

药材中黄曲霉毒素的免疫亲和层析净化高效液相色谱法

目的建立高效液相色谱法测定中药材砂仁中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的方法。方法样品经免疫亲和层析净化,色谱柱为Zorbax SB C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为甲醇-0.01mol/L的KH2PO(44+6),流量为0.5ml/min,柱温为35℃,激发波长为360nm,发射波长为425nm,柱后衍生反应器温度为70℃,进行HPLC检测。结果黄曲霉毒素B1在12.00～300.00μg/L范围内、黄曲霉毒素B2、G1、G2在24.00～600.00μg/L范围内时,回归方程呈良好的线性关系,检出限分别为0.025、0.085、0.060、0.055μg/L,r≥0.996。该方法的平均回收率为81.7%～101.2%,RSD为0.7%～4.9%。结论该方法灵敏度高,选择性好,方法稳定,可用于中药材中黄曲霉毒素的检验。     

测定花生及花生制品中黄曲霉毒素:免疫亲和柱净化·光化学在线衍生·高效液相色谱-荧光

〔目的〕建立免疫亲和柱净化、柱后光化学在线衍生、高效液相色谱-荧光法测定花生及花生制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检测方法。〔方法〕样品粉碎、由甲醇/水提取、Afla-P黄曲霉毒素免疫亲和柱净化、光化学衍生器在线衍生、高效液相色谱-荧光法检测。〔结果〕黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检出限分别为0.5、0.15、0.5、0.15μg/kg,相对标准偏差低于15%,回收率为64%～97%。〔结论〕该方法简便快速、灵敏准确、重现性好,能够满足出入境检验检疫工作的需要。     

免疫亲和柱净化、高效液相色谱法结合荧光检测器检测进出口芝麻中的黄曲霉毒素B1

采用免疫亲和柱净化、高效液相色谱法结合荧光检测器检测进出口芝麻中的黄曲霉毒素B1。方法的检测限为0．1μg／kg,相对标准偏差低于9％,回收率85％-90％,方法简便快速、灵敏准确,满足进出口芝麻黄曲霉B1的检测要求。     

免疫亲和柱净化荧光计快速测定核桃及制品中黄曲霉毒素

建立了免疫亲和柱净化荧光计法,快速定量地测定核桃和核桃制品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2总量。方法的检出限为2.0μg/kg,相对标准偏差低于15%,回收率〉80%。该方法简便快速、灵敏准确、重现性好,满足出入境检验检疫工作的需要。     

高效液相色谱法测定食品中黄曲霉毒素B1

黄曲霉毒素B_1(简称AFB_1)是一种毒性与致癌性强的物质,它主要是黄曲霉和寄生曲霉的代谢产物,温特曲霉也产生黄典霉毒素,但产量较少。黄曲霉毒素主要污染粮油及其制品。如花生、花生油、玉米、大米、棉籽、啤酒和酱油等。 黄曲霉毒素根据其荧光颜色Rf(相对荧光)值及结构等分别命名为B_1、B_2、G_1、G_2、M_1、M_2、P_1、Q_1、霉醇、GM等。其基本结构都有二呋喃和氧杂萘邻酮,凡二呋喃环末端有双键者毒性较强并有致癌性如B_1、G_1和M_1。 黄曲霉毒素B_1是一种较强的致癌物,以往食品中AFB_1的测定多采用薄层色谱,柱液相色谱等方法,但操作较繁,误差较大,灵敏度也不够理想。本文参考有关文献在食品预处理后进行衍生,用高效液相色谱测定,效果较好。采用Sep-Pak C_(18)小柱浓缩AFB_1,提高了方法灵敏度,并对色谱分离条件进行了改     

食品中黄曲霉毒素高效液相色谱法测定

黄曲霉毒素是具有极强致癌性的次生代谢产物,主要存在于粮油制品中。食品中黄曲霉毒素的检测方法主要有薄层色谱法、酶联免疫法、液相色谱法等^[1-2] 。薄层色谱法操作繁琐,而酶联免疫法特异性差。     

柱后衍生高效液相色谱法测定啤酒中的黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2

目的建立免疫亲和柱净化-柱后光化学衍生-高效液相色谱-荧光法(HPLC-FLD),同时测定啤酒中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2。方法啤酒样品除尽二氧化碳后,氮吹至近干,用乙腈-水(20∶80,V/V)提取,提取液经免疫亲和柱净化,甲醇洗脱,洗脱液氮气吹干,溶剂换为乙腈-水(20∶80,V/V),上高效液相色谱,C_(18)柱分离,经光化学柱后衍生器衍生、荧光检测器检测,外标法定量。结果 4种黄曲霉毒素在相应的浓度范围内线性相关良好,相关系数(r)为0.999 2~0.999 5,检出限为0.01μg/kg~0.08μg/kg,加标回收率为90.55%~107.51%,加标回收实验的相对标准偏差(RSD)为0.47%~7.37%。结论该法灵敏度高、准确性好,可用于啤酒中4种黄曲霉毒素的测定。     

免疫亲和柱-高效液相色谱法测定营养型固体饮品中维生素B_(12)

目的建立测定营养型固体饮料中维生素B_(12)水平的高效液相色谱测定方法。方法样品经胃蛋白酶和淀粉酶水解后,采用维生素B_(12)免疫亲和柱富集、净化,用5ml甲醇洗脱,氮气吹干定容,再经高效液相色谱法测定,色谱柱为Eclipse XDB-C_(18),流动相有体积分数为0.025%三氟乙酸水溶液和体积分数0.025%三氟乙酸乙腈溶液梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,波长为361nm测定。结果维生素B_(12)在21.0～420.0mg/L范围内线性关系良好,回归方程y=0.115x+0.024,相关系数0.9999,回收率为88.5%～94.6%,检出限为0.5ng。结论本研究方法灵敏度高,结果准确,适用于测定营养型固体饮品中维生素B_(12)的水平。     

ELISA和免疫亲和柱HPLC方法测定粮油食品中黄曲霉毒素B1

目的:建立一套快速、灵敏、准确的测定粮油食品中AFB1的检测方法,并对市售大米、面粉、食用油样品中AFB1的污染状况进行检测分析。方法:大量样品首先用直接竞争ELISA方法初筛测定,阳性样品再用免疫亲和柱净化、荧光检测器测定的HPLC方法验证和准确定量。结果:用ELISA法和HPLC法测定食用油样品的回收率分别为74 6 %～10 9%和80 7%～98 0 % ,加标样品6次平行测定的RSDr分别为0 6 3%～2 8%和0 6 3%～2 8% ,10份阳性样品测定结果显示两种具有很好的符合性(r =0 996 8) ;16 6份样品中经HPLC法验证检出2 0份阳性,含量范围为0 8～4 8 6 μg/kg。结论:建立了一种简便、快速、高效的ELISA法初筛检测结合HPLC法验证和定量测定粮油食品中AFB1的检测方法;在抽检的样品中发现有12 %污染了AFB1,主要为花生油样品,但绝大多数阳性样品(95 % )的污染水平不高(<2 0 μg/kg)。     

植物油中黄曲霉毒素B_1的污染状况调查分析

目的为了初步调查分析市售植物油中黄曲霉毒素B_1的污染状况。方法随机抽取市售花生油、玉米油、葵花籽油、菜籽油、大豆油、调和油共246份的植物油作为研究对象,采用高效液相色谱法进行黄曲霉毒素B_1测定。结果调查分析的6类植物油中,黄曲霉毒素B_1只在花生油和菜籽油中有检出,超标样品全部为花生油。花生油黄曲霉毒素B_1的平均含量为16.2μg/kg,最高浓度为288μg/kg,其检出率及超标率分别为88.1%和11.9%。散装花生油与定型包装花生油黄曲霉毒素B_1检出率差异无统计学意义(χ~2=0.649,P0.05);但超标率差异有统计学意义(χ~2=9.469,P0.05)。结论市售植物油黄曲霉毒素B_1的总体污染水平不高,但花生油的检出率和超标率较高,散装花生油较易受到黄曲霉毒素B_1的污染,其超标率高于定型包装花生油。