防风中1个新多糖的结构及免疫调节活性研究

目的 对防风Saposhnikovia divaricata中分离得到均一多糖的结构及其免疫调节活性进行研究。方法 采用DEAE-纤维素、Sephadex G-75等柱色谱法,对防风多糖进行系统分离纯化,采用ESI-MSⁿ、GC-MS、NMR等谱学技术,对分离得到的防风多糖SP800203的相对分子质量分布、单糖组成、寡糖片段、糖残基类型和糖苷键连接方式等进行分析,确定其结构。采用细胞实验和斑马鱼实验,研究防风多糖SP800203的免疫调节活性。结果 从防风中分离得到防风多糖SP800203,糖醛酸质量分数为75.73%,相对分子质量约为7.14×10⁴,由鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖和半乳糖醛酸组成,单糖物质的量比为2.8∶6.7∶6∶84.5。主链由半乳糖醛酸聚合而成,2条支链分别由阿拉伯糖、半乳糖醛酸、半乳糖、鼠李糖,以及阿拉伯糖、半乳糖醛酸、半乳糖聚合而成,二者分别通过β、α糖苷键与主链相连。防风多糖SP800203可以促进巨噬细胞一氧化氮、肿瘤坏死因子-α、白介素-1β和白介素-6的释放,增加斑马鱼的免疫细胞密度和巨噬细胞数量。结论 防风多糖SP800203为从防风中分离得到的新的均一多糖,具有良好的免疫调节活性;研究结果为阐明防风免疫调节作用机制奠定了基础,为防风临床应用及进一步研究与开发提供科学依据。     

不同产地和不同品种枸杞子中多糖成分测定

目的 通过比较19批不同产地宁夏枸杞果实和3批北方枸杞果实的总糖含量、重均相对分子质量（M_w）及单糖组成,探索枸杞中多糖成分的差异性。方法 采用水提醇沉法获得22批枸杞的粗多糖成分,以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法测定总糖含量;Shodex SB-806 HQ型凝胶柱和Shodex SB-804 HQ型凝胶柱串联,流动相为0.1%氯化钠溶液,柱温为40 ℃,柱流速为0.5 mL·min^–1,采用凝胶渗透色谱-示差检测器-多角度激光光散射法（GPC-RI-MALLS）测定M_w及分布系数;选择Zorbax Eclipse XDB C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-磷酸二氢钾溶液,柱温为35 ℃,流速为1.0 mL·min^–1,检测波长为250 nm,采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生化-高效液相色谱-光电二极管阵列检测器（HPLC-PDA）测定单糖组成,同时建立单糖组成指纹图谱。结果 22批枸杞样品中粗多糖成分的质量分数为3.24%~8.66%,M_w为0.733×10⁶~3.191×10⁶;多糖成分均由9种单糖组成,其中阿拉伯糖含量最高。结果显示,不同产地宁夏枸杞粗多糖结构较为一致,但北方枸杞中多糖成分在结构上与宁夏枸杞存在较明显差异,主要体现在M_w、色谱峰面积比及半乳糖醛酸含量上。结论 宁夏枸杞和北方枸杞的粗多糖成分在结构上有较大差异,且通过建立的单糖组成及M_w测定方法可以对其进行有效区分,可为枸杞质量标准完善及枸杞资源评价提供方法和思路。     

金水宝胶囊中发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱研究

目的建立金水宝胶囊发酵虫草菌粉多糖的指纹图谱。方法沸水回流提取金水宝胶囊中的发酵虫草菌粉多糖,经酸水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后采用HPLC法分析,色谱条件为Phenomenex OOG-4252-EO C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.05 mol/L磷酸盐缓冲液梯度洗脱,体积流量1 m L/min,进样量20μL,检测波长250 nm,柱温30℃。结果对组成发酵虫草菌粉多糖的11种单糖成分进行鉴别,并建立了发酵虫草菌粉多糖指纹图谱。通过指纹图谱分析10批金水宝胶囊中各单糖成分,相似度均大于0.999,无显著性差异。结论建立的发酵虫草菌粉多糖指纹图谱操作简单,专属性强,重复性好,能够客观评价金水宝胶囊的质量。     

党参多糖单糖组成与其对HepG2细胞毒活性的相关分析

目的探究党参多糖的单糖组成与其对肝癌HepG2细胞毒活性之间的相关性。方法 26批不同产地的党参样品,采用水提醇沉法提取多糖,苯酚硫酸法测多糖的量、气相色谱法和间羟基联苯法同时测定半乳糖醛酸的量、糖腈乙酸酯衍生化法分析单糖种类及量、三甲基硅醚衍生化法测果糖的量,MTT法研究党参多糖对HepG2细胞的细胞毒活性,采用聚类分析法对26批党参样品进行聚类分析,以偏最小二乘法(PLS)探究样品中各单糖种类和量与其对HepG2细胞毒活性的相关性。结果 26批党参多糖样品均显示一定的HepG2细胞毒活性,且以甘肃文县的8号党参多糖的细胞毒活性最强(其抑制率为36.36%)。26批党参多糖中各类单糖的量存在差异。聚类分析结果表明,党参多糖的单糖种类及量不能作为党参分类的指标。党参多糖的单糖组成与HepG2细胞毒活性的相关性研究表明,半乳糖醛酸、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、果糖与HepG2细胞毒活性呈正相关,而甘露糖、木糖和葡萄糖与HepG2细胞毒活性呈负相关。结论党参多糖对HepG2的细胞毒活性与其单糖的种类存在相关性,含有半乳糖醛酸相对较高的党参多糖的细胞毒活性较强。     

铁皮石斛茎、叶多糖含量及多糖部位柱前衍生化-高效液相色谱指纹图谱比较研究

为更好地开发利用铁皮石斛叶资源,该文采用苯酚-硫酸比色法和PMP（1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮）柱前衍生化-HPLC-DAD-ESI-MSⁿ对铁皮石斛茎、叶中多糖含量、单糖组成、多糖中甘露糖和葡萄糖的含量及多糖部位HPLC指纹图谱进行了比较研究;并用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价软件2004A”建立了对照图谱和进行了相似度评价。结果表明,铁皮石斛茎与叶多糖含量,组成多糖的单糖种类,各单糖组成比例及单糖含量明显不同。叶中多糖含量约为相应茎中多糖含量的1/3。茎多糖主要由甘露糖和葡萄糖组成;叶多糖为酸性杂多糖,由甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成,但茎和叶多糖中均以甘露糖组成比例最高。茎中甘露糖和葡萄糖的含量均比相应叶中高。14个不同种植基地铁皮石斛茎和叶多糖部位指纹图谱相似性较好,相似度均在0.9以上。该文为进一步研究铁皮石斛叶多糖中各单糖连接顺序、连接位置和多糖药理活性及申报铁皮石斛叶新资源提供了研究资料。     

趁鲜切制和传统切制金荞麦饮片糖类组分比较研究

目的 比较趁鲜切制和传统切制方法对金荞麦Fagopyri Dibotryis Rhizoma饮片糖类组分的影响，基于糖组分探究适宜的金荞麦饮片切制方法。方法 采用多维色谱技术表征2种饮片中多糖含量、相对分子质量分布、单糖组成及物质的量比以及寡糖和游离单糖的含量，结合统计分析，比较2种饮片的糖组分特征。结果 与传统切制法相比，趁鲜切制饮片中多糖、寡糖含量较高；2种饮片中多糖的相对分子质量分布范围相似，但传统方法切制饮片在4.456×10⁶～8.095×10⁶区域占比较高；2种饮片多糖都主要由D-甘露糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成，但传统方法切制饮片的D-葡萄糖物质的量比较高，D-甘露糖、半乳糖和阿拉伯糖物质的量比较低。结论 趁鲜切制能更好地保留多糖和寡糖组分，且操作方法相对简便，可以考虑作为金荞麦饮片的候选切制方法。     

铁皮石斛原球茎多糖的研究

 目的 研究铁皮石斛原球茎多糖的理化性质。方法 经过水提醇沉、脱蛋白和透析等步骤获得铁皮石斛粗多糖（CDO）和原球茎粗多糖（CDOP）;CDOP经过纤维素DE-52和葡聚糖凝胶Sephadex G-200柱层析获得6个均一多糖;用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定均一多糖的纯度及相对分子质量;用气相色谱法（GC）分析粗多糖和均一多糖的单糖组成;用高碘酸氧化-Smith降解反应研究均一多糖的一级结构。结果 CDO主要由甘露糖和葡萄糖组成,物质的量比为4.29∶1.00;CDOP主要由半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖组成,物质的量比为2.80∶1.00∶0.61。从CDOP中获得了6个质量均一的多糖,分别为DOPW-1（78×103）、DOPW-2（37×103）、DOPS1-1（287×103）、DOPS1-2（351×103）、DOPS1-3（335×103）和DOPS1-4（171×103）;它们的单糖组成及物质的量比等特点与DOP的相同;各均一多糖分子中的1→3糖苷键均主要由半乳糖组成,还含有阿拉伯糖、葡萄糖和鼠李糖;除DOPS1-4外,各均一多糖的一级结构中均不存在1→4糖苷键。结论 这6个均一多糖为首次从铁皮石斛原球茎中得到。     

白亮独活的HPLC指纹图谱

目的: 建立白亮独活的HPLC指纹图谱分析方法并测定药材中佛手柑内酯及欧前胡素含量,为该药材的质量评价提供参考。方法: 收集10批白亮独活样品,采用HPLC建立指纹图谱方法,流动相水-甲醇梯度洗脱,检测波长为302 nm。利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"2004A版软件进行指纹图谱分析。结果: 10批白亮独活的HPLC指纹图谱相似度均>0.89,标定了11个共有峰。样品中佛手柑内酯、欧前胡素平均质量分数分别为0.117%和0.709%。结论: 该方法简单、重复性好,可用于白亮独活的品种鉴别和质量评价。     

基于UPLC法的定坤丹指纹图谱研究＊

目的 建立定坤丹的超高效液相色谱（ultra-high performance liquid chromatography，UPLC）指纹图谱，为其质量控制提供比较全面快速的评价方法。方法 采用Waters UPLC，Water Acquity UPLC^? HSS T3色谱柱(2.1 mm × 100 mm，1.8 μm)，以0.1%甲酸水-0.1%甲酸甲醇溶液为流动相梯度洗脱，流速0.2 mL·min^-1，检测波长280 nm，建立19批次定坤丹的UPLC指纹图谱。结果 建立了19批定坤丹样品的对照指纹图谱，确定了22个共有峰，经标准品化学对照及UPLC-MS确认共鉴别了其中8种成分，分别为没食子酸、5-羟甲基糠醛、芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、甘草苷、黄芩苷和藁本内酯。19批供试品的指纹图谱全谱峰匹配的相似度均大于0.91，表明该复方总体质量较为稳定。结论 该指纹图谱方法科学、准确且简便，可以为定坤丹的内在质量控制提供科学依据。     

五倍子多糖相对分子质量和单糖组成的测定

目的:研究五倍子多糖精细组分的相对分子质量、单糖组成。方法:五倍子多糖经提取纯化后得到GCP-1,GCP-2和GCP-3 3种精细组分。用高效凝胶渗透色谱(HPGPC)分析其相对分子质量;采用三氟乙酸(TFA)水解和1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化的高效液相色谱(HPLC)分析其单糖组成。结果:HPGPC试验结果显示,GCP-1,GCP-2,GCP-3的相对分子质量分别为182,2.1×10~4,6×10~4;单糖组成试验表明,GCP-2和GCP-3的单糖组成类型基本一致,主要为半乳糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸等。结论:用HPGPC和PMP柱前衍生法测得五倍子多糖精细组分的相对分子质量和单糖组成,方法简便可行,可用于五倍子多糖的研究。     

清肺止咳合剂质量标准研究

目的:制定清肺止咳合剂质量标准。方法:采用薄层色谱法(TLC)鉴别金银花、黄芩,高效液相色谱法(HPLC)测定绿原酸的含量。结果:TLC色谱能明显检出金银花、黄芩,绿原酸含量,线性关系良好,回归方程Y=3258180.077X 5589.828,γ=0.9999,绿原酸的平均回收率为99.9%,RSD%为0.98%。结论:本方法简便,准确,重现性好,可作为本品质量控制。     

余甘子化学成分研究

目的:研究余甘子的化学成分。方法:采用硅胶、聚酰胺、Sephadex LH-20等色谱法进行分离纯化,通过理化性质和波谱分析进行结构鉴定。结果:从余甘子中分离鉴定了13个化合物,分别为:三十烷醇(1)、三十烷酸(2)、β-香树脂酮(3)、白桦脂酮酸(4)、胡萝卜苷(5)、羽扇豆醇乙酸酯(6)、β-香树脂醇-3-棕榈酸酯(7)、没食子酸(8)、白桦脂酸(9)、乌苏酸(10)、齐墩果酸(11)、槲皮素(12)、芦丁(13)。结论:其中,化合物1、2、4、6、7、9~11为首次从该植物中分离得到。     

苦瓜子中植物胰岛素的凝胶柱与RP-HPLC法分离

采用有机酸、醇提取,Sephadex G-50凝胶柱层析、反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术分离,从苦瓜子中分离出降糖多肽PA,根据SDS-PAGE电泳和氨基酸组成分析,判定PA为植物胰岛素.     

砂生槐种子中脂肪酸成分的研究

目的分析砂生槐种子油中的脂肪酸成分。方法采用石油醚提取砂生槐种子油,然后用氢氧化钾-甲醇溶液对油样进行甲酯化,以气相色谱-质谱联用法(GC-MS)分析砂生槐中挥发油成分。结果共分离出13个色谱峰,确认了其中6个峰为脂肪酸,共占总峰面积的98.41%,其中不饱和脂肪酸含量占总峰面积的89.96%。亚油酸和油酸是砂生槐种子油中主要不饱脂肪酸,相对含量分别为66.67%和23.19%。结论砂生槐中含多种对人体有益的脂肪酸成分,因此具有很大的开发价值。     

高效液相色谱法测定生化汤及其配伍组方中阿魏酸的煎出量

 目的：考察当归、川芎与生化汤中其它3味药组合构成的10种样本药物中阿魏酸含量的变化。方法：反相高效液相色谱法进行测定。结果：当归、川芎单味药阿魏酸煎出量分别为(56.88±0.11)μg·g-1,(36.2±4.0)μg·g^-1,加入其它药物合煎后，阿魏酸煎出量为1.7～56.9 μg·g^-1。结论：当归与川芎合煎，阿魏酸的煎出量有一定的加合性；加入桃仁、甘草、干姜后，阿魏酸煎出量降低；生化汤中阿魏酸的煎出量在各样本中最高。     

太白米化学成分的研究

目的 研究太白米的化学成分.方法 采用硅胶柱、Sephadex-LH20凝胶柱、开放ODS-C18柱等色谱进行分离纯化,通过理化常数测定、薄层色谱检测和1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HSQC、MS等波谱技术进行化合物的结构鉴定.结果 从中药太白米中的95％乙醇提取物中分离得到了5个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇(Ⅰ)、对甲氧基桂皮酸(Ⅱ)、对羟基桂皮酸(Ⅲ)、胡萝卜苷(Ⅳ)、对羟基桂皮酸酯苷(Ⅴ).结论 化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ为首次从该种植物中分离得到的有机酸类化合物,也为首次从植物中分离得到的天然产物.     

太白米化学成分的研究

目的研究太白米的化学成分。方法采用硅胶柱、Sephadex-LH20凝胶柱、开放ODS-C18柱等色谱进行分离纯化,通过理化常数测定、薄层色谱检测和1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HSQC、MS等波谱技术进行化合物的结构鉴定。结果从中药太白米中的95%乙醇提取物中分离得到了5个化合物,分别鉴定为β-谷甾醇（Ⅰ）、对甲氧基桂皮酸（Ⅱ）、对羟基桂皮酸（Ⅲ）、胡萝卜苷（Ⅳ）、对羟基桂皮酸酯苷（Ⅴ）。结论化合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ为首次从该种植物中分离得到的有机酸类化合物,也为首次从植物中分离得到的天然产物。     

芦笋多糖提取、单糖组分分析及定量测定

目的提取芦笋多糖,纯化后分析其单糖组分并测定总糖,为今后芦笋多糖研究提供参考。方法水提醇沉法提取粗多糖,Sevage法除蛋白,H2O2脱色,高效毛细管电泳(HPCE)测定单糖组成,苯酚-硫酸法测定多糖。结果芦笋粗多糖主要单糖组成为木糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖,其质量分数分别为3.44%、7.92%、10.52%、17.15%、41.85%。以单糖混合物为对照品测得粗多糖中总糖的质量分数为79.14%。结论高效毛细管电泳分离度高,可用于单糖组分分析;苯酚-硫酸法实验操作简便,准确可靠,可用于芦笋多糖的测定。     

HPLC测定四物汤及其配伍组方中阿魏酸的煎出量

 目的 考察川芎、当归与四物汤中其它两味药组合构成的12种样本药物中阿魏酸含量的变化。方法 反相高效液相色谱法进行测定。结果 当归、川芎单味药阿魏酸煎出量分别为0.518,1.215 mg·g^-1;加其它药味合煎后,阿魏酸煎出量为 0.375～1.761 mg·g^-1。结论 川芎与当归合煎,阿魏酸的煎出量有一定的加合性;加入地黄或白芍后,阿魏酸煎出量降低;四物汤中阿魏酸的煎出量在各样本药物中居中。     

赤芝不同部位油脂组成分析

收集不同产地、品种、采收部位和潮次的赤芝孢子粉和子实体,对其含油率、脂肪酸组成进行测定分析,结果表明:全国不同产地的破壁孢子粉含油率为23.61%~34.17%;浙江主栽赤芝品种子实体含油率为0.81%~1.87%,未破壁孢子粉为0.07%~0.24%,破壁孢子粉为27.54%~34.17%,赤芝孢子粉含油率远远大于子实体,破壁加工可提高孢子粉中油脂提取率150~340倍。赤芝孢子油主要由不饱和脂肪酸组成,其中油酸和亚油酸质量分数分别为53.26%~58.16%,10.69%~16.87%;偏最小二乘法判别分析显示,孢子粉和子实体的脂肪酸组成存在明显差异,通过测定脂肪酸组成,尤其是油酸、硬脂酸、棕榈酸的含量,可以鉴别赤芝类产品来源的组织类型。研究还发现同一品种赤芝1潮孢子粉和子实体中含油率和脂肪酸含量均高于2潮。