HPLC法同时测定不同产地香附药材中香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮

目的建立HPLC法同时定量测定香附中3种特征性成分香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮,并对不同产地香附样品进行测定。方法香附甲醇提取液的分析采用Phenomenex C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(68∶32),检测波长为242nm,体积流量为1.0mL/min,柱温为30℃。结果香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮进样量分别在0.260~0.912μg、0.028~0.098μg、0.082~0.286μg内呈现良好的线性关系,平均回收率分别为98.3%(RSD为1.5%)、97.9%(RSD为2.0%)、99.1%(RSD为1.4%)。海南、广东、广西、四川省的11批香附中香附烯酮为1.52~4.80mg/g、圆柚酮为0.04~0.20 mg/g、α-香附酮为0.70~1.99 mg/g。结论同一产地香附中3种成分含有量均呈现香附烯酮α-香附酮圆柚酮的规律。     

贵州鼠尾草中1个新的姜黄素类化合物

目的 研究贵州鼠尾草Salvia cavaleriei中抗菌活性成分。方法 采用正相硅胶柱色谱、RP-18反相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及半制备高效液相色谱等多种手段进行分离纯化,并借助化合物的理化性质、质谱、核磁数据以及碳谱计算等方法确定化合物结构。采用微量肉汤稀释法测定化合物的最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration,MIC）。结果 从贵州鼠尾草中分离得到11个化合物,分别鉴定为1,7-bis-(4''-hydroxyl-3''-methoxyphenyl)-5(R)-methoxyhepthan-3-one（1）、姜烯酮A（2）、原儿茶醛（3）、对羟基苯甲醛（4）、oresbiusin B（5）、迷迭香酸（6）、bis (2-ethyloctyl) phthalate（7）、cylindol B（8）、2-(3'',4''-二羟苯基)-1,3-胡椒环-5-醛（9）、苯甲醇葡萄糖苷（10）和1H-indole-3-carboxaldehyde（11）,其中,化合物1为1个新的姜黄素类化合物。抗菌活性结果显示化合物1对青枯假单胞菌、产气荚膜梭菌有较好抑制作用,MIC为71.2 μg/mL,而化合物2对青枯假单胞菌、产气荚膜梭菌、枯草芽孢杆菌的MIC为77.6 μg/mL。结论 化合物1为新化合物,命名为鼠尾草姜黄素。除化合物3和6外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到,此外,化合物2、7、8和9为首次从唇形科植物中分离得到,化合物5为首次从鼠尾草属植物中分离得到。化合物1和2表现出明显的抗菌活性。     

香附醋制前后香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮的含量比较

目的:研究醋制对香附中3种特征性成分香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮含量的影响。方法:采用HPLC测定醋制前后不同产地香附中3种成分的含量,Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(68∶32),检测波长242 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃。结果:建立的含量测定方法稳定可靠,香附烯酮、圆柚酮及α-香附酮线性范围依次为0.260~0.912,0.028~0.098,0.082~0.286μg;平均回收率分别为98.34%,97.87%,99.12%,RSD依次为1.48%,2.03%,1.37%。11个产地香附生品中香附烯酮、圆柚酮和α-香附酮的质量分数分别为1.52~4.80,0.04~0.20,0.70~1.99 mg·g-1;醋制后3种成分质量分数依次为1.55~4.96,0.04~0.19,0.61~1.97 mg·g-1。结论:不同产地香附中3种成分含量差异较大,醋制后香附烯酮含量升高,圆柚酮和α-香附酮含量降低,为香附的醋制机制研究提供参考。     

不同醋制方法对香附中指标成分含量的影响

目的:比较香附生品及其不同醋制品中圆柚酮、香附烯酮及α-香附酮的含量变化,从物质基础出发,研究不同炮制方法对该药材质量的影响。方法:采用HPLC测定圆柚酮、香附烯酮及α-香附酮含量,流动相甲醇-水(68∶32),检测波长242 nm。比较不同香附炮制品中3种指标成分的含量。结果:与生品相比,醋蒸品中圆柚酮、香附烯酮及α-香附酮分别下降了12.9%,14.2%,12.5%;醋煮品中各成分含量分别降低了23.1%,12.8%,18.7%;醋炙品中香附烯酮虽然增加了14.4%,但其他2种成分的含量大幅下降,圆柚酮约降低62.5%,α-香附酮降低44.9%。结论:醋炙法能使香附烯酮含量增加。各醋制法均能使样品中圆柚酮和α-香附酮的含量较生品降低,若以3种成分含量总体降低幅度小为原则,则选择醋蒸法为香附最佳醋制法。     

广金钱草中黄酮及黄酮苷类化学成分研究

目的 对广金钱草Desmodium styracifolium中的黄酮及黄酮苷类化学成分进行研究。方法 采用溶剂提取法、MCI HP20柱色谱、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、ODS柱色谱、制备高效液相色谱等方法进行分离纯化,并利用现代波谱技术对化合物进行结构鉴定。结果 从广金钱草醇提取物醋酸乙酯和正丁醇部位中分离得到31个黄酮及黄酮苷类化合物,分别鉴定为5,7-二羟基-2''-甲氧基-3'',4''-亚甲二氧基二氢异黄酮（1）、5,7-二羟基-2'',4''-二甲氧基二氢异黄酮（2）、金圣草黄素（3）、异鼠李素（4）、红车轴草素（5）、parvisoflavanone（6）、3,3''-二甲氧基槲皮素（7）、5,7,3''-三羟基-4'',5''-二甲氧基异黄酮（8）、5,7-二羟基-3'',4''-二甲氧基黄酮（9）、eriocoumaronochromone（10）、染料木素（11）、苜蓿素（12）、3''-甲氧基大豆苷元（13）、5,7,2''-三羟基-4''-甲氧基二氢异黄酮（14）、山柰酚（15）、木犀草素（16）、大豆苷元（17）、7,3''-二羟基-4'',5''-二甲氧基异黄酮（18）、spicatolignan B（19）、槲皮素（20）、香豌豆酚（21）、3-甲氧基山柰酚（22）、芹菜素（23）、二氢山柰酚（24）、dalbergiodin（25）、2''-羟基染料木素（26）、木犀草苷（27）、异荭草苷（28）、染料木素-7-O-β-D-呋喃芹糖基-（1→6）-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（29）、异牡荆苷（30）、维采宁-2（31）。结论 化合物6～8 、10 、14 、18～19 为首次从广金钱草中分离得到,丰富了广金钱草黄酮类成分的结构类型。     

自乳化释药系统（SEDDS）对姜黄素类组分增溶作用的研究

目的 探讨自乳化释药系统（SEDDS）对多组分同时增溶的可行性。方法 以姜黄素类组分为模型药物,采用D-最优混料设计优化SEDDS处方,以对双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的载药量、SEDDS的粒径和乳化时间为指标对SEDDS进行优化并对其进行综合评价,探讨SEDDS对多成分同时增溶的可行性。结果 优化得SEDDS最佳处方为Obleique CC497-聚山梨酯20-Transcutol P（0.21∶0.50∶0.29）,SEDDS粒径为（248.8±3.4）nm,乳化时间为（70±1）s。37 ℃时,SEDDS对双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的最大载药量分别为2.298、12.220、52.561 mg/g,在水中的溶解度分别为0.107、0.661、1.648 mg/mL。结论 SEDDS能实现对多组分的同时增溶。     

基于HPLC-QAMS多指标成分含量测定联合化学计量学的恒古骨伤愈合剂质量控制

目的 建立高效液相色谱-一测多评法（HPLC-QAMS）多指标成分含量测定联合化学计量学的恒古骨伤愈合剂质量控制研究的方法。方法 采用HPLC-QAMS检测15批恒古骨伤愈合剂中11个成分的含量,并与外标法结果进行对比,采用聚类分析、主成分分析与偏最小二乘法-判别分析对HPLC-QAMS结果进行分析评价。结果 11个成分分别在各自质量浓度范围内线性关系良好（r>0.999 3）;平均加样回收率为96.81%~100.21%（RSD<2.0%）;HPLC-QAMS所测结果与ESM差异无统计学意义;通过化学计量学分析,羟基红花黄色素A［变量重要性投影（VIP）值=1.446］、三七皂苷R₁（VIP值=1.351）、橙皮苷（VIP值=1.258）、京尼平苷（VIP值=1.138）、人参皂苷Rg₁（VIP值=1.067）可能是影响恒古骨伤愈合剂产品质量的差异性标志物。结论 建立的方法操作便捷、可靠稳定,可为深入研究恒古骨伤愈合剂质量控制提供参考。     

昆明山海棠化学成分研究

目的 研究昆明山海棠Tripterygium hypoglaucum根中的化学成分。方法 利用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱及半制备HPLC进行分离纯化,采用¹H-NMR、¹³C-NMR、ESI-MS等多种波谱技术鉴定获得的化合物结构。结果 从昆明山海棠根乙醇提取物的二氯甲烷部位分离得到6个化合物,分别鉴定为2-（5'',7''-二甲氧基-2'',2''-二甲基-2H-苯骈吡喃-6''-）-3-甲酰基-5,6-二甲氧基-苯骈呋喃（1）、3（R）-（4'',5''-二羟基）-2'',5,7-三甲氧基-6-（3-甲基-2-丁烯基）-异黄酮（2）、3''-香叶草基-5,7,2'',5''-四羟基异黄酮（3）、β-谷甾醇棕榈酸酯（4）、甘油山嵛酸酯（5）、β-谷甾醇（6）。结论 化合物1为新化合物,命名为毛秔子梢素C;化合物2~5为首次从该植物中分离得到。     

基于化学计量学、灰色关联度、一测多评多组分定量分析的童康片质量控制研究

目的 建立童康片中13个成分含量测定方法,结合化学计量学及灰色关联度分析（GRA）对其质量进行综合评价。方法 采用高效液相色谱-一测多评法（HPLC-QAMS）,以乙腈-甲醇（9∶1）-0.5%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱;检测波长分别为300 nm（检测柚皮芸香苷、橙皮苷）、254 nm（检测升麻素苷、升麻素、亥茅酚苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷）、203 nm（检测黄芪甲苷、薯蓣皂苷元）和220 nm（检测尿囊素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅰ）;结合化学计量学和GRA对多指标成分含量进行差异性分析。结果 方法学验证结果均符合《中华人民共和国药典》2020年版要求。化学计量学分析显示,橙皮苷、9,10-二甲氧基紫檀烷-3-O-β-D-葡萄糖苷、升麻素苷、白术内酯Ⅲ和尿囊素是影响童康片质量的主要潜在标志物。GRA相对关联度为0.297 6~0.667 8,同一时期生产的童康片质量差异小。结论 HPLC-QAMS同时测定童康片中13个成分含量,简便实用,化学计量学和GRA可用于评价童康片的整体质量。     

四制香附炮制前后UPLC指纹图谱比较及指标成分含量测定

目的 研究四制香附的质量评价方法。方法 建立香附和四制香附的超高效液相色谱法（UPLC）指纹图谱并通过化学计量学方法比较炮制前后指纹图谱中总体化学成分的变化,流动相甲醇（A）-水（B）梯度洗脱（0~10 min,5%~40%A;10~30 min,40%~70%A;30~40 min,70%A）,流速0.3 mL·min^-1,进样量3 μL,柱温35 ℃,检测波长280 nm。采用UPLC比较香附四制前后主要指标成分香附烯酮和α-香附酮的含量变化,流动相甲醇-水（75∶25）,检测波长242 nm。结果 四制对香附指纹图谱中化学成分的总体特征产生了显著影响。香附和四制香附的指纹图谱中共标示了28个特征峰,其中峰1,2,4为四制香附的特有峰,峰5为香附的特有峰,经指认峰2为5-羟甲基糠醛,峰24为香附烯酮,峰27为α-香附酮。香附四制后产生的5-羟甲基糠醛来源于四制辅料中的米醋、黄酒及香附中多糖类成分的美拉德反应。定量分析结果显示,四制前后香附烯酮含量差异无统计学意义,但α-香附酮含量明显降低。结论 香附四制过程中存在结构转化产生新成分且伴随着指标成分含量变化,可作为区别香附和四制香附的专属特征标识和差异性特征标识。该研究从定性和定量2个方面快速有效地评价了香附和四制香附,建立的方法准确性强、稳定性好,为完善香附和四制香附的质量评价体系提供了实验依据。