急性肝坏死大鼠NO水平的动态变化和作用

目的探讨一氧化氮（ＮＯ）在急性肝坏死大鼠模型中的浓度动态变化及其可能的作用机制．方法通过用化学药物促进或抑制急性肝坏死大鼠ＮＯ的合成，检测其外周血ＮＯ及ＡＬＴ，ＡＳＴ的浓度变化，并观察肝脏的病理变化．结果①急性肝坏死大鼠血清ＮＯ浓度６，１２，２４，４８ｈ显著高于正常对照（μｍｏｌ／Ｌ，９０±１３，１３７±３１，６６±１６，４４±１０ｖｓ１６±６，分别为Ｐ＜００１，Ｐ＜００１，Ｐ＜００１，Ｐ＜００５）；ＡＬＴ，ＡＳＴ也显著升高（ＡＬＴ，Ｕ／Ｌ，６９８±１０８，２０５６±６６８，８５８±２０８，１９６±３４ｖｓ３５±１３，Ｐ＜００１；ＡＳＴ，Ｕ／Ｌ，８０１±９４，３５７５±７１４，１２７２±２４２，１７５±１２７ｖｓ６５±２２，Ｐ＜００１）；②用ＮＡＭＥ抑制ＮＯ合成，降低了急性肝坏死大鼠外周血ＮＯ浓度，却显著升高了ＡＬＴ，ＡＳＴ浓度．③急性肝坏死大鼠应用ＮＯ合成底物后，与阳性对照组相比，未见ＮＯ显著升高，ＡＬＴ，ＡＳＴ也无显著变化．结论ＮＯ对ＤＧａｌｎ／ＬＰＳ诱导的急性肝坏死大鼠肝组织具有保护作用．     

回生口服液对人IL-2水平及LAK细胞活性的影响

目的探讨回生口服液对人体ＩＬ２水平及ＬＡＫ细胞活性的影响．方法取健康献血者外周静脉血，分离出单个核细胞（ＰＢＭＣ），加入植物血凝素（ＰＨＡ），于９６孔微量培养板中，分别加入不同浓度的回生口服液，孵育２４ｈ，以ＣＴＬＬ２细胞作为检测细胞，用ＭＴＴ法测定ＩＬ２水平，同时设空白对照及阴性对照组；分离出的ＰＢＭＣ加入γＩＬ２，于２５ｍｌ培养瓶中共同孵育９６ｈ，制备ＬＡＫ细胞，然后将其与经不同浓度回生口服液处理后的ＳＭＭＣ７７２１，Ｈｅｌａ细胞株于９６孔微量培养板中共同孵育２０ｈ，用ＬＤＨ释放法测ＬＡＫ细胞活性，同时设空白对照．全部数据采用ｔ检验方法进行处理．结果回生口服液在浓度为１０ｍｇ／ｍｌ以上时能促进ＰＢＭＣ在ＰＨＡ作用下分泌ＩＬ２（Ｐ＜００１），在１ｍｇ／ｍｌ时即能拮抗１％（Ｐ＜００１）、５％（Ｐ＜００５）人血清ＩＬ２抑制物的作用，且都与药物浓度呈正相关，在高浓度（１００ｍｇ／ｍｌ）时还能增强ＬＡＫ细胞的活性（Ｐ＜００１）．结论回生口服液可提高人ＩＬ２水平，并增强ＬＡＫ细胞活性，以实现抗癌作用．     

衰老人胚肺成纤维细胞核转录活性的研究

目的研究人胚肺成纤维细胞（简称２ＢＳ）核体外转录活性与代龄的关系。方法用３ＨＵＴＰ掺入法研究不同代龄２ＢＳ细胞核体外转录活性。结果衰老２ＢＳ细胞核转录活性较年轻组下降３３％（Ｐ＜００１），其催化ｒＲＮＡ和ｔＲＮＡ合成的ＲＮＡ聚合酶（ＲＮＰ）Ⅰ和Ⅲ的转录活性下降２４％（Ｐ＜００５），催化合成ｍＲＮＡ的ＲＮＰⅡ转录活性下降３８％（Ｐ＜００１）；衰老２ＢＳ细胞核内ＲＮＡ被转运至核外的量为总合成量的２９％，明显低于年轻细胞组的４５％（Ｐ＜００１）。结论衰老２ＢＳ细胞核转录活性的下降可能与其ＲＮＰ的活性与ＲＮＡ的转运水平下降有关。     

老年人面部,小腿皮肤角朊细胞终末分化蛋白的研究

目的探讨老年人面部、小腿皮肤角朊细胞终末分化蛋白的情况。方法应用免疫组化方法,对老年人和青年人面部、小腿皮肤角朊细胞表达、丝聚合蛋白（ｆｉｌａｇｇｒｉｎ）、壳蛋白（ｉｎｖｏｌｕｃｒｉｎ）、胱胺蛋白（ｃｙｓｔａｔｉｎＡ,ＣＴＡ）和碳酸酐酶样蛋白（ｃａｒｂｏｎｉｃａｎｈｙｄｒａｓｅ－ｌｉｋｅｐｒｏｔｅｉｎ,ＣＡＰ）进行了检测。结果丝聚合蛋白、壳蛋白、ＣＡＰ在老年人和青年人皮肤的含量差异无显著性;老年人面部皮肤ＣＴＡ的含量显著增加（４．７±１．６和３．３±０．４,Ｐ＜０．０５）,老年人小腿皮肤内丝聚合蛋白的含量却显著减少（２．２±０．４和３．７±１．７,Ｐ＜０．０５）。结论老年人皮肤干燥、脱屑,可能与角朊细胞丝聚合蛋白的表达降低有关;面部皮肤表皮细胞的分化产物不随年龄的增长而变化。     

免疫结合物5F11—DXR对人肺癌细胞杀伤作用的研究

目的 探讨一种抗肺癌单抗５Ｆ１１与多柔比星（ＤＸＲ）的结合物５Ｆ１１－ＤＸＲ对肺癌的导向治疗作用及其对一种耐药肺癌细胞系的耐药逆转作用。方法 应用戊二醛法制备５ＦＦ１１－ＤＸＲ,通过集落形成试验、染料排斥试验来评价其对靶细胞Ａ２的导向杀伤作用、对耐药靶细胞８０１－Ｄ、８０１－Ｄ＾ＤＸＲ的耐药逆转作用。结果 与ＤＸＲ相比,５Ｆ１１－ＤＸＲ可将对８０１－Ｄ细胞的１００％杀伤浓度降低１０倍（Ｐ〈０．０１）,将对Ａ２细胞的１００％杀伤深度降低２５倍（Ｐ〈０．０１）,在所含ＤＸＲ浓度为１μｇ／ｍｌ时,可将对８０１－Ｄ＾ＤＸＲ细胞的抑制率由２６．３％提高至１００％;在所含ＤＸＲ浓度为０．４μｇ／ｍｌ时,５Ｆ１１－ＤＸＲ对８０１－Ｄ细胞的杀伤较ＤＸＲ增强１０倍左右（Ｐ〈０．０５）,对Ａ２细胞的杀伤较ＤＸＲ增强１０００倍以上（     

硫酸镁对早期后去极和室性心律失常的抑制作用

镁治疗室性心律失常的机制还不清楚，本实验以Ｆｒａｎｚ心内膜接触电极研究镁对氯化铯引起的大室性心律失常作用。结果表明，氯化铯可引起早期后去极（ＥＡＤ）和室性心律失常，镁治疗组的ＥＡＤ幅度明显低于对照组（９．２±２．２％ＭＡＰ，２０．３±２．４％ＭＡＰ，Ｐ＜０．０１）。室性心律失常的发生率由对照组的１００％降为３７．５％（Ｐ＜０．０１）。硫酸镁可缩短延长了的ＱＴｃ间期。本文提示，硫酸镁对ＥＡＤ的抑制作用可能是抗心律失常的机制所在。     

H2O2诱导体外培养的皮肤成纤维细胞氧化应激损伤

目的探讨H2O2对体外培养的人皮肤成纤维细胞生物学特性的影响,从细胞水平为抗皮肤衰老药物的研究提供较理想的皮肤衰老模型。方法用不同浓度的H2O2(50～300μmol/L)干预体外培养的正常皮肤成纤维细胞,MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,羟脯氨酸比色法检测胶原含量,紫外分光光度计测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活性和丙二醛(MDA)的含量。结果 H2O2浓度依赖性地抑制皮肤成纤维细胞增殖,促进细胞凋亡,降低细胞SOD的活性,减少细胞胶原含量,增加MDA含量。结论氧化应激可损伤皮肤成纤维细胞,用H2O2致皮肤成纤维细胞氧化损伤模型可用于抗皮肤衰老药物的研究。     

用流式细胞仪和RNA原位杂交技术联合检测白血病患者的多药耐药

为研究多药耐药（ＭＤＲ）在白血病中临床意义，以及环孢霉素Ａ（ＣｓＡ）对ＭＤＲ体外逆转效果，对２６例白血病患者采用流式细胞仪测定治疗前白血病细胞内柔红霉素（ＤＮＲ）浓度及应用原位杂交技术检测ＭＤＲ１表达水平，并与加入ＣｓＡ后细胞内ＤＮＲ浓度变化比较。结果显示，初治完全缓解组，ＭＤＲ１阳性细胞内ＤＮＲ平均浓度（８０．０１％±２．１０％）明显高于难治、复发组（４４．８０％±７．７４％）（Ｐ＜０．０１），ＣｓＡ对难治组、复发组中ＭＤＲ１阳性者逆转效果好（Ｐ＜０．０１）。提示两种方法联合检测ＭＤＲ可指导临床化疗方案设计，ＣｓＡ对体外白血病耐药细胞有明显逆转效果     

抗胸腺细胞球蛋白治疗再生障碍性贫血25例临床研究

本文报道抗胸腺细胞球蛋白（ＡＴＧ）治疗２５例再生障碍性贫血（再障ＡＡ）的疗效。总有效率７２．０％，基本治愈＋缓解４４．０％，病死率１６．０％。死亡的４例均为重型再障。８０．０％ＡＡ病人治疗前Ｔ＿４／Ｔ＿８倒置，治疗后半数转为正常或好转。血清病反应轻者疗效明显优于反应重者（Ｐ＜０．０１）。     

中药白术延缓小鼠肾脏衰老的形态学研究

通过普通光镜和透射电镜技术，研究了中药白术延缓小鼠肾脏衰老的作用。结果表明，灌服白术液的小鼠肾小体数量、大小、硬化肾小体的比例、肾小囊腔的宽度、足细胞裂孔隙及血管球基膜厚度等项指标均与对照组不同（Ｐ〈０．０５，或Ｐ〈０．０１），实验证明白术有抗肾脏衰老的作用。     

紫杉醇诱导人体外培养滑膜细胞凋亡

目的研究紫杉醇对类风湿关节炎（ＲＡ）的作用。方法用光镜、电镜、共聚焦显微镜、流式细胞仪及ＤＮＡ凝胶电泳等方法检测了紫杉醇诱导体外培养的９例ＲＡ与５例骨关节炎（ＯＡ）及４例正常对照（骨折）患者关节滑膜细胞凋亡（Ａｐｏ）情况。结果紫杉醇对３种体外培养的滑膜细胞均可诱导出现凋亡，其中ＲＡ组最高，可达６７０４％±１１２０％。ＯＡ组为３８２８％±４４０％，正常对照组为１５１６％±８７５％。ＲＡ组凋亡细胞百分率显著高于ＯＡ组（Ｐ＜０．０１）和正常对照组（Ｐ＜０．０１），在一定剂量范围内具有时间和浓度依赖性。结论紫杉醇可能具有临床治疗ＲＡ的潜在性价值，而诱导ＲＡ滑膜细胞凋亡可能为寻找新的ＲＡ治疗药物提供一种新途径     

幽门螺杆菌感染对胃上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的为了探讨幽门螺杆菌感染对胃粘膜上皮细胞动力学的影响。方法应用免疫组织化学和切口末端标记法（ＴＵＮＥＬ），检测了１６例正常胃粘膜者和３１例幽门螺杆菌（Ｈｐ）相关慢性胃炎患者治疗前后胃粘膜上皮细胞增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）标记指数（ＬＩ％）、细胞凋亡指数（ＡＩ）和表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）的表达。结果Ｈｐ阳性患者的ＰＣＮＡＬＩ％为１３．９４±１．６４，正常对照组为６．７１±０．９２，差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）；ＥＧＦ－Ｒ表达与ＰＣＮＡＬＩ％呈正相关（ｒ＝０．４４８７，Ｐ＜０．０１）：Ｈｐ阳性患者组的ＡＩ为７．１±１．６，正常对照组为１．３±０．６，差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１）；抗Ｈｐ治疗后，２１例Ｈｐ根除者的ＰＣＮＡＬＩ％和细胞ＡＩ分别降至８．２１±１．３２和１．２±０．６，与治疗前相比差异有非常显著性（Ｐ＜０．０１），而１０例Ｈｐ持续阳性者则无明显降低（Ｐ＞０．０５）：ＰＣＮＡＬＩ％、ＥＧＦ－Ｒ表达及细胞ＡＩ与胃粘膜炎症程度无显著相关（Ｐ＞０．０５）。结论上述结果提示，Ｈｐ感Ｈ能引起胃粘膜上皮细胞过度增殖和凋亡。这为Ｈｐ感染胃癌发病中的作用机制提供了一些线索。     

虫草多糖对大鼠Ito细胞增殖及胶原基因表达的影响

目的　研究虫草多糖（ＣＰ）对大鼠Ｉｔｏ细胞增殖及Ⅰ、Ⅲ型前胶原基因ｍＲＮＡ表达的影响,探索ＣＰ抗肝纤维化的作用机制。方法分离、培养大鼠Ｉｔｏ细胞,采用~３Ｈ－胸腺嘧啶（~３Ｈ－ＴｄＲ）和~３Ｈ－脯氨酸（~３Ｈ－Ｐｒｏ）掺入法测定Ｉｔｏ细胞增殖及胶原合成;用原位杂交法检测Ｉｔｏ细胞Ⅰ、Ⅲ前胶原基因ｍＲＮＡ含量。结果　在０．１～８０μｇ／ｍ剂量范围内,ＣＰ可明显抑制Ｉｔｏ细胞~３Ｈ－ＴｄＲ和~３Ｈ－Ｐｒｏ的掺入。当ＣＰ浓度为１０μｇ／ｍｌ时,抑制率分别为２７．９％和４５．４％（Ｐ均＜０．０５）。随着浓度的增加和作用时间的延长,其抑制作用逐渐加强,１０μｇ／ｍｌ ＣＰ可显著抑制Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ的表达,抑制率分别为３２．６０％和３７．３２％（Ｐ均＜０．０１）。结论 ＣＰ在体外可抑制Ｉｔｏ细胞的增殖和胶原合成,下调Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达,并呈剂量和时间依赖性,提示ＣＰ对Ｉｔｏ细胞增殖和胶原合成的抑制可能是其体内抗肝纤维化作用的主要途径。     

关附甲素对单个心肌细胞钠、钙通道的阻断作用

用膜片钳全细胞记录法研究关附甲素（ＧＡ）对分离的单个豚鼠心室肌细胞钠通道电流（ＩＮａ）和Ｌ－型钙通道电流（ＩＣａ－Ｌ）的影响。结果表明:８，４０μｍｏｌ／ＬＧＡ使ＩＮａ峰值（ＩＮａｍａｘ）从８．０２±２．５３ｎＡ分别降至５，７９±１．８２ｎＡ和４．４４±１．８１ｎＡ（ｎ＝８，Ｐ＜０．０５和Ｐ＜０．０１）；使ＩＣａ－Ｌ最大峰值（ＩＣａ－Ｌｍａｘ）从１０２０．８±１９７．３ｐＡ分别降至５２３．０±１０１．８ｐＡ和４２９．６±１２０．０ｐＡ（ｎ＝５，均Ｐ＜０．０１）。ＧＡ使ＩＮａ和ＩＣａ－Ｌ的电流－电压曲线上移，但均不改变其激活、峰值和反转电位。本研究表明:ＧＡ对ＩＮａ和ＩＣａ－Ｌ具有浓度依赖性阻滞作用，这种阻滞作用可能为其抗心律失常作用的主要机制。     

寿命表法对慢性砷中毒皮肤体征阳性概率的估计

按水砷浓度、饮水年限和生理需水量算出经饮水累积摄入的砷总量（累积砷），用寿命表法计算出各累积砷水平下的慢性砷中毒皮肤体征阳性概率，并拟合剂量反应关系曲线，发现经饮水累积摄入的砷总量（ｘ，克）和慢性砷中毒皮肤体征阳性概率（ｙ，％）间存在明显的剂量反应关系（Ｐ＜０．０１），可表示为皮肤色素改变的阳性概率Ｙ＝０．０３６７２２Ｘ０．８３０５８６，皮肤角化过度的阳性概率Ｙ＝０．００９８９６Ｘ１．２３００２４。     

多巴胺对大鼠嗜铬细胞瘤细胞凋亡的影响

目的研究帕金森病（ＰＤ）黑质多巴胺神经元的死亡机理。方法用脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）标记法，借助流式细胞仪和荧光显微镜观察多巴胺（ＤＡ）对大鼠嗜铬细胞瘤（ＰＣ１２）细胞凋亡的影响。结果ＤＡ可诱发ＰＣ１２细胞凋亡，适中浓度（０．４５ｍｍｏｌ／Ｌ）时ＰＣ１２细胞凋亡数最多（凋亡率为４８．７％±６．３％）；抗氧化剂二硫苏糖醇（ＤＴＴ）可部分阻止ＤＡ诱发的ＰＣ１２细胞凋亡（Ｐ＜０．０１）。结论细胞凋亡参与了ＰＤ的病变过程，采用适当的抗氧化剂可能有益于ＰＤ的治疗     

ATP敏感性钾通道的活化改善心肌顿抑的作用

为了解ＡＴＰ敏感性钾通道（ＫＡＴＰ）的活性对心肌顿抑进程的影响。本实验结扎家兔左冠状动脉左室支１０分钟后，再灌注２小时造成短暂缺血－再灌注心肌顿抑模型，观察心电图、血流动力学、抗氧化酶、脂质过氧化物及细胞Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｃａ２＋的变化。结果，与对照组比较，活化ＫＡＴＰ通道能显著降低心脏后负荷（８０±７ｖｓ．１０２±１０，Ｐ＜０．０５）和心肌耗氧量（２．２±０．０５ｖｓ．２．７５±０．０９，Ｐ＜０．０１），逆转缺血心肌细胞内钙超载（２．４９±０．２８ｖｓ．０．９９±０．０８，Ｐ＜０．０１），提高再灌注期ＬＶｄｐ／ｄｔｍａｘ（４１．５％ｖｓ．８９％，Ｐ＜０．０１），降低ＭＤＡ浓度及ＭＤＡ／ＳＯＤ值（３．６±０．４ｖｓ．７．６±０．５，Ｐ＜０．０１；０．０９２±０．００８ｖｓ．０．２７０±０．０３４，Ｐ＜０．０１）。表明活化ＫＡＴＰ通道能产生直接的心肌保护作用，逆转心肌顿抑。     

表皮生长因子对人衰老成纤维细胞EGFR基因及HER－2基因表达的诱导

人胚肺成纤维细胞（２ＢＳ）的３Ｈ脱氧胸苷（ＴｄＲ）掺入率，衰老细胞明显低于中年和年轻细胞（Ｐ＜０．０１）。表皮生长因子（ＥＧＦ）对三种细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入均有促进作用，衰老细胞的反应性明显降低。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ及斑点杂交法显示衰老细胞的ＨＥＲ－２ｍＲＮＡ较年轻细胞明显降低，ＥＧＦ受体ｍＲＮＡ水平仅在极端衰老时才下降，ＥＧＦ可诱导年轻细胞ＨＥＲ－２基因表达，而衰老细胞却难以诱导。     

碱性成纤维细胞生长因子反义寡脱氧核苷酸抑制胰岛素诱导动脉平滑肌细胞增殖

为研究胰岛素诱导的动脉平滑肌细胞增殖作用和碱性成纤维细胞生长因子反义寡脱氧核苷对培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠主动脉平滑肌细胞生长的影响。采用胰岛素和碱性成纤维细胞生长因子反义寡脱氧核苷酸处理培养的Ｗｉｓｔａｒ大鼠主动脉平滑肌细胞,Ｎｏｒｔｈｅｎｂｌｏｔ检测碱性成纤维细胞生长因子基因ｍＲＮＡ表达,并测定氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入和细胞计数。结果发现胰岛素能明显诱导平滑肌细胞碱性成纤维细胞生长因子ｍＲＮＡ表达和增殖,且呈浓度依赖性。胰岛素浓度由０．００１ｍｇ／Ｌ增加到１．０ｍｇ／Ｌ,平滑肌细胞增殖率由１０％增加到５３％。碱性成纤维细胞生长因子反义寡脱氧核苷酸（５μｍｏｌ／Ｌ）能明显抑制胰岛素诱导的平滑肌细胞碱性成纤维细胞生长因子ｍＲＮＡ表达和增殖,氚标胸腺嘧啶脱氧核苷掺入被抑制４１．１％（与对照组比较,Ｐ＜０．０１）,细胞计数被抑制３０．２％（与对照组比较,Ｐ＜０．０１）。提示胰岛素可通过诱导平滑肌细胞碱性成纤维细胞生长因子的表达而促进动脉平滑肌细胞增殖,碱性成纤维细胞生长因子反义寡脱氧核苷酸能有效抑制胰岛素诱导的平滑肌细胞的ＤＮＡ合成及其增殖。     

免疫抑制酸性蛋白单克隆抗体MI2体外抗肿瘤作用的观察

作者采用ＭＴＴ比色法观察了本室自制免疫抑制酸性蛋白单克隆抗体ＭＩ＿２的体外抗肿瘤作用。结果表明：ＭＩ＿２在浓度为７．８１ｍｇ／Ｌ时即可明显抑制胃癌细胞株ＳＧＣ７９０１的生长（抑制率７．５％±２．４％Ｐ＜０．０１），并见剂量依赖性表现；在ＬＡＫ细胞与ＳＧＣ７９０１胃癌细胞的效靶比为１０：１时，加入１．９５ｍｇ／Ｌ的ＭＩ＿２即可明显增强ＬＡＫ细胞的细胞毒作用（增强效应为２０６．３％Ｐ＜０．０１），其作用也呈剂量依赖性表现。作者还发现ＭＩ＿２的这种抗肿瘤作用与补体无关。