一种兔圆小囊抗菌肽对新城疫病毒抑制作用

目的观察兔圆小囊抗菌肽对鸡新城疫病毒强毒株有无抑制作用。方法将NDV用圆小囊抗菌肽处理后再接种9日龄鸡胚，测定鸡胚尿囊液中的NDV血凝效价，并观察鸡胚病变。结果与对照组比较，兔圆小囊抗菌肽使鸡胚尿囊液中新城疫病毒的血凝效价降低，同时还能抑制因以上新城疫病毒所引起的鸡胚病变。结论兔圆小囊抗菌肽在体外对鸡新城疫病毒强毒株具有抑制作用。     

pSIREN/PB1 siRNA重组质粒抗甲型流感病毒研究

目的研究重组质粒pSIREN/PB1在鸡胚尿囊液中干扰甲型流感病毒复制的效果。方法设计1对编码PB1siRNA的寡核苷酸序列,经退火互补形成双链,再克隆至带有U6启动子的RNAi ready pSIREN-shuttle线性化载体,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,双酶切和测序鉴定重组质粒pSIREN/PB1。大量提取重组质粒pSIREN/PB1,用脂质体进行包裹后,按每只鸡胚90μg质粒量接种于10日龄鸡胚尿囊腔,4血凝单位甲型流感病毒液分别于质粒接种后0h、24h、48h接种于鸡胚尿囊腔,流感病毒接种48h后收集无色澄清尿囊液进行血凝实验检测流感病毒效价。结果甲型流感病毒PB1基因的siRNA编码序列成功克隆至pSIREN质粒载体。经酶切和测序分析,重组质粒pSIREN/PB1中的siRNA编码序列均完全正确。将脂质体包裹的pSIREN/PB1质粒和病毒液同时注射入鸡胚尿囊腔后,收获的甲型流感病毒效价最低。结论成功构建了表达甲型流感病毒PB1siRNA的重组质粒pSIREN/PB1,并且它可以抑制鸡胚中流感病毒复制。此研究进一步证实了RNA干扰对流感病毒复制的抑制作用,为开发流感基因防治新方法奠定了基础。     

鸡新城疫爆发的诊断

对某鸡场发病的依莎产蛋鸡群抽样后，测得其新城疫（ND）血凝抑制抗体效价高达1：（128～1028）。将病死鸡脑组织通过鸡胚接种，收获致死胚的尿囊液能凝集鸡红细胞，血细胞凝集价在1：128以上，能抑制ND阳性血清，不能抑制EDS76阳性血清；经毒力测定，其平均死亡时间为45．4h，静脉致病指数为2．42，脑内致病指数为1．85，说明该分离病毒为1株强毒力型NDV，从而确诊该鸡场爆发ND。     

鸡胚成纤维细胞培养抗肿瘤NDV疫苗的实验研究

目的用细胞培养法研制高效价人用抗肿瘤NDV。方法采用鸡胚成纤维细胞低血清培养法,在接种NDV之前的细胞培养中,少量使用优质小牛血清（2%）,让单层细胞基本铺满培养瓶底时,用无血清培养液多次洗涤单层细胞,以尽量降低残余牛血清含量。接种NDV之后,以人白蛋白代替小牛血清继续滋养细胞,培养病毒。结果NDV收获液LogPFU≥5.5,血凝效价1：640,经反向间接血凝试验检测,残余牛血清蛋白含量≤50ng/ml。结论NDV效价和活性符合人用疫苗要求。     

鸡胚成纤维细胞培养抗肿瘤NDV疫苗的实验研究

目的 用细胞培养法研制高效价人用抗肿瘤NDV.方法 采用鸡胚成纤维细胞低血清培养法,在接种NDV之前的细胞培养中,少量使用优质小牛血清(2 %),让单层细胞基本铺满培养瓶底时,用无血清培养液多次洗涤单层细胞,以尽量降低残余牛血清含量.接种NDV之后,以人白蛋白代替小牛血清继续滋养细胞,培养病毒.结果 NDV收获液Log PFU≥5.5,血凝效价1:640,经反向间接血凝试验检测,残余牛血清蛋白含量≤50 ng/ml.结论 NDV效价和活性符合人用疫苗要求.     

戊二醛和季铵盐复合消毒剂对鸡常见病原微生物杀灭效果的研究

目的研究戊二醛和季铵盐复合消毒剂对鸡常见的几种病原微生物杀灭效果.方法将金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和类炭疽杆菌培养,用PBS缓冲液和含有有机物的溶液(5%鸡粪和10%小牛血清)分别稀释成含菌5×106CFU/ml,分别加入到不同浓度的消毒剂中,作用不同的时间之后,进行平板细菌计数;将含2×105EID50新城疫病毒(NDV)和禽流感病毒(AIV)分别与不同浓度的复合消毒剂作用不同的时间,尿囊腔接种9日龄SPF鸡胚(0.2mL),孵育7天,测其尿囊液中病毒血凝效果.结果 1∶500稀释的复合消毒剂在水溶液和有机物溶液中,10min能百分之百的杀灭大肠埃希菌和葡萄球菌,1∶100稀释时,在10?min内能杀灭类炭疽芽胞杆菌;0.1%的消毒剂在5?min内可有效杀灭NDV和AIV.结论戊二醛和季铵盐复合消毒剂有很强的杀菌和杀病毒能力,即使在有机物存在的条件下,也不影响其杀菌效果.     

紫外线灭活新城疫病毒体外抗肿瘤作用的研究

目的比较新城疫病毒（NDV）和紫外线灭活的新城疫病毒（NDV-UV）在体外对肿瘤细胞的直接杀伤作用。方法用NDV和NDV-UV作用于喉癌细胞株Hep一2细胞，用MTT法测定病毒的杀瘤活性并测定培养上清液病毒的血凝效价。结果NDV和NDV-Uv对Hep一2细胞均有杀伤作用，且随着病毒与肿瘤细胞作用时间的延长，二者杀瘤率逐渐增强，病毒与细胞作用48h后。NDV对Hep一2细胞的杀伤作用较NDV-UV组强，NDV组可测出血凝效价，且随着病毒与细胞作用时间的延长，NDV组血凝效价逐渐升高，而NDV-UV组血凝效价始终未测出。结论NDV和NDV-UV能直接杀伤肿瘤细胞，NDV能在肿瘤细胞内复制并杀伤肿瘤细胞，而NDV-UV不能在肿瘤细胞内复制亦能杀伤肿瘤细胞，提示NDV的杀瘤作用并不完全依赖于病毒的复制，NDV-UV可作为安全有效的生物调节剂用于肿瘤的生物治疗。     

经卵白给药研究利巴韦林在鸡胚内抗甲型流感病毒的作用

目的建立抗甲型流感病毒作用新的鸡胚模型。方法设计尿囊腔中接种流感病毒(甲型流感病毒鼠肺适应的FM1株及流感病毒A3),鸡胚卵白注射利巴韦林,35℃培养72 h后,观察尿囊液流感病毒血凝素滴度。结果在新的模型下,利巴韦林100、50、25 mg/kg剂量组对流感病毒FM1及流感病毒A3在鸡胚体内有明显的抑制作用,具有统计学意义(P<0.05)。感染前2 h及感染后0 h、2 h、4 h注射利巴韦林,对流感病毒FM1及流感病毒A3在鸡胚体内有明显的抑制作用,具有统计学意义(P<0.05)。结论在新的鸡胚模型中,利巴韦林可明显地抑制流感病毒的复制。     

The Effect of Ribvirin Against Influenza Virus A by Injected Into Albumen in Improved Chick Egg Model

目的 建立抗甲型流感病毒作用新的鸡胚模型.方法 设计尿囊腔中接种流感病毒(甲型流感病毒鼠肺适应的FM1株及流感病毒A3),鸡胚卵白注射利巴韦林,35℃培养72 h后,观察尿囊液流感病毒血凝素滴度.结果 在新的模型下,利巴韦林100、50、25 mg/kg剂量组对流感病毒FM1及流感病毒A3在鸡胚体内有明显的抑制作用,具有统计学意义(P＜0.05).感染前2 h及感染后0 h、2 h、4 h注射利巴韦林,对流感病毒FM1及流感病毒A3在鸡胚体内有明显的抑制作用,具有统计学意义(P＜0.05).结论 在新的鸡胚模型中,利巴韦林可明显地抑制流感病毒的复制.     

2种纯化流感病毒方法的比较研究

目的比较2种纯化浓缩鸡胚尿囊液中流感病毒方法。方法将流感病毒鸡胚尿囊液分别采用蔗糖密度梯度离心法(sucrose—density—gradient—centrifugation,SDGC)和红细胞吸附释放法(absorption and release-RBC,AR—RBC)进行纯化,收集纯化病毒测定血凝效价,比较2种纯化方法。结果SDGC法纯化病毒可在30％和45％蔗糖层面交界处的区带中检测到流感病毒,血凝效价为1：2560;用AR—RBC法纯化病毒过程中用新鲜鸡红细胞出现了溶血现象,而用甲醛处理过的鸡红细胞则无此现象,血凝效价均为1：2560。结论与SDGC法纯化病毒比较,AR-RBC法是一种经济实用、操作简便并有较高纯化效率的方法,尤以甲醛处理过的鸡红细胞纯化效果最好。