聚乳酸-羟基乙酸纳米粒的制备

背景:聚乳酸-羟基乙酸是一种生物相容性良好的可降解材料,确定其最佳制备工艺条件,有利于聚乳酸-羟基乙酸后续药物载体研究与工业化生产条件的确立。目的:以聚乳酸-羟基乙酸为包裹材料,探索纳米粒的制备条件对粒径、表面形态等的影响,确定最佳制备工艺条件。方法:采用乳化-溶剂挥发法制备聚乳酸-羟基乙酸纳米粒,以粒径为观察指标,探讨乳化剂种类、乳化剂含量、油相种类、超声时间、挥发时间、油相与水相体积比(W∶O)以及聚合物质量浓度等制备条件对纳米粒粒径的影响,确定制备聚乳酸-羟基乙酸纳米粒的最佳工艺条件。结果与结论:优化后的制备工艺条件是在室温下,以一定的搅拌速度和滴加速度,选择常用无毒的乳化剂,浓度在0.3%~1.0%,丙酮为有机相,超声时间8~15min、挥发时间6~10h、水油相比(W∶O)>25∶1,聚合物质量浓度<60g/L。提示该制备工艺简单、稳定,优化制备条件,可制备出表面形态规整、粒径适宜的聚乳酸-羟基乙酸纳米粒。     

聚乳酸-羟基乙酸纳米粒的制备

背景：聚乳酸-羟基乙酸是一种生物相容性良好的可降解材料,确定其最佳制备工艺条件,有利于聚乳酸-羟基乙酸后续药物载体研究与工业化生产条件的确立。目的：以聚乳酸-羟基乙酸为包裹材料,探索纳米粒的制备条件对粒径、表面形态等的影响,确定最佳制备工艺条件。方法：采用乳化-溶剂挥发法制备聚乳酸-羟基乙酸纳米粒,以粒径为观察指标,探讨乳化剂种类、乳化剂含量、油相种类、超声时间、挥发时间、油相与水相体积比（W∶O）以及聚合物质量浓度等制备条件对纳米粒粒径的影响,确定制备聚乳酸-羟基乙酸纳米粒的最佳工艺条件。结果与结论：优化后的制备工艺条件是在室温下,以一定的搅拌速度和滴加速度,选择常用无毒的乳化剂,浓度在0.3%~1.0%,丙酮为有机相,超声时间8~15min、挥发时间6~10h、水油相比（W∶O）〉25∶1,聚合物质量浓度〈60g/L。提示该制备工艺简单、稳定,优化制备条件,可制备出表面形态规整、粒径适宜的聚乳酸-羟基乙酸纳米粒。     

磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒的制备及其特性

背景：基于纳米技术发展起来的纳米载体介导的磁性载药系统，在外加磁场作用下，能实现位点特异性靶向给药的目的，有利于提高病灶部位的局部药物浓度，从而进一步提高治疗效果，减少全身毒副作用。目的：研究磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒的制备工艺，评价纳米粒子特性。设计：首先选择几个可能影响纳米微粒特性的因素进行了单因素实验，然后再根据实验结果，结合统计学中的正交设计，获得了最佳优化处方。单位：解放军第二军医大学长海医院特诊科。材料：实验于2005—01／2006—03在解放军第二军医大学药学院药剂教研室完成。实验用氧化酚砷购自美国Sigma公司，聚乳酸-羟基乙酸由山东医疗器械研究所提供，纳米级四氧化三铁购自美国Sigma公司，聚乙烯醇购自北京有机化工厂，二氯甲烷等其他试剂均为分析纯，购于上海国药集团化学试剂有限公司。方法：运用超声乳化-溶剂挥发法制备磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒，通过透射电镜观察微粒形态，振动样品磁强计确证纳米微粒磁性的存在，激光粒径仪测定纳米粒的粒径大小和分布，高效液相法测定氧化酚砷的载药量及包封率，并计算氧化酚砷体外释放百分率。主要观察指标：磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒的形态、粒径、载药量、包封率、磁性及体外释放情况。结果：①微粒包封率和载药量：实验制备的纳米粒平均包封率为34.2％；5批纳米粒载药量分别为3．06％，3．15％，3．18％，3．21％，3．41％，平均载药量为3．20％，批间差异较小，说明工艺稳定性、重现性好。②微粒形态：纳米微粒呈圆形，表面光滑，分布均匀，不粘连，磁性微球中可见非均匀分散的黑色不透光区，为四氧化三铁微粒。③微粒粒径：分布范围窄（140～500nm）。平均290nm。④微粒磁性：在不断改变外加磁场的大小与方向的情况下，微粒具有不同的磁化强度，说明氧化酚砷聚乳酸纳米微粒具有一定的磁响应性。⑤体外释放实验：氧化酚砷经过最初的快速释放后，进入缓慢控释阶段，于第8天时达到最终基本稳定的平台期。结论：实验获得了较满意的磁性聚乳酸-羟基乙酸氧化酚砷纳米微粒制备工艺；该纳米微粒在外加磁场的情况下有较好磁靶向性的作用，同时具备良好药物缓释作用。     

聚乳酸/聚乙二醇琥珀酸酯-姜黄素纳米粒的制备及体外评价

背景:聚乳酸及其共聚物是一类具有良好生物相容性的可降解高分子材料,已被广泛用于可生物降解型药物缓释或靶向给药系统中.目的:探索载药纳米粒制备条件对包封率和载药量的影响,确定最佳制备工艺条件.方法:以维生素E1000 聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)为乳化剂、姜黄素为模型药物、聚乳酸为载体材料,采用O/W 型乳化-溶剂挥发法制备聚乳酸-姜黄素纳米粒,以包封率和载药量为主要指标,单因素实验探索影响两指标的主要因素,再正交试验设计优化制备工艺.结果与结论:通过正交试验设计制备聚乳酸-姜黄素纳米粒的最佳工艺为:水油相比10∶1,聚合物浓度15g/L,药物浓度3g/L,乳化剂TPGS 浓度0.03%.以此工艺制备的载药纳米粒外形圆整光滑,粒度分布较为均匀,平均粒径为167.5 nm,包封率为89.52%,载药量为13.72%,纳米粒前期突释不明显具有良好的缓释作用.该工艺稳定、简单可行,优化制备工艺得到的聚乳酸-姜黄素纳米粒粒径适中、包封率和载药量较高.     

聚乳酸/聚乙二醇琥珀酸酯-姜黄素纳米粒的制备及体外评价

背景：聚乳酸及其共聚物是一类具有良好生物相容性的可降解高分子材料,已被广泛用于可生物降解型药物缓释或靶向给药系统中。目的：探索载药纳米粒制备条件对包封率和载药量的影响,确定最佳制备工艺条件。方法：以维生素E1000聚乙二醇琥珀酸酯（TPGS）为乳化剂、姜黄素为模型药物、聚乳酸为载体材料,采用O/W型乳化-溶剂挥发法制备聚乳酸-姜黄素纳米粒,以包封率和载药量为主要指标,单因素实验探索影响两指标的主要因素,再正交试验设计优化制备工艺。结果与结论：通过正交试验设计制备聚乳酸-姜黄素纳米粒的最佳工艺为：水油相比10：1,聚合物浓度15g/L,药物浓度3g/L,乳化剂TPGS浓度0.03%。以此工艺制备的载药纳米粒外形圆整光滑,粒度分布较为均匀,平均粒径为167.5nm,包封率为89.52%,载药量为13.72%,纳米粒前期突释不明显具有良好的缓释作用。该工艺稳定、简单可行,优化制备工艺得到的聚乳酸-姜黄素纳米粒粒径适中、包封率和载药量较高。     

乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒的制备及体外释药性

背景：医用纳米粒作为药物传递的新型载体,目前已经成为医药领域研究的重点。目的：构建以生物可降解材料乳酸-羟基乙酸共聚物为载体,负载抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶的载药纳米粒。方法：利用复乳-溶剂挥发法制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒。场发射扫描电子显微镜观察纳米粒表面形态;激光粒度分析仪测定粒径分布并计算成球率;紫外分光光度计测定5-氟尿嘧啶载药量、包封率,并对体外释药进行评估。结果与结论：纳米粒呈球性,平均粒径为（186±14）nm,成球率、载药量和包封率分别为70.8%、6.6%、28.1%,体外释药有突释现象,24h内5-氟尿嘧啶累积释药量达36.2%,10d达83.6%。提示成功制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒,其具有缓释效应。     

乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒的制备及体外释药性

背景:医用纳米粒作为药物传递的新型载体,目前已经成为医药领域研究的重点。目的:构建以生物可降解材料乳酸-羟基乙酸共聚物为载体,负载抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶的载药纳米粒。方法:利用复乳-溶剂挥发法制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒。场发射扫描电子显微镜观察纳米粒表面形态;激光粒度分析仪测定粒径分布并计算成球率;紫外分光光度计测定5-氟尿嘧啶载药量、包封率,并对体外释药进行评估。结果与结论:纳米粒呈球性,平均粒径为(186±14)nm,成球率、载药量和包封率分别为70.8%、6.6%、28.1%,体外释药有突释现象,24h内5-氟尿嘧啶累积释药量达36.2%,10d达83.6%。提示成功制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒,其具有缓释效应。     

胸腺五肽-聚乳酸-羟基乙酸微球的制备及释药性能

背景:国内外所用的胸腺肽多为注射液,其保存、运输困难,成本升高,给患者带来不便,限制了它的广泛使用.因此胸腺肽口服缓释制剂的研究正逐步受到人们的关注.目的:观察胸腺五肽-聚乳酸-羟基乙酸缓释微球的释药性能.设计、时间及地点:体外观察实验,于2005-02/2007-10在武警医学院化学教研室科研室完成.材料:胸腺五肽标准品(含量99.17%)由成都川抗派德生物医药科技有限公司提供,胸腺五肽(含量97.16%)由杭州中肽生化有限公司提供,聚乳酸-羟基乙酸共聚物(50:50,Mr10 000)由山东省医疗器械研究院提供,聚乙烯醇(聚合度1 750±50)由天津市天大化工实验厂提供,三氟乙酸由上海吉尔生化公司提供,二氯甲烷(分析纯).方法:称胸腺五肽溶丁二聚乙烯醇溶液为内水相;溶解于二氯甲烷中,超声形成W/O初乳;将初乳加入聚乙烯醇溶液快速搅拌到W/ONV复乳,再缓慢搅拌,待二氯甲烷完全挥发后得固化胸腺五肽-聚乳酸-羟基乙酸缓释微球.主要观察指标:①扫描电镜观察微球的形态.②反相高压液相色谱法测定胸腺五肽含量,计算微球载药量、包封率.③体外释药情况.结果:制备的微球表面光滑,球体均匀:微球中胸腺五肽的载药量和包封率分别为1.87%和67%左右;微球在10d内累积释药率达70%.结论:胸腺五肽-聚乳酸-羟基乙酸缓释微球对胸腺五肽具有明显的缓释作用.     

聚乳酸／羟基乙酸纳米粒的应用进展

聚乳酸／羟基乙酸（PLGA）是一类可生物降解的高分子材料,具有良好的生物相容性、安全性、稳定性。PLGA纳米粒作为一种新型的高分子材料超声造影剂,具有显影效果好、大小均匀、抗压性强等特点。PLGA纳米粒应用于药物缓释系统、载基因治疗、疾病诊断、组织工程、疫苗研制等方面。本文主要对PLGA纳米粒的制备、性质及其应用作一综述。     

Preparation and evaluation of paclitaxel-loaded PEGylated immunoliposome

A sterically stabilized paclitaxel-loaded liposome tailored to target human breast cancer cells was developed, thereby promoting the efficiency of intracellular delivery of paclitaxel through receptor-mediated endocytosis. Results indicated that the targeting moiety (thiolated Herceptin) was successfully coupled to the distal reactive maleimide terminus of the poly (ethylene glycol)-phospholipid conjugate as well as being incorporated in the liposomal bilayers. The particle size of the PEGylated immunoliposome was maintained at about 200 nm. Confocal microscopy studies showed that the PEGylated immunoliposome was uptaken into the interior of the tumor cell through the receptor-mediated endocytosis pathway. The PEGylated immunoliposome showed substantially higher cellular uptake than the PEGylated liposome in cancer cells (BT-474 and SK-BR-3) over-expressing human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) at 37 °C, while no difference was found in low HER2 expressing cells (MDA-MB-231) nor at low temperature (4 °C). Pharmacokinetics of paclitaxel in the PEGylated immunoliposome was compared with that in Taxol® and in the PEGylated liposome in rats. The circulating time of paclitaxel in the PEGylated immunoliposome was prolonged compared to Taxol® while slightly shortened than that in the PEGylated liposome. Therefore, the paclitaxel-loaded PEGylated immunoliposome using Herceptin could serve as a promising model for future tumor specific cancer therapy of HER2 over-expressing breast cancers.     

The effect of paclitaxel-loaded nanoparticles with radiation on hypoxic MCF-7 cells

BACKGROUND AND OBJECTIVE: The inability of radiotherapy to eradicate completely certain human tumours may be due to the presence of resistant hypoxic cells. Several studies have confirmed the radiosensitizing effect of paclitaxel, a microtubular inhibitor. The object of this study was to evaluate the physicochemical characteristics of paclitaxel-loaded nanoparticles, and determine the ability of the released paclitaxel to radiosensitize hypoxic human breast carcinoma cells (MCF-7) with respect to radiation dose. METHODS: The poly(d,l-lactide-co-glycolide) (PLGA) nanoparticles containing paclitaxel were prepared by o/w emulsification-solvent evaporation method. The morphology of the paclitaxel-loaded nanoparticles was investigated by scanning electron microscopy. The drug encapsulation efficiency (EE) and in vitro release profile were measured by high-performance liquid chromatography. Cell cycle was evaluated by flow cytometry. Cell viability was measured by the ability of single cells to form colonies in vitro. RESULTS: The prepared nanoparticles were spherical with diameter between 200 and 800 nm. The EE was 85.5%. The drug release pattern was biphasic with a fast release rate followed by a slow one. Co-culture of human breast carcinoma cells (MCF-7) with paclitaxel-loaded nanoparticles demonstrated that released paclitaxel retained its bioactivity to block cells in the G2/M phase of the cell cycle and effectively sensitized hypoxic MCF-7 cells to radiation with radiosensitivity shown to be dependent of radiation dose at levels of dosages studied. The sensitizer enhancement ratio for paclitaxe-loaded nanoparticles at 10% survival is approximately 1.4. CONCLUSION: This work has demonstrated that paclitaxel can be effectively released from a biodegradable PLGA nanoparticle delivery system while maintaining potent combined cytotoxic and radiosensitizing abilities for hypoxic tumour cells.     

紫杉醇纳米粒子的制备及其应用

背景:紫杉醇临床用剂型紫素易引起过敏反应,因此研制新的紫杉醇新剂型就显得十分有意义。目的:研制紫杉醇新剂型,观察其在动物模型上治疗肿瘤的效果。方法:合成具有自主知识产权的生物可降解材料医用聚己内酯。采用溶剂替代法制备载紫杉醇纳米粒子,对其粒径、形态、紫杉醇含量、体外释放等进行测定。选用TA2系实验小鼠,建立乳腺癌动物模型,随机分为5组,分别局部注射生理盐水、紫素、低剂量、中剂量及高剂量紫杉醇纳米粒子进行治疗。结果与结论:实验制备的紫杉醇纳米粒子平均粒径约为153.54nm,包埋率为87.25%,紫杉醇含量19.06%。体外可恒定释放30d以上。2周药物治疗显示,各治疗组均不同程度上抑制了肿瘤的生长,其中紫杉醇纳米粒子中、高剂量组的抑瘤率明显高于紫素治疗组(P<0.01)。提示紫杉醇纳米粒子可缓释药物,中剂量组和高剂量组对小鼠乳腺癌的抑瘤率高于紫素组。     

载紫杉醇脂质微泡的改良制备研究

目的 探讨加入三醋酸甘油酯改良制备载紫杉醇脂质微泡的可行性,及其对载药微泡质量、载药量、包封率的影响.方法 采用冷冻干燥法制备携带紫杉醇的脂质微泡,分别于制备过程中加入或不加入三醋酸甘油酯,测定载药微泡的包封率、载药量、粒径大小、分布和Zeta电位、pH值.结果 改良法(加入三醋酸甘油酯)制备的载紫杉醇脂质微泡与常规冻干法制备的载药微泡相比较,微泡粒径显著减小,二者的平均粒径分别是(1.1±0.4)μm和(2.8±0.4)μm,P<0.01;其表面电位显著增高(19.1±0.3)mV和(-5.9±0.2)mV,P<0.01;包封率和载药量显著增高,包封率分别为(95.0±1.2)%和(36.1±4.7)%,载药量为(5.60±0.10)%和(0.50±0.04)%,P<0.01.结论 制备过程中加入三醋酸甘油酯可显著提高载药微泡的包封率和载药量.     

Novel optimized biopolymer-based nanoparticles for nose-to-brain delivery in the treatment of depressive diseases

A valid option to bypass the obstacle represented by the blood–brain barrier (BBB) in brain delivery is the use of the unconventional intranasal route of administration. The treatment of depressive diseases, resulting from the depletion of a neurotransmitter in the inter-synaptic space, such as serotonin, is indirectly treated using molecules that can permeate the BBB unlike the latter. In the present article, a set of nanovectors were produced using a mucoadhesive biopolymer, i.e. alginate (Alg). Optimizing the reaction, polymeric nanoparticles having diameter of 30–70 nm were produced, and water stable multi-walled carbon nanotubes functionalized (MWCNT-COOH)/Alg complexes were obtained. These nanovectors were loaded with serotonin, evaluating drug loading/release. By means of Raman microscopy, the cellular internalization of the (MWCNT-COOH)/Alg complex was demonstrated. A complete biocompatibility on neuronal cells was proved for the whole set of nanovectors. Finally, a method of self-administration was tested, which involves the use of a household apparatus, such as an aerosol machine, observing a fine particulate, able to deliver the nanovectors through the nose.

A valid option to bypass the obstacle represented by the blood–brain barrier (BBB) in brain delivery is the use of the unconventional intranasal route of administration.     

包裹pHEV23纳米壳聚糖的制备和特性

背景：裸DNA在基因治疗中易被体内核酸酶降解。携载DNA疫苗的病毒类载体存在致癌和引发免疫应答等安全问题，且制备方法复杂。非病毒载体（尤其是阳离子-DNA聚合物）具有低毒，低免疫反应，能重复给药，易于大量制备等优点。壳聚糖是一种天然阳离子碱性聚多糖，具有良好的生物可降解性、生物相容性及生物安全性。 目的：制备含质粒pHEV23的纳米壳聚糖，观察其表征及对DNA的保护作用。 设计、时间及地点：对比观察实验，于2007-06／2008-05在浙江省医学科学院生物工程研究所完成。 材料：壳聚糖，脱乙酰度88％，批号061220，由青岛利中甲壳质公司提供。质粒pHEV23为浙江省医学科学院生物工程研究所实验室提供。 方法：通过脱水剂Na2SO4诱导的复凝聚沉淀法制备含质粒pHEV23的纳米壳聚糖。根据壳聚糖质量浓度1．4，0．7，0．4g／L，分别制备壳聚糖（高）-pHEV23、壳聚糖（中）-pHEV23、壳聚糖（低）-pHEV23。主要观察指标：激光纳米粒度分析仪测定壳聚糖-pHEV23粒径、Zeta电位；紫外分光光度计检测包封率；凝胶阻滞实验分析壳聚糖和pHEV23的聚合：DNase Ⅰ的保护试验分析壳聚糖-pHEV23的抵抗核酸酶降解能力；释放实验评价壳聚糖-pHEV23的稳定性。 结果：制备的壳聚糖-pHEV23粒径在170～470nm，其中壳聚糖（低）-pHEV23 171．6nm，壳聚糖（中）-pHEV23 387．0nm，壳聚糖（高）-pHEV23 467．3nm。壳聚糖（低）-pHEV23 Zeta电位为＋22．9mV。包封率均〉95％，其中壳聚糖（低）-pHEV23 95．8％，壳聚糖（中）-pHEV23 96．7％，壳聚糖（高）-pHEV23 97．1％。凝胶阻滞分析表明，壳聚糖和pHEV23之间通过静电作用完全结合，纳米粒带正电荷。DNase Ⅰ保护试验表明，壳聚糖-pHEV23能有效抵抗DNase Ⅰ酶降解，对pHEV23有保护作用。稳定性试验表明，4℃保存60d，纳米粒仍能较稳定地包裹pHEV23。 结论：壳聚糖-pHEV23能高效装载外源DNA，稳定性良好，并保护其免受核酸酶的降解。     

肝素修饰金纳米粒子的制备及表征

背景:大分子修饰的金纳米粒子可被应用于治疗学或诊断学等其他方面,但是大多数报道多限于制备蛋白质、DNA及小分子糖修饰的金纳米粒子方面,对于制备多糖修饰的金纳米粒子的研究尚不深入.目的:制备一种肝素修饰的金纳米粒子,考察工艺条件片对其粒径及紫外吸收光谱进行观察.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-04/2008-09在武汉理工大学化工学院生物技术制药实验室完成.材料:制备金纳米粒子并在4℃保存供实验用.方法:将肝素钠用亚硝酸降解法降解,得到还原末端为醛基的肝素,分别溶解于二甲亚砜、含0.05 mL,0.5 mL冰醋酸的二甲亚砜溶液,再与对巯基苯胺发生还原胺化反应,用氰基硼氢化钠作还原剂,得到带巯基的肝素衍生物.另取样品溶解于4支含0.5mL冰醋酸的二甲亚砜溶液的瓶内,再加入对巯基苯胺和氰基硼氢化钠,分别反应2,4,6,24 h.将得到的肝素衍生物加入到制备好的金纳米粒子溶液中,肝素以Au-S化学键合的方式定向固定在金纳米粒子的表面.主要观察指标:①肝素修饰前后金纳米粒子的紫外光谱最大吸收波长.②肝素修饰前后金纳米粒子的粒径大小.结果:制备金纳米粒子时,当柠檬酸钠和氯金酸物质的量比为6∶1时,纳米粒子粒径均一.通过还原胺化反应制各端基为巯基的肝素时,加入冰醋酸的量越多,反应产率越高.反应6 h内.反应时间越长,其反应产率越高,24 h的反应产率虽比6 h的略有提高,但差别不大,说明6 h反应已经基本完全.将肝素以Au-S化学键合的方式定向固定在金纳米粒子的表面,金纳米粒子的粒径为10 nm,紫外最大吸收为522 nm;肝素修饰的金纳米粒子的粒径为20 nm,紫外最大吸收为529 nm.结论:制备了粒径均一的肝素修饰的金纳米粒子,并且粒径大小对纳米粒子的紫外最大吸收有影响.还原胺化反应的最佳反应条件是采用浓度比为8∶1的二甲亚砜/冰醋酸混合溶液作为溶剂,反应时间为6 h.