慢加亚急性肝衰竭大鼠肠源性内毒素血症时Th17/Treg表达变化的实验研究

目的:观察Treg/Th17细胞失衡及相关细胞因子在慢加亚急性肝衰竭肠源性内毒素血症(IETM)时的表达变化,进而探讨Treg/Th17细胞对内毒素介导的炎症反应的调控作用。方法:采用牛血清白蛋白致敏建立免疫性肝纤维化大鼠模型,以腹腔注射D-Gal+LPS液(合D-Gal 400mg/kg,LPS 100μg/kg)急性攻击建立肝衰竭IETM大鼠模型。流式细胞术检测不同时间点大鼠外周血中Th17、Treg细胞频数,ELISA法测定不同时间节点大鼠结肠组织IL-10、TNF-α、IL-17A、IL-23、TGF-β水平。结果:与正常组比较,模型组Treg、Th17细胞频数在各时间节点均升高(P 0. 05),Treg、Th17细胞与前一时间节点比较均有上升(P 0. 05);与正常组比较,模型组结肠组织Treg/Th17型细胞因子IL-17A、IL-23、TNF-α、TGF-β、IL-10各时间节点表达均升高(P 0. 05),且各炎症因子与前一时间节点比较均有上升(P 0. 05);正常组大鼠IL-10、TGF-β等抑炎因子水平高于IL-17A、IL-23、TNF-α等促炎因子,模型组Th17比例高于Treg,失衡向Th17方向偏移。结论:肝衰竭IETM发生时Treg/Th17细胞失衡,向Th17方向偏移,相关抑炎、促炎因子均释放增加,加剧IETM程度。     

犀角地黄汤对免疫性血小板减少症模型大鼠外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞及Th17细胞的影响

目的探讨犀角地黄汤对免疫性血小板减少症(ITP)模型大鼠外周血CD4~+ CD25~+调节性T细胞(Treg)、Th17细胞及相关细胞因子的影响。方法将48只大鼠随机分为正常组、模型组、醋酸泼尼松组及犀角地黄汤低、中、高剂量组,每组8只。除正常组外,其余组均采用腹腔注射兔抗大鼠血小板血清(APS)建立ITP模型,于造模开始后第7天开始,各给药组灌胃给予相应剂量药物,连续14 d。采用血细胞计数仪检测造模前、灌胃前、灌胃结束后各组大鼠外周血中血小板数目;灌胃结束后,采用流式细胞术检测各组大鼠Treg、Th17细胞比例,采用实时荧光定量PCR法检测淋巴细胞Foxp3 mRNA相对表达量,采用酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素-17(IL-17)、IL-35水平。结果灌胃结束后,与模型组比较,犀角地黄汤各剂量组大鼠血小板数目明显上升(P均0.05),外周血淋巴细胞中Treg所占比例、Foxp3 mRNA相对表达量及IL-35水平均明显上升(P均0.05),而Th17细胞所占比例及IL-17水平均明显下降(P均0.05),且具有剂量依赖性;犀角地黄汤高剂量组各指标与醋酸泼尼松组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论犀角地黄汤可能通过上调ITP大鼠外周血中Treg细胞表达,下调Th17细胞表达,维持Treg/Th17平衡,进而调节相关细胞因子IL-17、IL-35的表达发挥抗血小板减少作用。     

温经化瘀止痛法对寒凝血瘀证痛经大鼠Th17、Treg细胞分化及其细胞因子表达的影响

目的观察温经化瘀止痛法对寒凝血瘀证原发性痛经大鼠Th17、Treg细胞分化及其特征性细胞因子(IL-17A、TGF-β)表达的影响,探讨温经化瘀止痛法治疗寒凝血瘀证原发性痛经的免疫机制。方法将50只大鼠随机分为空白组、模型组、西药组、中药高剂量组和中药低剂量组。除空白组外,通过寒冷刺激法联合苯甲酸雌二醇和缩宫素建立寒凝血瘀证原发性痛经大鼠模型。从造模第7天开始,分别给予中药、布洛芬和蒸馏水治疗。检测各组Th17、Treg细胞比例、IL-17A、TGF-β含量及IL-17A、TGF-βmRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组Th17细胞比例、IL-17A含量、IL-17A mRNA表达和IL-17A/TGF-β比值均升高(P0.05,P0.01);Treg细胞比例、TGF-β含量和TGF-βmRNA表达降低(P0.01)。与模型组比较,西药组和中药低剂量组Th17细胞比例降低,中药高、低剂量组IL-17A含量降低,中药高剂量组IL-17A mRNA表达降低(P0.05,P0.01);各治疗组Treg细胞比例、TGF-β含量和TGF-βmRNA表达均升高,IL-17A/TGF-β比值降低(P0.01)。中药两组间比较,中药低剂量组调节Th17、Treg细胞比例和降低IL-17A含量优于中药高剂量组(P0.01);中药高剂量组升高TGF-β含量、降低IL-17A mRNA表达优于中药低剂量组(P0.01)。结论温经化瘀止痛法调节Th17、Treg细胞比例及IL-17A、TGF-β表达可能是其治疗寒凝血瘀证PD的免疫机制之一。     

Th17/Treg平衡在湿热型结肠炎大鼠中的变化及黄芩汤的调节作用

目的:观察湿热型结肠炎大鼠模型中Th17/Treg的平衡变化以及黄芩汤对Th17/Treg的调节作用,从免疫学的角度探讨其治疗湿热型结肠炎的机制。方法:应用高脂、高糖饲料联合人工气候箱法等复合因素造出大鼠湿热模型,再结合三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法建立湿热+TNBS结肠炎模型;将60只大鼠随机分为空白组、湿热+TNBS结肠炎模型组、黄芩汤组、美沙拉嗪组。对大鼠进行一般临床观察,采用酶联免疫吸附法(ELISA)分析大鼠血清中白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)水平,用Western blot方法检测结肠组织中Treg转录因子FOXP3和Th17转录因子RORγt的表达水平。结果:黄芩汤免煎剂0.12g/100g能够有效的缓解湿热型结肠炎的炎症反应,与对照组比较,湿热+TNBS结肠炎大鼠模型中Th17/Treg表达失衡,Th17类细胞因子IL-17和IL-6和转录因子RORγt表达升高而Treg类细胞因子IL-10和TGF-β和转录因子FOXP3表达降低;与模型组相比,黄芩汤能够降低IL-17、IL-6和RORγt的水平而增强IL-10、TGF-β和FOXP3的表达。结论:Th17/Treg失衡可能与湿热型结肠炎的发生发展密切相关,黄芩汤能够有效的调节Th17/Treg的平衡关系,这可能是其治疗湿热型结肠炎的免疫机制之一。     

益气补肾方对自然流产小鼠Th17/Treg细胞及相关细胞因子的影响

目的:观察益气补肾方对自然流产模型小鼠外周血Th17/Treg及相关细胞因子的影响及其对妊娠结局的影响。方法:孕鼠随机分为正常妊娠模型组、自然流产模型组、环孢素组、中药高、中、低剂量组,每组6只。正常妊娠模型组和自然流产模型组给予生理盐水;环孢素组给予环孢素A;中药高、中、低剂量组分别给予48、24、12g/kg益气补肾方,连续2周,每天1次。给药结束后取血,检测外周血Th17、Treg细胞含量及Th17/Treg细胞比例,检测干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、白介素-17(IL-17)、白介素-10(IL-10)含量。观察子宫胚胎数量并计算胚胎吸收率。结果:连续给药2周,中药各剂量组均能显著减少胎盘吸收率(P0.05),增加胎盘存活数量;中药各剂量自然流产模型小鼠Th17/Treg细胞百分率比值均显著降低,中药高、中剂量组Th17细胞比例显著降低(P0.05);中药低、中剂量组Treg细胞比例显著升高(P0.05);中药各剂量自然流产模型小鼠IL-17、IFN-γ含量均显著降低(P0.05);中药低剂量组IL-10含量显著升高(P0.05);中药中剂量组IL-4含量显著升高(P0.05)。结论:益气补肾方可能通过调节Th17及Treg细胞的表达水平,降低Th17/Treg比例,并调节相关细胞因子的表达水平,影响Th17/Treg平衡,诱导妊娠免疫耐受,促进胚胎发育,从而改善妊娠结局。     

中药逐水饮对小鼠Lewis肺癌胸腔积液模型积液生成及Th17免疫平衡的影响

目的观察中药逐水饮对小鼠Lewis肺癌胸腔积液模型积液生成及Th17细胞免疫平衡的影响。方法小鼠随机分为正常对照组、模型组、逐水饮组、顺铂组、逐水饮+顺铂组。采用胸腔注射Lewis肺癌单细胞悬液的方法建立小鼠Lewis肺癌胸腔积液模型。给药结束处死小鼠,记录模型小鼠恶性胸腔积液(MPE)体积、胸壁转移瘤计数、转移瘤质量,采用流式细胞术法检测MPE和外周血中Th17、Treg细胞百分比,ELISA法检测MPE和外周血中白细胞介素17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达水平。结果与模型组比较,逐水饮组、顺铂组和逐水饮+顺铂组小鼠MPE体积、胸壁转移瘤数目减少(P 0.05),转移瘤质量减轻(P 0.05),生存期延长(P 0.05),其中逐水饮+顺铂组变化更加明显(P 0.05)。与正常对照组比较,模型组外周血中Th17细胞百分比及IL-17、IL-23水平降低(P 0.05),Treg细胞百分比及TGF-β1水平升高(P 0.05);与模型组比较,逐水饮组、顺铂组和逐水饮+顺铂组小鼠MPE和外周血中Th17细胞百分比及IL-17、IL-23水平升高(P 0.05),MPE中Treg细胞百分比及TGF-β1水平降低(P 0.05);逐水饮+顺铂组小鼠MPE和外周血中Th17细胞百分比及IL-17/IL-23水平高于逐水饮组,Treg细胞百分比及TGF-β1水平低于逐水饮组,但差异无统计学意义(P 0.05);模型小鼠MPE中Th17、Treg细胞百分比均高于其外周血中Th17、Treg细胞百分比(P 0.05)。结论中药逐水饮能够抑制小鼠MPE生成,纠正Th17细胞失衡,减轻MPE微环境免疫抑制状态,增强小鼠对肿瘤的免疫作用。     

益肾安宫方治疗复发性流产疗效及对患者外周血T细胞亚群和细胞因子表达水平的影响

目的:探讨益肾安宫方用于复发性流产(RSA)的疗效及其对外周血T细胞亚群比例和细胞因子表达水平的影响。方法:选取89例RSA非孕期患者为研究对象,按照随机数表法分为治疗组、对照组,其中对照组给予黄体酮治疗,治疗组给予黄体酮联合益肾安宫方治疗,两组均持续治疗3周。比较两组治疗后1年的妊娠结局、治疗前后外周血T细胞亚群的比例和细胞因子表达水平。结果:治疗组的妊娠成功率和活产率均明显大于对照组(均P0.05)。治疗前两组Th1、Th2、Th17和Treg细胞比例相比均无统计学差异(均P0.05)。经治疗,治疗组Th1和Th17细胞比例均明显低于对照组,Th2和Treg细胞比例均明显高于对照组(均P0.05)。治疗前两组IFN-γ、IL-4、IL-17和Treg水平相比均无统计学差异(均P0.05)。治疗后治疗组IFN-γ和IL-17水平均明显低于对照组,IL-4和TGF-β水平均明显高于对照组(均P0.05)。治疗前两组T-bet、GATA-3、STAT-3、FOXP3和RORγt mRNA表达水平相比均无明显差异(均P0.05)。治疗后治疗组T-bet、STAT-3和RORγt mRNA表达水平均明显低于对照组,GATA-3和FOXP3mRNA表达水平均明显高于对照组(均P0.05)。结论:益肾安宫方治疗RSA患者可以有效改善其妊娠结果,调节T细胞亚群分化失衡状态,并有效改善相应的细胞因子水平及转录因子的表达。     

芪参汤对肝纤维化大鼠肝组织辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的影响

目的观察芪参汤对肝纤维化大鼠肝组织辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响,探讨其抗肝纤维化作用机制。方法 40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、芪参汤组及秋水仙碱组,每组10只。采用四氯化碳腹腔注射法制备肝纤维化大鼠模型。造模期间芪参汤组及秋水仙碱组分别给予芪参汤(2 g/mL)及秋水仙碱混悬液(20 mg/L)灌胃,空白组、模型组予等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续8周。全自动生化分析仪检测血清天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及总胆红素(TBil)水平;ELISA检测肝组织白细胞介素(IL)-17A和IL-10含量;免疫组化检测肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达;流式细胞术检测肝组织Th17和Treg比例;Westernblot和RT-PCR分别检测肝组织维甲酸相关孤儿受体γt(ROR-γt)、叉头状转录因子p3(Foxp3)蛋白和m RNA表达。结果与空白组比较,模型组大鼠肝纤维化评分、胶原染色面积明显增加(P0.05),血清AST、ALT、TBil水平明显升高(P0.05),IL-17A含量明显增加、IL-10含量明显减少(P0.05),肝组织TGF-β1、α-SMA蛋白表达明显升高(P0.05),Th17比例增加、Treg比例减少,Th17/Treg比值明显增加(P0.05),肝组织ROR-γt蛋白和m RNA表达明显升高,Foxp3蛋白表达明显降低(P0.05);与模型组比较,芪参汤组和秋水仙碱组肝纤维化评分、胶原染色面积明显减少(P0.05),血清AST、ALT、TBil水平明显降低(P0.05),IL-17A含量明显减少,IL-10含量明显增加(P0.05),肝组织TGF-β1、α-SMA蛋白表达明显降低(P0.05),Th17比例减少,Treg比例增加,Th17/Treg比值明显降低(P0.05),肝组织ROR-γt蛋白和m RNA表达明显降低,Foxp3蛋白表达明显升高(P0.05)。结论芪参汤可抑制大鼠肝纤维化,其作用机制可能与减少胶原纤维增生、改善大鼠肝功能、降低炎症因子水平、恢复Th17/Treg平衡有关。     

清热抗毒煎剂对普通型手足口病患儿外周血Treg、Th17平衡的调节作用

目的:研究清热抗毒煎剂对普通型手足口病患儿外周血中Th17与调节性T细胞(Treg细胞)及相关细胞因子的水平的影响。方法:采用流式细胞术检测30例正常儿童及15名普通型手足口患儿外周血中(CD3+CD8-IL-17+)Th17及(CD4+CD25+Foxp3+)Treg细胞表达量,采用ELISA方法检测血清中IL-6、IL-10、IL-17、IL-23、TGF-β1的水平。结果:普通型手足口患儿治疗前与正常对照组相比,Treg细胞表达量、Treg/Th17比率及TGF-β1水平均明显降低,Th17细胞表达量明显升高(P值均0.05),IL-17、IL-6及IL-23有增高趋势,IL-10有降低趋势,但差异无显著性(P0.05);治疗后患儿体内Treg/Th17比率及TGF-β1水平与治疗前相比均明显升高,Th17细胞表达量明显降低(P值均0.05),与正常对照组相比差异无显著性(P0.05),IL-17、IL-6及IL-23有降低趋势,IL-10有增高趋势,但差异无显著性(P0.05)。结论:清热抗毒煎剂可能通过抑制Th17细胞及其相关的细胞因子的产生,调整普通型手足口患儿体内Treg/Th17平衡紊乱,抑制体内炎症的进展,这是其治疗普通型手足口病机制之一。     

调脾胃升降温针法对溃疡性结肠炎患者Th17/Treg平衡及其细胞因子水平的影响

目的观察调脾胃升降温针法治疗溃疡性结肠炎的临床疗效及对患者外周血辅助T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg)比例及相关细胞因子水平的影响。方法将2018年6月—2020年1月唐山市中医医院收治的溃疡性结肠炎脾虚证患者随机分为2组,对照组38例予美沙拉嗪肠溶片口服,观察组39例在对照组基础上加用调脾胃升降温针法治疗,2组疗程均为2个月。观察2组治疗前后Mayo评分,血清C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平及外周血单个核细胞中Th17和Treg细胞比例,分析Mayo分级与血清IL-17、TGF-β1水平及Th17和Treg细胞比例的关系,观察比较2组临床疗效及不良反应发生情况。结果治疗后观察组Mayo评分及血清CRP、IL-17水平和Th17细胞比例较对照组及治疗前明显下降(P均<0.05),血清TGF-β1、Treg细胞比例较对照组及治疗前明显升高(P均<0.05);IL-17、Th17细胞表达与Mayo分级呈显著正相关(P均<0.05),TGF-β1、Treg细胞表达与Mayo分级呈显著负相关(P均<0.05)。观察组总有效率为89.7%(35/39),对照组为73.7%(28/38),观察组总有效率明显高于对照组(P<0.05)。2组不良反应均较微。结论调脾胃升降温针法治疗溃疡性结肠炎疗效更好,机制可能与明显调节Th17/Treg平衡,使IL-17、TGF-β1水平趋向正常,从而减轻炎症反应有关。     

熊果酸对胶原诱导性关节炎大鼠外周血Th17/Treg细胞比例失衡的影响

目的:研究熊果酸(UA)对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠外周血淋巴细胞辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)比例失衡的影响。方法:雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠,复制CIA模型,造模成功后CIA大鼠随机分为CIA模型组、UA低剂量组、UA高剂量组、甲氨喋呤(MTX)组、UA+MTX组并予以对应处理。于初次免疫21 d时,收集各组大鼠的外周血淋巴细胞,进行细胞染色,流式细胞术检测外周血Th17/Treg细胞比例,并分离CD~+_4T细胞,RT-PCR法检测RORr、FoxP3、SOCS3mRNA的表达。结果:(1)与空白组相比,模型组CIA大鼠外周血Th17细胞明显增高,与模型组比较,治疗组(UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组)Th17细胞比例明显下调;有显著统计学差异(P0.01)。(2)与空白组相比,模型组大鼠的外周血Treg细胞明显下调;与模型组比较,治疗组(UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组)Treg细胞比例增高,有统计学差异(P0.05);(3)与空白组相比,模型组RORr升高,FoxP3、SOCS3降低;与模型组相比,各治疗组RORr均降低,FoxP3(UA高剂量组、MTX组、UA+MTX组)表达升高,SOCS3mRNA(UA低剂量组、UA高剂量组、UA+MTX组)表达升高。结论:UA高剂量组、UA+MTX组能抑制CD~+_4T细胞向Th17细胞分化,降低Th17细胞比例,升高Treg细胞比例,维持Th17/Treg细胞平衡,这是UA缓解实验性CIA关节炎症的可能机制。     

开玄泄浊方对阳虚型银屑病大鼠外周血Th细胞平衡及相关细胞因子表达的影响

目的：探究开玄泄浊方对阳虚型银屑病大鼠外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞（Treg）平衡及相关细胞因子表达的影响。方法：将72只大鼠随机分为空白对照组（16只）、模型组（56只）。所有大鼠背部脱毛后,空白对照组大鼠外涂凡士林,模型组大鼠予5%咪喹莫特乳膏外用+大黄灌胃建立阳虚型银屑病SD大鼠模型。将50只造模成功大鼠随机分为模型对照组、雷公藤多苷片组和开玄泄浊方低、中、高剂量组,每组10只。各组大鼠予以相应药物灌胃干预,1次/d,连续7 d。观察并记录大鼠背部皮损银屑病面积与严重性指数（PASI）评分,流式细胞仪检测外周血Th17/Treg比例,ELISA法检测白介素-17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)水平,并取背部皮肤行病理组织切片观察。结果：与模型对照组比较,雷公藤多苷片组和开玄泄浊方低、中、高剂量组PASI评分、Th17/Treg比例、IL-17水平下降（P<0.05）,TGF-β水平上升,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：开玄泄浊方治疗阳虚型银屑病的机制可能与调节Th17/Treg比例及相关因子的表达有关。     

再生胶囊对再生障碍性贫血大鼠外周血CD4~+、CD25~+调节性T细胞及细胞因子IL-10、TGF-β_1的影响

目的:探讨再生胶囊对再生障碍性贫血大鼠外周血CD4+、CD25+调节性T细胞(Treg)、核转录因子Foxp3表达及细胞因子IL-10、TGF-β1的影响。方法:将80只SD大鼠随机分成空白组、模型组、阳性对照组和再生胶囊组,每组20只。除空白组外,其余各组大鼠予60Co-γ联合腹腔注射环磷酰胺和氯霉素建立再生障碍性贫血大鼠模型。于造模第7天再生胶囊组给予再生胶囊[0.216 g/(kg·d)]灌胃,模型组和空白组予等体积的生理盐水灌胃,阳性对照组予环孢素[3 mg/(kg·d)]灌胃,各组均干预30 d。检测大鼠外周血白细胞数(WBC)、网织红细胞数(Ret)、血红蛋白数(Hb)及血小板数(PLT),骨髓有核细胞数(粒系比例、红系比例、淋巴细胞比例、巨核细胞数),细胞因子IL-10和TGF-β1浓度,Treg细胞比例和单个核细胞Foxp3 mRNA表达量。结果:与空白组比较,模型组大鼠外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、IL-10浓度、TGF-β1浓度、Treg细胞比例、Foxp3 mRNA表达量降低,淋巴细胞比例升高(P0.05)。与模型组比较,再生胶囊组和阳性对照组大鼠外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、IL-10浓度、TGF-β1浓度、Treg细胞比例、Foxp3 mRNA表达量升高,淋巴细胞比例下降(P0.05)。与阳性对照组比较,再生胶囊组大鼠外周血WBC、Ret、Hb、PLT、骨髓粒系比例、红系比例、巨核细胞数、IL-10浓度、TGF-β1浓度、Treg细胞比例、Foxp3mRNA表达量升高,淋巴细胞比例下降(P0.05)。结论:再生胶囊能通过促使再生障碍性贫血大鼠外周血Treg细胞数和FOXP3表达量增多,产生抑制性细胞因子IL-10和TGF-β1,恢复自身免疫耐受平衡,改善骨髓造血衰竭。     

小鼠骨髓间充质干细胞对呼吸道合胞病毒毛细支气管炎小鼠模型的免疫调节作用

目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)对呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎小鼠的免疫调节作用,为毛细支气管炎的治疗提供新的思路和依据。方法采用RSV鼻腔接种法制作毛细支气管炎小鼠模型;通过贴壁培养法体外分离纯化扩增BMSCs,使用第3代(P3)BMSCs作为实验细胞;将60只3周BALB/C小鼠随机分成模型组、BMSCs组、磷酸缓冲液(PBS)组、健康组,每组15只,BMSCS治疗组和PBS组分别经尾静脉注射BMSCs和PBS,24 h后处置,经流式细胞术检测Treg和Th17细胞百分率;收集外周血和肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测IL-4、IFN-γ、IL-10、TGF-β和IL-17细胞因子表达水平。结果与健康组相比,模型组Treg百分率降低,Th17百分率升高,差异均有统计学意义(P均0.01);与模型组相比,BMSCs组Treg百分率升高,Th17百分率下降,差异均有统计学意义(P均0.01)。模型组IL-4、IL-17水平高于健康组(P均0.05),IFN-γ、IL-10、TGF-β水平低于健康组(P均0.05);BMSCs组IL-4、IL-17水平明显低于模型组(P均0.05),IL-10、TGF-β水平明显高于模型组(P均0.05),IL-17表达水平显著高于健康组(P0.05);BMSCs组IL-10、TGF-β表达水平高于模型组(P均0.05)。结论 BMSCs对RSV毛细支气管炎小鼠模型有积极的免疫调节作用,通过纠正Th1/Th2和Treg/Th17失衡,达到治疗毛细支气管炎的作用。     

围术期异体输血对肺癌患者Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡的影响

目的观察围术期异体输血后肺癌患者外周血CD4+T细胞各亚群Th1、Th2、Th17及Treg细胞相关因子的比例变化。方法将行手术治疗的64例肺癌患者随机分为2组:未辐照组34例术中输入普通悬浮红细胞,辐照组30例术中输入辐照悬浮红细胞,分别于术前及术后14 d应用流式细胞术(FCM)测定2组患者外周血Th1(IFN-γ)、Th2(IL-4)、Th17(IL-17)及Treg(Foxp3)细胞比例。结果术后14 d,2组外周血中Th1、Treg细胞比例和Th1/Th2均明显高于术前(P均<0.05),Th2细胞比例、Th17/Treg均明显低于术前(P均<0.05),且辐照组Th1细胞比例及Th1/Th2、Th17/Treg比值均显著高于未辐照组(P均<0.05),Treg细胞比例低于未辐照组(P<0.05)。结论肺癌患者围术期异体输血后Th1/Th2、Th17/Treg细胞因子失衡可能与输入异体血中的活性淋巴细胞有关。     

补脾强力复方对EAMG大鼠Th1/Th2/Th17细胞因子的影响

目的:研究补脾强力复方对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠血清Th1/Th2/Th17细胞因子的影响,探讨其可能的作用机制。方法:选择健康SPF级雌性Lewis大鼠,分为正常组、模型组、醋酸泼尼松组及补脾强力复方高、中、低剂量组,采用免疫诱导注射鼠源性AchR-α亚基97-116肽段方法制备大鼠EAMG模型。ELISA法检测各组大鼠血清细胞因子IFN-γ、TGF-β、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清中IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平均明显升高,TGF-β水平明显降低,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01);与模型组比较,补脾强力复方高、中、低剂量组大鼠血清IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平明显降低,而TGF-β水平明显升高,差异均有统计学意义(P0.01或P0.05);醋酸泼尼松组大鼠血清TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平较模型组明显降低,差异均有统计学意义(P0.01)。结论:补脾强力复方能有效降低EAMG大鼠IFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-4、IL-17水平,升高TGF-β水平,从而纠正EAMG大鼠Th1/Th2/Th17细胞因子失衡,这可能是其治疗EAMG的作用机制之一。     

维持性血液透析患者外周血辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡与动脉粥样硬化心血管疾病的相关性分析

目的:探讨维持性血液透析患者外周血辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡与动脉粥样硬化心血管疾病的相关性。方法:选择2017年12月-2018年12月来本院进行维持性血液透析治疗且伴有动脉粥样硬化的心血管疾病患者40例作为观察组,选择同期健康体检者40名设为对照组。采用酶联免疫吸附测定法和SPSS Pearson相关性分析进行测算,比较两组相关细胞因子水平和相关性数据,对其评估。结果:观察组中IL-17、IL-6因子水平明显高于对照组(P0.05),TGF-β1因子水平低于对照组P0.05)。SPSS Pearson相关性分析结果表明:Th17细胞比例与IL-17、IL-6成正相关,与TGF-β1、IL-10成负相关(P0.05);Treg细胞比例与IL-17、IL-6成负相关,与TGF-β1、IL-10成正相关(P0.05);Th17/Treg比值与IL-17、IL-6成正相关,与TGF-β1、IL-10成负相关(P0.05)。结论:进行维持性血液透析治疗且伴有动脉粥样硬化心血管疾病患者,容易出现外周血辅助性T细胞17/调节性T细胞功能和数量失衡,对于动脉粥样硬化心血管疾病的发病、发展过程中可能起到重要作用。     

牛膝总皂苷对类风湿关节炎大鼠Th17/Treg平衡和滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α的影响

目的:观察牛膝总皂苷对类风湿关节炎大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡和滑膜组织中白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法:将50只SD大鼠按照体质量随机分为正常对照组,模型对照组,牛膝总皂苷低、中、高剂量组5组。皮下注射Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂建立类风湿关节炎模型。造模后第7 d开始给药。牛膝总皂苷低、中、高剂量组分别以牛膝总皂苷60,120,240μg/g灌胃,正常对照组和模型对照组灌胃等体积的纯水,1 d 1次,连续28 d。以流式细胞术检测外周血Th17和Treg水平;用酶联免疫吸附法检测滑膜组织匀浆中IL-2、IL-6和TNF-α;以苏木精-伊红染色,观察大鼠关节组织病理变化。结果:与正常对照组对比,模型对照组大鼠外周血中Th17水平升高,Treg水平降低,滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α水平升高,差异均有统计学意义(P0.01);踝关节组织炎性改变。与模型对照组对比,牛膝总皂苷中、高剂量组外周血中Th17水平降低,Treg水平升高,滑膜组织中IL-2、IL-6、TNF-α水平降低,差异有统计学意义(P0.01);踝关节组织炎性病变明显改善。结论:牛膝总皂苷可能通过逆转Th17/Treg的失衡、抑制炎症因子分泌来发挥治疗类风湿关节炎的作用。     

宣肺平喘方对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡的影响

目的:探讨宣肺平喘方对卵清蛋白(OVA)致敏哮喘小鼠模型气道炎症及Th17/Treg平衡的影响。方法:55只6~8周雌性Balb/C小鼠随机分为正常组、模型组、泼尼松组(7.5 mg·kg-1·d-1)、宣肺平喘方低、高剂量组(16.72,66.88 g·kg-1·d-1),每组11只。除正常组用生理盐水注射及气道雾化外,其余各组小鼠均采用OVA致敏及激发的方法建立哮喘模型,各干预组于哮喘激发后给予相应的药物灌胃,正常组、模型组用生理盐水,连续15 d,末次给药后处死小鼠,取肺组织进行病理切片及苏木素-伊红(HE)染色,酶联免疫吸附法(ELISA)法检测小鼠血清白细胞介素(IL-4),转化生长因子-β(TGF-β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,流式细胞术检测血液中Th17细胞和Treg细胞的比例。结果:与模型组比较,各治疗组的肺组织损伤均有减轻,IL-4,TNF-α水平均低于模型组(P0.05),TGF-β水平均高于模型组(P0.05),血液中Th17细胞水平低于模型组,Treg细胞水平高于模型组。宣肺平喘方低、高剂量组在降低IL-4,TNF-α水平,升高TGF-β水平方面与泼尼松组比较无统计学差异,在降低血液Th17细胞比例,升高血液Treg细胞比例方面优于泼尼松组。结论:宣肺平喘方对哮喘小鼠的肺组织黏膜损伤具有一定的保护作用,其机制可能与下调Th17细胞水平,上调Treg细胞水平,恢复Th17/Treg细胞平衡,从而使得血清中炎症因子IL-4,TNF-α的含量降低,抑炎因子TGF-β的含量增加有关。     

重症脑梗死患者血清免疫炎性细胞因子水平变化研究

目的分析重度脑梗死患者血清超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平与Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例变化,比较Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例与患者病情严重程度GCS评分相关性。方法选择重度急性脑梗死患者80例,依据入院后24 h病情严重程度评分(格拉斯哥昏迷评分,Glasgow Coma Scale,GCS)将患者分为重度组(30例)与特重组(50例)。酶联免疫吸附法检测发病后24 h患者外周血清中hs-CRP、IL-6、TNF-α水平。流式细胞术检测外周血清中Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例变化,采用Pearson直线相关分析Treg/CD4+细胞、Th17/CD4+T细胞比例与GCS评分之间相关性。结果发病后,重度组与特重组患者hs-CRP、IL-6、TNF-α水平比较差异有统计学意义。外周血Treg/CD4+细胞百分比、Th17/CD4+T细胞比例2组比较差异有统计学意义(P0.05)。血清Th17/CD4+T细胞百分比与GCS评分呈正相关(r=5.981,P0.05),血清Treg/CD4+细胞百分比与GCS呈直线正相关(r=-4.872,P0.05)。结论急性重症脑梗死患者发病后体内存在严重的免疫抑制炎症反应。主要表现为炎性细胞因子hs-CRP、IL-6、TNF-α水平上升以及Treg/CD4+细胞比例升高、Th17/CD4+T细胞比例下降。免疫调节性T细胞、抑制性T细胞比例变化与临床病情严重程度存在相关性。