逍遥丸对排卵障碍模型大鼠子宫内膜雌孕激素受体表达的影响

目的:以"女子以肝为先天"的中医理论为基础,选用逍遥丸作为疏肝法的代表方,比较逍遥丸对排卵障碍模型大鼠子宫内膜雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)表达的影响。方法:雌性Wistar大鼠给予雷公藤多甙片,雌性SD大鼠注射丙酸睾丸酮,将2种排卵障碍成功模型大鼠随机分为模型组和治疗组(灌服逍遥丸),给药5周,择动情前期,断头取血,检测血清雌二醇(E2)、孕酮(P);取子宫,进行免疫组织化学染色,观察子宫内膜ER、PR的表达。结果:2种模型组均表现为血清E2、P值异常,子宫内膜ER、PR表达降低,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05);经逍遥丸治疗后,均有不同程度的改善,差异均有统计学意义(P<0.05);两治疗组血清E2及子宫内膜ER表达与正常组比较,差异无统计学意义。结论:逍遥丸可通过改善卵巢激素和子宫内膜ER、PR的表达治疗排卵障碍性疾病。     

补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜P21表达的影响

目的：观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠着床部位子宫内膜中周期素依赖的蛋白激酶抑制物P21和增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。方法：采用免疫印迹法观察胚泡植入 ［即妊娠第6天(pregnancy day 6,Pd6),Pd7和Pd8］时P21在整个子宫中的表达,采用免疫组化法进一步定位观察着床部位子宫内膜中PCNA和P21的表达。结果：与对照组相比,模型组子宫内膜PCNA和P21的出现和消失在时间和空间上均明显滞后；补肾益气和血方能促进PCNA和P21及时有序地表达或消失,从而改善胚泡着床障碍小鼠子宫内膜的蜕膜反应。结论：补肾益气和血方可通过促进子宫内膜的蜕膜反应来改善胚泡着床,其作用机制与其促进子宫内膜PCNA和P21时空有序地表达和消失密切相关。     

补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体凋亡的影响

目的 观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体凋亡的影响. 方法 复制小鼠胚泡着床障碍模型,分为对照组、模型组和治疗组,每组30只.观察小鼠妊娠率和着床胚泡数,分析子宫内膜腺体的凋亡情况,检测子宫内膜腺体的增殖细胞核抗原(PCNA)、bax、bcl-2和激活型Caspase-3蛋白表达情况. 结果 模型组妊娠率和平均着床胚泡数均显著降低,治疗组两者均较模型组显著提高(P<0.05或P<0.01).模型组子宫内膜腺体增殖指数(PI)明显高于对照组(P<0.01),而凋亡指数(AI)则明显低于对照组(P<0.05);治疗组与模型组比较,腺体PI明显降低而AI明显增高(P<0.01),两者与对照组比较差异均无统计学意义.模型组子宫内膜腺体中bax和激活型Caspase-3蛋白显著低于对照组(P<0.01);治疗组两者则显著高于模型组(P<0.01);治疗组与对照组差异无统计学意义. 结论 促进子宫内膜腺体中bax蛋白的表达和Caspase-3的激活,调节植入窗期腺体细胞增殖和凋亡的平衡,可能是补肾益气和血方促进子宫内膜接受性建立和改善胚泡着床障碍的机制之一.     

补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体凋亡的影响

目的观察补肾益气和血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜腺体凋亡的影响。方法通过给8～12周龄昆明小鼠于妊娠第4天皮下注射米非司酮造成胚泡着床障碍模型,采用TUNEL法分析各组小鼠子宫内膜腺体的凋亡情况,采用免疫组化方法检测各组小鼠子宫内膜腺体的增殖情况以及bax和bcl-2蛋白表达情况。结果模型组妊娠率和平均着床胚泡数均显著降低(P＜0．05,P＜0．01)；治疗组的妊娠率及平均着床胚泡数均较模型组显著提高(P＜0．05,P＜0．01)。模型组子宫内膜腺体增殖指数(PI)明显高于正常组(P＜0．01)；治疗组与模型组相比,腺体PI明显降低(P＜0．01),与正常组比较差异无显著性。模型组子宫内膜腺体凋亡指数(AI)明显低于正常组(P＜0．05)；治疗组与模型组相比,腺体AI明显增高(P＜0．01),与正常组比较差异无显著性；各组子宫内膜基质细胞PI和AI差异均无显著性。模型组子宫内膜腺体中bax蛋白显著低于正常组(P＜0．01)；治疗组则显著高于模型组(P＜0．01)；治疗组与正常组比较差异无显著性。结论子宫内膜腺体细胞凋亡不足、增殖亢进可能是米非司酮诱导胚泡着床障碍的机理之一；促进子宫内膜腺体中bax的表达,使植...     

补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜ER、PR及整合素α5、β3蛋白表达的影响

目的 观察补肾助孕方对大鼠胚胎着床期子宫内膜细胞雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及整合素α5、β3蛋白表达的影响,以阐明该方改善黄体功能不全性不孕症的机制。     

补肾安胎方及其不同组分对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素及其受体的影响

目的比较补肾安胎方、补肾方及活血方对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响及其机制。方法采用吲哚美辛诱导小鼠胚泡着床障碍模型,从妊娠第1天起分别予补肾安胎方、补肾方、活血方治疗。于妊娠第5、6天处死小鼠,留取血清及子宫标本。采用放射免疫法检测血清雌激素(E2)和孕激素(P)的含量;采用免疫组织化学方法检测子宫雌、孕激素受体(ER、PR)的表达。结果补肾安胎方可以提高妊娠第6天血清P及E2水平,并且促进着床位点ER及PR的表达。而补肾方和活血方虽有轻度促进ER、PR表达作用,但其治疗作用弱于补肾安胎方。结论将补肾法和活血法结合起来的补肾安胎方可以通过对E2、P、ER、PR的影响,从更大程度上改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床。     

安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜雌孕激素受体表达的影响

目的:观察安坤种子丸对胚泡着床障碍小鼠雌、孕激素受体表达的影响,探讨其对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的影响及作用机制。方法:筛选有规律动情周期的雌性小鼠,随机分为正常组、模型组和中药组,每组25只。用安坤种子丸先期对中药组小鼠进行灌胃,雌、雄合笼后观察雌鼠阴栓情况,之后各组选取有阴栓者20只并计为妊娠第1天(D1),雄鼠及其余雌鼠刎除。妊娠第4天对中药组和模型组注射米非司酮进行干预,制成胚泡着床障碍模型;于妊娠第5、6天处死小鼠,留取子宫标本。检测子宫雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达;同时统计分析各组间妊娠率、平均着床胚泡数及胚泡着床率等指标的变化。结果:安坤种子丸可以提高胚泡着床障碍小鼠子宫内膜ER、PR的表达,妊娠率、平均着床胚泡数及胚泡着床率等指标虽低于正常组(P0.05),但显著高于模型组(P0.01)。结论:安坤种子丸可以提高雌鼠子宫内膜上ER、PR的水平,一定程度上改善着床障碍小鼠子宫内膜容受性,促进胚泡着床。     

益气活血方和补肾生髓方对大鼠脑缺血恢复期GAP-43和SYP表达的影响

目的：探讨益气活血方和补肾生髓方对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠恢复期缺血半暗带生长相关蛋白（GAP－43）和突触素（SYP）表达的影响。方法：以线栓法阻塞大鼠左侧大脑中动脉，复制局灶性脑缺血再灌注模型，缺血2小时再灌注1、2、3周，用免疫组织化学染色SABC法分别检测皮质缺血半暗带GAP－43和SYP的表达。结果：各时间点益气活血方、补肾生髓方组皮质缺血半暗带GAP－43（1周除外）和SYP表达阳性细胞平均吸收光密度显著升高，与模型组比较有显著性差异（P〈0．05或0．01）；在1周、2周GAP－43表达阳性细胞平均吸收光密度，益气活血方优于补肾生髓方组，两组间比较有显著性差异（P〈0．01）。结论：益气活血方、补肾生髓方能通过促进皮质脑缺血半暗带GAP－43和SYP表达，有利于脑缺血后突触重塑和神经细胞轴突的再生，促进脑卒中后神经功能恢复。     

补肾安胎方对胚泡着床障碍模型小鼠着床局部PGI2及其核受体的影响

目的 观察补肾安胎方对胚泡着床障碍小鼠着床局部前列环素I2（PGI2）及其核受体过氧化物酶体增殖激活因子受体δ（PPARδ）表达的影响。方法 将妊娠小鼠随机分为正常组、模型组和中药组(每天灌服补肾安胎液12.4 g/kg）,在妊娠第4、5、6、8天取3组小鼠妊娠子宫,采用放射免疫法测定PGI2含量,RT-PCR和免疫组织化学方法检测PPARδ mRNA及蛋白的表达。结果 模型组小鼠子宫内膜着床点PGI2含量明显低于正常组（P＜0.01）,而中药组PGI2含量较模型组显著增高（P＜0.01）。模型组小鼠子宫内膜中PPARδ的表达均滞后于正常组（P＜0.05）;小鼠子宫内膜中PGI2含量和PPARδ的表达正常组和中药组组间比较,差异无统计学意义。结论 补肾安胎方可能通过促进胚泡着床局部的PGI2及其核受体PPARδ的表达来改善胚泡着床障碍小鼠的胚泡着床。     

补肾益气活血方对兔软骨细胞凋亡和bcl-2mRNA表达的影响

目的:观察补肾益气活血方含药血清对硝普钠诱导的体外培养兔关节软骨细胞凋亡和bcl-2mRNA表达的影响。方法:取新西兰兔的关节软骨,将软骨细胞分离传代后,置入37℃、5%CO2培养箱内,各组在相应的血清培养24h后,采用TUNEL法和原位杂交法分别检测各组软骨细胞的凋亡和bcl-2mRNA表达。结果:①补肾益气活血方含药血清各组的软骨细胞凋亡率明显低于模型组(P<0.01)。②补肾益气活血方含药血清各组对软骨细胞bcl-2mRNA表达明显高于模型组(P<0.01)。结论:补肾益气活血方能通过上调bcl-2mRNA的表达,抑制软骨细胞的凋亡,达到防治膝骨关节炎的目的。     

益气活血补肾方联合厄贝沙坦对高血压性肾损害患者肾功能的保护作用

目的:观察益气活血补肾方联合厄贝沙坦治疗高血压性肾损害疗效及对患者炎症因子的影响.方法:选取100例高血压性肾损害患者,随机分为试验组、对照组,每组50例.对照组给予厄贝沙坦治疗,试验组给予益气活血补肾方联合厄贝沙坦治疗,两组均治疗12周.比较两组治疗前后血压、肾功能指标及炎症因子水平.结果:治疗前,两组患者收缩压、舒...     

补肾解毒活血法与益气补血法对骨髓抑制小鼠造血功能影响的比较研究

目的:比较补肾解毒活血法与益气补血法对环磷酰胺(CTX)所致骨髓抑制小鼠造血功能的影响及其作用机制的不同特点.方法:昆明种小鼠80只,随机分为4组,正常对照组、模型组、补肾解毒活血组(20.55 g·kg -1·d-1)和益气补血组(17.47 g·kg-1·d-1).采用CTX 100 mg·kg-1 ip,连续3d,制成骨髓抑制小鼠模型.各组于造模完成后次日开始ig连续10d.分别于造模前及造模后1,3,5,7,10,14 d动态检测外周血象;于末次给药次日后进行骨髓有核细胞计数(BMNC)及粒-单核系集落形成单位( CFU-GM)、红系集落形成单位(CFU-E)、和红系爆式集落形成单位(BFU-E)集落计数.结果:补肾解毒活血方和益气补血方均可明显升高模型小鼠的WBC,PLT,BMNC,可促进造血祖细胞(HPC)增殖,CFU-GM,CFU-E,BFU-E集落数均显著高于模型组(P＜0.01);补肾解毒活血方对血小板的恢复优于益气补血方.结论:补肾解毒活血方和益气补血方均可促进骨髓造血祖细胞集落生成,具有减轻和改善化疗后骨髓抑制的效果,而前者尤可减轻血小板减少、促进其恢复;其作用机制可能在骨髓细胞分化过程或造血微环境等途径上有不同.     

益气活血方对中晚期非小细胞肺癌高凝状态作用运用分析

目的:探讨益气活血方对中晚期非小细胞肺癌高凝状态的作用。方法:选择本院肿瘤科住院的58例患者随机分为实验组和对照组,每组各29例。对照组单纯采用对症支持治疗,实验组在对照组治疗的基础上口服中药益气活血方,观察两组患者疗效。结果:实验组患者在治疗后凝血时间显著延长,局部复发、新转移病灶情况及中医辨证分型疗效等方面均优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:益气活血方联合适当对症支持治疗方案,可以改善中晚期非小细胞肺癌患者的血液高凝状态,同时可以减少肿瘤的复发和转移情况且在中医辨证分型疗效上有显著效果,值得临床广泛应用。     

补肾养阴益气活血法治疗2型糖尿病临床观察

目的：观察中西药结合治疗2型糖尿病的疗效。方法：将所治患者随机分为两组,对照组均腹部皮下注射重组人胰岛素,治疗组在对照组治疗的基础上加服补肾养阴益气活血的中药,观察FBG、PBG、HbA1c及并发症出现情况。结果：治疗组并发症的发生率明显低于对照组,有效率显著高于对照组,讨论：补肾养阴益气活血法结合西药治疗2型糖尿病有胰岛素增敏作用,能有效预防和遏制糖尿病并发症的发生。     

补肾益气活血方药对胎儿宫内生长迟缓胎鼠脑葡萄糖转运蛋白基因表达的影响

目的:探讨补肾益气活血方药防治胎儿宫内生长迟缓(IUGR)的分子机制。方法:以被动吸烟法建立 IUGR 的动物模型,分为正常对照组(正常组)、IUGR 组、中药治疗组(中药组)、及左旋精氨酸治疗组(精氨酸组)。检测了各组胎鼠脑的重量、胎鼠血清葡萄糖水平以及胎鼠脑中葡萄糖转运蛋白(GLUT)家族中 GLUT_1、GLUT_3 mRNA 水平和蛋白浓度,其中 mRNA 水平和蛋白浓度分别利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和 Western blot 的方法进行检测。结果:IUGR 组和精氨酸组脑的重量、胎鼠血清葡萄糠水平较中药组和正常组明显降低(P<0.05),而中药组和正常组之间无明显差异。胎脑 GLUT_1 mRNA 水平在 IU-GR 组中明显升高,其余三组间无明显差异;而 GLUT_3 mRNA 水平在中药组中明显高于 IUGR 组(0.9458±0.1448 vs 0.7951±0.1534 P=0.0365)。GLUT_3和 GLUT_1(55KD)的蛋白浓度在 IUGR 组及精氨酸组中都明显降低,中药组和正常组之间差异无显著性。GLUT_1(45KD)的蛋白浓度在4组之间均无差异。结论:胎鼠血...     

补肾益气活血方对胎儿生长受限孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响

目的观察补肾益气活血方对胎儿生长受限(fetal growth restriction,FGR)孕鼠胎盘滋养细胞凋亡的影响,探讨该方治疗FGR的机制。方法采用被动吸烟法建立大鼠FGR模型,将32只孕鼠随机分为正常组、模型组、中药组(采用补肾益气活血方治疗)、西药组(采用精氨酸治疗)。运用HE染色观察各组胎盘的组织学变化,TUNNEL法检测胎盘滋养细胞的凋亡及RT-PCR、免疫组化检测胎盘滋养细胞Bcl-2、Bax的表达。结果模型组胎盘绒毛出现血液淤积及缺血,中药可明显改善FGR胎盘绒毛的微循环,而西药组则部分改善。正常组、模型组、中药组、西药组的绒毛两层合体细胞凋亡指数中位数依次为45%、75%、57%、70%,正常组和中药组的凋亡指数均低于模型组(P0.01),西药组与模型组比较差异无统计学意义。各组胎盘Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达比较,差异均无统计学意义。结论补肾益气活血方可改善FGR胎盘微循环,防止FGR胎盘滋养细胞的过度凋亡,但其并非通过经典的Bax/Bcl-2凋亡途径起作用,其作用途径仍待探讨。     

补肾益气活血方对宫内生长迟缓胎鼠肝脏C-Jun和C-Fos表达的影响

目的:探讨补肾益气活血方对胎儿宫内生长迟缓(intrauterine growth retardation,IUGR)胎鼠肝脏 C-Jun 和 C-Fos 表达的影响。方法:利用被动吸烟法建立 IUGR 大鼠模型,将动物分成正常组、IUGR 组、IUGR 中药治疗组(中药组)、IUGR 左旋精氨酸治疗组(精氨酸组),采用 Western-blot 方法检测各组肝脏 C-Jun 和 C-Fos 蛋白表达水平。结果:正常组胎鼠肝脏 C-Jun 有一定量表达,C-Fos 有少量表达;IUGR 组 C-Jun与 C-Fos 表达较正常组明显增强(P<0.05);中药组和精氨酸组 C-Jun 和 C-Fos 表达水平较 IUGR 组明显降低(P<0.05),且与正常组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:IUGR 的发生与 C-Jun 和 C-Fos 表达改变有关,中药补肾益气活血方可能通过影响 C-Jun 和 C-Fos 表达而调节其他相关基因转录从而防治 IUGR。     

补肾活血祛痰方对高雄激素多囊卵巢综合征大鼠类固醇激素合成急性调节蛋白质因子的影响

目的:探讨补肾活血祛痰方对高雄激素多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)的影响。方法:选择SD雌性大鼠60只,采用脱氢表雄酮注射建立高雄激素PCOS模型,并随机分为对照组(30只)和中药组(30只),中药组给予补肾活血祛痰方灌胃治疗,对照组给予等量的0.9%氯化钠溶液灌胃,观察治疗后两组大鼠卵巢组织形态学情况,比较治疗后两组大鼠血清激素水平情况; Western blot法检测治疗后两组大鼠StAR蛋白的表达情况。结果:治疗后,卵巢组织形态学观察结果显示,对照组仍存在多个囊泡,其囊泡即空卵泡,中药组卵巢组织形态明显改善; 与对照组相比,卵泡及黄体数较多(均P<0.05); 治疗后,中药组血清促黄体生成素(LH)和雄激素(T)水平比对照组明显降低(均P<0.05)。治疗22 d后,中药组血清胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)和肿瘤坏死因子(TNF-α)水平比对照组明显降低(均P<0.05)。Western blot结果显示,治疗后中药组StAR蛋白表达明显比对照组降低(P<0.05)。 结论:补肾活血祛痰方可改善高雄激素PCOS大鼠卵巢功能,促进激素水平趋于正常,并可降低卵泡膜细胞的细胞膜附近StAR蛋白质,改善大鼠的生殖功能。     

益气活血方对乳腺癌MCF-7细胞系增殖侵袭能力及miR-100表达水平影响的研究

目的:探讨益气活血方对乳腺癌MCF-7细胞系增殖侵袭能力及microRNA-100(miR-100)表达水平的影响。方法:取对数生长期的MCF-7乳腺癌细胞,将益气活血方以培养液稀释调整为20、40、80 mg/L培养细胞,设置高、中和低浓度组,并以不含药物的相同培养液培养细胞为对照组。分别采用qRT-PCR检测miR-100的表达水平; MTT法检测细胞增殖; Transwell小室法检测细胞侵袭; 并采用Western blot法检测细胞增殖相关蛋白特异性周期蛋白D1(Cyclin D1)和侵袭相关蛋白基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达水平。结果:与对照组相比,实验组miR-100表达水平升高; 且与较低浓度组相比,较高浓度组miR-100表达水平亦呈上升趋势(均P<0.05)。与对照组相比,实验组细胞增殖抑制率和侵袭抑制率明显升高,且与较低浓度组相比,较高浓度组各抑制率均亦呈上升趋势(均P<0.05)。同时,与对照组相比,实验组Cyclin D1和MMP-9蛋白表达水平明显降低,且与较低浓度组相比,较高浓度组Cyclin D1和MMP-9蛋白表达水平亦呈下降趋势(均P<0.05)。结论:益气活血方可抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭。其机制可能与益气活血方可提高miR-100表达水平、降低Cyclin D1和MMP-9表达水平相关。